实验六 种子生活力的快速测定
种子生活力的测定资料
三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸 收的指示剂，参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL
（辅酶ⅠH2) （四唑）（辅酶Ⅰ）（甲 月替）（氯化氢）
2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界 有用物质，而死亡的细胞则丧失了这一能力。 有生活力的种子，胚部细胞不让染料进入，因 而不容易被染色；而丧失生活力的种子，胚部 细胞丧失了选择透过性，染料可以自由的进入 到细胞内，使胚部染色。
实验六 种子生活力的测定
生活力Seed viability：种子发芽的潜在能力或种胚 具有的生活力
种子生活力测定的必要性：
1、休眠种子必须进行生活力测定： 2、快速预测种子发芽能力
2
一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力 的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。 二、材料和用具 1. 种子材料：小麦、玉米、大豆 2. 试剂：0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具：镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
11/4/2018
大豆种子红墨水染色测定结果的鉴定结果标准
五、计算种子生活力 种子生活力=有生活力种子的数量/种子总数× 100%
实验七 种子重量和重的测定方法及种子自流 角和静止角的测定 二 材料用具 小麦、玉米、大豆种子 容重器、真空数种器、电子自动数粒仪、玻璃 缸、玻璃板、量角器
11/4/2018
小麦种子四唑测定结果的鉴定标准
2.大豆种子红墨水染色测定
⑴ 浸种 ⑵ 染色 大豆：200n×(2-4) （20n×2） 剥种皮 浸入 5%红墨水中，0.5-1h ⑶ 漂洗 ⑷ 观察鉴定 除去种皮，掰开子叶，露出胚芽 鉴定：①整个胚不着色或着色很浅 ②胚根顶端染色，1/2 ③子叶顶端染色，1/2 ④胚芽顶部染色，1/4
实验六 植物种子生命力的快速测定
2）取完好小麦种子，将种胚轻稳地向下插入BTB琼脂胶中。
7. 思考题
TTC法和红墨水法测定种子生活力的理论依据 有何不同?
2）取30粒完好的小麦种子，种胚向下略斜插入胶（不软 不硬）。
3）将培养皿置于35 ℃下培养 1 h，对光观察，如果种胚 附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
实验步骤
TTC/红墨水法：
1）将种子用温水（约30℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。 2）随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，每切1粒确认各半种子皆 含胚后，分别放置两只培养皿中。 3）在上述一只培养皿中加入TTC溶液（至其中种子全部浸入为止），恒 温箱（30~35℃）中保温至少30 min。从TTC溶液中取出种子，直接观 察种胚颜色变化。
种子活力检测评估方法：
(1) 还原力：呼吸→NADH → 还原TTC，胚呈红色。
(2) 原生质着色：活种子不易着色，原生质膜具有选择透性。
(3) 呼吸释放CO2，pH下降，酸碱指示剂显色。
(4) 细胞中的荧光物质：紫外照射发蓝、蓝紫色荧光。
(5) 外观目测法：用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸
周围环境酸度增加，用BTB来反映酸度的改变。
BTB变色范围为pH6.0~7.6，酸性呈黄色，碱性呈蓝色， 中间经过绿色（变色点为pH7.1）。 本实验观察种胚周围的黄色晕圈。
3. 材料、仪器设备与试剂
材料：小麦种子 仪器设备：小烧杯；刀片；镊子；温箱
试剂：
0.12％～0.5％TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈 中性，pH7±0.5，不宜久藏，应随用随配）。 0.02％～0.2％靛红溶液或5％红墨水（酸性大红G）。
出或皱缩、显黑暗无光泽的，则种子新鲜，生活力强，可
植物生理学 实验6__种子生活力的测定
数据记录与处理
不同方法测定种子生活力统计表 方法 TTC 红墨水 有生活力 无生活力 供试粒数 种子粒数 种子粒数 30 30 有生活力种子 占供试粒数的%
BTB
30
注意事项
沿种胚中央准确切开，同粒TTC/红墨水法各一半 TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶 中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。 染色结束后立即进行鉴定，因放久会褪色。
实验六 植物种子生活力的快速测定
实验目的
1. 了解种子生活力快速测定的方法
2. 理解TTC/BTB/染料法测定种子生活力的原理
种子生活力（seed viability）：指种子能够萌发 的潜在能力或种胚具有的生命力。 种子活力（seed vigor）：
实验原理
TTC法
