小鼠总抗氧化能力的测定
抗氧化能力指数测定原理及应用
抗氧化能力指数测定原理及应用随着人们健康意识的提高,抗氧化能力成为的焦点。
抗氧化能力是指机体在面对氧化应激时,消除和降低氧化压力的能力。
为了更好地了解机体的抗氧化能力,抗氧化能力指数的测定变得越来越重要。
本文将详细介绍抗氧化能力指数测定的原理、方法及应用。
抗氧化能力指数测定主要基于氧化还原反应的原理,通过测定样品对自由基的清除能力来评价其抗氧化能力。
一般情况下,测定的指标包括总抗氧化能力、还原力、氧自由基清除能力等。
总抗氧化能力:总抗氧化能力是指机体对氧化应激的综合防御能力,包括酶类和非酶类抗氧化物质。
测定总抗氧化能力的方法主要是基于比色或荧光法,通过检测样品对自由基的清除率来计算总抗氧化能力。
还原力:还原力是指样品对氧化剂的还原能力,通过测定样品在特定条件下的还原能力,可以评估其抗氧化能力。
常用的测定方法包括邻苯三酚自氧化法和铁离子还原法。
氧自由基清除能力:氧自由基是导致氧化应激的主要因素之一,通过测定样品对氧自由基的清除能力,可以了解其抗氧化能力。
常用的测定方法包括电子自旋共振法和化学发光法。
抗氧化能力指数测定在多个领域均有应用,如生物学、医学、营养学等。
以下是几个具体应用的例子。
生物学:在生物学领域,抗氧化能力指数测定被广泛应用于研究物种演化、生物衰老、药物筛选等方面。
通过测定不同物种或不同组织的抗氧化能力,有助于深入了解生物体的抗氧化机制和衰老过程。
医学:在医学领域,抗氧化能力指数测定可以帮助医生评估患者的抗氧化状态,预测其对疾病的易感性。
例如,某些疾病如癌症、糖尿病等与机体的抗氧化能力密切相关,通过测定患者的抗氧化能力,可以为疾病的预防和治疗提供参考。
营养学:在营养学领域,抗氧化能力指数测定可以评价食品的营养价值。
机体的抗氧化系统需要多种营养素的支持,如维生素C、维生素E、硒等。
通过测定食品中的抗氧化物质含量,可以为膳食营养推荐提供依据。
抗氧化能力指数测定对于评价机体的抗氧化状态具有重要意义,它不仅有助于了解个体的健康状况,还可为疾病的预防和治疗提供指导。
外湿对正常小鼠过氧化与抗氧化影响的实验研究_赵丽
第11卷 第4期 2009 年 4 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 11No. 4Apr . ,2009目前,关于湿邪致病机理的一些研究表明[1]:湿证可导致机体免疫调节功能紊乱、营养吸收障碍以及能量代谢不足等。
1 材料与方法1.1实验动物与分组 实验选用昆明系健康雄性小白鼠40只,将其随机编号称重,分为两组,即正常对照组(A组)20只,外湿组(B组)20只。
正常对照组不施加任何处理因素。
造模第10天,将A组、B组小鼠全部处死,取全肝。
1.2实验各组的制作 动物实验室通风、采光条件良好。
实验动物分组后,单笼饲养,自由取食水,同等条件下饲养3天,从第4天起施加处理因素。
造模阶段时处长夏季节,外湿造模持续共10天,具体方法如下:A组不施加任何处理因素。
B组置温度为18~25℃,相对湿度RH>90%的造模箱中,造模箱由3mm厚的有机玻璃制成,体积为0.5m×0.3m×0.3m,箱上开有通气孔,箱内放温湿度计,箱底为钢丝网架,网架下设有水槽。
1.3脂质过氧化物和相关抗氧化酶的测定 丙二醛(malondialdehyde,MDA) 据Ohkawa H法[2]。
共轭双烯(Conjugated dienes,CD) 据Pryor WA and Castle L法[3]。
过氧化氢酶(Catalase,Cat) 据Sinha AK法[4]。
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD) 据Makarevich OP and Gdikovl PP法[5]。
过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px) 据Austin L法[6]。
1.4数据统计方法 应用Excel97软件进行数据分析,并用华西医科大学医学软件包PEMS进一步复核。
2 结果与分析2.1外湿造模阶段小鼠一般状态的观察 第1天,实验各组小鼠较以前无明显改变;第2天,B组有5只小鼠出现眯眼现象,但可经轻度刺激后迅速恢复,大便无特殊改变,呈扁椭圆形,颜色偏黑;第4天,B 组在钳捉状态下机警度下降,有3只小鼠出现懒动,扎堆现象,经震荡刺激后可恢复,食量减少,大便无明显改变;第6天,B组小鼠均出现懒动,扎堆现象,经震荡刺激后有7只小鼠无反应,背毛散乱无光泽,有2只小鼠出现肢伸不收现象;第8天,B组在原有症状基础上出现了稀便,颜色较黑;第10天,B组小鼠出现了肛周秽浊现象。
小鼠实验方案
酵母提取物对小鼠肝损伤保护作用试验方案酵母提取物抗氧化能力的测定概述:自由基是指是机体代谢的正常产物,在体内有很强的氧化反应能力,可以在细胞代谢的过程中不断地产生。
大量的研究结果证明,自由基是衰老的决定因素。
在生命活动过程中产生的各种自由基中轻自由基的作用最强,进攻性也最强,几乎可以和所有的生物分子、有机物或无机物发生不同类型的化学反应。
超氧阴离子不仅自身具有毒性,而且可以通过其他反应产生更多的氧自由基,进一步对生物体产生损伤作用。
试验拟采用DPPH自由基体系、超氧阴离子(O2-)自由基体系、羟自由基(HO-)体系以及还原力测定体系评价酵母提取物的抗氧化活性。
试验方法1)DPPH 自由基清除试验DPPH储备液配制:精密称取19.7 mg DPPH溶解于25 mL甲醇中,再吸取2.5 mL溶液,以甲醇补足体积至25 mL,得到200 µM DPPH母液,暗处保存备用。
药品及对照品储备液配制:酵母提取物采用甲醇溶解,得到终浓度为1 mM的母液。
再将母液加甲醇稀释至一定浓度梯度,加3 mL于比色管中(对照组加入3 mL甲醇或水),再加入1 mL DPPH母液,剧烈震荡后,与暗处保存30 min,以甲醇做空白,测其517 nm吸光值。
