ISH探针地高辛(digoxin) 生物素 (biotin) 一抗 二抗 显色系统
地高辛片Digoxin-详细说明书与重点
地高辛片Digoxin英文名称:DigoxinTablets【成分】本品主要成份为:地高辛化学名称:3即[[0-2,6-二脱氧-B-D-核-己毗喃糖基-(1-4)-0-2,6-二脱氧邛-D-核- 己毗喃糖基-(1-4)-2,6-二脱氧-B-D-核-己毗喃糖基]氧代]-120,14即二羟基-5B-心笛- 20(22)烯内酯。
【性状】本品为白色片。
【适应症】1.用于高血压、瓣膜性心脏病、先天性心脏病等急性和慢性心功能不全。
尤其适用于伴有快速心室率的心房颤动的心功能不全;对于肺源性心脏病、心肌严重缺血、活动性心肌炎及心外因素如严重贫血、甲状腺功能低下及维生素B1缺乏症的心功能不全疗效差;2.用于控制伴有快速心室率的心房颤动、心房扑动患者的心室率及室上性心动过速。
【规格】0.25mg【用法用量】成人常用量。
口服:常用0.125〜0.5吗(半片・2片),每日一次,7天可达稳态血药浓度;若达快速负荷量,可每6〜8小时给药0.25mg(1片),总剂量。
75〜1.25mg/日(3-5片/日);维持量,每日-次0.125〜0.5哨(半片-2片)。
小儿常用量。
口服:本品总量,早产儿0.02〜0.03mg/kg;1月以下新生儿0.03〜0.04mg/kg;1月〜2岁,0.05~0.06mg/kg;2~5岁,0.03~0.04mg/kg;5~10罗0,02~0.035/kg;10岁或10岁以上,照成人常用量;本品总量分3次或每6〜8小时给予。
维持量为总量的1/5〜1/3,分2次,每12小时1次或每日1次。
在小婴幼儿(尤其早产儿)需仔细滴定剂量和密切监测血药浓度和心电图。
近年通过研究证明,地高辛逐日给予-定剂量,经6~7天能在体内达到稳定的浓度而发挥全效作用,因此,病情不急而又易中毒者,可逐日按5.5ng/kg给药,也能获得满意的治疗效果,并能减少中毒发生率。
【不良反应】1 .常见的不良反应包括:促心律失常作用、胃纳不佳或恶心、呕吐(刺激延髓中枢)、下腹痛、异常的无力、软弱。
地高辛 (Digoxin)使用说明书
地高辛 (Digoxin)使用说明书地高辛 (Digoxin) 使用说明书地高辛是一种常用的心脏疾病治疗药物,主要用于治疗心力衰竭和心律失常。
本说明书将详细介绍地高辛的用法、剂量、注意事项和可能的副作用,帮助患者正确使用地高辛,从而达到最佳疗效。
一、药物名称和成分药物名称:地高辛(Digoxin)成分:每片含地高辛0.25毫克。
二、适应症地高辛适用于下列疾病的治疗:1. 心力衰竭:用于改善心脏收缩力,增加心脏排血量。
2. 心房颤动:用于控制心脏节律,减少心房颤动的发作并减轻症状。
三、用法和剂量1. 使用方法:口服。
最好与饭后服用,以减少不适感。
2. 常用剂量:成人一般剂量为每日0.125-0.25毫克,根据患者具体情况,可在医生指导下微调剂量。
3. 用量调整:用地高辛治疗时,应根据患者的病情和耐受性进行用量调整。
请遵循医生的指导,并定期检查药物浓度和心脏功能。
四、注意事项1. 专科医生指导:地高辛使用需要在专科医生的监护下进行,不得擅自调整剂量或停药。
2. 定期检查:使用地高辛期间,应定期检查心脏功能、药物浓度等指标,以确保疗效和安全性。
3. 过敏反应:如果出现过敏反应,如皮疹、荨麻疹、呼吸困难等症状,请立即就医。
4. 注意相互作用:地高辛有一些药物相互作用可能导致心脏毒性增加,如抗心律失常药物、某些抗生素等,请告知医生所用的所有药物。
5. 年老体弱者:对于年老体弱、肝肾功能减退者,应特别谨慎使用,避免出现中毒症状。
五、可能的副作用地高辛的使用可能会出现以下副作用:1. 胃肠道反应:如恶心、呕吐、腹泻等,特别是在剂量过高的情况下。
2. 心脏毒性:如心律失常、心搏骤停等,请密切关注心脏状况,若出现异常请立即就医。
3. 颜面潮红:部分患者使用地高辛后可能出现颜面潮红的不适感。
4. 视觉障碍:可能出现视觉模糊、视物有影等,若出现此类问题,请及时就医。
六、妊娠和哺乳期使用妊娠和哺乳期妇女慎用地高辛,应在医生的指导下使用。
地高辛(digoxin)
地高辛(digoxin)作者:来源:《上海医药》2020年第26期1概述地高辛是公认的窄治疗指数药物(NTIDs)之一,并为我国、美国、日本和加拿大等国家的NTIDs目录所收载[1-2]。
