HE的染色基本原理

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HE染色——精选推荐

HE染⾊HE染⾊实验步骤及常见问题解析⼀、HE染⾊HE染⾊全名为苏⽊精(hematoxylin)和伊红(eosin)染⾊⽅法，是最基本的也是最重要的病理学染⾊技术。

⼀张质上乘的HE切⽚是病理医⽣得以做出正确诊断的关键。

HE染⾊是⽬前国内外病理诊断上⼴泛采⽤的常规染⾊⽅法。

切⽚质量的好坏，可直接影响疾病诊断的及时与准确性。

因此，能制作出⼀张⾼质量的HE染⾊切⽚，是必须掌握的技术之⼀。

⼆、染⾊原理1.细胞核染⾊原理：苏⽊精为碱性天然染料，可使细胞核着⾊。

细胞核内染⾊质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏⽊精碱性燃料以离⼦键或氢键结合⽽被染⾊。

苏⽊精在碱性溶液中呈蓝⾊，所以细胞核被染成蓝⾊。

2.细胞浆染⾊原理：细胞浆内主要成分是蛋⽩质，为两性化合物、细胞浆的染⾊与pH值有密切关系，当pH调到蛋⽩质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染⾊。

当pH调到6.7-6.8时，⼤于蛋⽩质的等电点pH值，表现酸性电离，⽽带负电荷的阴离⼦，可被带正电荷的染料染⾊，现时胞核也被染⾊，核和胞浆难以区分。

因此必须把pH调⾄胞浆等电点以下，在染液中加⼊醋酸使胞浆带正电荷（阳离⼦），就可被带负电荷（阴离⼦）的染料染⾊。

伊红Y是⼀种化学合成的酸性染料，在⽔中离解成带负电荷的阴离⼦，与蛋⽩质的氨基正电荷（阳离⼦）结合⽽使细胞浆染⾊，细胞浆、红细胞、肌⾁、结缔组织，嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红⾊或粉红⾊，与蓝⾊的细胞核形成鲜明的对⽐。

3.分化作⽤：染⾊后，⽤某些特定的溶液将组织过多结合的染⾊剂脱去，这个过程称为分化作⽤，所⽤的溶液称为分化液。

在HE染⾊中⽤0.5%盐酸⼄醇作为分化液，因酸能破坏苏⽊精的醌型结构，使组织与⾊素分离⽽褪⾊。

经苏⽊精染⾊后，必须⽤0.5%盐酸⼄醇分化，使细胞核过多结合的苏⽊精染料和细胞浆吸附的苏⽊精染料脱去，在进⾏伊红染⾊，才能保证细胞核与细胞浆染⾊的分明。

石蜡组织切片的H E染色

石蜡组织切片的H E染色一、实验目的苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法，简称HE染色方法，是常规病理制片最基本的染色，能够对正常组织和病理组织进行形态结构的观察。

通过本实验的学习，了解HE 染色的方法，学会观察正常组织和病理组织。

二、实验原理1、细胞核染色的原理：苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。

细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点（4.7—5.0）以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。

伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。

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-3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。

在HE染色中用1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木精的醌型结构，使组织与色素分离而褪色。

经苏木精染色后，必须用1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去，在进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。

因此，在HE染色中分化是极为关键的一步。

4、返蓝作用：分化之后，苏木精在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色，在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。

组织切片经1%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色，故分化之后，立即用水出去组织切片上的酸而终止分化，再用弱碱性水（0.2%氨水）使苏木精染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。

