海蒿子_羊栖菜_生甘草配伍及海藻_省略_生甘草加减配伍的急性毒性实验研究_修琳琳

Abstract: Objective: To compare the acute toxicity of Sargassum pallidum, Sargassum fusiforme, Radix Glycyrrhiaze
and different Haizao Yuhu Decoction groups in mice. Methods: Different groups were prepared, and comparisons were made in accordance with the classical acute toxicity test methods. Results: The acute toxicity of different groups in mice is: Sargassum pallidumda>Sargassum pallidum with Radix Glycyrrhiaze>the Haizao Yuhu Decoction removed Radix Glycyrrhiaze (Sargassum pallidumda)>the Haizao Yuhu Decoction (Sargassum pallidumda) >the Haizao Yuhu Decoction removed Sargassum and Radix Glycyrrhiaze>the Haizao Yuhu Decoction removed Radix Glycyrrhiaze (Sargassum fusiforme). Conclusion: Sargassum pallidumda, Sargassum pallidum with Radix Glycyrrhiaze have low toxitity to mice with LD50 of 35.73g/kg body weight, LD50(6) of 40.83g/kg body weight. Sargassum fusiforme has no toxitity to mice.
4. 实验方法 4.1 预实验 取体质量为18-22g的昆明种小鼠120只，雌雄 各半，健康适龄，适应性喂养3d。随机分组：空白组、海蒿子煎 液组、羊栖菜煎液组、生甘草煎液组、海蒿子生甘草合煎组、羊 栖 菜 生甘草合煎 组、海 藻 玉 壶汤（海蒿子 配 生甘草）组、海 藻 玉壶汤（羊栖菜配生甘草）组、海藻玉壶汤去甘草（含海蒿子） 组、海藻玉壶汤去甘草（含羊栖菜）组、海藻玉壶汤去海藻（含 生甘草）组、海藻玉壶汤去海藻甘草组，共计12组，每组10只[7]。 实验前小鼠 禁 食 8h，以最大 浓度、最大体 积（0 . 4 m L /10 g），灌 胃3次，每隔8h 1次，连续观察7d，记录小鼠的行为、活动、体 质量、粪便、死亡量以及中毒反应等情况。若给药小鼠死亡率 ＞8 0 %，进 行L D 5 0 实 验；若小鼠 死亡率＜8 0 %，则 进 行L D 5 0（n） 实验[8]。 4.2 正式实验 预实验结果显示，海蒿子煎液组死亡率＞ 80%，需进行LD50实验，海蒿子煎液以1∶0.80的比例稀释为5个 浓度组，每组10只，给药后观察7d，计算其LD50；其余10组死亡 率＜80%，需进行LD50（n）实验，每个给药组煎液按1∶0.85稀释 为5个浓度组，加空白组，共计51组，每组14只。灌胃给药，给药 体积0.4mL/10g，每天固定时间点（上午8∶00-9∶00）给药1次， 连续28d。给药期间观察试验动物死亡情况，记录各组累积发 生一半动物死亡时的天数，计算LD50（n）。 5. 观察指标 逐日观察小鼠饮食、饮水情况、体质量、异常 分泌物、大小便、呼吸是否异常以及皮肤颜色改变等毒性反应和 死亡情况。对濒死动物进行大体解剖，观察主要脏器大体病理变 化，分析死亡原因。 6. 统计学方法 采用SPSS软件进行数据处理，各项数据 以x-±s表示，计 量资料多组比较采用方差分析，方差齐选用
当代医药论丛杂志
• 1933 •
·论著·
海蒿子、羊栖菜、生甘草配伍及海藻玉壶汤中 海藻不同品种与生甘草加减配伍的 急性毒性实验研究
修琳琳，王思睿，钟赣生，柳海艳，许皖，张建美，郭岩松
（北京中医药大学，北京 100029）
摘要：目的：比较海蒿子或羊栖菜单味药、与生甘草配伍及其在复方中加减配伍对小鼠急性毒性的影响，评 价单味药、反药组合及含反药组合复方的急性毒性。方法：参照小鼠急性毒性实验方法，进行不同组别小鼠急性 毒性实验。结果：各组别对小鼠急性毒性表现为海蒿子煎液组＞海蒿子生甘草合煎组＞海藻玉壶汤去甘草（含海 蒿子）组＞海藻玉壶汤（海蒿子配生甘草）组＞海藻玉壶汤去海藻甘草组＞海藻玉壶汤去甘草（含羊栖菜）组； 其余各组未表现出明显毒性。海蒿子煎液组LD50为35.73g·kg-1·d-1，海蒿子生甘草合煎组连续给药第6天，死亡 数量达到半数，L D50（6）为40.83g·k g-1·d-1。结论：海蒿子煎液、海蒿子生甘草合煎液属小毒范畴，海蒿子与羊 栖菜在单独应用、与生甘草配伍应用以及在复方海藻玉壶汤中加减配伍的急性毒性实验中，均表现出明显的差 异，单用及各配伍组合中，海蒿子毒性高于羊栖菜。
XIU Lan-sheng, LIU Hai-yan, XU Wan, ZHANG Jian-mei, GUO Yan-song
( Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China )
本实验基于临床应用的角度，在前期海蒿子与甘草反药组
通讯作者：钟赣生，北京市朝阳区北三环东路11号北京中医药大学基础医学院方药系，邮编：100029，电话：010-64287006 E-mail：zhonggansheng@
• 1934 •
合加减配伍的急性毒性实验基础上[5-6]，进行不同品种海藻与 生甘草反药组合的急性毒性实验，选择海藻玉壶汤为载体，以 评价单味药、反药组合及其在复方海藻玉壶汤中应用的急性毒 性。为了更好地评价其毒性，在做不出LD50时，选择连续给药累 计半数致死的天数，即LD50（n）来评价。海藻玉壶汤（组成：海蒿 子/羊栖菜、浙贝母、醋青皮、陈皮、连翘、昆布、独活、生甘草、 川芎、当归、法半夏、海带）剂量根据2015年版《中华人民共和 国药典》一部，选择高限剂量作为处方用量。
海蒿子煎液组药液的制备：称取海蒿子3 000g，加10倍量 水 入桶中，加 热，微 沸时开始 计 时，煎煮 提 取 2 h 后，将药液 趁 热过滤，得第1次药液；第2次加8倍量水，煎煮提取1h，过滤， 得第2次 药液，合并两 次 药液，于 通 风 橱中置 水浴 锅上 加 热， 并及时排出水蒸气，药液（实测温度约70℃）浓缩至浸膏呈缓 慢流动 状 态（以灌胃针 能 抽 吸 为度），停止浓 缩，得 到 浓 缩 液 1 650mL，浓度为1.82g生药/mL。其余10组药液的制备方法同 前，羊栖菜煎液组药液浓度为2.0g生药/mL，生甘草煎液组药液 浓度为1.67g生药/mL，海蒿子生甘草合煎组药液浓度为1.77g生 药/mL，羊栖菜生甘草合煎组药液浓度为1.87g生药/mL，海藻玉 壶汤（海蒿子配生甘草）组药液浓度为2.1g生药/mL，海藻玉壶 汤（羊栖菜配生甘草）组药液浓度为2.1g生药/mL，海藻玉壶汤 去甘草（含海蒿子）组药液浓度为2.0g生药/mL，海藻玉壶汤去 甘草（含羊栖菜）组药液浓度为2.0g生药/mL，海藻玉壶汤去海 藻（含生甘草）组药液浓度为2.0g生药/mL，海藻玉壶汤去海藻 甘草组药液浓度为2.1g生药/mL。
材料与方法 1. 动物 SPF级昆明种小鼠，体质量18-22g，雌雄各半。由 北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCXK （京）2012-0001。 2. 药物 生甘草：宁夏产，批号：20140901，为豆科植物甘 草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根和根茎；海蒿子：海南 产，批号：20141101，为马尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum (Turn.) C.Ag.的干燥藻体；羊栖菜：山东产，批号：20140701， 为马尾藻科植物羊栖菜Sargassum fusiforme (Harv.) Setch.的 干燥藻体；法半夏：贵州产，批号：20141201，为天南星科植物 半夏Pinellia ternata (Thunb.）Breit 的块茎，经甘草和石灰炮制 的炮制品；贝母：浙江产，批号：20140901，为百合科植物浙贝 母Fritillaria thunbergii Miq.的干燥鳞茎；海带：山东产，批号： 20140901，为海带科植物海带Laminaria japonica Aresch.的叶 状体；以上药物由安徽铜陵禾田中药饮片有限公司提供。连翘： 山西产，批号：1502070，为木犀科植物连翘Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl的干燥果实；川芎：四川产，批号：1409027，为伞形 科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的根茎；独活：四川产， 批号：1501084，为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim. f. biserrata Shan et Yuan的干燥根；昆布：福建产，批号： 1410027，为海带科植物海带Laminaria japonica Aresch.或翅藻 科植物昆布Ecklonia kurome Okam.的叶状体；醋青皮：四川产， 批号：1501086，为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽 培变种的幼果或未成熟果实的干燥果皮；陈皮：四川产，批号： 1501029，为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培变种 的成熟干燥果皮；当归：甘肃产，批号：1409034，为伞形科植物 当归Aaugellica sinensis（Oliv）Diels.的根；以上药材购自北京双 桥燕京中药饮片厂。经北京中医药大学基础医学院李伟老师鉴 定均为该科属合格的中药饮片。 3. 药物制备 共11组药液，分别为：海蒿子煎液组、羊栖菜 煎液组、生甘草煎液组、海蒿子生甘草合煎组、羊栖菜生甘草合 煎组、海藻玉壶汤（海蒿子配生甘草）组、海藻玉壶汤（羊栖菜 配生甘草）组、海藻玉壶汤去甘草（含海蒿子）组、海藻玉壶汤 去甘草（含羊栖菜）组、海藻玉壶汤去海藻（含生甘草）组、海 藻玉壶汤去海藻甘草组。