地高辛为强心苷类药物,1954年获美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市[3],有正性肌力、减慢心率的作用[4],常用于治疗高血压、瓣膜性心脏病、先天性心脏病等急性和慢性心功能不全,尤其适用于伴有快速心室率的心房颤动类的心功能不全[5]。
地高辛既为我国医保用药,又被列入国家基本药物目录,目前仍是常用的心脏疾病治疗药物之一。
对于地高辛用于治疗急慢性心力衰竭(心衰),中国指南[6]维持对地高辛的Ⅱa类推荐,美国指南(包括2013年版和2017年更新版)[7]认为地高辛可降低射血分数下降的心衰(HFrEF)患者住院风险(Ⅱa,B),而欧洲指南[8]将洋地黄类药物降为Ⅱb类推荐;对于规范药物治疗后仍有症状的窦性心律HFrEF患者可考虑应用(Ⅱb,B)[9-11]。
2安全用药提示2.1替换使用地高辛口服生物利用度个体差异大,不同厂家的产品也可有较大差异,临床应用时应注意调整剂量,谨慎替换不同企业的地高辛。
2.2警示①任何洋地黄类制剂中毒、室性心动过速、心室颤动、肥厚型梗阻性心肌病(若伴收缩功能不全或心房颤动仍可考虑)、预激综合征伴心房颤动或心房扑动者禁用。
②低钾血症、不完全性房室传导阻滞、高钙血症、甲状腺功能低下、缺血性心脏病、急性心肌梗死早期、活动性心肌炎、肾功能损害患者慎用。
③有严重或完全性房室传导阻滞且伴正常血钾者的洋地黄化患者不应同时应用钾盐,但如同时应用噻嗪类利尿药时常须给予钾盐,以防止低钾血症。
应用洋地黄患者对电复律极为敏感,应高度警惕。
④老年人应用时,因肝、肾功能不全,表观分布容积减小或电解质平衡失调,对本品耐受性低,必须减少剂量。
⑤地高辛可通过胎盘,妊娠后期母体用量可能增加,分娩后6周须减量。
可排入乳汁,哺乳期妇女应用需权衡利弊。
ISH探针地高辛(digoxin) 生物素 (biotin) 一抗 二抗 显色系统
Avidin与Streptavidin的区别
Avidin是一种醣蛋白,被发现存在于鸡蛋卵白中,所以中文称之为「卵白素」,鸟类、爬虫类及两栖类的组织中亦存在。
Avidin 总分子量为 67,000 Daltons,由四个完全相同的次体 (subunit)所组成,每个次体皆能与一分子的 biotin 结合。
Avidin 含醣比例颇高,约占了总分子量的 10%。
其 pI=10-10.5,溶于水及含盐溶液中。
Avidin 在相当广的温度及 pH 范围下皆很稳定。
Streptavidin 也是个由四个相同次体 (subunit)所组成的蛋白质,每个次体皆能与一分子的 biotin 结合,且其与 biotin 之键结亲和力相当于Avidin-biotin 之亲和力。
不过Biotin-Streptavidin 复合物对
于 guanidine.HCl 将两者分开的抗拒能力较Biotin-Avidin 还要强。
此外,Streptavidin 不含醣且具有酸性的pI = 5,正好与Avidin相反。
FISH简介
荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization, 简称FISH)由于其直观, 快速, 敏感性高和方便灵活越来越得到广泛应用, 尤其是在血液学领域中. 因为白血病标本比较容易取得和制备, 不同类型的白血病又往往有其特异的染色体异常, FISH在白血病诊断, 治疗监测, 预后估计和微小残留病检测等诸方面都正成为不可缺少的重要手段.FISH的基本原理很简单, 就是标记了荧光的单链DNA(探针)和与其互补的DNA(玻片上的标本)退火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上的位置来反映相应基因的情况.FISH探针按标记方法可分为直接标记和间接标记: 用生物素(biotin)或地高辛(digoxingenin)标记称为间接标记, 杂交后需要通过免疫荧光抗体检测方能看到荧光信号, 因而步骤较多, 操作麻烦, 其优点是在信号较弱或较小时可经抗原抗体反应扩大; 直接用荧光素标记DNA的方法称为直接标记. 由于直接标记的探针杂交后可马上观察到荧光信号, 省去了烦琐的免疫荧光反应, 不再需要购买荧光抗体, 也由于近年来荧光互的亮度和抗淬灭性的不断改进和提高, 直接标记的荧光探针越来越成为首选, 采用多种不同颜色的荧光, 方便在同一标本上同时检测多钟异常. 其荧光强度和信号大小都易于在普通荧光显微镜下观察, 操作过程中也不需要严格避光, 使FISH过程变得简便而易于操作. FISH并不能取代传统的白血病MCI诊断, 但它却能使MIC分型更为准确和深入. , MIC即细胞形态学(M), 免疫学和细胞遗传学(C), 三者结合对白血病进行分型诊断, 对不同类型的白血病采用不同治疗方案手段. 随着人们对白血病的不断认识, 仅进行MIC分型不够全面, 还要加上对白血病的分子(M)诊断, 成为MICM分型. FISH就是连接细胞遗传学和分子生物学的桥梁.FISH流程仪器设备1、医用微波炉;2、水浴锅;3、OLYMPUS BX51荧光显微镜;4、OLYMPUS DP11数字显微照相机。
