寄生虫免疫
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土源性线虫病:指不需要中间宿主,其中卵和幼虫在外界发育到感染期后直接感染人的线虫。食物源性寄生虫病:因生食或半生食含有感染期寄生虫的食物而感染的寄生虫病。
抗原的纯化:通过物理的化学的方法,利用寄生虫的物理化学特性进行组分分离的过程。纯化的方法:凝胶层析、离子交换层析、亲和层析
凝胶层析:凝胶层析是一种以分子大小为基础的分离技术,凝胶中每个颗粒的细微结构的小孔使被分离组分在流经途径上出现差别,大分子物质首先从孔外经过,首先被洗脱出来,其次是较小的组分,最后是小分子物质。(常用载体:交联葡聚糖、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶。)
离子交换层析:是利用离子交换剂作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的层析方法。
离子交换层析原理:依靠静电吸引溶液中带相反电荷的离子结合利用待分离的各种蛋白质的等电点或所带电荷的不同而引起的与载体结合力不同和进行区分。
离子交换层析过程:起始、吸附、解脱、完成
亲和层析(affinity chromatography):将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂有亲和力的蛋白质就被吸附而被滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附直接流出,从而与被分离的蛋白质分离,然后选用适应的洗脱液改变条件将被结合的蛋白质洗脱下来
亲和层析原理:亲和层析是一种吸附层析抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的,所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在的液相中的相应抗体(或抗原)选择性的结合在固相载体上借以与液相中的其它蛋白质分开达到分离提纯的目的。
理想载体的基本条件:1、不溶于水,但高度亲水2、惰性物质,非特异性吸附少3、具有相当量的化学基团可供活化4、理化性质稳定5、机械性能好,具有一定的颗粒形式以保持一定的流速6、通透性好,最好为多孔的网状结构,使大分子能够自由通过7、能抵抗微生物和醇的作用
固相载体包括皂土、玻璃微球、纤维素、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等
在缓冲液离子浓度大于0.05mol/l时对蛋白质几乎没有非特异性吸附。
配基:亲和层析中能被某一种生物大分子识别和可逆结合的生物专一性物质
基质:亲和层析中与配基共价结合使其固相化的物质
淋巴细胞转化实验:T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时,受到后者的刺激可发生形态学和生物学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞,并进行有丝分裂
过敏性反应:
弱毒活疫苗:一般是活虫经过放射性因素照射后制成的,另一类是由异种寄生虫制备
免疫应答的体外实验:体外试验虽不能提供体内免疫反映的直接依据,但可以了解机体的免疫状态以及对分析体内免疫反映所参加的成分提供有价值的数据。1、淋巴细胞转化实验2、溶血斑试验3、体外杀伤实验
溶血斑试验:是体外检测单个抗体形成细胞的一种方法,即将绵羊红细胞(SRBC)免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液。与一定量的SRBC结合,于37℃作用下,免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素,在补体的参与下,使抗体形成细胞周围肉眼可见的溶血空斑。