HE染色

H-E染色概述苏木精（Hematoxylin）-伊红（Eosin）染色也称普通染色，简称为H-E染色。

是生物组织学、病理学及细胞学工作必不可少的最常用的染色方法，故又称常规染色H-E染色应该是红蓝相映，层次浓淡均为分明稳恒定优质各种固定、包埋方法所制作的组织切片和冰冻切片等，均可用采用常规染色H-E染色原理组织细胞的不同成分对苏木精染料的亲合力不同，经苏木精染色的组织切片，再利用酸乙醇的分化作用，可使细胞核等酸性成分着色清晰，而其它成分脱色再经伊红染细胞质等碱性成分，则各种组织与病变的一般形态结构均可显示出来一张优质的染色切片，可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的确切依据再根据此染色切片所见，分别进行不同的特殊染色到目前为止人类所积累的病理组织学知识，绝大部分是从观察苏木精-伊红染色标本所得来的第一节染液及溶液的配制一、明矾苏木精染液的配制苏木精染液的配法很多，普通、常规染色多用明矾苏木精，常用的有哈瑞（Harris）、埃利希（Ehrlich）、德拉菲而德（Delafield）及迈耶（Mayer）等明矾苏木精染液用钾明矾或铵明矾中的铝离子作为苏木精的媒染剂利用氧化汞等氧化剂进行人工氧化或通过自然氧化成熟的方法，使苏木精具有较强的染色效果还需用冰醋酸作为促染剂，以增强染色能力（一）哈瑞斯（Harris）苏木精染液1．配方（1）甲液苏木精1g无水乙醇10ml（2）乙液钾明矾（硫酸铝钾）20g蒸馏水200ml（3）其他氧化汞0.5～1g冰醋酸0.5～1ml2．配制法分别配制甲、乙液，将乙液（加温并搅拌），待全部溶解后，再加入甲液，混合后煮沸1～2分钟，然后改用小火加温，慢慢加入氧化汞，同时不停地摇荡或搅拌使其充分氧化，当液体变为深紫蓝色时，即迅速将容器放入入冷水中使之迅速冷却，室温静置数小时至一夜。

第二天过滤，每100毫升滤液内加0.5～1毫升冰醋酸，以增强其染色力染色时间为3～15分钟此液为人工氧化剂，配制方便，配后第二天即可应用，且染色时间较短，为临床病理常用之方法，保存时间不能太长，经2～6个月后染色作用渐弱，故现用现配为好，一次不宜配制过多，应按需要量随用随配钾明矾为媒剂，氧化汞为氧化剂，冰醋酸为促染剂二、伊红染液的配制为砖红色粉末状或酱红色结晶，是最常用的胞浆染料伊红有水溶性和醇溶性，黄光（Y）与蓝光（B）之分病理组织学常规染色一般多用水溶性伊红Y伊红染液的一般浓度为0.25％～1％。

HE染色的原理

HE染色的原理HE染色，又称组织酵素染色，是一种染色技术，它使用酵素以不同的颜色显示组织自身的形态特征或形态构造，以及影像学的精细结构上的细微组成。

作为一种解剖学方法，被广泛应用于许多领域，如医学组织学，病理学，医学影像学等。

HE染色的原理是，当高度分散的侧染色酶（如厌氧酶）接触到一种水溶性侧染色剂（比如酒石酸）时，水溶性侧染色剂将发生氧化反应，从而形成一种由植物细胞墙（例如细胞膜）组成的结构，从而形成以细胞膜为中心的细胞质。

高度分散的侧染色酶与水溶性侧染色剂的相互作用，引发了一种驱动染色反应的化学键合作用，从而使细胞膜中氧化剂流出细胞内，引发细胞液酸化反应，使细胞内的材料（如蛋白质，碳酸钙）form indelible substances and polymers, which will be stained by the hydroxide groups. Such polymers and indelible substances are colored according to the color of the hydroxide groups. The resultant staining patterns will be observed through optical microscope or electron microscope.得益于HE染色技术，机械和形态细胞学家可以精准地查看细胞内外的分布。