以Vc作为阳性对照,各组反应平行测定三次,DPPH自由基清除率按照下面公式计算:×100DPPH自由基清除率(%)=A0−A1A0式中A0代表对照组的吸光值;A1代表加药组的吸光值。
2)超氧阴离子(O2-)自由基清除试验采用NADH-PMS方法评估酵母提取物对超氧阴离子自由基的清除能力。
试管中依次加入1 mL NBT (81µM)溶液,1 mL NADH (468µM )溶液,1 mL不同浓度的待测溶液,0.4 mL PMS (88µM)溶液,充分混匀,静置5 min,在560 nm处测其吸光值。
用水代替待测溶液做阴性对照,水代替PMS做本底组对照,Vc做阳性对照。
恩施硒茶-锌对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用实验论文
恩施硒茶\锌对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的实验研究【摘要】目的:观察恩施硒茶、锌对d-半乳糖到衰老小大鼠抗氧作用。
方法:将昆明种小鼠随机分为正常对照组(nc)、衰老缺锌组(azd)、衰老缺锌硒茶组(azdset)、、衰老补锌硒茶组(azsset),测定各组缺锌和补锌对小鼠血清、肝脏、脑组织锌含量的影响及硒茶、锌对血清中mda、t-aoc、sod及全血中gsh-px的影响。
结果:衰老模型组与正常对照组比较,血清、肝、脑组织mda含量均显著高于正常对照组(p<0.05)。
结论:恩施硒茶、锌具有明显的抗氧化作用。
【关键词】硒茶锌;d-半乳糖;抗氧化the anti- oxidative activities of selenium and zinc mice induced with d-galactosexu jian-an(medical school of hubei institute for nationalities,enshi 445000,china)【abstract】objective: to observe selenium tea, enshi and zinc on d-galactose to the antioxidant effect of aging small rats. methods: the mice were randomly divided into control group (nc), the aging of zinc deficiency group (azd), selenium deficiency of aging tea group (azdset),, old zinc selenium tea group (azsset), lack of determination in each group zincand zinc supplementation on serum, liver and brain of zinc and selenium content of tea and zinc in serum mda, t-aoc, sod and gsh-px in blood influence. results: the aging model group compared with the control group, serum, liver and brain mda levels were significantly higher than the control group (p <0.05). conclusion: tea enshi selenium, zinc has a significant antioxidant effect.【key words】selenium tea; zinc; d-galactose;anti-oxidative恩施硒茶富含微量元素硒,是抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)的重要成份,对体内自由基及过氧化脂质清除起重要作用。
抗氧化活性研究方法
抗氧化活性研究方法引言:氧化反应是指分子或原子失去电子,而还原反应是指分子或原子获得电子。
由于氧化反应产生的自由基具有高度活性,能够对细胞结构和功能造成损害,导致多种疾病的发生。
因此,研究抗氧化活性及其机制对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。
本文将介绍几种常用的抗氧化活性研究方法。
一、DPPH自由基清除能力测定法DPPH自由基清除能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
DPPH(2,2-二苯基-1-苦味肼)是一种紫色自由基,其颜色随着氧化程度的增加而减弱。
在该方法中,将待测样品与DPPH溶液混合,通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够清除DPPH自由基,使其浓度降低,从而导致吸光度的下降。
二、还原能力测定法还原能力测定法是通过测定待测样品对还原剂的还原能力来评估其抗氧化活性。
常用的还原剂包括铁离子、铜离子等。
在该方法中,将待测样品与还原剂混合,通过测定混合液的吸光度变化或还原剂浓度的变化来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够还原还原剂,使其浓度降低,从而导致吸光度的下降或还原剂浓度的降低。
三、氧化脂质抑制能力测定法氧化脂质抑制能力测定法是通过测定待测样品对氧化脂质的抑制能力来评估其抗氧化活性。
常用的氧化脂质包括脂肪酸、脂肪油等。
在该方法中,将待测样品与氧化脂质混合,通过测定混合液中脂质的氧化程度来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够有效抑制氧化脂质的形成。
四、超氧阴离子清除能力测定法超氧阴离子是一种常见的自由基,具有较高的活性。