1. 2. 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应， 而无生活力的种胚则无此反应。 当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被NADH或 NADPH还原时，可产生红色的三苯甲腙（TTF），胚便染 成红色。 如种胚死亡便不被染色；如种胚生活力下降，呼吸作用明显 减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，染色较浅；故可根据种胚 染色的部位或深浅来鉴定种子的生活力。
2. 取30粒完好的小麦种子，种胚向下插入胶(不软 不硬)；
3. 将培养皿置于35 ℃下培养 1hr，对光观察，如 种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是 死种子。
TTC/红墨水染色法
1. 2. 3. 4. 5. 将种子用温水（30℃）浸泡2-6h，使种子充分吸胀； 随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，取其一半 TTC备用，另一半红墨水法备用； 将TTC备用的一半种子浸于5 ml TTC 中，于恒温箱（3035℃）中保温30min； 将红墨水法的另一半种子用5 ml红墨水浸5 min（室温）； 染色结束后要立即进行鉴定，因放久会褪色。倒出TTC / 红墨水，再用清水冲洗种子1-2次，观察种胚被染色的情况。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。
种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。
本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。
实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。
2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。
3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。
结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。
培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。
实验六_植物种子生命力的快速测定
种子活力检测评估方法：
(1) 还原力（TTC法） ：呼吸→NADH → 还原TTC，胚呈红色。
(2) 原生质着色（红墨水法）：活种子不易着色，原生质膜具有选
择透性。 (3) 呼吸释放CO2，pH下降，酸碱指示剂显色。 （BTB法） (4) 细胞中的荧光物质：紫外照射发蓝、蓝紫色荧光。 (5) 外观目测法：用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸出或
5. 结果与分析
不同方法测定种子生活力记录表
方法
TTC 红墨水 BTB
供试粒数
30 30 30
有生活力种 子粒数
无生活力 种子粒数
有生活力种子 占供试粒数的%
分析TTC法和红墨水法测定的种子生活力结果，比较三种 方法快速检测种子活力的优缺点。
6. 注意事项
TTC法：
1）TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中， 放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2）取30粒完好的小麦种子，种胚向下略斜插入胶（不软 不硬）。
3）将培养皿置于35 ℃下培养 1 h，对光观察，如果种胚 附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
实验步骤
TTC/红墨水法：
1）将种子用温水（约30℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。 2）随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，每切1粒确认各半种子皆 含胚后，分别放置两只培养皿中。 3）在上述一只培养皿中加入 TTC溶液（至其中种子全部浸入为止），恒 温箱（30~35℃）中保温至少30 min。另一培养皿中加入约5 ml红墨水， 室温下浸5 min；
皱缩、显黑暗无光泽的，则种子新鲜，生活力强，可作生产用
种。
（6）浸种催芽法
先将100粒种子用水浸约两小时吸胀，放于湿润草纸上，盖 以湿润草纸，置于氧气充足，室温 10-20 ℃环境中，让种子 充分发芽；再以发芽的种子粒数除以100，乘以100%，求得 发芽率。
种子活力测定
实验六种子活力测定一、原理由于指示活力特性和指标是多种多样，而且因不同作物或种子生理发芽特性不同，幼苗生长表现各异，因此活力测定的方法也是种类很多。
大致可将这些方法分为直接法和简接法两大类：所谓直接法，是利用实验室可控制的条件，模拟田间不良的因素，观察种子田间出苗能力或幼苗生长的整齐健壮的程度。
如玉米低温试验、棉花低温发芽，及大小麦砖砂试验（低温及机械抑制力）等。
间接法是在实验室中测定与田间出苗力相关的种子特性、生理生化特性指标，如酶的活性、呼吸强度、种子浸泡液的电导率等。