它使研究者很容易地观察细胞内的材料分布，例如胞浆，线粒体，链球菌等的分布情况。

HE染色也可以用于观察蛋白质，碳酸钙，膜蛋白，脂质，以及细胞核中的DNA等，可以进一步检测细胞的变化和病理病变。

总而言之，HE染色是一种重要的染色技术，可以用于生物学，病理学和其他医学学科，以用肉眼和显微镜观察组织中细胞和其他生物组织结构的形态和结构细节。

这种技术不仅可以科学证明炎症性疾病的发生，而且可以提供用于研究其它细胞和组织生物学病理学变化的重要资料。

组织he染色的原理

组织he染色的原理染色体染色是指通过特定染料对染色体进行染色的过程。

染色体染色的原理主要涉及到染料与染色体之间的相互作用。

染料会通过与染色体上存在的DNA、RNA、蛋白质等分子结构发生特定的相互作用来实现染色作用。

在染色体染色的过程中，通常会使用一种或多种染料，包括核染剂、碱性染料和荧光染料。

1. 核染剂染色原理：核染剂是指能够与DNA结构相互作用的染料。

核染剂主要是通过静电相互作用结合到DNA的底物上。

染色体上的DNA碱基中有高达35%以上的含氮碱基，其中较多的是腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)，较少的是鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)。

核染剂通常是阳离子，它们与DNA中的阴离子结合，形成染色体上显著的染色区域。

核染剂通过静电相互作用与DNA结合后，会使染色体在显微镜下呈现颜色，从而实现染色。

2. 碱性染料染色原理：碱性染料是与DNA分子的磷酸含量相互作用的染料。

DNA分子上的磷酸基团带有负电荷，而碱性染料则带有正电荷。

当碱性染料与DNA分子中的磷酸基团相互作用时，由于相互之间的电荷吸引作用，染料会结合到染色体上，从而实现染色。

3. 荧光染料染色原理：荧光染料是指能够发射荧光的染料。

荧光染料通常通过与DNA或RNA分子结合后，发生能级跃迁，从而发出光信号。

荧光染料可以通过荧光显微镜观察到，从而实现染色。

荧光染料常常用于细胞、组织或胚胎中标记特定的DNA、RNA 或蛋白质，以获取有关它们位置和功能的信息。

在染色体染色的实验操作中，需要适当的处理样本，以便染料与染色体有效结合。

通常情况下，样本需要进行固定、脱水、染色等处理步骤。

染色体染色的结果要依赖于染色剂的选择、使用条件、操作技巧等多个因素。

总结来说，染色体染色的原理是通过染料与染色体上存在的分子结构相互作用，实现对染色体的染色。

核染剂通过静电相互作用与DNA结合，碱性染料则与DNA分子中的磷酸基团相互作用，荧光染料则发生能级跃迁并发出光信号。

这些作用使得染色体能够在显微镜下呈现颜色或发出荧光，从而实现染色的效果。

H-E染色原理

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型；苏木素-伊红染色液混合型。

【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。

因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。

【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红苏木素-伊红染色液混合型苏木色精、伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。

【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟；2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟，经8O%乙醇若干分钟，自来水冲洗若干分钟；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色若干分钟，自来水洗若干分钟；或苏木素染色液(Mayer)染色若干分钟；或苏木素-伊红染色液(混合型)染色若干分钟；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)和苏木素-伊红染色液(混合型)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝若干分钟；亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干秒，自来水洗若干分钟；6、入伊红染色液(水溶)染色若干分钟，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色若干分钟(忌水洗）；此步骤苏木素-伊红染色液(混合型)不适用。