超氧阴离子清除能力测定法是通过测定待测样品对超氧阴离子的清除能力来评估其抗氧化活性。
常用的超氧阴离子产生体系包括NBT(硝基蓝盐)-NADH(尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸)体系、XTT(二苯基四唑盐)体系等。
在该方法中,将待测样品与超氧阴离子产生体系混合,通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够有效清除超氧阴离子,使其浓度降低,从而导致吸光度的下降。
小鼠肾脏中抗氧化酶的表达
小鼠肾脏中抗氧化酶的表达肾脏是人体内一种非常重要的器官,其主要功能为排泄体内废物和调节体内电解质的平衡。
与此同时,肾脏也是人体内一个重要的抗氧化系统。
抗氧化剂是一种与自由基相互作用的物质,可以减少由于自由基过量引起的细胞损伤和氧化应激。
小鼠肾脏中的抗氧化酶也是这种抗氧化系统的一部分。
本文将简要介绍小鼠肾脏中的抗氧化酶的表达情况。
小鼠肾脏中的抗氧化酶种类小鼠肾脏中主要存在三种抗氧化酶,分别是超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)。
其中,SOD的主要作用是将细胞内的超氧自由基转化为较为稳定的分子氧和过氧化氢;CAT能够将细胞内的过氧化氢转化为氧和水;GPx主要作用是将细胞中的有机过氧化物转化为各种醇和水。
小鼠肾脏中的SOD表达情况小鼠肾脏中存在三种不同的SOD,分别是Cu/ZnSOD、MnSOD和EcSOD。
其中Cu/ZnSOD主要存在于细胞质和细胞外基质中;MnSOD存在于线粒体中;EcSOD则存在于细胞外基质中。
研究显示,小鼠肾脏中SOD的表达与细胞坏死和肾脏疾病有关。
具体来说,SOD的表达水平也与年龄、性别等因素有关。
小鼠肾脏中的CAT表达情况小鼠肾脏中CAT的表达量较低,但也具有一定的重要性。
一些研究显示小鼠肾脏CAT的表达与肾脏疾病、肾损伤等相关。
小鼠肾脏中的GPx表达情况小鼠肾脏中GPx的主要类型是GPx1、GPx3和GPx4。
研究显示小鼠肾脏之间的GPx的表达量差异较大,不同类型的GPx对于小鼠的生长发育、肾功能、细胞周期等都具有一定的影响。
小鼠肾脏中抗氧化酶对于肾脏疾病的影响抗氧化酶对于小鼠肾脏疾病的产生具有一定的影响。
研究表明,在肾脏疾病的过程中,氧化应激的程度会不断增高,导致小鼠肾脏中抗氧化酶的表达水平不断增加。
同时,抗氧化酶的表达也会对小鼠肾脏疾病的治疗产生影响。
结论综上所述,小鼠肾脏中抗氧化酶的种类较多,包括了SOD、CAT和GPx等多种类型。
抗氧化功能评价方法
附件1:抗氧化功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2 脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)1.1.3 蛋白质氧化产物:蛋白质羰基1.1.4 抗氧化酶:超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶1.1.5 抗氧化物质:还原性谷胱甘肽1.2 人体试食试验1.2.1 脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)1.2.2 超氧化物歧化酶1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶2 试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
2.2 脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8-表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定,动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。
2.3 氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
2.4 在进行人体试食试验时,应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验:脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。
3.2 人体试食试验:脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性,且对机体健康无影响,可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法Method for the Assessment of Antioxidative Function1 动物实验1.1 实验动物选用10月龄以上老龄大鼠或8月龄以上老龄小鼠,也可用氧化损伤模型鼠。
单一性别,小鼠每组10-15只,大鼠8-12只。
1.2 剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个溶剂对照组,以人体推荐量的10倍(小鼠)或5倍(大鼠)为其中的一个剂量组,另设两个剂量组,高剂量一般不超过30倍,必要时设阳性对照组、空白对照组。
皮肤内抗氧化实验报告
皮肤内抗氧化实验报告实验目的:本实验旨在研究不同抗氧化物对皮肤内抗氧化能力的影响,并评估其对皮肤健康的潜在益处。
实验材料:1. 10只实验动物(例如小鼠);2. 不同抗氧化物溶液,如维生素C、维生素E、多酚等;3. 生理盐水或其他溶剂,用于对照组;4. 测量抗氧化能力的相关试剂和仪器。
实验步骤:1. 将实验动物随机分为不同组别,每组尽量保持相似的体重和性别分布。
2. 对照组用生理盐水或其他溶剂按体重进行适量给药,其他组分别给予不同抗氧化物溶液。
3. 按照给药时间和剂量进行连续给药,确保每只实验动物获得相同剂量的抗氧化物。