体外杀伤实验:1、CD56,2、CD16,3、杀伤细胞活化受体(KAR);识别靶细胞表面的糖类配基4、杀伤细胞抑制受体(KIR);识别子自身的MHC分子,介导抑制信号
Ⅰ类MHC分子的晶体结构只有一种构象,即α1和α2相互作用形成一个8条反平行的β折叠片层构成的平台,支撑着两个平行α螺旋,其中4条反平行β片层和一个α螺旋是由α1的氨基酸折叠形成的。
Ⅱ类MHC分子都是由两条非共价结合的多肽链组成的。α链和β链必须同时合成,随后在内质网中以非共价键方式连接在一起。只有α和β链的非共价作用才能结合在细胞膜上。
抗原递呈细胞(APC):能够摄取、加工、处理抗原并将抗原信息递呈给抗原特异性淋巴细胞(T细胞)的一类免疫细胞。包括巨噬细胞、树突状细胞、成熟B细胞等。
抗原加工:指蛋白质抗原在细胞内被降解成能与MHC结合的肽的过程。
抗原递呈:指MHC分子与抗原肽结合,将其展示于细胞表面供T细胞识别的过程。
独特型(idiotype)。:每一形成抗体的克隆细胞所产生的抗体上,都具有自身独特的抗原专一性。
抗体依赖的细胞介导的细胞(ADCC):具有杀伤活力的细胞如NK细胞通过其表面表达的Fc 受体识别结合于靶抗原上的抗体Fc段,直接杀伤靶抗原。
细胞的杀虫效应:A.活化粘附作用B.细胞杀灭过程
目前发现的细胞杀伤寄生虫有以下五种ADCC表现形式:IgG-嗜酸性粒细胞机理;IgE-巨噬细胞机理;IgG-中性粒细胞机理;IgG-肥大细胞机理;IgE-中性粒细胞-组织胺释放机理
低亲和力抗体:LAAB 高亲和力抗体:HAAB
细胞因子(Cytokine):是由机体的多种细胞(免疫细胞、非免疫细胞)合成、分泌的,通过结合细胞表面的相应受体而发挥生物学作用的小分子蛋白质。
细胞因子合成、分泌特性:(1) 产生细胞的多源性:一种细胞因子由多种细胞产生,如:单核-巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞等 IL-1;(2) 产生因子的多向性:一种细胞分泌多种细胞因子,如:T细胞 IL-2、IL-13、GM-CSF等;(3) 短时自限性分泌;(4) 主要为自分泌、旁分泌效应。
环卵沉淀反应试验:是以血吸血整卵为抗原的特异免疫血清学试验。卵内毛蚴或胚胎分泌排泄的抗原物质经卵壳微孔渗出与试样血清中的特异抗体结合,可在虫卵周围形成特殊的复合物沉淀,在光镜下判读反应强度并计数反应卵的百分率称环沉率。
环卵沉淀反应试验原理:卵内毛蚴或胚胎分泌排泄的抗原物质经卵壳微孔渗出与试样血清中的特异抗体结合,可在虫卵周围形成特殊的复合物沉淀,在光镜下判读反应强度并计数反应卵的百分率称环沉率。
带虫免疫:人体感染寄生虫后,产生一定程度的免疫力:1、可杀伤体内原有的寄生虫,使其数量明显下降,维持在一个低水平上,临床症状消失呈带虫状态,但不能完全消除体内的寄生虫。2、可抵抗同种寄生虫的在感染。3、体内无寄生虫时此免疫力即消失,这种免疫状态叫带虫免疫
伴随免疫:人感染寄生虫后可获得部分免疫力,动物体内仍有成虫寄生和产卵,但宿主对再感染有一定免疫力,而无损于体内的成虫
变态反应分类:Gell与Coombs按变态反应发生发展的近代知识,首先提出四型分型法,即I型——速发型,Ⅱ型——细胞毒型,Ⅲ型——免疫复合物型,Ⅳ型——迟发型或细胞免疫型
活性介质包括:组胺、5-羟色胺、肝素、类胰蛋白酶等。
免疫逃避:某些寄生虫能逃避宿主的免疫效应而发育、繁殖、生存。
分子模拟:某些寄生虫体表达与宿主组合抗原相似的成分,妨碍宿主免疫系统的识别、
抗原伪装:某些寄生虫能将宿主的抗原分子镶嵌在虫体体表,或用宿主抗原包被自己。
封闭抗体:多克隆B细胞激活后,高IG血症,其中有一种抗体它结合于虫体表面,但无保护性,并阻止了保护性抗体与虫体结合,这种抗体为封闭抗体。
血清灭活后反应减弱,保存3天以上的血清需加补体,目前认为此反应是部分依赖补体的抗原抗体反应
免疫酶染色实验基本原理:将寄生虫各期制成冰冻切片后用于检测,当切片抗原加上寄生虫