沙门菌属

微生物检验
４、分离培养与鉴定： （２）鉴定：
1)生化鉴定: 菌落特点：沙门菌菌落EMB上无色或不透明琥珀 色;MAC上较小、无色透明;SS上不透明或透明、 无色或中央为黑色的菌落.
微生物检验
４、分离培养与鉴定： （２）鉴定：
生化反应 ：常用三（双）糖铁琼脂(TSIA、KIA)来初步鉴
定.本菌在TSIA上典型生化模式为:碱/酸,葡萄糖产气,硫 化氢阳性 (K/A + +).少数菌株为乳糖发酵型,呈 A/A + - ,这些菌株硫化氢往往阴性.
生物学性状
G-直杆菌，较细长 ， 直杆菌， 大都周身鞭毛 无芽孢， 周身鞭毛， 大都周身鞭毛，无芽孢， 无荚膜
培养特性
兼性厌氧,营养要求不高最适 生长温度35℃～37℃,最适 pH为6.8～7.8. 在普通营养琼脂上菌落为圆 形光滑、湿润、半透明、边 缘整齐,有时出现粗糙型菌落. 在肠道选择培养基上菌落小 至中等,透明或半透明,乳糖 不发酵与志贺菌相似,有些产 生硫化氢菌株,在SS琼脂上 形成中心黑色菌落.
抗原构造与分类
O抗原：脂多糖，群特异性 抗原：脂多糖， 1，2，3……67(其中有9种被删除) ……67(其中有9种被删除) O抗原刺激机体产生IgM型抗体 抗原刺激机体产生IgM型 H抗原：蛋白质，分第1、2相 抗原：蛋白质，分第1 特异相）： ）：a, 第1相（特异相）：a, b, c …… 非特异性）： ）：1 第2项( 非特异性）：1，2，3 …… H抗原刺激机体产生IgG型抗体 抗原刺激机体产生IgG型 Vi抗原：多糖，与毒力（Virulence）有关。存在于菌 抗原：多糖， 毒力（ 抗原 ）有关。 体表面，可阻止O抗原与相应抗体反应。测定Vi抗体有 体表面，可阻止O抗原与相应抗体反应。测定 抗体有 助于检出伤寒带菌者. 助于检出伤寒带菌者 M抗原：粘液抗原，不用于血清学分型 抗原：粘液抗原， 5抗原：表面抗原
第四阶段
进入恢复阶段 进入 恢复阶段 。 病愈后部分患者可 恢复阶段。 自粪便或尿液继续排菌3 周至3 个月， 自粪便或尿液继续排菌 3 周至 3 个月 ， 甚至1 恢复期带菌者。 甚至 1 年 ， 称 恢复期带菌者 。 约有 3%的伤寒患者成为慢性带菌者。 的伤寒患者成为慢性带菌者。
肠炎型食物中毒
所致疾病
1、肠热症 2、急性肠炎（食物中毒） 3、败血症 4、无症状带菌者
肠热症（伤寒和副伤寒） 肠热症（伤寒和副伤寒）
传染源：病人和带菌者、水源 传播途径： 粪—口 典型病程：分四个阶段
第一阶段
为临床上的潜伏期 潜伏期阶段 潜伏期 伤寒杆菌经口到小肠，穿过粘膜上皮进 入下层的淋巴小结繁殖，被巨噬细胞吞 噬后在细胞内繁殖。部分细菌通过淋巴 液到达肠系膜淋巴结大量繁殖。细菌经 胸导管入血。
微生物检验
2、标本采集： （1）肠热症根据病程不同采取不同的标本 根据病程不同采取不同的标本， 根据病程不同采取不同的标本 第1周取血液，第1-3周取骨髓液，第2周 起取粪便和尿液。 （2）胃肠炎型取粪便、呕吐物和可疑食物。 （3）败血症取血液
微生物检验
3、标本直接检查： （1）显微镜检查：G-杆菌
第二阶段
细菌随淋巴液经胸导管进入血液（第一 第一 次菌血症），并扩散到肝、脾、肾、胆、 次菌血症 骨髓等到部位。 此阶段为临床上的发病第一周 第一周，出现发 第一周 热、不适、全身疼痛等前驱期症状 前驱期症状。 前驱期症状
第一周取什么样 品为标本？ 品为标本？
第三阶段
在肝、 在肝、脾、肾、胆、骨髓等部位繁殖。由巨噬 骨髓等部位繁殖。 细胞带入血液（第二次菌血症） 细胞带入血液（第二次菌血症），胆内细菌排 入小肠，部份随粪便排出， 入小肠，部份随粪便排出，部分进入肠内淋巴 组织而激发变态反应，可造成肠出血及肠穿孔。 组织而激发变态反应，可造成肠出血及肠穿孔。 此阶段为临床上的第 此阶段为临床上的第2、3周，出现持续高热、 出现持续高热、 相对缓脉、肝脾肿大、白细胞下降、 相对缓脉、肝脾肿大、白细胞下降、皮肤玫瑰 全身中毒症状显著。 疹、全身中毒症状显著。
沙门菌基本生化反应特征
TSIA(三糖铁) 产碱/产酸或产碱/产酸产气,H2S阳性、 CIT(枸橼酸盐)阳或阴性、URE (脲酶)阴性、IND(吲哚) 阴性、MOT(动力)阳性、VP阴性、ORN(鸟氨酸)阳性.凡临 床分离菌乳糖、吲哚阳性,或脲酶阳性者,均不考虑为沙 门菌.