4. 给药期间,定期观察实验动物的一般健康状况,记录体重变化,并注意可能的副作用。
5. 在给药结束后,使用相关的试剂和仪器,评估各组动物皮肤内抗氧化能力的变化。
可以使用抗氧化酶活性测定试剂盒、ROS(活性氧物种)产生测定试剂盒等进行检测。
6. 根据实验结果,进行统计学分析并得出结论。
实验结果:1. 记录各组实验动物的一般健康状况、体重变化和可能的副作用。
2. 测定各组动物皮肤内抗氧化能力的变化,并进行统计学分析。
实验结论:1. 根据实验结果,评估不同抗氧化物对皮肤内抗氧化能力的影响。
2. 探讨可能的机制和潜在的皮肤健康益处。
3. 提出进一步研究的建议,例如探索适宜剂量和给药时机,并进行长期观察等。
注意事项:1. 实验过程中应遵守实验室安全规范,确保操作安全。
2. 实验数据的收集和处理应严谨,保证实验结果的可靠性和准确性。
3. 与其他研究结果进行比较和讨论时应注意适当引用相关文献。
参考文献:(根据实际引用的文献进行添加)。
小鼠抗氧化实验实验报告
小鼠抗氧化实验实验报告小鼠抗氧化实验实验报告一、引言氧化应激是指机体内氧自由基与抗氧化系统之间的失衡状态,导致细胞和组织受到损害。
氧自由基的产生是正常代谢过程中产生的副产物,但当氧自由基的产生超过抗氧化系统的清除能力时,就会导致氧化应激。
氧化应激与许多疾病的发生和发展密切相关,因此,研究抗氧化物质对氧化应激的影响具有重要的意义。
本实验旨在通过小鼠抗氧化实验,评估不同抗氧化物质对小鼠氧化应激的影响,为抗氧化物质的应用提供实验依据。
二、材料与方法1. 实验动物:选用健康的雄性小鼠,年龄在8-10周之间。
2. 实验组设置:将小鼠随机分为对照组和实验组,每组10只。
3. 实验药物:选用三种常见的抗氧化物质A、B和C。
4. 实验过程:(1) 对照组:给予对照组小鼠正常饮食和生活环境。
(2) 实验组:给予实验组小鼠不同抗氧化物质的饮食,每天观察小鼠的行为和食量。
5. 实验指标:观察小鼠的体重变化、血液生化指标(如丙二醛、超氧化物歧化酶等)以及组织病理学变化。
三、结果与讨论1. 小鼠体重变化:实验组小鼠的体重增长速度较对照组小鼠明显较慢,尤其是接受抗氧化物质C的小鼠。
2. 血液生化指标:实验组小鼠的血液中丙二醛含量明显低于对照组小鼠,而超氧化物歧化酶活性明显增加。
3. 组织病理学变化:实验组小鼠的肝脏和肾脏组织中的氧化应激标志物含量较对照组小鼠明显降低,组织结构也更加完整。
通过对实验结果的分析,可以得出以下结论:抗氧化物质A、B和C对小鼠的氧化应激具有显著的保护作用。
抗氧化物质的应用能够降低小鼠体内氧自由基的含量,提高抗氧化酶活性,减少氧化应激对小鼠组织的损害。
其中,抗氧化物质C的效果最为明显。
本实验结果表明,抗氧化物质对氧化应激的调节具有潜在的临床应用价值。
进一步研究抗氧化物质的机制和剂量效应将有助于深入理解氧化应激的发生机制,并为抗氧化物质的临床应用提供更多的依据。
四、结论通过小鼠抗氧化实验,我们发现抗氧化物质A、B和C对小鼠氧化应激具有显著的保护作用。
细胞抗氧化实验报告
一、实验背景随着生活节奏的加快和环境污染的加剧,自由基损伤已成为导致细胞衰老和疾病的重要因素。
因此,研究细胞抗氧化机制对于揭示疾病发生机理和开发新的治疗策略具有重要意义。
本实验旨在探讨细胞抗氧化系统的功能及其调控机制。
二、实验材料与试剂1. 细胞:小鼠成纤维细胞(3T3-L1)2. 试剂:DPPH自由基清除剂、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、NADPH、FAD、黄嘌呤、牛血清白蛋白、无水乙醇、磷酸盐缓冲盐溶液(PBS)、Tris-HCl缓冲液、考马斯亮蓝G-250等。
三、实验方法1. 细胞培养:将小鼠成纤维细胞(3T3-L1)接种于含10%胎牛血清的DMEM培养基中,置于37℃、5%CO2培养箱中培养。
2. DPPH自由基清除实验:取对数生长期的细胞,用PBS洗涤后,加入不同浓度的GSH和DPPH自由基清除剂,于37℃孵育30min。
采用分光光度法测定DPPH自由基的吸光度值,计算清除率。
3. GSH含量测定:采用比色法测定细胞中的GSH含量。
4. SOD活性测定:采用黄嘌呤氧化酶法测定细胞中的SOD活性。
5. CAT活性测定:采用牛血清白蛋白法测定细胞中的CAT活性。
6. GSSG还原实验:取对数生长期的细胞,用PBS洗涤后,加入不同浓度的NADPH和GSSG,于37℃孵育30min。
采用分光光度法测定GSSG的吸光度值,计算还原率。
四、实验结果1. DPPH自由基清除实验:随着GSH浓度的增加,DPPH自由基清除率逐渐升高,表明GSH具有较好的自由基清除能力。
2. GSH含量测定:与空白组相比,抗氧化剂处理组的GSH含量显著升高。
3. SOD活性测定:与空白组相比,抗氧化剂处理组的SOD活性显著升高。
4. CAT活性测定:与空白组相比,抗氧化剂处理组的CAT活性显著升高。
5. GSSG还原实验:随着NADPH浓度的增加,GSSG的还原率逐渐升高,表明NADPH具有较好的抗氧化作用。
开心散对缺氧和力竭运动小鼠的抗氧化及抗疲劳作用研究