地高辛作业指导书 (2)
采用竞争法原理,整个过程18分钟完成。
第1步:10l标本与钌(Ru)标记的抗地高辛单克隆抗体混匀,形成夹心复合物,其数量取决于标本中分析物的浓度。
第2步:加入链霉亲和素包被的微粒和生物素标记的地高辛衍生物,后者与钌标记的单克隆抗体上未占据的位点结合,形成抗体-半抗原复合物。形成的完整复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
4. Lindenbaum J, Mellow MH, et al. Variation in Biologic Availability ofDigoxin from Four Preparations. New Engl J Med 1971;285:1344-1347.
5. Lindenbaum J, Butler VP Jr., Murphy JE,CresswellRM.Correlation of Digoxin-Tablet Dissolution Rate with BiologicalAvailability. Lancet 1973;1:1215-1217.
12.参考文献
1. Hoffman BF, Bigger JT Jr. In: Gilman AG, Goodman LS, Gilman A,eds.The Pharmacological Basis of Therapeutics. 6th ed.NewYork,NY: MacMillan; 1980:729-760.
8.参考范围
通常地高辛的治疗浓度是0.9-2.0ng/ml(1.2-2.6nmol/l)。高于2.0ng/mL(2.6nmol/l)时一般考虑中毒。但中毒和非中毒剂量之间有交叉。因此,临床诊断应根据临床和实验室的数据综合考虑。各实验室应提供合适的报告形式以及一致的异常结果报告程序。如有必要,各实验室应自己测定一个参考值。
地高辛标记核酸探针
地高辛(Digoxigenin ,DIG) 又称异羟基洋地黄毒甙元,是一种类固醇半抗原分子。
地高辛标记的探针是一种非放射性探针。
1设计 Digoxigenin 标记探针的引物。
每种血清型在保守区域设计一对通用引物。
2 标记探针合成(引物来源上述)
(1)各血清型阳性质粒模板的扩增。
(2)利用引物,通过PCR《参照罗氏公司 PCR DIG Probe Synthesis Kit说明书》,合成标记探针。
(3)电泳、回收、纯化和定量
3 核酸斑点杂交检测
(1)其他病毒核酸作对照,12种血清型PCR扩增产物。
(2)将12种探针和探针PM(混合探针)与同一血清型不同含量的核酸用常规方法进行核酸杂交。
4.显色。
地高辛 (Digoxin) 心功不全的治疗
地高辛 (Digoxin) 心功不全的治疗地高辛(Digoxin)心功能不全的治疗地高辛(Digoxin)是一种被广泛应用于心脏疾病治疗的药物,尤其在心功能不全的治疗中起到了重要的作用。
本文将简要介绍地高辛的相关信息,并详细探讨其在心功能不全治疗中的作用机制、适应症、用法用量以及可能的副作用等方面。
地高辛是一种心脏糖苷类药物,广泛用于心脏骤停、心律失常以及心力衰竭等心脏疾病的治疗。
它主要通过抑制心肌细胞内的钠-钾泵,增加心肌细胞内钙离子浓度,从而增强心肌的收缩力,并改善心脏的收缩功能。
此外,地高辛还能够通过影响神经内分泌系统抑制心房颤动的发作,并减轻心脏的负荷。
地高辛在心功能不全的治疗中应用广泛。
心功能不全是一种心脏疾病,其特征是心脏无法有效泵血,导致供血不足和充血等症状。
地高辛通过增强心肌的收缩力,促进心脏泵血功能的恢复,从而减轻了心力衰竭的症状,改善患者的生活质量。
此外,地高辛还可以减少心房颤动的发作,减少心房颤动对心脏功能的影响,有助于改善患者的心功能。
在使用地高辛时,需要根据患者的具体情况来确定剂量和使用方式。
在开始治疗时,通常需要进行逐渐增量的过程,以避免副作用的发生。
一般情况下,成年患者的起始剂量为每日0.125-0.25毫克,分次服用。
一旦开始治疗,患者需要定期进行监测,检测地高辛的血药浓度,以确保达到治疗效果,并避免过量使用导致的副作用。
