超滤管使用注意事项
3kd超滤管使用方法和注意事项
3kd超滤管使用方法和注意事项以3kd超滤管使用方法和注意事项为标题的文章一、3kd超滤管的使用方法：1. 准备工作：在使用3kd超滤管之前，首先需要准备好一套完整的实验设备。
包括3kd超滤管本身、离心机、离心管、滤膜、滤液和所需的实验溶液等。
2. 安装滤膜：将滤膜放入3kd超滤管的滤膜座中，确保滤膜与座位紧密贴合，并且没有明显的气泡存在。
然后将滤膜座固定在3kd超滤管的上部。
3. 连接设备：将3kd超滤管的上部与离心管连接，确保连接紧密，避免滤液泄漏。
然后将装有滤液的容器与3kd超滤管的下部连接，确保连接紧密，避免滤液溢出。
4. 装填滤液：将待处理的滤液缓慢地倒入3kd超滤管的上部，直至液面超过滤膜座。
注意不要过度装填滤液，以免超过3kd超滤管的容量。
5. 开始离心：将连接好的3kd超滤管放入离心机中，并按照设备要求设置好离心速度和离心时间。
启动离心机，开始离心过程。
6. 收集上清液：离心结束后，将上清液从离心管中取出，注意不要将离心管中的沉淀物和滤液混合在一起。
7. 清洗和保养：使用完毕后，及时清洗和保养3kd超滤管。
将滤膜座取下，用纯水冲洗滤膜，并清洗其他部分。
然后将滤膜座重新安装好，保持干燥。
二、3kd超滤管的注意事项：1. 操作注意安全：在使用3kd超滤管时，要注意个人防护，避免接触滤液和有害物质。
同时，要按照实验室安全操作规范进行操作，确保实验室的安全。
2. 滤液选择：根据实验需要选择合适的滤液。
3kd超滤管适用于蛋白质、核酸等大分子物质的分离和浓缩，因此滤液的选择应根据实验目的进行合理搭配。
3. 控制离心条件：在使用3kd超滤管进行离心时，要根据实验要求控制好离心速度和离心时间。
过高的离心速度可能导致滤膜破裂，过长的离心时间可能降低分离效果。
4. 避免堵塞：在装填滤液时要注意避免滤液中的颗粒物或大量蛋白质等物质堵塞滤膜。
如果滤膜出现堵塞，可以尝试调整离心条件或更换滤膜。
5. 注意滤液浓度：使用3kd超滤管进行滤液浓缩时，要注意滤液浓度的控制。
超滤管使用指南(一)
超滤管使用指南（一）引言概述：超滤管是一种常用的水处理设备，能够有效去除水中的悬浮物、微生物和有机物质。
本文将为您介绍超滤管的使用指南，包括使用前的准备工作、操作步骤、注意事项等。
正文：1. 准备工作：a. 清洗超滤管：在第一次使用超滤管前，需要进行清洗以去除管道内的杂质和污垢。
可使用清洗剂和清水进行清洗，确保管道干净。
b. 连接管路：将超滤管与水源和出水管路连接好，确保管道的连接牢固，避免漏水或破裂的情况发生。
2. 操作步骤：a. 打开水源：打开水源阀门，让水缓慢地通过超滤管进入系统。
b. 观察滤水效果：观察超滤管的滤水效果，如果水呈混浊状态或有气泡冒出，可能是管道连接不牢或超滤膜受损，需要及时排查和修复。
c. 调节进水压力：根据超滤管的要求，调节进水压力。
过高的压力可能导致超滤管损坏，过低的压力则会影响过滤效果。
d. 控制出水质量：根据需要，调节出水阀门以控制出水质量。
可以根据不同需求选择不同的出水模式，如高纯水模式、饮用水模式等。
3. 注意事项：a. 使用环境：超滤管一般适用于自来水、井水等水源。
避免将其用于含有大量悬浮物、酸碱度较高或温度过高的水源中。
b. 定期检查：定期检查超滤管的运行状态，如滤膜是否有损伤、水流是否正常等。
如发现异常情况，及时进行维修或更换相应部件。
c. 清洗维护：定期清洗超滤管以保持其过滤性能，具体频率根据水源的情况而定。
一般情况下，可每3个月进行一次清洗。
4. 使用注意事项：a. 避免迫击炮效应：水源的进水压力不宜过高，以免超滤管因水压巨大而受损。
b. 避免冻结：超滤管在寒冷地区使用时，需要采取保温措施，避免管道因冻结而出现开裂破损的情况。
c. 禁止拆卸：使用过程中，严禁随意拆卸超滤管的部件，以免损坏管道结构或影响过滤效果。
5. 总结：超滤管是一种重要的水处理设备，使用前的准备工作和正确的操作步骤非常重要。
在使用过程中，需注意使用环境、定期检查和维护以及遵循相关的注意事项，以保证超滤管的正常运行和滤水效果。
离心超滤管的使用方法【可编辑范本】
超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffeｒ通常使用的超滤管,常用Ｍｉlｌｉｐorｅ的Ａmｉｃｏn—Uｌtｒa—1５超滤管（MＷCＯ1０kＤ）。