开心散对缺氧和力竭运动小鼠的抗氧化及抗疲劳作用研究曹寅;胡园;赵海霞;刘明;黄志雄;韦颖梅;刘屏【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2011(27)4【摘要】目的研究中药复方开心散的耐缺氧及抗疲劳作用.方法通过小鼠常压耐缺氧实验观察开心散的耐缺氧作用及对脑组织中SOD活力和MDA含量的影响.观察开心散在小鼠转轮疲劳模型上运动力竭小鼠被电击的次数和对肝糖原、肌糖原、肌乳酸含量和血清中SOD活力和MDA含量的影响.结果中、高剂量(250、500 mg/kg)组的开心散能明显延长小鼠存活时间,提高小鼠脑组织SOD活力,降低MDA含量.与溶剂对照组相比,开心散能明显降低转轮疲劳小鼠力竭运动电击次数,减慢肝糖原和肌糖原的分解及降低肌肉中乳酸浓度.结论开心散具有明显的耐缺氧作用,可通过增强机体抗氧化应激能力、调节能量储备和降低肌肉中乳酸浓度等方面发挥抗疲劳作用.【总页数】5页(P307-310,313)【作者】曹寅;胡园;赵海霞;刘明;黄志雄;韦颖梅;刘屏【作者单位】233003 安徽蚌埠,安徽蚌埠医学院药学系;100853 北京,解放军总医院药理研究室;300193 天津,天津中医药大学;100853 北京,解放军总医院药理研究室;300193 天津,天津中医药大学;233003 安徽蚌埠,安徽蚌埠医学院药学系;100853 北京,解放军总医院药理研究室【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.伪人参皂苷GQ对力竭运动小鼠抗疲劳作用研究 [J], 李平靖;张婷;王晓莹;王放2.杜仲叶提取物对力竭运动及恢复小鼠的抗疲劳作用 [J], 刘静3.玛咖对一次力竭运动小鼠抗疲劳作用及T-SOD、肝糖原的影响 [J], 邱良武;王路;王丽;柏春玲;保文莉;4.玛咖对一次力竭运动小鼠抗疲劳作用及T-SOD、肝糖原的影响 [J], 邱良武;王路;王丽;柏春玲;保文莉5.连翘叶黄酮对力竭运动小鼠的抗疲劳作用研究 [J], 刘静因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
虾青素油抗氧化动物实验研究
虾青素油抗氧化动物实验研究摘要:目的了解虾青素油对实验小鼠抗氧化功能的辅助增强作用。
方法动物实验设3个剂量组(12.5、25.0和75.0mg/kg·bw)和1个溶剂对照组,观察虾青素油对老龄小鼠抗氧化功能的影响。
结果在试验初始、中期、末期,3个剂量组的小鼠体重及增重与对照组差异均无统计学意义;试验末期各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量差异无统计学意义;与对照组比较,高剂量组的丙二醛(MDA)含量降低、超氧化物歧化酶(SOD)活力增加、谷胱甘肽(GSH)含量升高。
结论来源于雨生红球藻的虾青素油,对实验动物有抗氧化功能。
关键词:抗氧化实验;老龄小鼠;氧化应激;动物实验虾青素(astaxanthin )是唯一能通过血脑屏障的酮式类胡萝卜素,在其分子中,有很长的共轭双键、羟基和在共轭双键链末端的不饱和的酮基,其中羟基和酮基又构成 Ot-羟基酮,这些结构都具有比较活泼的电子效应,能向自由基提供电子,使得虾青素具有抗氧化作用[[1]]。
本实验研究来源于雨生红球藻的虾青素油的抗氧化作用。
1材料与方法1.1样品本研究所用虾青素油为暗红色油状液体,由雨生红球藻经CO2萃取制得,要求其虾青素含量≥5%。
1.2实验动物 SPF级ICR种雄性8~10月龄小鼠40只(湖南斯莱克景达实验动物有限公司),实验动物生产许可证号:SCXK(湘)2013-0004;实验期间小鼠饲养于22℃~26℃、湿度50%~56%的屏障环境中。
实验动物使用许可证号:SYXK(湘)2015-0012。
1.3仪器与试剂动物称量秤、离心机、水浴箱和紫外可见分光光度计等;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及蛋白质羰基试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.4方法试验初始、中期、末期均对小鼠进行体重监测。
试验初始,采尾尖血制成4%溶血液,用试剂盒测定其MDA水平。
根据MDA含量将40只小鼠平均分为1个对照组和低、中、高3个剂量组(12.5、25.0和75.0mg/kg·bw),保证各组试验前MDA值均衡。
急性砷中毒小鼠血清中NO、GSH、MDA及总抗氧化能力的实验研究
急性砷中毒小鼠血清中NO、GSH、MDA及总抗氧化能力的实验研究罗鹏;吴应宽;蒋宪瑶【期刊名称】《中华地方病学杂志》【年(卷),期】2004(023)004【摘要】目的探讨急性砷中毒小鼠血清中一氧化氮(NO)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及总抗氧化能力的变化,及其在砷中毒发病机制中的作用.方法通过急性动物实验,小鼠灌胃染毒,分为低、中、高剂量组及对照组,采用生化试剂盒测定各组小鼠血清中NO、GSH、MDA及总抗氧化能力.结果低剂量组小鼠血清中NO、GSH显著高于对照组(P<0.05),高剂量组NO、GSH则低于对照组(P<0.05);各剂量组NO、GSH和总抗氧化能力随染砷剂量的增加而降低,MDA水平则显著增高(P<0.01).结论三氧化二砷(As2O3)可引起小鼠血清中GSH、MDA和总抗氧化能力发生改变,进而影响NO合成与代谢,导致脂质过氧化的发生.提示脂质过氧化可能是砷中毒的机理之一.【总页数】2页(P325-326)【作者】罗鹏;吴应宽;蒋宪瑶【作者单位】550004,贵阳医学院预防医学系;550004,贵阳医学院预防医学系;550004,贵阳医学院预防医学系【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.甘遂与甘草配伍对小鼠肝脏组织中MDA、GSH-PX影响的实验研究 [J], 杨志军;邓毅;王昕;高慧琴2.火龙果对衰老模型小鼠血清和肝脏中GSH-Px、SOD活性和MDA含量的影响[J], 郑守欢;韦玉娜;黎瑜霜;魏海帆;李朝敢3.逍遥散对阿尔茨海默病模型小鼠血清及脑组织匀浆中SOD,GSH-PX活性及MDA水平的影响 [J], 王虎平;张莉云;邢喜平;吴红彦4.火麻仁油对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠血清NO、SOD、GSH-Px、MDA 的影响 [J], 曹俊岭;李祖伦;陈建武;李华利5.四君子汤对环磷酰胺造模小鼠血清中SOD GSH CAT和MDA水平的影响 [J], 吴军;赵凤鸣;王明艳;席蓓莉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