尽管地高辛在心功能不全治疗中起到了重要的作用,但它也存在一些副作用需要我们关注。
常见的副作用包括恶心、呕吐、心律失常以及视觉障碍等。
因此,在使用地高辛时,我们应该谨慎选择适应证,并密切监测患者的病情和药物反应,确保使用地高辛的安全性和有效性。
总之,地高辛是一种用于心功能不全治疗的重要药物,通过增强心肌的收缩力和减少心房颤动的发作,改善了心脏疾病患者的心功能和生活质量。
然而,我们在使用地高辛时需要注意合理的剂量选择和监测,并重视其可能的副作用。
只有在严密的监测下,合理应用地高辛,才能最大程度地发挥其疗效,同时确保患者的安全性和舒适度。
原位杂交技术(单独一章)
第十三章原位杂交技术原位杂交(in situ hybridization,ISH)是分子生物学、组织化学和细胞学相结合的产物。
该技术是根据核酸碱基互补配对原则,将放射性或非放射性标记的外源核酸(探针)与染色体经过变性的单链DNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子。
经过一定的检测手段,可利用显微镜直接观察到所研究的目的序列在细胞或染色体上的位置和分布。
为宏观的细胞学与微观的分子生物学研究架起了一座桥梁,形成了一门新的交叉学科――分子细胞遗传学(molecular cytogenetics)。
原位杂交技术是由Gall 和Pardue利用同位素标记的rDNA探针与非洲爪蟾细胞核杂交,于60年代末首次获得成功。
第一节原位杂交基本程序原位杂交的基本程序包括5个基本步骤:第一步是制作用来进行原位杂交的染色体制片,方法与普通染色体制片完全相同。
材料可以是体细胞(如根尖细胞),也可以是花粉母细胞。
以3:1甲醇/乙醇:冰醋酸固定材料,而后做直接压片法或酶解火焰干燥法制片,选择具有理想的细胞分裂时期的片子以备后用。
第二步是对染色体DNA进行变性(denaturation)处理。
先把盖玻片揭开,用RNA酶处理制片,消化掉染色体上的内源RNA,而后用碱、酸或甲酰胺或高温处理,使DNA变性,成为单链状态。
第三步进行杂交。
用以进行杂交的DNA或RNA分子探针通常利用切刻平移法或随机引物标记法标记上放射性的3H、125I或非放射性的生物素(biotin)、地高辛(digoxingenin)。
目前常用的是,把非放射性探针、甲酰胺、硫酸葡聚糖、鲑鱼精DNA(ssDNA)、磷酸缓冲液(SSC)配成杂交液,置于制片上,盖上盖玻片,在37℃右的温箱中保温过夜,使探针同与其碱基序列具有互补性的单链DNA分子进行充分杂交,形成双链。
而后打开盖片,冲洗掉多余未杂交的探针。
第四步信号检出和对染色体进行染色。
对于使用放射性标记探针的,先将制片浸入一定浓度的感光乳剂溶液,并缓慢取出,使制片表面涂上一层均匀的感光乳剂,而后把制片放入暗箱,进行2-3天的感光,接着进行显影和定影。
地高辛 (Digoxin)治疗的疾病及其副作用
地高辛 (Digoxin)治疗的疾病及其副作用地高辛(Digoxin)治疗的疾病及其副作用地高辛(Digoxin)是一种广泛用于心衰治疗的药物。
心衰是一种心脏功能不全的疾病,指心脏无法以足够的力量泵血以满足身体的需求。
地高辛通过增强心脏肌肉的收缩力和减慢心率来改善心脏功能。
除了心衰,地高辛还可以用于心房颤动和心动过速等心律失常的治疗。
然而,使用地高辛也存在一些副作用,需要患者和医生共同注意。
地高辛的主要治疗疾病是心衰。
心衰是一种慢性病,主要表现为呼吸困难、乏力、水肿等症状。
地高辛作为一种正性肌力药物,可以增加心肌收缩力,从而增加心脏泵血量,改善心衰患者的症状。
研究表明,地高辛可以降低心衰患者的住院率和死亡率。
除了心衰,地高辛还可以用于治疗心律失常,尤其是心房颤动。
地高辛通过抑制传导系统来减慢心率,并且可以抑制异位节律点的生成。
这对于心房颤动患者来说是非常重要的,因为心房颤动会导致心率不规则,增加心脏负担,并增加心脏血栓形成的风险。
地高辛可以帮助恢复正常的心律,减少心房颤动对患者的影响。
然而,使用地高辛也需要注意其副作用。
常见的副作用包括恶心、呕吐、食欲不振、乏力等。
这些副作用通常发生在治疗初期,但可以通过调整剂量和持续观察来减轻。
同时,地高辛还可导致心律失常,如心脏传导阻滞,特别是在同时使用其他具有负性效应的药物时。
因此,在使用地高辛时,患者需要密切监测心率和心律。
除了副作用,地高辛还有一些其他的注意事项。
首先,地高辛的血药浓度需要监测,因为药物过量会导致中毒症状,如心律失常、恶心、视觉改变等。