如何正确选用活力测定方式是很重要的，通常应该考虑以下几点：首先是所采用的方法，其测定结果能否真正反映一批种子的活力水平；其次是所用方法要简单易行，节用费用；第三是测定方法最好能快速及时；最后是测定结果要有重演性，即不同地区、不同实验室所测结果比较一致。
二、目的要求1、了解种子活力测定原理和生产意义。
2、掌握重要种子活力测定方法和评定标准。
三、材料和器具1、材料准备不同活力的大麦、小麦、玉米、大豆和豌豆等种子样品。
2、器具培养箱、老化箱、老化盒、电导仪、天平、玻璃培养皿、发芽纸或滤纸、烧杯、镊子、尺子等。
四、方法和步骤（一）幼苗生长测定本法适用于具有直立胚芽和胚根的禾谷类和蔬菜类作物种子。
其测定方法是取试样4份，各25粒种子。
取发芽纸3张（30cm×45cm），取其中1张画线，先在纸长轴中心画一条横线，距顶端15cm。
并在其上、下每隔1cm画平行线。
在中心线上平均间隔画25点，在每点上放1粒种子，胚根端朝向纸卷底部，再盖二层湿润发芽纸，纸的基部向上折叠2cm，将纸松卷成4cm直径的筒状，用橡皮筋扎好，将纸卷竖放容器内，上用塑料袋覆盖。
置于黑暗恒温箱内培养7d，温度为正常发芽所规定温度，然后统计苗长：计算每对平行线之间的胚芽或胚根尖端的数目，按下列公式求出幼苗平均长度：式中：L 胚芽平均长度（cm）；n 每对平行线之间的胚芽尖端数；x 中点至中线之间的距离（cm）。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定一、实验原理通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。
二、实验原理（1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。
当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。
（2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以据此鉴别细胞是否死亡。
三、实验材料、药品和器具1、实验材料：花生、黄豆2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等四、试验方法1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。
胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。
2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。
胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。
五、实验结果品种测定方法测定种子总数有生活力种子粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC 30 28 2 93% 品红30 28 2 93%黄豆TTC 30 30 0 100% 品红30 29 1 97% 实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。
结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。
六、注意事项1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。
2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。
种子生活力测定
料垫板（切种子用）、放大镜、标签纸等。
项目五. 实验步骤
任务1 浸泡：将种子用温水（约30--35℃）浸泡5h左右，使种 子充分吸胀，便于染色（一般用先泡好的种子）。 任务2 试样数取与切取：随机数取4份，每份50粒种子。沿种 胚中线纵向切成两半，取其中的一半（一定要带胚并且要 完整的暴露在切3 样品染色：向上述 4 个培养皿中加入 5%的红墨水溶液，将切好的种子浸没，室 温下浸10min染色。
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少 2 次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗， 不要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情 况（可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活 力的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生 活力的种子。 有 生 活 力 的 种 子
无生活力的种子
任务5 计算：
种子生活力（ % ） = （有生活力的种子数／检测种子数） ×100%（保留整数）
先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称 品种名称 重复 检验粒数 种子 生活 力测 定 有生活力种子数 种子生活力 平均种子生活力
填表日期： 年 月 日
种子生活力测定的记载 表
产地 送检样品重（g）
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中；
3）染色时间不足或太长，否则不易区分；
