斑马鱼学习小结专题培训课件

l斑马鱼繁殖用水要求：
pH6.5-7.5，硬度6-8，水温25-26℃。
l配对：
按雌雄比例1:1或1:2鱼置于交配缸内，保持环境安静； 使其自然产卵和受精。放养密度为1对/1.5L。
l受精卵收集：
一般头天晚上放入，第二天上午可收集受精卵，种鱼捞出另养。 斑马鱼的繁殖周期约7天，一年可连续繁殖6-7次。
模式生物生理（包括生理、病理等）特性相对稳定。
斑马鱼作为模式生物的特点：
l发育迅速、性成熟快。胚胎24h发育成形，3个月性成熟。 l便于观察和操作。体外受精、体外发育、胚胎透明。 l产卵量大。每尾雌斑马鱼一次产卵200枚以上，每周可产1次。 l体型小，养殖成本低。体长约3cm，对水质要求不高，可高密度养殖。
Ø斑马鱼简介。 Ø斑马鱼品系及鉴定。 Ø斑马鱼的养殖。 Ø斑马鱼的繁殖。 Ø斑马鱼在生态毒理学中的应用。
Ø斑马鱼简介。 Ø斑马鱼品系及鉴定。 Ø斑马鱼的养殖。 Ø斑马鱼的繁殖。 Ø斑马鱼在生态毒理学中的应用。
生物学特征
l斑马鱼（Barchydanio rerio）为淡水鲤科鱼类，原产于南亚， 是一种常见热带鱼。
l体色：银或金色，覆有蓝或紫色的横纹，背部呈浅橄榄黄色。 l食性：杂食性，可摄食人工饲料和各种天然活饵料如水蚤。
斑马鱼的发展历程
l 斑马鱼是重要的模式生物。广泛应用于生命科学、毒理学、环 境和农业科学等领域。 l 1972年，美国俄勒冈大学George Streisinger首先利用斑马鱼 研究了脊椎动物发育生物学和建立模式动物。
斑马鱼养殖系统
Ø斑马鱼简介。 Ø斑马鱼品系及鉴定。 Ø斑马鱼的养殖。 Ø斑马鱼的繁育。 Ø斑马鱼在生态毒理学中的应用。
斑马鱼繁殖过程
l斑马鱼的雌雄辨别：
雄鱼体修长，鳍大，体色偏黄，臀鳍棕黄色，条纹显著； 雌鱼体较肥大，体色偏蓝，臀鳍淡黄色，怀卵期鱼腹膨大明显。
l斑马鱼的挑选：
鱼龄6-12月，体长>3cm，健康、活力强，性腺发育IV期以上；
Ø 转基因型品系常用鉴定方法-荧光鉴定
Ø 突变型品系常用鉴定方法-表型鉴定、基因型鉴定
Ø斑马鱼简介。 Ø斑马鱼品系及鉴定。 Ø斑马鱼的养殖。 Ø斑马鱼的繁殖。 Ø斑马鱼在生态毒理学中的应用。
斑马鱼养殖技术
Ø光照周期/暗周期：14hrs/10hrs Ø温度：28.5℃ ØpH：7.2-7.6 Ø溶解氧：≥6.0mg/L Ø电导率：500-1500us Ø盐度：0.5-1g/l ØCL2：0mg/l ØNH3/NH4+：0mg/l ØNO2-：0mg/l
Ø斑马鱼简介。 Ø斑马鱼品系及鉴定。 Ø斑马鱼的养殖。 Ø斑马鱼的繁殖。 Ø斑马鱼在生态毒理学中的应用。
斑马鱼品系
l 全球已鉴定和建立1万种以上斑马鱼品系。 l 所有品系可归为三类：野生型、转基因型、突变型。 l 转基因型和突变型品系为野生型品系经人工处理后得到。
Ø 野生型品系：
从自然界获得的，在实验室内经过多代培育后获得的遗传背景清晰的斑 马鱼品系。
Ø 现有约29种野生型品系。 Ø 常用野生型品系：AB、Tu、TL和WIK。
品系鉴定
l 荧光鉴定：主要用于转基因品系的鉴定。 l 表型鉴定：
主要用于突变品系的鉴定。 l 基因型鉴定：
Ø 野生型品系鉴定方法-微卫星DNA 微卫星DNA(简单重复序列)：因重复单元数目及重复程度差异 造成的同一基因座位在特定物种的群体中能有很多等位基因， 呈现出较高的多态性。
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斑马鱼各阶段饵料
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斑马鱼急性毒性试验
通过静态法、半静态法或流水式试验方法，将野生型成年斑马鱼 暴露在含有不同浓度化学物质的水体中96h，记录斑马鱼中毒症 状和死亡率，并求出24h、48h、72h和96h的半致死浓度(LC50)。
静态法 试验期间不更换试验药液。
半静态法
试验期间每隔一定时间更换一次药液，以保持试验药液的 浓度不低于初始浓度的80%。
流水式 试验期间药液连续更新。
试验步骤
Ø 斑马鱼急性毒性试验的实验设计 Ø 斑马鱼急性毒性试验结果的记录 Ø 急性毒性试验结果的分析 Ø 农药生态安全性评估
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