其次,地高辛与其他药物存在相互作用,如利尿剂、抗心律失常药物等。
患者在使用地高辛之前,应告知医生所有正在使用的药物,以避免不良反应或药物相互作用的发生。
综上所述,地高辛作为一种重要的心衰和心律失常治疗药物,在临床上得到广泛应用。
它通过增强心肌收缩力和减慢心率来改善心脏功能。
然而,在使用地高辛时需注意其副作用,如恶心、呕吐、心律失常等,并密切监测血药浓度。
地高辛 检验标准-概述说明以及解释
地高辛检验标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述地高辛(Digoxin)是一种常用的心脏强心剂,广泛用于治疗心力衰竭、心律失常等心脏疾病。
在临床应用中,合理确定地高辛的用药剂量对患者的病情控制至关重要。
因此,准确、可靠的地高辛检验标准对于医生的判断和患者的治疗非常重要。
地高辛的检验标准是根据药物的药代动力学、药效学和临床应用经验等综合因素而建立的。
通过对血浆或血清样本进行测试,可以测量出地高辛的浓度,从而判断患者体内地高辛的血药浓度。
地高辛的合理用药与其血药浓度密切相关。
如果血药浓度过高,可能会导致地高辛中毒的风险增加,出现恶心、呕吐、心律失常等不良反应;而血药浓度过低,则可能无法达到治疗效果。
因此,了解和掌握地高辛检验标准对于有效、安全地使用该药物至关重要。
目前,地高辛的检验标准一般采用药物的血药浓度范围来进行评价。
根据临床实践和研究,常用的地高辛治疗血药浓度范围一般为0.5-2ng/mL。
在这个范围内,地高辛的治疗作用最为显著,同时不会引起严重的不良反应。
然而,需要注意的是,地高辛的检验标准可能会因患者的情况、用药方案、年龄、肝肾功能等因素而有所不同。
因此,在进行地高辛检验时,应该综合考虑患者的个体差异和临床表现,结合相关指南和专家建议,制定合理的测量和解读标准。
总之,地高辛的检验标准是临床用药中不可或缺的重要指标。
通过准确测量地高辛的血浆或血清浓度,医生可以更好地判断患者的用药状况并进行个体化的治疗。
而患者在接受地高辛治疗时,也应积极配合医生的监测和调整药物剂量,以确保药物的疗效和安全性。
文章结构部分是对整篇文章的组织和布局进行介绍,它会将文章的各个部分进行概括和归纳。
在本篇文章中,文章结构部分可以如下所写:文章结构:本文主要由引言、正文和结论三个主要部分组成。
1. 引言部分:引言部分是文章的开篇,主要包括概述、文章结构和目的三个方面。
1.1 概述:在概述部分,将介绍地高辛的背景信息,包括其定义、作用和使用范围等内容,用以引起读者对地高辛检验标准的兴趣。
罗氏地高辛(DIG)系统产品选择指南设计
罗氏地高辛(DIG)系统产品选择指南发布日期:2011-02-15 来源:浩然生物技术浏览次数:374罗氏应用科学部是最早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。
罗氏专利的地高辛产品上市近二十年,尽管有许多出色的竞争者涉足这一领域,尽管有定量PCR技术的应用,DIG系统仍然是非放射性高效标记&检测技术的首选。
Ø 关于非放射性标记技术罗氏应用科学部是最早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。
罗氏专利的地高辛产品上市近二十年,尽管有许多出色的竞争者涉足这一领域,尽管有定量PCR技术的应用,DIG系统仍然是非放射性高效标记&检测技术的首选。
Ø 地高辛技术优势地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物(毛地黄和毛花毛地黄)中提取的类固醇物质——Digoxigenin (DIG)。
由于洋地黄植物的花和叶片Digoxigenin在自然界中的唯一来源,因此抗DIG 的抗体不会与其他的生物物质结合,从而可以满足特异性标记的需要。
这一点,正是DIG胜于生物素(Biotin)的地方——同样是小分子标记物,生物素广泛存在于各种组织中,对于灵敏度很高的标记检测实验来说,样品自身含有的源生物素,就会对结果产生干扰。
地高辛就能够很好地避免这个问题。