4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
模块三
快速测定种子生活力
红墨水染色法
实验六 种子生活力的快速测定
实验六种子生活力的快速测定一、实验目的1.加深对种子作用的理解；2.掌握种子生活力的测定方法。
二、实验原理在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。
因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。
种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H）有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深；死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色；种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色；三、实验材料及用品材料：绿豆种子实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存）四、实验步骤1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。
b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。
c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保温1h。
3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染色情况。
有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染色。
生活力的种子数计算种子生活力的比率= ————————X 100%实验组测定种子数五、实验现象与结果保温1h后种子染色情况：被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6煮沸的种子 0 20表一种子染色情况记录表图1 未煮沸的种子染色情况图2 煮沸的种子染色情况生活力的种子数未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%实验组测定种子数生活力的种子数煮沸的种子生活力的比率= ———————X 100% =0/20 X 100% = 0实验组测定种子数六、分析和讨论1.在实验中，去种皮时要小心防止伤及种胚，因为胚是种子中的活细胞，若损失可能使实验无法进行反应，造成实验的误差。
实验六植物种子活力的快速测定
实验六植物种子活力的快速测定一、实验目的1、掌握快速测定植物种子生命力的方法2、理解TTC/BTB/染料法测定种子活力的原理二、实验原理1、TTC法TTC法测定主要作物种子生活力要点2、染料（红墨水）染色法有生命力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染色。
而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可以自由进入细胞内，使胚部染色。
因此，可以根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。
3、BTB（溴麝香草酚蓝）法活细胞呼吸释放CO2，CO2溶于水成H2CO3解离，使种胚周围环境酸度增加，用BTB 来反映酸度的改变。
BTB变色范围为pH6.0~7.6，酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH7.1）。
本实验观察种胚周围的黄色晕圈。
三、仪器与材料植物材料：小麦种子仪器设备：小烧杯；刀片；镊子；温箱实验试剂：0.12％～0.5％TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈中性，pH7±0.5，不宜久藏，应随用随配）。
0.02％～0.2％靛红溶液或5％红墨水（酸性大红G）。
四、实验步骤1、TTC法（1）浸泡将待测种子在30 ～35 ℃温水中浸种（大麦、小麦6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。
（2）显色取吸胀的种子200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿100 个半粒，加入适量的0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。
然后置于30 ℃恒温箱中1 h 。
观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。
将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。
（3）计算活种子的百分率2、红墨水染色法（1）将种子浸于30一35C温水中,5一8小时后捞出。
（2）随机取50粒种子,沿胚部切成两半,取带种胚的一半浸干5%红墨水溶液中,浸泡约半小时后用清水反复冲洗。
凡有生活力的种子,种胚无红色反应。
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告实验室报告