也有其它型号的、不同体积大小和MWＣO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用．1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1／3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kＤa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10ｋD左右，则可以用截留分子量3kＤ的超滤管.2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MｉlliQ水,水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡．注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜.开始离心超滤（离心机预冷至4度）。
膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。
在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命.4、当浓缩到剩下1mｌ时,【取5０uｌ国产Bradfｏrｄ溶液，加入10uｌ流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白.如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤.要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSＡ离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradfｏrｄ粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作,防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止.离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。
若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Bｕffｅr不合适;前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Ｂｕfｆeｒ,直到蛋白不发生沉淀为止.5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至１ｍl左右的时候,轻轻加入新的Bufｆｅr(经０.2２um超滤膜超滤),再浓缩至1mｌ左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul,也有浓缩至2０0ul以内的情况。
超滤管的使用注意事项
超滤管使用相关：
✓使用 ✓特性 ✓样品损失
如何正确使用：
加入样品
离心
吸出
✓ 使用之前：用ddH2O润湿，冰浴或冰箱预冷几分 钟。
✓ 加入样品：摆动桶离心机 15ml
ห้องสมุดไป่ตู้
固定角转离心机 12ml
✓ 离心：摆动桶离心机 4000g
固定角转离心机 5000g
离心时，膜和转轴垂直（角转离心机）
✓ 吸出：离心完毕后立即吸出，将两侧膜冲洗下。
用完后，水洗并离心；管内装ddH2O保存， 一旦开始使用，切勿使膜变干。
超滤管的一些特性：
✓可浓缩80倍； ✓对各种物质的耐受性：
尿素<=8M 咪唑<=100mM ✓ 蛋白大小是超滤管孔径的2倍 ✓ 除浓缩外，还可更换缓冲液，去除盐分。
样品损失：
✓ 吸附损失： 及时吸出，将两侧膜洗下； ✓ 离心时间过长： 产生沉淀，使蛋白损失（换试剂）； ✓ 滤出去：用小孔径超滤管。
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
到底选择多大截留分子量比较合适呢？10kDa、 5kDa、还是30kDa？通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤（离心机预冷至4度）。
不同离心机的转速 rpm 换算成g之后，有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档，减小对膜的压力。
注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。
在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