he染色的原理

he染色的原理
染色的原理是利用染料分子与纤维分子之间的相互作用力，将染料分子牢固地固定在纤维上，使其能够具有持久的染色效果。

一种常用的染色原理是亲合染色原理。

亲合染料具有与纤维分子相似的结构和化学性质，因此它们能够与纤维分子发生相互作用并结合。

其中最常见的相互作用力有氢键、范德华力、离子键等。

这些力能够使染料分子与纤维分子之间形成强有力的结合，从而将染料固定在纤维上。

另一种常用的染色原理是离子交换染色原理。

纤维表面通常带有带电离子交换基团，如羟基、胺基等。

染料分子通常带有相反电荷的离子，这些离子能够与纤维表面的离子交换，从而使染料分子与纤维之间形成离子键结合。

离子交换染色原理通常用于染色天然纤维，如棉花、亚麻等。

此外，还存在其他染色原理，如还原染色原理、金属盐络合染色原理等。

不同的染色原理适用于不同类型的纤维和染料，选用合适的染色原理能够提高染色效果和染色牢度。

总之，染色的原理是通过染料与纤维间的相互作用力，使染料牢固地固定在纤维上，实现染色效果。

HE的染色基本原理

七、促染剂
指只增强染料的染色能力，但不参与
染色反应的一类物质。常见：伊红染液中冰
醋酸。
八、染色过程中易出现的问题及原因
（一）染色过程中易出现问题及注意事项
1. 在进行染色操作前，进一步了解组织来源，固定、脱水、透明、包埋、切片的方法，因为
这些处理因素对组织染色的效果都有直接影响，
特别是固定液和固定时间与染色效果有特别重要的关系。
均；
③染色处理不当引起染色不均的原因
a. 组织脱蜡不彻底；原因：试剂陈旧，温度低 b. 染液试剂量少时； c. 分化剂浓度大，分化过强；原因：进行急速分化或在分化后没有迅速入水，使之终止分化均可造成染色不均
d. 染色或分化时、组织切片上有气泡时，则气泡内的
组织可能染不上色或没分化着，使之染色不均。
（四）模糊不清
①取材时组织已经腐败自溶或取材后没能及时固定和固定液浓度不够而组织出现自溶时，在染色组织切片上，往往是一片模糊； ②组织切片脱蜡不彻底，造成染色染不上或着色很淡，镜检时呈现模糊不清； ③染色后脱水不彻底，肉眼所见为云雾状，镜下模糊不清； ④封固切片时因空气潮湿，封片迟缓或呼吸造成切片上水珠，亦可出现模糊不清。
f. 染色后的切片长期地置于日光或强烈高温的灯光下，
尤其是暴晒于日光下最容易引起切片褪色，另外，将
封固后的切片加温烤干或室温过高时，一切能加速氧
化易引起褪色。
十、染液的配制
1. 迈耶（Mayer）氏苏木素染液：
苏木素 0.5g 水合氯醛 25g 钾明矾 25g 柠檬酸 0.5g 碘酸钠 0.1g 蒸馏水 500ml
①组织本身的原因，如凝血块、血栓、干涸成过硬的组
织及组织碎屑等；
②组织透明不足，石蜡不能浸透，切片时免强切出的片

HE的染色基本原理

3. 促染液：
碳酸氢钾 1g 硫酸镁 10g 自来水 500ml
谢谢！
3. 保持染色剂和各种用具的清洁 4. 染色时间问题：与染液新旧、温度、不同固定液固定时间长短
〔二〕切片脱落
1. 由于组织处理不当所致
①组织本身的缘由，如凝血块、血栓、枯槁成过硬的组织及组织碎屑等；
②组织透亮缺乏，石蜡不能浸透，切片时免强切出的片子脱蜡时大收缩，入水或染液后易脱落；
③组织脱水透亮过度，浸蜡时间长或温度太高，引起组织收缩硬脆，不易切片完整切片。
间接染色过程中，媒染染料+媒染剂结合 =色淀+组织结合
媒染剂+组织然后再与染料结合，生成组织——媒染剂——染料结合物，从而使组织着色
七、促染剂
指只增加染料的染色力气，但不参与染色反响的一类物质。常见：伊红染液中冰醋酸。
八、染色过程中易消逝的问题及缘由
〔一〕染色过程中易消逝问题及留意事项
水，才能使苏木精染液进入细胞核中，使细胞核染色。
水洗目的：①切片清洁，提高切片质量；②切片着色均匀；③防止不清洁的切片污染染液，保持染液的清洁和纯度。染色之后的水洗：为洗去未与切片结合染液分化以后的水洗：中止分化作用伊红染色后的水洗：洗去未结合的染液，以防止大量伊红进入染缸
四、分化和蓝化作用
苏木素、伊红染色方法〔自动染色机程序〕
二甲苯 5分钟
二甲苯 5分钟
二甲苯 3分钟
无水乙醇 5分钟
无水乙醇 3分钟
无水乙醇 3分钟
水洗
5分钟
苏木素 13分钟
水洗
3分钟
伊红
8秒
水洗
2秒
85%酒精 5秒
95%酒精 5秒

