金黄色葡萄球菌的检查
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金黄色葡萄球菌的检查
同学们,这一节我们一起来学习一下第四章微生物限度检查法中的金黄色葡萄球菌的检查。
金黄色葡萄球菌为葡萄球菌属中的一种。本菌在自然界分布甚广,空气、土壤、水和日常用具,人的皮肤。看,这就是金黄色葡萄球菌,它是一种革兰氏阳性球菌,呈葡萄状排列,无芽胞,无荚膜,能分解甘露醇,血浆凝固酶阳性。
该菌是葡萄球菌中致病力最强的一种,可经皮肤、粘膜侵入人体引起化脓性病变等局部及全身化脓性炎症,严重时可导致败血症。
所以,国家规定外用药品和一般滴眼剂、眼膏剂、软膏剂等规定不得检出金黄色葡萄球菌,检验金黄色葡萄球菌有重要意义。
金黄色葡萄球菌的操作流程如图所示,与之前讲述过的其他控制菌的检查一样:
在完成培养基的配制和供试品的处理后,用营养肉汤于30~35℃增菌培养18~24小时,必要时可延至48小时。增菌培养的目的使被检药物中的被检菌增殖,避免出现漏检。
接着,进行分离纯化,其目的是使被检菌从混合菌中分离出来。以接种环沾取以接种环沾取1~2环培养液,划
线接种于卵黄氯化钠琼脂平板或甘露醇氯化钠琼脂平板上,置30~35℃培养24~72小时。
当阳性对照平板呈典型菌落生长时,供试品分离平板无菌落生长,或有菌落生长但不同于表中所列特征,可判为未检出金黄色葡萄球菌。
若供试品分离平板生长的菌落与表中所列特征相似疑似时,应选取2~3个以上菌落,分别接种于营养琼脂斜面上,于30~35℃培养18~24小时,取其培养物做以下检查。
1. 革兰染色镜检
革兰染色镜检观察显微镜下的细菌结构是否符合金黄色葡萄球菌的形态特征:金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌,无芽孢,无荚膜。排列呈不规则的葡萄状,亦可呈单个、成双或短链状排列,菌体较小。
2. 血浆凝固酶试验
金黄色葡萄球菌能产生血浆凝固酶,能将血浆里的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,使血浆凝固。
检查时,轻轻将试管倾斜(动作勿大),仔细观察,阴性对照管血浆应流动自如,阳性对照管血浆应凝固状,若试验管液血浆凝固为血浆凝固酶试验阳性;否则为阴性。阳性对照管和阴性对照管任何一管不符合要求时,应另制备血浆,重新试验。
最后,根据检查结果进行判断
1.革兰染色镜检呈阳性球菌,血浆凝固酶试验阳性时,判定为检出金黄色葡萄球菌。
2.革兰染色镜检呈非革兰阳性球菌,或血浆凝固酶试验阴性反应,判供试品未检出金黄色葡萄球菌。
3.阴性对照有菌生长或阳性对照试验呈阴性结果,试验结果无效。
在金黄色葡萄球菌的检查过程中,要注意:
1.金黄色葡萄球菌在三种分离培养基上的典型菌落为金黄色。但由于受药物影响或非典型菌株存在,亦可呈橙黄色、柠檬色或白色。
2.如果使用干燥培养基,应按说明书配制。注意pH是否符合规定,必要时校正pH后灭菌使用。
3.血浆凝固酶试验应用新鲜培养物及新鲜血浆
4.检测控制菌,按一次检出结果为准,不再复检。检出的控制菌培养物须保留1个月,备查。
好,以上就是金黄色葡萄球菌的检查的相关内
容,谢谢大家。