Ø 地高辛技术特点ü可用于标记核苷酸或蛋白质ü检测方法:显色法、荧光或化学发光法ü安全环保,不接触放射性物质,不会对环境造成污染ü曝光时间短,结果显示时间以分钟计算,无需几小时甚至几天的自显影过程ü地高辛标记的探针至少可贮存一年以上,可一次大量制备ü可轻松进行探针剥离和重探Ø 应用领域地高辛系统能够安全高效地标记DNA、RNA或是寡聚核苷酸探针,这些探针可以被广泛应用在:üSouthern blot'' Northern blot'' dot blot ü菌斑杂交üMicroarrayüELISAü原位杂交Ø 根据标记方法选择探针更多产品选择请参考https://.roche-applied-science./sis/lad/index.jsp?id=lad_010100 Ø 根据实验方法选择产品üSouthern blottingüNorthern blottingüColony and plaque hybridizationüIn situ hybridizationhttps://.roche-applied-science./sis/lad/index.jsp?id=lad_010300 Ø 根据检测方法选择产品ü灵敏度更高的化学发光法ü方便直观的显色法。
地高辛标记核酸探针的标记方法
地高辛标记核酸探针的标记方法地高辛标记核酸探针的标记方法核酸探针已被广泛用于筛选重组克隆、基因多样性的种性检测和真菌种群内及种群之间的系统发育关系评价。
最早使用的放射性同位素标记核酸探针具有敏感性高、特异性好、分辨力强的特点,但放射性同位素标记也存在着一系列令人困扰的问题,如成本高、探针半衰期短、放射性物质危害人体健康等。
而且在进行放射性同位素标记实验时,需要有专门的实验室及相应的实验保护设施,还需要由经过培训的专业人员来操作,因而限制了在普通实验室进行分子生物学实验。
近几年发展起来的非放射性核酸探针大多通过酶促、光化学和化学手段掺入一种报道基团,这种报道基团可通过高灵敏度的冷光、荧光或金属沉淀等检测系统检测。
另外,应用pH电极或感应器技术的电化学检测系统也有报道。
在这些检测系统中,灵敏度最高的是生物素- 亲合素检测系统和半抗原-抗半抗原地高辛检测系统。
由于生物样品中常含有内源性生物素及生物结合蛋白,生物素标记的核酸探针会发生一些非特异性结合,从而影响实验效果。
与生物素-亲合素系统同样具有高灵敏度,却减少了非特异性结合的地高辛检测系统,已为人们所接受,并得到广泛的应用。
地高辛(Digoxigenin ,DIG) 又称异羟基洋地黄毒甙元,是一种类固醇半抗原分子。
其化学结构如图1 所示。
采用人工方法可以将地高辛的线型间隔臂与dUTP 连接起来,形成DIG-11-dUTP,通过随机引物法或PCR法将其掺入到DNA探针中。
RNA探针的标记是使用噬菌体信息编码的RNA聚合酶,通过体外转录将DIG-11-dUTP掺入到RNA探针中。
寡核苷酸探针的标记则是通过末端转移酶催化,在3,末端加上DIG-11-dUTP/dATP 或DIG-11-ddUTP 尾巴。
对于目的DNA 或RNA 来说,分子杂交后,杂交部分可通过ELISA 实验程序加以检测,即加入一种结合有碱性磷酸酶的地高辛-特异性抗体,它与地高辛半抗原分子形成酶联抗体-半抗原(DIG) 复合物,再加入相应的显色底物,使杂交部分得以显示。
地高辛(Digoxin)使用说明书
地高辛(Digoxin)使用说明书地高辛(Digoxin)使用说明书一、药品名称地高辛(Digoxin)二、适应症地高辛主要用于心力衰竭和心律失常的治疗。
三、使用方法和剂量1. 成人用法:(1)心力衰竭:初始剂量:每日0.125-0.25毫克口服,分2-3次服用。
维持剂量:每日剂量根据患者的临床情况逐渐调整,但一般不超过0.5毫克。
(2)心律失常:房性心律失常:根据患者临床情况,起始剂量为0.25-0.5毫克每日1次。
随后根据患者反应和心电图监测结果逐渐调整剂量。
室性心律失常:根据患者具体情况,开始推荐剂量为1.0-1.5毫克每日1次。
剂量可根据患者反应和心电图监测结果逐渐调整。
2. 儿童用法:儿童剂量需根据患者的具体情况,结合体重和心功能状况进行调整。
首剂维持剂量通常为0.01-0.03毫克每千克,分剂2-3次口服。
四、禁忌症以下情况患者禁用地高辛:1. 对地高辛或其他洋地黄类药物过敏;2. 严重房室传导阻滞(第二度或二度以上);3. 窦房结功能低下,除非也内步或外步植入物并同时应用心脏起搏器;4. 快速性心律失常,如心房颤动或心室颤动;5. 严重的左心室功能受损;6. 妊娠期间禁用。
五、不良反应地高辛可能引起以下不良反应:1. 心律不齐:如房性和室性心律失常;2. 消化系统反应:如恶心、呕吐、腹泻和胃肠不适;3. 神经系统反应:如头痛、视觉异常和混乱;4. 毒性反应:如地高辛中毒,表现为恶心、呕吐、心律失常、心绞痛等。
地高辛中毒危险性增加主要是因为剂量过高或过敏,或者临床情况发生改变。
六、注意事项1. 在使用地高辛前,应对患者进行全面评估,包括心功能、肾功能、电解质水平等。