到底选择多大截留分子量比较合适呢？10kDa、 5kDa、还是30kDa？通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤（离心机预冷至4度）。
不同离心机的转速 rpm 换算成g之后，有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档，减小对膜的压力。
注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。
在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。
Millipore的超滤管使用经验
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。
常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
到底选择多大截留分子量比较合适呢？10kDa、5kDa、还是30kDa？通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤（离心机预冷至4度）。
不同离心机的转速rpm 换算成g之后，有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档，减小对膜的压力。
注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。
在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。
50ml超滤管的使用方法
50ml超滤管的使用方法一、引言50ml超滤管是一种常用于生物分离和富集的实验工具。
它的使用方法简单易懂，但需要注意一些细节，以确保实验的准确性和可靠性。
本文将详细介绍50ml超滤管的使用方法，帮助读者更好地掌握这一实验技术。
二、准备工作在使用50ml超滤管之前，需要进行一些准备工作：1. 确保实验室台面整洁干净，以防污染样品。
2. 检查超滤管是否完整无损。
3. 准备好所需的培养基、缓冲液等实验用品。
三、使用步骤1. 将50ml超滤管垂直放置于支架上，保持稳定。
2. 打开超滤管的盖子，将待处理的样品（如细胞悬液）倒入超滤管中。
注意不要超过超滤管的最大容量，一般为50ml。
3. 盖好超滤管的盖子，确保盖子与超滤管的接触紧密，以防样品泄漏。
4. 将超滤管放入离心机中，并设置合适的离心参数。
根据样品的离心要求，选择适当的转速和离心时间。
一般来说，低速离心（1000-2000rpm）可用于去除大分子物质，高速离心（3000-5000rpm）可用于富集目标分子。
5. 离心结束后，取出超滤管。
注意不要晃动或倾斜超滤管，以避免样品的混合。
6. 打开超滤管的盖子，将上层液体倒掉。
这些上层液体可能含有未被过滤的杂质或废弃物。
7. 关闭超滤管的盖子，将超滤管放回离心机中进行再次离心。
这样可以确保样品中的目标分子更好地被富集。
8. 离心结束后，取出超滤管，将上层液体倒掉。
重复这一步骤，直到上层液体基本清澈为止。
9. 最后，将超滤管中富集的目标分子转移到另一个容器中，即可完成50ml超滤管的使用。
四、注意事项1. 在操作过程中，要注意保持实验环境的洁净，以避免样品被污染。
2. 在离心时，要确保超滤管的盖子盖紧，以防止样品泄漏。
3. 在倒掉上层液体时，要小心谨慎，以免溅出样品或误倒。
4. 使用完毕后，要及时清洗超滤管，避免样品残留导致下次使用时的污染。
五、总结50ml超滤管是一种常用于生物分离和富集的实验工具。
通过上述步骤，我们可以轻松地使用50ml超滤管进行样品的超滤和富集。
超滤管使用指南
超滤管使用指南超滤管使用指南1：引言在本文档中，我们将详细介绍超滤管的使用方法和相关注意事项。
超滤管是一种常见的过滤器件，广泛应用于水处理、食品加工、医药制造等领域。
通过本指南，您将了解超滤管的工作原理、安装步骤和保养方法，以确保其正常运行。
2：超滤管的工作原理超滤管是一种通过物理隔离的方式进行过滤的装置。
其工作原理是利用超薄半透膜的特性，将水中的悬浮颗粒、溶解物质、细菌等进行分离和过滤，从而实现水的净化和处理。
超滤管通过管道输送水流，将水中的杂质与膜分离，使纯净的水通过滤膜而得到。
3：超滤管的安装步骤3.1 准备工作在安装超滤管之前，需要进行一些准备工作：- 确定超滤管的适用场景和用途。
- 选择合适的超滤管型号和规格。
- 准备必要的安装工具和辅助材料。
3.2 安装步骤以下是超滤管的安装步骤：步骤1：确保水源的稳定供应。