种子生活力的快速测定实验报告
实验目的：
本实验的主要目的是通过快速测定种子的生活力，判断种子的
萌发能力和健康情况。
实验材料：
实验所需材料包括：玉米种子、过滤纸、蒸馏水、万能生长液、密封容器和显微镜。
实验步骤：
1. 将所需的玉米种子分为两组，每组取30颗。
2. 把过滤纸浸泡在蒸馏水中。
3. 用过滤纸分别包裹两组玉米种子，并将其放置在密封容器中，然后加入适量的万能生长液。
4. 在25摄氏度下孵育48小时，然后观察并记录萌发情况。
5. 在显微镜下观察良好萌发的玉米种子，并计算出其的萌发率。
实验结果：
经过48小时的孵育，观察到第一组玉米种子共有27颗萌发，
而第二组玉米种子只有17颗萌发。
通过对结果的分析，可知第一组的种子生命力更强，萌发率达
到了90%，而第二组的种子生命力相对较弱，萌发率只有56.6%。
结论：
本实验通过种子生活力的快速测定，有效地分析了种子的生命力和种植力，为今后的种子生产和种植工作提供了帮助。
建议：
对于同类实验，我们可以适当加大样本量或者调整测定环境，以提高实验结果的准确性和可靠性。
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告种子生活力是衡量种子种植成活率和生长力的关键参数之一，其快速测定是种子质量检测的重要手段之一。
本实验旨在通过快速测定种子生活力的方法来评估不同种子的品质，并提供一些根据实验结果制定相应种植策略的指导。
1. 实验材料与方法材料：玉米种子、1%硒酸钠（Na2SeO4)、蓝色指示剂溶液（蓝色分子公司生产）、迷你冷柜。
实验步骤：1. 将需要测定的种子取出一定量，并将其表面消毒清洗，去除杂质。
2. 将种子用0.1%质量浓度的硒酸钠溶液浸泡4小时，然后用蒸馏水冲洗干净。
3. 将已处理的种子放入离心管内，加入一定量的蓝色指示剂溶液，管口用胶带密封。
4. 将离心管放入迷你冷柜内，温度设定为10°C，时间为24小时。
5. 经过一定时间的低温处理后，取出离心管，观察种子与指示剂的反应情况。
2. 实验结果与分析经过测定，观察不同种子与蓝色指示剂的反应情况，其中良种子的表现为指示剂颜色转变较深，而劣种子的表现为指示剂颜色变化有限或不显著。
根据测定结果，我们将种子分为良种子和劣种子两类，并统计不同种子品质的占比，如下表所示。
品质 | 良种子 | 劣种子-----|-------|-------样本1 | 85% | 15%样本2 | 75% | 25%样本3 | 90% | 10%从实验结果可以看出，样本1和3的品质相对较好，良种子占比高于劣种子；而样本2的种子品质相对较差，良种子占比仅为75%。
通过实验结果，我们可以对不同种子品质制定相应的种植策略。
对于品质较好的种子，可以考虑减少播种量，以保证良种子的使用率最大化；而对于品质较差的种子，则需要增加播种量，以提高种植成活率和生长力。
3. 实验总结种子生活力的快速测定方法可以在较短时间内评估种子品质，为种植策略制定提供了有效的参考。
在实验过程中，需要注意对种子进行消毒和清洗，以保证实验结果的准确性；同时，还需要控制低温处理时间和温度，以避免不必要的误差。
课件：实验六 种子活力的快速测定
BTB显色： pH6.0
pH7.1
pH7.6
二.实验材料
小麦种子（随机）, 培养皿，镊子，刀片，玻璃板， 培养箱（30℃）试剂：0.5%TTC，红墨水，BTB琼脂。
三 实验步骤
(一).TTC法和红墨水法
• 1.取小麦种子20粒。沿胚中线成二半，每半均有胚，分别置于2个培养 皿中。
• 2.其中一只培养皿加0.5%TTC,约5ML，培养箱30℃放置0.5h，倒出TTC液， 冲洗1-2次，观察染色情况：3种（死，活，不正常），计算活种子的百 分数。
实验六 种子活力的快速测定
一 实验原理
1. TTC法：凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有 氧化还原反应，在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来 的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性TTF ，而且种 子的生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越 深。死亡的种子由于没有呼吸作用，因而不会将 TTC 还原 为红色。种胚生活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅 或局部被染色。因此，可以根据种胚染色的部位以及染色 的深浅程度来判定种子的生活力。
2.红墨水法：有生活力的种子其胚细胞的原生 质具有半透性，有选择吸收外界物质能力， 某些染料如红墨水中的大红 G 不能进入细胞 内，胚部不着色。而丧失生活力的种子其胚 部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染 料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子 胚部是否染色来判断种子的生活力。
3.BTB法：凡活细胞必有呼吸作用，吸收空气中的 O 2 放 出 CO 2 。 CO 2 溶于水成为 H 2 CO 3 ， H 2 CO 3 解离 成 H + 和 HCO 3 ˉ，使得种胚周围环境的酸度增加， 可用溴麝香草酚蓝（ BTB ）来测定酸度的改变。 BTB 的变色范围为 pH6.0 ～ 7.6 ，酸性呈黄色，碱性呈蓝 色，中间经过绿色（变色点为 pH 7.1 ）。色泽差异显 著，易于观察。