2. 患者需要定期监测心电图、心率和血药浓度,以确保地高辛在治疗范围内。
3. 地高辛具有窄治疗范围,必须严格控制剂量,注意患者年龄、体重、肾功能等因素的影响。
4. 患者必须告知医生正在使用或打算使用的其他药物,以避免与地高辛产生不良相互作用。
地高辛标记原理及步骤
地高辛标记原理及步骤地高辛(Digoxin)是一种植物来源的药物,常用于治疗心脏病和心律失常。
在临床实验室中,地高辛也可用于标记其他物质,以便进行研究和诊断。
本文将介绍地高辛标记的原理及步骤。
一、地高辛标记的原理地高辛标记是一种共价标记方法,通过将地高辛与待标记物质结合,使其能够被检测出来。
该方法基于地高辛的特殊结构和与其他物质之间的化学反应。
地高辛的结构包含一个呈环状的核苷苷酸结构,其中有一个活性位点。
这个活性位点可以与其他分子中的羟基或氨基等活性基团发生化学反应。
在地高辛标记中,我们利用这个活性位点将地高辛与待标记物质连接起来。
二、地高辛标记的步骤1. 准备地高辛标记试剂首先,我们需要准备地高辛标记的试剂,包括地高辛分子和反应条件。
根据不同的实验需要,地高辛可以选择单独标记或与其他分子共同标记。
2. 标记反应的进行将待标记物质与地高辛标记试剂加入反应体系中,控制好反应时间和温度。
反应条件的选择需要根据实验的具体要求来确定。
3. 纯化标记产物完成标记反应后,需要对反应产物进行纯化,以去除未反应的地高辛和其他杂质。
常见的纯化方法包括色谱层析、电泳等。
4. 检测标记效果对纯化后的标记产物进行检测,确定地高辛与待标记物质的结合情况。
常用的检测方法包括光谱分析、质谱分析、核磁共振等。
5. 应用标记产物纯化并验证了标记产物后,可以将其应用到相应的实验或诊断中。
根据实验的目的和需求,地高辛标记产物可以被用于免疫染色、荧光探针等多个领域。
总结:地高辛标记是一种常用的药物标记方法,其原理是通过地高辛与待标记物质的共价结合。
标记步骤包括准备试剂、标记反应、纯化产物、检测效果和应用标记产物。
掌握地高辛标记原理及步骤对于科研和临床实验室中的药物研究和诊断具有重要意义。
地高辛(Dig)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求yuande
地高辛(Dig)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)适用范围:用于体外定量测定人血清或血浆中的地高辛(Dig)的含量。
1.1 产品规格试剂盒规格为48人份/盒、96人份/盒。
1.2 主要组成成分表1 地高辛(Dig)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)主要组成成分a) 酶结合物以含1% BSA的0.9%Nacl缓冲液配制的联接HRP的Dig抗原,其中含0.5%ProClin300做为防腐剂。
b) 反应抗体以含1% BSA的0.9%Nacl缓冲液配制的兔抗Dig,其中含0.5%ProClin300做为防腐剂。
c) 校准品校准品以100%小牛血清为稀释液,其中含0.5%ProClin300做为防腐剂,校准品A~F中含Dig的目标浓度分别约为0、0.5µg/L、1.0µg/L、2.0µg/L、3.0µg/L、5.0 µg/L。
校准品具体浓度详见标签及试剂盒参数IC卡。
d) 发光液发光液A主要成份为鲁米诺,发光液B主要成份为过氧化脲,两者均以pH8.6的Tris-HCl缓冲液配制。
e) 包被微孔板包被有羊抗兔抗体的白色聚苯乙烯微孔板,用铝箔袋真空包装。
f) 质控品(备选)以100%正常人血清为基质制备的冻干品,其中含0.5%ProClin300做为防腐剂,靶值浓度范围为1.62 µg/L~2.31 µg/L。
质控品具体浓度详见质控品参数表。
不同批号试剂盒中的相同组分不能互换。
2.1 外观a)液体组分应澄清,无沉淀或絮状物,实际装量应不小于标示装量;b)冻干组分呈白色或淡黄色疏松体,加水后应在3分钟内完全溶解;c)所有组分均无包装破损,标示清楚。
2.2 准确度试剂盒内校准品与相应浓度的国家标准品(编号:100015)同时进行分析测定,用Logit-Ln模型拟合,要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行(t检验);以国家标准品为对照品,试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在0.900~1.100之间。
地高辛素,生物素标记产毒性大肠杆菌I型不耐热肠...