HE的染色基本原理

HE的染色基本原理染色是一种将颜色添加到织物或其他物质上的过程，使其变得有吸引力或增加它们的价值。

衣物和其他织物通过染色来改变它们的外观，使它们具有各种颜色和图案。

染色可以通过各种方法进行，其中最常见的是化学染料的使用。

染色的基本原理是将染料分子添加到纺织品的纤维中，从而改变它们的颜色。

染料分子具有可以吸收特定波长的光的能力，这就是我们所看到的颜色。

当光线照射到染过色的纤维上时，非吸收的波长会被反射，被我们的眼睛所感知。

染料分子主要有两部分组成：染料色基和染料基团。

染料色基是染料分子的主要部分，它能够吸收特定波长的光并反射其他波长的光。

染料基团是染料分子的其余部分，它们通过与纤维表面进行化学反应来将染料固定在纤维上。

染料的选择非常重要，它必须具有以下特性：1.溶解性：染料必须能够溶解在适当的溶剂中，以便能够均匀地添加到纤维中。

2.对纤维的亲和性：染料必须与纤维表面相互作用，以确保染料固定在纤维上，并具有良好的耐久性和抗褪色性。

3.光稳定性：染料必须具有良好的耐光性，以避免在暴露于阳光下时褪色。

4.色彩鲜艳：染料必须具有鲜艳的颜色，而且在染色过程中不会发生色彩变化。

染色的过程通常涉及以下步骤：1.清洗和预处理：纺织品通常在染色前需要进行清洗和预处理，以去除杂质和预处理剂，并提高染色效果。

2.染料配制：染料通常在水中或其他溶剂中配制，并添加适当的助剂和扩散剂，以确保染料在纤维中的分散性和渗透性。

3.染色过程：纺织品通常通过浸泡、滚煮、喷洒或者印花等方式来进行染色。

染料分子通过与纤维表面进行化学反应或物理吸附而固定在纤维上。

4.后处理：染过色的纺织品通常需要进行后处理以确保染料的稳定性，并去除剩余的染料和其他杂质。

染色技术在不断发展，带来了许多创新和改进，以提高染色效果和减少对环境的影响。

例如，染料的纳米粒子被用于增加颜色的亮度和耐光性，生物染料被用于降低化学品的使用量和对环境的影响。

另外，电子束染色和激光染色等新技术也正在被开发和应用。

HE染色原理

HE染色原理详解1. 引言HE（Hematoxylin and Eosin）染色是一种广泛应用于组织切片染色的方法。

它是组织学研究中最常用的染色方法之一，可以用于观察和识别不同类型的组织细胞、细胞器和细胞组分，对于发现和诊断疾病具有重要的意义。

本文将详细介绍HE染色的基本原理以及每个步骤的具体操作。

2. HE染色基本原理HE染色使用两种染料，即天青（Hematoxylin）和伊红（Eosin）。

天青染色核酸物质，如细胞核和核染色质；伊红则染色细胞质和细胞器。

这两种染料相互作用，形成了HE染色效果。

2.1 天青（Hematoxylin）染色原理天青是一种天然染料，通过与组织中的阴离子基团结合而发生染色反应。

天青与酸性物质结合形成的盐类在碱性条件下呈现出蓝色或紫色，使得细胞核等含有核酸的区域染色深蓝色。

天青染色可以分为以下几个步骤：1.组织固定：将待染的组织标本进行固定，一般使用10%中性缓冲福尔马林。

2.脱水：将组织标本通过逐渐浓度递增的酒精溶液进行脱水处理。

3.清洁：用去嵌剂的醛固定液对组织标本进行处理。

4.蜡包埋：将组织标本放入熔蜡中，使其浸透均匀。

5.切片：用梯度旋转切片机切取薄片。

6.抗静电：使用正电极处理切片以减少静电。

7.染色：将切片浸入天青染料中，使其染色蓝色。

8.除碱：用醋酸或其他酸性溶液将切片除去多余的天青染料。

9.脱水：逆序使用乙醇溶液将切片脱水。

10.透明：用透明度递增的有机溶剂对切片进行透明化处理。

11.封片：将切片放入玻璃片中，并用固定剂固定。

2.2 伊红（Eosin）染色原理伊红是一种酸性染料，其分子中含有阳离子染色基团。

伊红可与细胞质内的嗜多染色质、酸性粒细胞内的颗粒以及胶原纤维等物质结合，形成染色沉淀，使细胞质等区域呈红色。

伊红染色可以分为以下几个步骤：1.脱蜡：将切片放入去蜡剂中，去除组织标本中的蜡质。

2.脱水：使用递减浓度的酒精溶液对切片进行脱水处理。