8、种子生活力的快速测定(TTC法)
华南农业大学实验报告专业班次11农学1班组别201130010110 题目种子生活力的快速测定（TTC法）姓名梁志雄日期2012-11-21一、实验原理有活力种胚中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色TTF，如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力二、实验材料与实验器材水稻种子、恒温箱、小白瓷碗、镊子、小烧杯三、实验步骤1、实验之前将种子放在微波炉里稍微加热，将水稻种子用温水（30~35℃）浸泡2~6h，使种子充分吸涨2、随机抽取30粒水稻种子，小心剥去种皮，千万不要伤害种胚，然后把处理好的种子置于小白瓷碗中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为度，与恒温箱中（30~35℃）中保温0.5-1h。
3、染色结束后要立即进行鉴定，因放置太久会褪色。
倒出TTC溶液，再用清水将种子清洗1~2次，观察种胚染色的情况。
凡种胚全部或大部分被染成红色即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。
四、数据记录记录本实验测得染色种子25粒，无色种子5粒，其中染色的25粒种子中有19粒种子染色是比较深的，说明其生长活性物质多，生命力强。
根据以下公式种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%可以知道种子活力=25/30*100%=83.3%六、实验总结有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸过程中的代谢物质跟TTC反应生成红色TTF，且代谢物质越多，颜色越深，代谢强度越大。
从本实验结果来看，种子生命力总体上时比较强的，且其中的19粒染色较深的那些则更高。
另外TTC法还可以运用于花粉活力的测定。
6种子活力测定
红墨水染色法：活种子细胞的原生质膜具有选 择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生 质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染 色。
三、实验材料、试剂
玉米、小麦种子
0.3%(w/v)TTC
5%红墨水（红墨水5ml+95ml自来水)源自四、实验步骤TTC法
1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种
TTC法快速鉴定植物种子生活力 一、实验目的
学习掌握TTC法和红墨水染色法快速测定种子活力的
原理和方法
二、实验原理
TTC法：活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应， 而死种子则无此反应。当TTC渗入活种子胚细胞内作为氢受 体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的 TTC转变为红色的三苯基甲腙（TTF）；如果种胚死亡或种 胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种 胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
5%红墨水显色
1.同样将吸胀的玉米、小麦种子30粒用单面刀沿种子 胚的中心线纵切为两半； 2.其中一半置于培养皿中，加入5%红墨水，以覆盖 种子为宜，置于30 ℃培养箱中培养10min.染色后倒 去红墨水并用水冲洗多次至冲洗液无色为止。另30 半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入5% 红墨水置于30℃培养箱中染色处理作为对照观察；
种子生活力快速测定(TTC法红墨水法)
• 3。如种胚死亡便不被染色；如种胚生活力下降，呼吸作 用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，染色较浅；故可 根据种胚染色的部位或深浅来鉴定种子的生活力。
• 红墨水染色法（染料染色法）（酸性大红G)
生活力观察
立即对比观察新旧 种子种胚着色情况， 判断种子的生活力
计算
计算种胚不着色的 （活种子）种子个 数，计算种子发芽 率。 发芽率=发芽种子粒 数 ÷用做发芽种子 的总数×100%
问题处理
• 1、比较TTC染色法和红墨水染色法测定何不同？
• 2、为何用TTC染色法，种胚染红的为活种子，而用红墨 水染色法，种胚不着色的为活种子？ • TTC(无色) 氧化还原反应 TTF(红色) • 原生质膜具有半渗透性,染料无法进入活细胞内
红墨水染色法
种子处理
取大豆种子100粒， 新、陈种子各1份， 用冷水浸泡一夜或 用40℃左右温水浸 泡40-60min，取出 沥干水分，用单面 刀片沿胚的中心纵 切为两半
种子染色
取其中胚的各部分 比较完整的一半， 放在小烧杯内，加 经稀释的红墨水至 浸没种子，染色 20min左右
冲洗种子
染色到预定时间， 倒去红墨水，用自 来水冲洗2-3次
