自动震荡切片机操作流程

自动震荡切片机流程

1 琼脂的制备：琼脂浓度5%，用超纯水配制，然后用微波炉加热反复溶解几次，把气泡赶

出，要用大点的锥形瓶配制，一般配100ml的琼脂用500ml的锥形瓶。加热的时候一定要时刻注视着锥形瓶，防止琼脂胶沸腾从瓶口喷出。期间可以用磁力搅拌器搅拌一下，但搅拌的时间不宜过长，会产生气泡。在等胶体冷却时，要把瓶口封住，防止表面胶体先凝固，不好倾倒。每次琼脂胶用完后一定要在微波炉中加热沸腾下，除菌，防止真菌污染。

2 组织包埋：用表面光滑的硬皮纸折叠成包埋盒，然后修理组织。在需要手碰琼脂胶的时候要带上手套，防止细菌对琼脂的污染。在包埋前首先在包埋盒里倒入一些琼脂，然后把组织按正确方位放入，再倒入琼脂把整个组织包埋住，冷却凝固后，修理组织块，修理下来的琼脂回收。

3 安卸部件：在安装和卸下相应一起部件时一定要用专用工具，操作时工具与螺丝口一定要垂直进行，不要用力旋，松紧度适当即可。

4 刀片的安装：刀片的倾斜度调制好后，其他人员不要再改动（白边和黑边相平行即可）。在用刀片之前用100%的酒精擦拭，把表面的一些油渍擦掉。为了充分利用刀片，可以在更换组织时让刀片的不同部位与组织接触。

5 组织块黏着：在把组织块固定到托盘上时，胶水需均匀的涂抹在托盘上，滴加的胶水不宜过多，可以稍微挪动一下组织块，把胶水涂开，使组织固定在托盘上。

6 切片：首先在切片槽倒入适量0.1M PB，不宜过满。首先要调制好切片前后幅度，刚开始调试可以把刀片的推进速度调到最大，当切到组织的相应位置时，降到相应切片速度，大约15秒切一片，其中切片振幅调到最大，大约10左右。一般是振幅越大，速度越慢，效果越好。注意：如果再切片的过程中，要把组织调转位置从另一个方向切，一定要把粘到胶水的那面修理掉，防止过硬的胶块损伤刀片。切下来的切片收集在6孔板里，加入含0.1%的叠氮化钠PB，储存在4度中。

7 收拾整理：把托板上的组织和琼脂胶剔除干净，然后用纯水把切片槽，刀片固定托等所有

浸入过PB的部件清洗干净，最后用棉纸擦拭干，废弃的刀片回收，关闭切片机。

8 琼脂胶的储存：把暂时不用的琼脂胶储存于4度中，如果长期不用，需要定期的加热沸腾一下防止长菌，大约4、5天一次。