疫苗及其制备技术

溶液的配置等准备工作
地鼠取肾
纯化疫苗病毒液的收集
沙鼠肾细胞中毒SOP
地鼠细胞的分配
白色微浑浊液体，久放置可形成可摇散 的沉淀
出血热疫苗工业的发展历程
• 第一代抗体疫苗源于动物多价抗血清 • 第二代抗体药物是利用杂交瘤技术制备的单克隆
抗体及其衍生物 • 目前是新型基因工程抗体的不断出现
出血热疫苗主要有：
Ⅰ型疫苗 Ⅱ型疫苗 Ⅰ型纯化疫苗
Ⅰ型疫苗合成途径
本疫苗用Ⅰ型（野鼠型）出血 热Z10毒株，感染沙鼠肾原代细胞， 收获病毒，经β-丙内酯灭活制成 疫苗，内含氧氧化铝为佐剂。
出血热（HFRS）病毒
• 此病毒首先由韩国李镐汪等在1978年从该国疫区 捕获的黑线姬鼠肺组织中分离出，并根据分离地 点称为汉滩病毒。
• 1980年世界卫生组织将其统一命名为肾综合征出 血热。
• 现国际上通称为HFRS病毒。 • 根据此病毒的形态学和分子生物学特征。已将其
归入尼亚病毒科，另立为一个新属，命名为汉坦 病毒属。
低血压期：一般在发热4至6日，体温开始下降时或退热后不久， 患者出现低血压，重者发生休克。
少尿期：少尿期与低血压期常无明显界限。
多尿期：肾脏组织损害逐渐修复，但由于肾小管重吸收功能尚 未完全恢复，以致尿量显着增多。
恢复期：随着肾功能的逐渐恢复，尿量减至3000毫升以下时， 即进入恢复期。尿液稀释与浓缩功能逐渐恢复，精神及食欲 逐渐好转，体力逐渐恢复。
• 原理是：当机体通过注射或口服等途径接种疫 苗后，疫苗中的抗原分子就会发挥免疫原性作 用，刺激机体免疫系统产生高效价特异性的免 疫保护物质，当机体再次接触到相同病原菌抗 原时，机体的免疫系统便会依循其免疫记忆， 迅速制造出更多的保护物质来阻断病原菌的入 侵，从而使机体获得针对病原体特异性的免疫 力，使其免受侵害而得到保护。
染胎儿。
•
(5)虫媒传播：有研究表明寄生于鼠类身上的革螨
等具有传播作用。
世界上人类病毒性出血热共有13种， 根据该病肾脏有无损害，分为有肾损 及无肾损两大类。在中国主要为肾综 合征出血热（HFRS）。
1982年世界卫生组织统一定名为肾 综合征出血热。现中国仍沿用流行性 出血热的病名。
出血热的早期症状表现为：
•
肾损伤：出现蛋白尿、管型尿和血尿，肾功能下降。
•
验血异常：白细胞总数升高，淋巴细胞增多或出现异常
淋巴细胞，血小板减少明显。
•
临床表现
出血热的五个阶段
发热期：大多突然畏寒发热，体温在1至2日内可达39至40摄 氏度，热型以弛张及稽留为多，一般持续3至7日。出现全 身中毒症状，高度乏力，出现头痛、剧烈腰痛、眼眶痛，称 为“三痛”。
出血热疫苗 Hemorrhagic Fever
药学系：王欢 王芳 张雨祯
目录
• 出血热 • 出血热病毒 • 出血热疫苗 • 出血热疫苗制备技术
出血热是什么？
• 出血热（Hemorrhagic Fever）全称是流行性 出血热，国际上统称为肾综合征出血热，是 一种由病毒所致的经鼠传播的急性病毒性传 染病，发热、出血倾向及肾脏损害为主要临 床特征。
传播途径
•
(1)呼吸道传播：鼠类携带病毒的排泄物如尿、粪、
唾液等污染尘埃后形成的气溶胶，能通过呼吸道而感染
人体。
•
(2)消化道传播：进食被鼠类携带病毒的排泄物所
污染的食物，可经口腔或胃肠粘膜而感染。
•
(3)接触传播：被鼠咬伤或破伤Biblioteka Baidu接触病毒的鼠类
血液和排泄物亦可导致感染。
•
(4)母婴传播：孕妇感染本病后，病毒可经胎盘感
• 1981年我国学者宋 干等在黑线姬鼠中 分离到沙坦病毒 （A9和A16柱）
病毒的分类
病 毒 形 态
出血热疫苗的作用
• 流行性出血热疫苗是预防流行性出 血热的主要手段之一，当前国内外 研制成功的疫苗主要有两类，即细 胞培养灭火疫苗和纯化鼠脑疫苗通 过注射出血热疫苗能够防止疫情蔓 延。
疫苗作用原理
本疫苗用于预防出血热（Ⅰ型） 感染。
Ⅱ型疫苗合成途径
• 本疫苗系用Ⅱ型（家鼠型）出血热 病毒于原代培养后，收获病毒，经 甲醛灭活制成。内含氢氧化铝佐剂。 为橘红色微混液体。
• 本疫苗主要用于预防出血热（Ⅱ型） 病毒感染。
Ⅰ型纯化疫苗合成途径
• 本疫苗系用Ⅰ型（野鼠型 ）病毒感染 小鼠，取脑组织提取病毒囊膜糖蛋白 （G1P，G2P），核蛋白（NP）等有效 成分，经灭活，加佐剂制成亚单位组 分疫苗。
•
发热：38至40度，持续3至7天，一周以上也不少见。
•
胃肠道症状：食欲不振、恶心、呕吐、腹痛，少数有腹
泻。
•
三痛：头痛、腰痛、眼眶痛。
•
三红：颜面、颈部及上胸部皮肤充血潮红。眼结膜、眼
睑水肿和面部浮肿。
•
出血：口内软腭、咽部及眼结膜出血，腋下、胸背部皮
下出血，形如搔抓样。严重出血是本病最主要的死因。
• 本疫苗用于预防出血热(Ⅰ型)病毒感 染。
制备流行性出血热疫苗的方法
• 一种采用长爪沙鼠的肾细胞作病毒培养基质 制备流行性出血热疫苗的方法，适用于汉坦 （Ｈａｎｔａ）病毒属中任何一种型别的病 毒株。培养后加入β－丙内酯和硫柳汞对病 毒灭活，离心去除细胞碎片，再加入氢氧化 铝和人血白蛋白，成为单价流行性出血热疫 苗。将两种或者三种不同型别单价疫苗半成 品等量混合，配制分装，成为双价或者多价 流行性出血热疫苗。