地高辛素,生物素标记产毒性大肠杆菌I型不耐热肠...
曹纬;余守义
【期刊名称】《中山医科大学学报》
【年(卷),期】1990(011)001
【摘要】采用随机引物法制备地高辛素、生物素和^(32)P标记产毒性大肠杆菌Ⅰ型不耐热肠毒素(LT_1)DNA探针。
地高辛素、生物素和^(32)P LT_1探针分别在DNA斑点杂交试验中检测到0.1pg、1pg和0.1pg的质粒DNA,在菌落原位杂交试验中检测到12、120和12个细菌/ml,在粪便斑点杂交试验中检测到24、240和24个细菌/ml。
采用RNA酶A和蛋白酶K消化处理滤膜,消除了假阳性,使得地高辛素、生物素LT_1探针的特异性与^(32)PLT_1探针完全一致。
检测143株自腹泻病人分离的大肠杆菌,14株(9.79%)阳性,3种探针结果相同。
【总页数】5页(P38-42)
【作者】曹纬;余守义
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R392-33
【相关文献】
1.产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素和耐热肠毒素基因克隆及序列分析 [J], 李晓阳;郭学青
2.产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析 [J], 郭学青;李晓阳
3.地高辛素标记的DNA探针快速鉴定产不耐热肠毒素大肠杆菌的研究 [J], 陈清;俞守义
4.产不耐热肠毒素大肠杆菌减毒突变菌株的毒性和免疫应答评价 [J], 冯启峥;侯美佳;孙思萌;石博;刘嘉利;董秀梅;张萍;师东方
5.大肠杆菌的产毒能力与血清型关系——Ⅰ 被动免疫溶血试验(PIH)检测产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素 [J], 王克智;陈艺林;汤秀兰;王群
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
地高辛标记探针检测rhIL—2制品中微量DNA
地高辛标记探针检测rhIL—2制品中微量DNA
宋静;厉保秋
【期刊名称】《山东医科大学学报》
【年(卷),期】1996(034)002
【摘要】地高辛标记探针检测rhIL-2制品中微量DNA宋静,孙汶生,张利宁,曹英林,厉保秋,刘振生,高丰光(微生物学教研室毒理学研究室济南泉城生物工程研究所)DNA是生物遗传的物质基础,作为注射用的基因工程制品,其中的微量DNA可能对人体产生较大的危害。
因此...
【总页数】2页(P170-171)
【作者】宋静;厉保秋
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R394.8
【相关文献】
1.地高辛标记探针与生物素标记探针用于斑点杂交检测HBV DNA的初步研究 [J], 郭大为
2.用地高辛标记DNA探针检测乙肝标志物异常血清HBV—DNA [J], 邓建军
3.地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究[J], 王超;刘庚;张林波
4.应用地高辛标记HCMV DNA混合探针检测人巨细胞病毒DNA [J], 王玲;肖卫华;董伟;程兆军;胡嘉第;徐德启
5.地高辛标记的DNA探针检测核酸疫苗中宿主菌基因组DNA的含量 [J], 贺艳;施柯;孙树汉
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Avidin与Streptavidin的区别
Avidin是一种醣蛋白,被发现存在于鸡蛋卵白中,所以中文称之为「卵白素」,鸟类、爬虫类及两栖类的组织中亦存在。
Avidin 总分子量为 67,000 Daltons,由四个完全相同的次体 (subunit)所组成,每个次体皆能与一分子的 biotin 结合。
Avidin 含醣比例颇高,约占了总分子量的 10%。
其 pI=10-10.5,溶于水及含盐溶液中。
Avidin 在相当广的温度及 pH 范围下皆很稳定。
Streptavidin 也是个由四个相同次体 (subunit)所组成的蛋白质,每个次体皆能与一分子的 biotin 结合,且其与 biotin 之键结亲和力相当于Avidin-biotin 之亲和力。
不过Biotin-Streptavidin 复合物对
于 guanidine.HCl 将两者分开的抗拒能力较Biotin-Avidin 还要强。
此外,Streptavidin 不含醣且具有酸性的pI = 5,正好与Avidin相反。