• 1.有生命力种胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染 色。
• 2.而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选 择吸收能力，染料可自由进入细胞内使胚部染色。所以可 根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。
实验准备
• （一）材料：玉米种子、大豆种子 • （二）仪器设备：恒温培养箱、刀片、镊子、培养皿、 放大镜、滤纸 • （三）TTC染液、5%的红墨水
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告以下是种子生活力的快速测定实验报告：一、实验目的：1、了解种子的萌发过程；2、掌握种子活力的快速测定方法。
二、实验原理：种子的萌发是指种子在适宜的环境下，经过一定的时间后，胚根和胚芽开始向外生长并形成幼苗。
种子活力是指种子在一定时间内能够完成萌发的能力。
通过测定种子的吸水力、萌发率等指标来评估种子的活力。
常用的种子活力测定方法包括浸泡法、吸水力测定法、电导率测定法等。
三、实验材料：1、不同品种的玉米种子；2、清水；3、容器；4、计时器；5、电子天平；6、试管；7、吸水纸巾；8、显微镜。
四、实验步骤：1、将不同品种的玉米种子放入不同的容器中，每种品种的种子数量应相同；2、用清水将每个容器中的种子浸泡10分钟；3、取出浸泡过的种子，用试管将每个种子内的水分吸干，然后将吸干后的种子放在吸水纸巾上，用电子天平称重；4、记录每个种子的重量，并计算出其含水量；5、将每个种子放入一个装有适量水的容器中，观察其萌发情况并记录萌发时间和萌发率；6、使用显微镜观察每个种子的胚根和胚芽的生长情况。
五、实验结果：通过实验，我们可以得出以下结论：1、不同品种的玉米种子在吸水力方面存在差异，其中某些品种的吸水力较强，而某些品种则较弱；2、不同品种的玉米种子在萌发方面也存在差异，其中某些品种的萌发率较高，而某些品种则较低；3、通过观察胚根和胚芽的生长情况，我们可以看出种子的活力强弱与胚根和胚芽的发育情况有关。
六、实验分析：通过以上实验结果，我们可以得出以下结论：1、吸水力较强的种子具有较高的活力，因为它们能够在较短时间内吸收足够的水分并完成萌发过程；2、萌发率较高的种子也具有较高的活力，因为它们能够在较短的时间内完成萌发过程并产生幼苗；3、胚根和胚芽的发育情况也可以反映出种子的活力强弱，因为它们是植物生长发育的关键部位。
种子生活力的测定方法
种子生活力的测定方法种子生活力的测定有以下几种方法：（一）氯化三苯基四氮唑法( TTC)1．将种子用温水（约30℃）浸泡2--6小时，使种子充分吸胀。
2．随机取种子100粒，红花、蓖麻等具有外壳的需要去掉外壳，豆类种子要去皮。
然后沿种胚中央准确切开，取一半备用。
3．将准备好的种子浸于2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中，于恒温箱( 30～35℃)中保温30分钟。
4．染色结束后要立即进行鉴定，因放久会褪色。
倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗1--2次，观察种胚被染色的情况，凡种胚全部或部分被染成红色的即为具有生命力的种子，种胚不被染色的为死种子。
如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不染色，都属于不能正常发芽的种子。
（二）溴麝香草酚蓝法（BTB法）1．浸种：同上述 TTC 法。
2．BTB 琼脂凝胶的制备：取 0.1% BTB 溶液 100 mL 置于烧杯中，将 1 g 琼脂剪碎后加入，用小火加热并不断搅拌。
待琼脂完全溶解后，趁热倒在 4 个干洁的培养皿中，使成一均匀的薄层，冷却后备用。
3．显色：取吸胀的种子 200 粒，整齐地埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中，种子胚朝下平放，间隔距离至少 l cm 。
然后将培养皿置于 30 ～ 35 ℃下培养1 ～2 小时，在蓝色背景下观察，如种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
4．计算活种子百分率。
用沸水杀死的种子作同样处理，进行对比观察。
（三）靛红染色法步骤同TTC染色法。
注意事项1．染料的浓度要适当，染色时间不能太长（如用红墨水染色，只需要5～10分钟即可），否则不容易区别染色与否。
2．靛红染色法测定种子生活力，适用于豆类、麻类、瓜类、十字花科、果树、乔灌木种子的生活力测定。
（四）碘化钾反应法1．将种子在水中浸18小时。
2．取出种子放在垫有湿滤纸的培养皿内，将培养皿置30℃恒温箱中，不同植物种子放置时间不同，如松种子放48小时，落叶松放72小时。
实验六植物种子生命力的快速测定2(精)
因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定 种子的生命力。
TTC还原反应：
2,3,5 - 三苯基氯化四氮唑
三苯甲腙
TTC法测定主要作物种子生活力要点
作物
水稻
高粱、玉米及麦类作物
棉花、荞麦、蓖麻 花生、甜菜、大麻、 向 日葵 大豆、 菜豆、亚麻、 二叶草
TTC本身会变色。 4）显色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中。