3.染色：将切片浸入伊红染料中，使其染色红色。

he染色方法

he染色方法HE染色法又称苏木精- 伊红染色法，是一种广泛用于临床和实验中的染色方法。

顾名思义，HE染色就是以苏木精染液和伊红染液先后将特定的细胞成分上色，表现出一定的嗜酸性或嗜碱性。

蓝色的苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色。

细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均可被碱性染料染色，这些物质具有嗜碱性。

例如，脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。

伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

它的染色对象有细胞质中的蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等等，这些物质具有嗜酸型。

伊红的染色原理也类似苏木精，伊红是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色。

所以细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色。

必须注意的是，我们在制作HE切片的过程中，染色前要用二甲苯将切片组织中的蜡彻底脱净，染色后用酒精将切片组织彻底脱水透明，再用二甲苯提高组织的透光度，最后用中性树胶封盖。

如果脱蜡脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。

通过HE的染色，各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

方便我们观察细胞内部的形态结构。

细胞核着蓝紫色，我们可以分辨是否有异常的核分裂象；观察细胞质的染色，我们可以了解胞质中不同成分的不同比例。

上图示：在脂肪变性的肝细胞中，细胞浆中出现大一不一的脂滴，脂肪变性更加明显，纤维间隔增厚，汇管区的胶原纤维增生包绕周围细胞，我们可以看到细胞坏死。

这些都对我们病理诊断大有帮助。

小鼠脏器he染色实验步骤

小鼠脏器he染色实验报告一、实验目的本实验旨在通过组织石蜡切片技术，对小鼠的脏器进行he染色，观察其组织结构和细胞形态，为进一步研究小鼠生理机制提供形态学依据。

二、实验原理he染色是一种常用的组织学染色方法，利用苏木精和伊红两种染料对组织进行染色，能够清晰地显示出细胞形态和组织结构。

其中，苏木精能够使细胞核呈蓝色，而伊红能够使细胞质呈红色，从而实现对细胞进行定位和鉴别。

三、实验步骤1. 组织取材：选取小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器，用预冷的生理盐水冲洗干净，用滤纸吸干水分。

2. 组织固定：将组织块置于4%甲醛溶液中固定24小时，使其形态固定不变。

3. 组织脱水：将固定后的组织块依次置于50%、70%、80%、90%的酒精溶液中脱水，每次1小时。

4. 透明和浸蜡：将脱水后的组织块置于二甲苯溶液中透明2次，每次15分钟，然后将其置于石蜡溶液中浸蜡2次，每次1小时。

5. 切片与贴片：将浸蜡后的组织块进行石蜡切片，厚度为5μm，将切片置于烘片架上烘干。

6. he染色：将切片置于he染色液中染色10分钟，然后用水冲洗掉残余的染液。

7. 封片与观察：将染色后的切片用中性树胶封片，然后用光学显微镜观察并记录结果。

四、实验结果通过he染色，我们得到了小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器的石蜡切片，并观察到了各个脏器的组织结构和细胞形态。

其中，心脏的肌纤维呈束状排列，肝细胞的细胞核呈圆形或卵圆形，脾脏的淋巴细胞和巨噬细胞分布较为密集，肺泡上皮细胞呈扁平状排列在肺泡腔内，肾脏的肾小球和肾小管结构清晰可见。