总抗氧化能力(总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒
总抗氧化能力总抗氧化能力((T -AOC )测定试剂盒说明书修改日期说明书修改日期::2015.11.06 Cat number :KGT009 Store at 4 for for one year ℃ For Research Use Only一、测定意义机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系,该防御体系有酶促与非酶促两个体系,许多酶是以微量元素为活性中心,例如:超氧化物岐化酶(SOD )、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX )、过氧化氢酶(CAT )、谷胱甘肽S-转移酶(GST )等,非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。
例如:VE 、胡萝卜素、VC 、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。
这个体系的防护氧化作用主要通过三条途径:(1)消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化:(2)分解过氧化物,阻断过氧化链;(3)除去起催化作用的金属离子。
防御体系各成分之间相互起到了协同作用,以及代偿作用与依赖作用。
二、测定原理机体中有许多抗氧化物质,能使+3Fe 还原成+2Fe,后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物,通过比色可测出其抗氧化能力的高低。
三、所需仪器设备721或722分光光度计、水浴箱。
四、试剂盒组份组份 KGT009(25 assays )保存条件 Buffer A 60.0 mL 4℃ 试剂 B 粉剂1支 RT 20×Buffer C 3.0 mL 4℃避光 Buffer C 稀释液30.0 mL 4℃ Buffer D 12.0 mL RT Buffer E 12.0 mLRT注意事项1. Buffer B :试剂B 用时每支加双蒸水至120mL ,RT 保存。
2.1×Buffer C :用前用Buffer C 稀释液按1︰19稀释至1×Buffer C (现配现用)。
五、操作(一、)、血清血清血清((浆)中总抗氧化能力的测定中总抗氧化能力的测定:(:(样本前处理见附录样本前处理见附录样本前处理见附录((一)中的第一点中的第一点)) 1、操作表操作表::对照管 测定管 Buffer A (mL ) 1.0 1.0 待测样本(mL ) a Buffer B (mL ) 2.0 2.0 1×Buffer C (mL )0.50.5漩涡混匀器充分混匀,37℃水浴30分钟Buffer D (mL ) 0.10.1 待测样本(mL )*a漩涡混匀器充分混匀,放置10分钟,蒸馏水调零,1cm 光径,520nm 处测各管吸光度。
镰形棘豆总黄酮对D_半乳糖致衰老小鼠的抗氧化实验研究_尉丽力
[作者简介]尉丽力( 1985—) ,女,药师,E - mail: leolili126@ 126. com
糖致衰老模型小鼠为对象,以动物血液、心脏及肝脏 中丙二醛( MDA) 、超氧化物歧化酶( SOD) 以及谷胱 甘肽( GSH) 含量为指标,考察镰形棘豆总黄酮提取 物的抗氧化作用。 1 材料 1. 1 实验动物: SPF 级 balb / c 小鼠 50 只,1 ~ 1. 5 月龄,雌雄各半,体重 18 ~ 20 g。兰州生物制品所提 供,合格证: SCXK( 甘) 2009 - 0004。 1. 2 试剂与仪器: 镰形棘豆总黄酮根据实验前期提 取工 艺 制 备 生 产 ( 总 黄 酮 含 量 20. 14% ,得 率 8. 23% ) ,SOD、MDA、GSH 试剂盒均由南京建成生 物工程研究所提供。D - 半乳糖( 上海中秦化学试 剂有限公司,批号: 20111220) ,双蒸水和生理盐水, 电热恒温水浴锅( 北京科伟永兴) ,HP8453 紫外分 光光度计( 美国惠普公司) ,BP210S 电子天平( Sar
[摘要] 目的: 研究镰形棘豆总黄酮提取物对 D - 半乳糖致亚急性衰老小鼠的抗氧化作用。方法: 腹腔注射 D - 半乳糖建立
衰老小鼠模型,镰形棘豆总黄酮水溶液 500、200、100 mg / kg 分别连续灌胃 70 d 后,测定各组小鼠血浆、心脏和肝脏中的超氧化
物歧化酶( SOD) 、丙二醛( MDA) 和谷胱甘肽( GSH) 的含量。结果: 与模型组比较,低剂量能显著升高血浆和肝脏中 SOD( P <
抗氧化能力的测定(精选4篇)
抗氧化能力的测定(精选4篇)以下是网友分享的关于抗氧化能力的测定的资料4篇,希望对您有所帮助,就爱阅读感谢您的支持。
DPPH抗氧化能力测定篇一DPPH.法测定绿原酸清除自由基能力2.1 待测液的制备将绿原酸(纯度56%)、维生素C和没食子酸分别配制成体积分数为0.1mg/mL的无水乙醇溶液。
2.1.1 绿原酸母液的配制称取9.0 mg绿原酸,定容到50ml,即可得到绿原酸的母液0.1mg/mL。
然后,再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml;mg/ml。
2.1.2 Vc母液的配制称取mg VC,定容到100ml,即可得到VC的母液。
然后,再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。
2.1.3 没食子酸母液的配制称取mg 没食子酸,定容到100ml,即可得到没食子酸的母液。
然后,再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。
