细菌感染性疾病与感染免疫检测
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细菌感染性疾病与感染免疫检测
感染时病原体以某种传播形式从传染源传播到易感者,并在宿主体内生长繁殖、释放毒素后导致机体内微生态平衡失调的病理生理过程。
大多数病原体是由外界侵入的,受病原体侵袭力、致病力及宿主免疫状态等多种因素的影响,其破坏人体内的微生态平衡后产生各种不同的感染普,出现感染性疾病。
感染性疾病的早期诊断对疾病的诊断和治疗至关重要。临床上最为常用的是病原体抗原检测和宿主血清抗体检测。患者样本中若有病原体抗原检出,即可表明有该病原体的存在;病原体感染机体时可诱导产生相应的抗体,特异性抗体的检出是临床诊断的重要依据。IgM类抗体出现早,消失快,常作为感染的早期诊断指标。IgG类抗体出现晚,维持时间长,是流行病学检查的重要依据。
细菌感染性疾病的免疫监测
抗细菌的特异性免疫应答主要包括T细胞介导的细胞免疫反应和由B细胞的成熟和抗体产生组成的体液免疫反应。细胞介导的免疫应答是抗细胞内细菌感染的主要效应机制,活化B淋巴细胞(浆细胞)产生的抗体介导的体液免疫应答则在抗细胞外细菌感染中发挥主要作用。
一、链球菌感染
(一)链球菌
化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌,能产生多种毒素(链球菌溶血素O和S)、M蛋白、磷酸壁酸、链激酶和透明质酸等致病因子,可引起急性咽炎、呼吸道感染、脓疱疮、皮下软组织感染、心内膜炎、脑膜炎和猩红热等。该细菌感染后可致超敏反应性疾病,如RA和急性肾小球肾炎。
链球菌感染最常用的免疫学实验室检查是抗链球菌溶血素“O”(ASO)检测。
链球菌溶血素“O”(ASO)是一种具有溶血火星的蛋白质,能溶解人类和一些动物的红细胞,且具有一定的抗原性,能刺激机体产生相应的抗体。临场上常采用胶乳凝集试验、免疫散射比浊法检测ASO。ASO增高常见于急性咽炎等上呼吸道感染、风湿性心肌炎、心包炎、风湿性关节炎和急性肾小球肾炎。A组溶血性链球菌所致败血症、菌血症、心内膜炎等患者中,免疫功能不全或大量使用肾上腺皮质激素时,ASO水平可不升高。
二、伤寒沙门菌感染
沙门菌可致多种感染,轻者为自愈性胃肠炎,重者可引起致死性伤寒。伤寒和副伤寒A、B沙门菌引起胃肠炎、菌血症和肠热症等。伤寒的典型症状是发热、头痛、腹泻、腹痛,并可引起呼吸系统、肝、脾和(或)神经系统的致命损伤。在发病2周后,机体出现免疫反应,通过特异性抗体和致敏淋巴细胞消灭细菌。但有时可引起迟发型超敏反应,导致肠壁和集合淋巴结的坏死和
溃疡,甚至造成肠穿孔而危及生病。
伤寒沙门菌感染的实验室真顿主要依赖于免疫学检测方法。
1.肥大反应伤寒沙门菌有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(VI)抗原,三者的抗体均为非保护性抗体。由于(O)与(H)抗原的抗原性较强,故常用于做血清凝集试验(肥大反应)辅助临床诊断。产生抗凝时抗体效价≥1:80为阳性,或双份血清效价呈4倍以上增长,结合流行病学资料可以作出诊断。
2.酶联免疫吸附试验(ELISA)可用于检测伤寒沙门菌的抗原和抗体。目前有 1.以伤寒沙门菌脂多糖为抗原,用间接ELISA法检测伤寒患者血清中特异性IgM抗体,该方法有助于伤寒早期诊断。2.以高纯度的伤寒沙门菌VI抗原包被反应板,采用ELISA法测定患者血清中的VI抗体,有助于检出伤寒带菌者及慢性带菌者。
三、结核分枝杆菌感染
结核分枝杆菌(TB)进入人体后,可以诱导机体产生抗感染的细胞免疫,也能产生抗结核分枝杆菌的抗体反应。一般认为细胞免疫反应与体液免疫反应在结核感染时可发生分离现象,即活动性细胞免疫功能低下,抗体效价升高。在恢复期或者稳定期,细胞免疫功能增强,而抗体效价下降。
结核分枝杆菌感染机体后,可刺激机体产生抗体。目前认为抗体在抗结核免疫方面无保护作用,但高滴度的抗PPD抗体可作为结核病辅助诊断的手段。结核病的细胞免疫在抗感染免疫中起
重要作用,即致敏细胞与抗原相遇,释放淋巴因子,作用于巨噬细胞,促进细胞内溶酶体含量增加,其中酶的活性增高,吞噬能力增加。这种活化的巨细细胞能消化并杀死被吞入的结核分支杆菌。
结核分枝杆菌感染的免疫学方法有:
1.结核菌素试验包括针对旧结核菌素(OT)与结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)两种菌体蛋白。
2.分枝杆菌抗体检测以分枝杆菌为膜抗原为已知抗原,检测待测血清中的分枝杆菌抗体。可采用胶体金方法进行。需注意的是,其他分支杆菌感染、麻风病也克呈阳性。
3.全血干扰素测定发当全血与PPD和对照抗原共同孵育后,致敏的淋巴细胞可分泌IFN-γ,通过检测IFN-γ的含量来鉴定菌种。本实验所得结果与结核菌素试验相当,且具有受BCU接种史影响小、又能与非结核分枝杆菌进行区分的优点,同时还可避免结核菌素试验在操作上与结果判断上存在的多种主观或人为因素的影响。