五、结果分析通过he染色实验结果可以看出，小鼠的各个脏器具有不同的组织结构和细胞形态。

这些形态学特征反映了各个脏器的生理功能和特点。

例如，心脏的肌纤维呈束状排列，有利于心脏的收缩和舒张；肝细胞具有圆形或卵圆形的细胞核，表明肝脏具有强大的代谢功能；脾脏中分布着大量的淋巴细胞和巨噬细胞，提示脾脏在免疫系统中具有重要作用；肺泡上皮细胞呈扁平状排列在肺泡腔内，有利于气体交换；肾脏的肾小球和肾小管结构清晰可见，表明肾脏具有滤过功能。

HE染色

HE染色是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法.TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应，生成红色的甲月赞，用来表示细胞的活力。

配制多为2％，染色要避光，37度条件下，它是评价脑缺血损伤常用的指标。

微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。

物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。

化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。

酸性物质对于碱性染料较易吸附，且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸附。

如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力，易于吸附。

但是，要使酸性物质染上酸性材料，必须把它们的物理形式加以改变（如改变pH值），才利于吸附作用的发生。

相反，碱性物质（如细胞质）通常仅能染上酸性染料，若把它们变为适宜的物理形式，也同样能与碱性染料发生吸附作用。

细菌的等电点较低，pH值大约在2—5之间，故在中性、碱性或弱酸性溶液中，菌体蛋白质电离后带阴电荷；而碱性染料电离时染料离子带阳电。

因此，带阴电的细菌常和带阳电的碱性染料进行结合。

所以，在细菌学上常用碱性染料进行染色。

影响染色的其它因素，还有菌体细胞的构造和其外膜的通透性，如细胞膜的通透性、膜孔的大小和细胞结构完整与否，在染色上都起一定作用。

此外，培养基的组成、菌令、染色液中的电介质含量和pH、温度、药物的作用等，也都能影响细菌的染色。

二、染料的种类和选择染料分为天然染料和人工染料两种。

天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等，它们多从植物体中提取得到，其成分复杂，有些至今还未搞清楚。

目前主要采用人工染料，也称煤焦油染料，多从煤焦油中提取获得，是苯的衍生物。

多数染料为带色的有机酸或碱类，难溶于水，而易溶于有机溶剂中。

为使它们易溶于水，通常制成盐类。

染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类。

1、酸性染料这类染料电离后染料离子带负电，如伊红、刚果红、藻红、苯胺黑、苦味酸和酸性复红等，可与碱性物质结合成盐。

HE染色

HE染色观察细胞形态变化1.2.3.1 HE染色的原理（1）苏木精染细胞核的基本原理：苏木精被氧化后成为苏木红，加入媒染剂后成为带正电荷的紫蓝色的强盐基性色素，作用如碱性染料，是一种染细胞核的优良染料。

细胞核内的染色质主要是脱氧核糖核酸（DNA），DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精染料以离子键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以含碱性物质的细胞核被染成蓝色。

（2）伊红染细胞质的染色原理：伊红为酸性染料。

细胞内的主要成分是蛋白质，是两性化合物，细胞质的染色与pH值有密切关系，蛋白质等电点的pH值为4.7～5.0，此时细胞质对外部显电中性，既不被碱性染料着色，也不被酸性染料着色。

只有当染液中的pH值低于胞质等电点时，使胞质在酸性液体中带正电荷，就可被带负电荷（阴离子）的染料着色。

伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷结合而使细胞质染色。

细胞质、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等均可被染成颜色深浅不同程度的红色或粉红色，与细胞核的蓝色形成鲜明对比。