2.1.4 DPPH母液的配制称取mg DPPH,用无水乙醇定容到100ml,即可得到DPPH的母液。
然后,再将所配制的母液按照要求稀释成至一定浓度的溶液。
CDPPH= mg/ml。
(建议用0.025mg/mL)2.2 DPPH.溶液的可见光谱以无水乙醇为对照,在分光光度计上对DPPH.溶液进行在440~600nm下扫描。
Amax= nm2.3 抗氧化活性测定DPPH.是一种稳定的自由基,它的乙醇溶液呈紫色,在可见光区最大吸收峰为nm。
当DPPH.溶液中加入自由基清除剂时,溶液颜色变浅,517nm处的吸光度变小,而吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈线性关系。
因此,可用来检测自由基的清除情况,从而评价某物质的抗氧化能力,其能力用清除率(Scavenging Rate,SR)来表示,清除率越大,抗氧化能力越强具体实验步骤及方法:精确吸取的DPPH.溶液2mL与2ml无水乙醇混合均匀后,以相对应的溶剂(4mL无水乙醇)为对照,用分光光度计测定上述溶液在nm处的吸光度值(A0)。
A015 总抗氧化能力测试盒说明书
总抗氧化能力 (单位 / 毫克蛋白)
=
0.214 − 0.050 0.01
÷
30 ×
4.05 0.15
÷ 10.5
= 0.164 × 8.571 = 1.41单位 / 毫克蛋白
○ 血清中 T-AOC 单位定义及计算举例:
公司地址:南京市玄武区中央路 258-27 号新立基大厦 1106 室 邮政编码:210009
ODC —— 对照管吸光度值;
响酶类的活力。
N —— 反应体系稀释倍数(反应液总体积/取样量)。
6、测定总抗氧化能力、总氨基酸、维生素 C、维生素 E 等的试管
n —— 样本测试前稀释倍数。
清洗时注意:要用热水加洗涤净煮开后,剩热清洗并用自来水冲十 余次,单蒸水冲一遍,烤干或凉干。否则会影响其它酶类测试结果。
100 管/50 样 50 管/25 样
R1 无色液体
2~8℃保存 60ml×2 瓶 60ml×1 瓶
R2 白色晶体
2~8℃保存 粉剂×2 支 粉剂×1 支
试剂二配制: 每支粉剂加蒸馏水 120ml 充分溶解(粉剂较难溶解, 如需加快溶解,可以在 37℃水浴溶解)
R3 黄色贮备液 2~8℃避光保存 5ml×1 瓶
准确称取组织重量,按重量体积比加 9 倍生理盐水制成 10% 的匀浆,2000~2500 转/分离心 10 分钟,取上清待测。同时用 双缩脲试剂测定 10%组织匀浆蛋白。 3、培养细胞的前处理: 培养细胞悬液的制备:
将培养细胞消化,离心,弃上清,留下层细胞,用生理盐 水或匀浆介质制备成 107/cm3的悬液,即 107/ml的悬液,再进行 破碎。破碎细胞的方法有三种:①、用匀浆器匀浆。(可以用 匀浆机,也可以用玻璃匀浆器手工匀浆。)②、用进口的超声 粉碎器粉碎。③、反复冻溶 3 次。(第③种方法有时会影响酶 活力。)制备好的细胞悬液不需要离心,在测试加样前要摇匀 后取样。同时用考马斯亮兰试剂测定组织蛋白。 4、培养细胞的上清及部分体液均可以按照血清样本处理,一般直 接加样。 5、全血样本前处理:一般用双蒸水 10 倍稀释,具体稀释倍数及取 样量要做预试。
抗氧化能力检测方法如何选择
抗氧化能力检测方法如何选择1.避免氧自由基法避免氧自由基法是一种常用的营养物质抗氧化能力检测方法,通过测定物质对人工合成的活性氧自由基的清除能力来反映其抗氧化能力。
常用的活性氧自由基包括DPPH自由基和ABTS自由基。
该方法简单易行,适用于大批量样品处理。
2.过氧化氢降解法过氧化氢降解法是一种定量测定物质抗氧化能力的方法,通过测定物质对过氧化氢的消耗程度来评估其抗氧化能力。
该方法操作简便,适用于多种样品类型。
3.金属离子螯合能力法金属离子螯合能力法是一种常用的抗氧化能力检测方法,通过测定物质对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化性能。
常用的金属离子包括铁离子、铜离子等。
该方法适用于多种样品类型,尤其适用于检测多酚类化合物的抗氧化能力。
4.体外细胞模型法体外细胞模型法是一种模拟人体细胞环境,通过测定物质对细胞的氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的细胞模型包括人类肝细胞HepG2、人类白血病细胞HL-60等。
该方法较为贴近真实的生理环境,但操作较为繁琐。
5.动物模型法动物模型法是一种模拟人体内环境,通过测定物质对动物体内氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的动物模型包括小鼠、大鼠等。
该方法能够更好地反映物质的抗氧化能力,在药物研发领域较为常见,但需注意动物伦理和实验条件等问题。
在选择抗氧化能力检测方法时,需要综合考虑实验目的、被测物的特性、实验条件、预算等因素。
有时需要结合多种方法来评估物质的抗氧化能力,增加研究可靠性。
同时,还需注意选择已经被广泛验证和接受的方法,以确保实验结果的准确性和可重复性。
抗氧化功能评价方法
附件1:抗氧化功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目动物实验体重脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)蛋白质氧化产物:蛋白质羰基抗氧化酶:超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶抗氧化物质:还原性谷胱甘肽人体试食试验脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶2 试验原则动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8-表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定,动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。
氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
在进行人体试食试验时,应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定动物实验:脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。
人体试食试验:脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性,且对机体健康无影响,可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法Method for the Assessment of Antioxidative Function1 动物实验实验动物选用10月龄以上老龄大鼠或8月龄以上老龄小鼠,也可用氧化损伤模型鼠。
单一性别,小鼠每组10-15只,大鼠8-12只。
剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个溶剂对照组,以人体推荐量的10倍(小鼠)或5倍(大鼠)为其中的一个剂量组,另设两个剂量组,高剂量一般不超过30倍,必要时设阳性对照组、空白对照组。
受试样品给予时间30天,必要时可延长至45天。
实验方法老龄动物选用10月龄以上大鼠或8月龄以上小鼠,按血中MDA水平分组,随机分为1个溶剂对照组和3个受试样品剂量组。
自首乌对实验性小鼠抗氧化及耐缺氧作用的研究
k ) ,连续7 ,末 次灌 胃后4 ri ,将小 鼠放入耗 氧 g d 0 n a
量测定装置 ,记录耗氧量及存活时间。
3 统计学处 理
实验数据 以 “ X±S 表示, ” 采用S S 1. P S 1 统计学 5 软件进行方差分析 。
最佳条件为温度7  ̄ 0 C,乙醇体积分数7 5% ,提取 时间 1 8h ,考虑到 主要的抗氧化 成分 自首乌c 甾苷 的 . 7
将各组小 鼠摘 眼球采血 ,3 0 mi离心 1mi , 0 0r n / 5 n
测定血 清S D活性 、MDA含量。S D活性及MDA含 O O
量均按照试剂盒说 明书, 用分光光度法测定。
2 4 小鼠耐缺氧实验 .
为相应浓度 。超氧化物歧 化酶( 0D 测试盒 、丙二醛 s )
基金项目:泰山医学院20 年青年基金资助项 目。 08
泰山自首乌(a i C n nh B n e ,又名泰 山何 R d y aci u gi x ) 首乌 ,为萝摩科植物 戟叶牛皮消的干燥块根 ,有补肝
益肾、延年益寿的作用 ,是待开发的功能食 品基料。
( A  ̄ 试盒均购于南京建成生 物工程研究所。 MD ) O
S5 紫外可见分 光光度计 ,上 海棱 光技术有 限公 一4
司;R 一2 旋转蒸发仪 ,上海亚荣生化仪器厂 ;L 5 E5A D。 2 台式离心机 ,北京 医用离心机厂 ;小 鼠耐缺氧测定 A 装置 ,泰山医学 院药学院制备。
现代 化学研 究表 明,自首乌 中含有磷脂类 、C 甾 体酯苷 、黄酮类化合 物、多糖类及微量元 素等多种成
分 ,具有明显 的抗肿瘤 、调 节免疫和抗衰老等 多种药
理作用 。白首乌c 甾营 能够清除超氧 阴离子 自由基和
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小鼠总抗氧化能力的测定
刘小美宋菊敏
(2006-10-24)
一、原理
机体中有许多抗氧化物质,能使Fe3+还原成Fe2+,后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物,通过比色可测出其抗氧化能力的高低。
二、目的
1.掌握总抗氧化能力的测定方法。
2.观察血虚小鼠模型总抗氧化能力的变化。
3.观察中药对血虚小鼠模型总抗氧化能力的影响。
三、材料和方法
1.试剂:总抗氧化能力测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)
2.材料:EF管(1.5ml)120支,一次性试管(10ml)60支,移液器(P20ul、P100ul 、P1000ul)各2把及配套枪头各200支,玻璃比色皿(3ml,1cm光径)4只,温浴箱,分光光度计,漩涡混匀器1台,普通离心机大管、小管各1台,试剂瓶(125ml)1个,烧杯(150ml)2个,吸管(10ml)2支,吸球1支,量筒(200ml)1个,标签纸2张。
3.测定方法
(1)样本处理:取全血3500转/分离心15分钟得血清待测。
(2)试剂盒组成及配制:(50T)
试剂一:液体60ml×2瓶,40C保存。
试剂二:粉剂×2支,用时每支加双蒸水至120ml,室温保存。
试剂三:黄色贮备液10ml×1瓶,避光冷藏保存。
贮备液得稀释液60ml×1瓶。
试剂三应用液的配制:临用前取贮备液以稀释液稀释,比例为1:19。
需多少配制多少。
试剂四:溶液24ml×1瓶
试剂五:溶液24ml×1瓶,室温保存(天冷时会凝固,每次测试前适当加温以加速溶解,直至透明方可使用)。
——测组织中总抗氧化能力时用到,测血清时不用。
处测各管吸光度。
(370C时,每分钟每毫升血清使反应体系的吸光度(OD)值每增加0.01时,为一个总抗氧化能力单位)。
4)计算:
总抗氧化能力(单位/毫升血清)=(测定管OD-对照管OD)÷0.01÷30×19
四、注意事项
1.室温放置10分钟后必须立即测定吸光度,否则吸光度会增加。
2.实验试剂用量较少,所以加量一定要仔细、准确。
3.每次加样后都必须在漩涡器上充分混匀。
4.难吸难打的试剂必须做到慢吸慢打。
五.思考题
1.小鼠血虚模型总抗氧化能力会出现什么样的变化?为什么会出现这样的变化?
2.怎样用本实验的结果解释模型动物的某些主要症状?
1。