微生物学检查
伤寒沙门菌在KIA 培养基上的生长情况
抵抗力
不强，胆盐、 不强，胆盐、煌绿等对本属细菌的抑制作用 较其他肠道杆菌为小，可用来制备肠道杆菌选择 较其他肠道杆菌为小，可用来制备肠道杆菌选择 培养基，利于分离粪便中的沙门氏菌。 培养基，利于分离粪便中的沙门氏菌。
变 异
1、H-O变异 2、S-R变异 3、V-W变异 4、位相变异
微生物检验
检验程序
概
述
是一大群 一大群寄生于人类和动物肠道中，生 一大群 生 化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。 革兰氏阴性杆菌 化反应和抗原构造相似 革兰氏阴性杆菌 目前至少有67种O抗原2200种以上血清型。 其中对人致病的有伤寒沙门氏菌、甲、乙、 伤寒沙门氏菌、 伤寒沙门氏菌 丙副伤寒沙门氏菌，引起肠热症、败血症 丙副伤寒沙门氏菌 和胃肠炎。还有些细菌主要感染动物，也 可传染给人（人兽共患），引起食物中毒 或败血症。如鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、 鸭沙门菌、猪霍乱沙门菌等，以鼠伤寒沙 鼠伤寒沙 门菌最常见。 门菌最常见
微生物检验
血清学分型: 血清学分型 多数实验室先用A-F多价O抗血清对沙门菌分离株进行 血清学凝集,95％以上沙门菌临床分离株都属A-F群. 多价抗血清凝集后再分别用代表每个血清群的O单价因 子血清(A群为O2,B群为O4,C群为O6,D群为O9,E群为 O3,F群为O11)定群. O分群之后再用H因子血清检查第一相和第二相H抗原 综合O、H及vi因子血清结果,确定沙门菌血清型 有5种重要的临床分离株:甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒 沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌和伤寒沙 门菌分别属于A、B、B、C1和D血清群.
掌握：沙门氏菌的形态、培养特性、 掌握：沙门氏菌的形态、培养特性、主 要生化反应、微生物学诊断。 要生化反应、微生物学诊断。 了解：沙门氏菌属的抗原结构和分类； 了解：沙门氏菌属的抗原结构和分类； 掌握对人致病的沙门氏菌的种类、 掌握对人致病的沙门氏菌的种类、致病 性和免疫性。肠热症的血清学诊断—— 性和免疫性。肠热症的血清学诊断—— 肥大试验的原理、结果分析与判断。 肥大试验的原理、结果分析与判断。
（2）抗原检测：快速诊断，常用胶乳凝集试验。
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４、分离培养与鉴定 分离培养与鉴定： 分离培养与鉴定 （1）分离培养 ＭＡＣ、ＥＭＢ、 SS平 分离培养： 分离培养 板,初次分离菌量较少时加ＧＮ肉汤。
1) 血液和骨髓液： 血液5ml或骨髓液0.5ml加入50ml胆汁葡 血液和骨髓液： 萄糖肉汤或胰酶消化大豆蛋白肉汤中, 孵育, 移种至血平板 和SS培养基中. 2) 粪便或肛拭 ： 床边接种,或用卡-布运送培养基. 3) 尿液和体液 ：离心沉淀后接种于增菌液、血琼脂和肠 道选择培养基. 4) 食物等固体物质 ：磨碎后加10倍无菌生理盐水混匀,接种 于增菌液和肠道选择培养基.
临床表现：发热、恶心、呕吐、腹痛、 腹泻。为摄入污染的食物Biblioteka Baidu细菌在肠内 繁殖所至。 引起细菌：鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙 门菌、肠炎沙门菌。
败血症
引起细菌：猪霍乱沙门菌、丙型副伤寒 沙门菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门菌。 血培养阳性率高
免疫性
肠热症病后产生牢固免疫，细胞免疫为 主。 体液免疫：SIgA，而IgG、IgM对胞内寄 生菌无免疫作用。
致病物质
1、侵袭力 侵袭力：①若干个染色体基因位点与入侵有 侵袭力 关 ②Vi 抗原对O抗原的保护作用， ③LPS具有较 长的 O抗原侧链，能阻止外膜与补体接触，同时 能直接抑制C3旁路途径。 C3 2、内毒素：较强的内毒素，可以起一系列的病理 内毒素：较强的内毒素， 内毒素 生理变化。 生理变化。 3、外毒素 外毒素：类似于ETEC产生的肠毒素ST、志贺 外毒素 毒素，并有部分抗原交叉。