1.2.3.2 常用染色试剂的配制（1）1%的盐酸酒精：用移液管吸取浓盐酸1ml于99mL的70%乙醇中，并用玻璃棒搅拌均匀。

（2）酒溶性伊红：称取伊红5g溶于1000ml 70%～90%的乙醇中，并滴加冰醋酸10滴，搅拌完全溶解。

（3）爱氏苏木精染液：将2g苏木精溶于少量95%酒精中，加10ml冰醋酸后搅拌，加速其溶解；然后加入100 ml甘油将95%酒精补足（95%的酒精共用100 ml）；将5g钾矾研碎，溶于100ml温水中，将其溶液一滴滴地加入染色剂中，并不断搅动；加入0.2g碘酸钠，待样液变为紫红色时便可使用。

1.2.3.3 操作步骤细胞涂片的制作：用PBS洗涤培养制备好的MCF-7细胞，在1000r/min的转速下离心3次，每次5min，并调整细胞数为5.0×106 个细胞/mL，取10～20μL细胞悬液滴于载玻片上，再滴加同体积的3.7%的甲醛溶液固定细胞，室温下空气干燥30min，供染色备用。

HE染色原理

苏木精-伊红染色方法
苏木精（hematoxylin）和伊红（eosin）染色方法，简称HE染色方法，是细胞与组织学最广泛的染色方法。

一、HE染色的基本原理
理。

理离子，可被带正电荷的染料染我以，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。

因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细．
胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

用苯的作（三）、二甲烤片后切片进入二甲苯是脱蜡的作用。

组织处理和染色后进。

用。

用在脱蜡经酒精处理之后，水洗切片，是为了苏木精染液能更好的
进入细胞核中去，使细胞核染色均匀。

液染的合结片切与未去洗为是用作洗水的后之色染．
分化以后的水洗则是为了除去分化液和脱下的染料，中止分化作用。

在伊红染色之后也可以水洗，是为了减少伊红染液进入脱水的酒精中。

用作化和蓝六（）分化
用。

用。

HE染色制作实验报告牛蛙

HE染色制作实验报告牛蛙实验报告：HE染色制作实验报告（牛蛙）一、实验目的通过制作牛蛙组织切片并进行HE染色，了解HE染色的基本原理和方法，掌握制作组织切片和染色的技能，并能观察和描述组织细胞的基本形态结构。

二、实验原理HE染色是指将组织切片染色成不同颜色，以观察细胞的形态和结构。

其中HE染色是指用碱性染料“苏木精”（Hematoxylin）染出细胞核的深紫色，用酸性染料“伊红”（Eosin）染出细胞质的粉红色。

HE染色的步骤主要包括固定、脱水、浸渍、透明、浸渍、染色、洗涤、脱色、清洗、封片等过程。

其中固定是为了防止组织坏死和变性，使组织切片细胞结构得以保存，脱水是指将水分从组织切片中去除，使切片能够透明，染色是将切片染上苏木精和伊红，然后再进行洗涤和脱色，清洗后用透明剂使切片透明，最后封片。

三、实验步骤1.取一只牛蛙，将其放入麻醉液中麻醉，然后取出。

将取出的牛蛙头部切下，放在切片刀上，用刀片切下头部组织切片，然后放入10%的福尔马林固定剂中固定约12小时。

2.将固定好的组织切片用流水冲洗约1小时，然后将其放入70%的酒精中脱水。

3.将组织切片放入95%的酒精中浸泡2小时，然后将其放入100%的酒精中浸泡2小时。

4.将组织切片放入清理剂中浸泡3小时，然后将其放入透明剂中浸泡3小时。

5.将组织切片放入蜡中浸泡，加热融化后将其浸泡2小时。

6.将组织切片放入染料（苏木精和伊红）中染色10分钟，然后用流水冲洗。

7.将组织切片放入脱色以下是一份牛蛙HE染色制作实验报告：一、实验目的本实验旨在了解HE染色的原理、方法及注意事项，学习牛蛙内脏器官的HE染色制作方法，加深对细胞组织的结构与功能的理解。

二、实验原理HE染色是一种常用的细胞组织染色方法，用来观察细胞组织的结构与组织学特点。

HE染色即通过对组织切片进行染色，利用组织中核酸和蛋白质对颜料的亲和性，从而将不同部位的细胞组织染上不同的颜色。

HE染色分为三步：脱水、脱脂、染色。