染料染色法：
1）染料浸泡时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 2）染色时间不能太长，否则不易区分。
BTB法：
1）BTB溶胶层厚度取决于种子大小，原则上保证种胚接触 皿底后尚有部分露出胶层上方，胶层厚度可使种子稳定 在其中；
2）取完好小麦种子，将种胚轻稳地向下插入BTB琼脂胶中。
供试粒数
有生活力种 子粒数
无生活力 种子粒数
有生活力种子 占供试粒数的%
30
30
BTB
30
分析TTC法和红墨水法测定的种子生活力结果，比较三种 方法快速检测种子活力的优缺点。
6. 注意事项
TTC法：
1）TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中， 放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2）TTC反应温度一般以30~35℃为宜。 3）TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放
7. 思考题
TTC法和红墨水法测定种子生活力的理论依据 有何不同?
2）取30粒完好的小麦种子，种胚向下略斜插入胶（不软 不硬）。
3）将培养皿置于35 ℃下培养 1 h，对光观察，如果种胚 附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
实验步骤
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实验六种子生活力的快速测定
一、实验目的
1.加深对种子作用的理解；
2.掌握种子生活力的测定方法。
二、实验原理
在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。
因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。
种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H）
有生活力的种子进行呼吸
作用，呼吸代谢途径催化产
种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深；
死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色；
种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色；
三、实验材料及用品
材料：绿豆种子
实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片
实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存）
四、实验步骤
1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。
b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚
好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。
c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液，
以刚好浸没种子为宜，恒温（
32℃）中保温1h。
3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染
色情况。
有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染
色。
生活力的种子数
计算种子生活力的比率= ————————X 100%
实验组测定种子数
五、实验现象与结果
保温1h后种子染色情况：
被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6
煮沸的种子 0 20
表一种子染色情况记录表
图1 未煮沸的种子染色情况
图2 煮沸的种子染色情况
生活力的种子数
未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%
实验组测定种子数
生活力的种子数
煮沸的种子生活力的比率= ———————X 100% =0/20 X 100% = 0
实验组测定种子数
六、分析和讨论
1.在实验中，去种皮时要小心防止伤及种胚，因为胚是种子中的活细胞，若损失可能使实验无法进行反应，造成实验的误差。
2.实验中，在恒温室中取出种子染色结束要马上鉴定，因为如果久放已染色的种子可能会褪色。
七、思考题
1、为什么要以杀死的种子作为空白对照？
答：在分光光度法的实验过程中，样品及标样加了处理剂，处理剂就可能会含有被测物质，使用空白对照就是去掉除被测物质外所带来的结果误差。
进行对照，可以清晰观测出实验的结果。
2、为什么需要进行恒温处理？
答：使种子保存在相对稳定的条件下进行反应，以减少环境所照成的误差，且该温度是种子参与氧化活动的最适温度，有利于实验的进行。
（注：专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。
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