步骤2：准备好超滤管和附件，检查是否有损坏或缺失。
步骤3：根据超滤管的安装位置，选择合适的安装方式，如立式安装或横向安装。
步骤4：将超滤管与管道连接，确保连接紧固牢固。
步骤5：打开水源，排除管道中的气泡，并调整水流的速度和压力。
4：超滤管的保养方法为了保证超滤管的正常运行和延长使用寿命，需要进行定期的保养和维护。
以下是一些常见的超滤管保养方法：- 定期清洗超滤管，以去除堵塞和污垢。
- 检查超滤管的连接件，确保紧固牢固，无漏水现象。
- 定期更换超滤管滤膜，以保证过滤效果。
附件：本文档不涉及附件。
法律名词及注释：1：超滤管：一种利用超薄半透膜进行物理隔离和过滤的装置。
2：悬浮颗粒：指在液体中悬浮的细小颗粒物质。
3：溶解物质：指在液体中完全溶解的化学物质。
4：细菌：一种微小的生物体，具有独立的生命活动能力。
超滤管使用指南范文
超滤管使用指南范文超滤管（Ultrafiltration Membrane）是一种常用的膜分离技术，在水处理、食品饮料加工、药品制造和生物工程等领域得到广泛应用。
本文将介绍超滤管的基本原理、使用方法和注意事项，帮助用户正确使用超滤管，提高工作效率和产品质量。
一、超滤管的原理超滤管是一种纳米级别的膜分离技术，通过孔径大小在0.1-0.01微米之间的滤膜，将溶胶、胶体、胶束等微小颗粒从溶液中分离出来。
其工作原理基于渗透压差，通过应用压力使溶液经过膜表面，小分子通过膜孔径进入膜孔内，而大分子则被截留在膜表面上，实现了溶质的高效分离。
二、超滤管的使用方法1.准备工作：首先需要确保超滤装置安装完毕并处于正常工作状态。
安装超滤管时，需要注意将膜孔面朝外，并确保管件连接牢固。
2.清洗超滤管：为了确保超滤管的使用寿命和过滤效果，首次使用前需要对超滤管进行初次清洗。
具体步骤如下：a.将超滤管放入清水中，浸泡10-20分钟。
b.将清水排出，然后使用清水进行冲洗。
冲洗至水清为止。
c.将超滤管放入含有10%氢氧化钠或漂白粉的溶液中，浸泡30-60分钟。
d.将溶液排出，再次使用清水进行冲洗，直至水清为止。
e.最后，使用85℃左右的蒸馏水进行冲洗，直至水中氧气减少。
3.使用超滤管：使用超滤管的具体步骤如下：a.将需要处理的溶液通过管道导入超滤管的供液端。
b.调节超滤装置的操作参数，包括进水压力、流量和温度等，根据实际情况进行调整。
c.打开超滤装置的开关，开始进行过滤操作。
d.监控溶液的浓缩情况，根据需要可以适时打开或关闭排液阀门，调整流速和浓缩效果。
e.当超滤管内的溶质浓度达到设定值时，停止过滤操作，关闭超滤装置的开关。
三、超滤管的注意事项1.避免超滤管受到高温或严重压力冲击，以免损坏膜孔结构。
2.定期进行超滤管的清洗和维护，以保证其工作正常和寿命长。
3.切勿使用有机溶剂和酸碱强腐蚀性液体进行超滤操作，以免损坏超滤膜。
4.在超滤操作过程中，应密切观察管道和连接处是否存在泄漏等情况，及时处理。
超滤离心管安全操作及保养规程
超滤离心管安全操作及保养规程前言超滤离心管是一种广泛应用于生物化学、分子生物学、生物医学等领域的实验设备。
合理的使用操作和正确的保养可以延长超滤离心管寿命，更重要的是确保操作安全。
为了保证安全，本文将介绍超滤离心管的安全操作及保养规程。
安全操作1. 操作前的准备在进行使用超滤离心管之前，需要进行以下步骤：1.确认超滤离心管的型号和能力。
2.检查超滤离心管的外观是否完好无损。
3.确认离心机的最大离心力是否大于超滤离心管的离心力。
4.确保超滤离心管的使用温度和pH值均在其能够承受的范围内。
5.确认使用的离心机是否符合超滤离心管的需求。
2. 离心使用注意事项在使用超滤离心管时需要注意以下事项：1.超滤离心管只能使用一次，不能重复使用。
2.超滤离心管的最大离心力不应超过离心机的最大离心力。
3.在装载试样时，应轻拿轻放，避免伤害其材质。
4.离心时应保持超滤离心管平衡，避免倾倒。
5.离心前要检查离心机和超滤离心管的装载是否正确。
6.离心完成后要等待超滤离心管完全停止旋转后再取出。
3. 清洗离心管在使用完毕后，需要将超滤离心管进行清洗：1.在取出超滤离心管之前，先关闭离心机并等待超滤离心管停止旋转。
2.将超滤离心管取出后，用无菌的纯水进行清洗，避免与其它物品混淆。
3.清洗时应注意不要划伤离心管表面。
4.用纯水将超滤离心管内的试液完全冲洗干净。
5.用细长的枪控制洗涤水的方向避免水流冲击。
6.用吸水纸吸取离心管和枪中残留的水分后烘干。
保养规程1. 保持清洁超滤离心管的外观和内部需要保持清洁：1.每次使用后要进行清洗，以避免留存不洁物质破坏其实用寿命。
2.将超滤离心管放置在无泡动的水中浸泡片刻，用纯水进行多次重复清洗，待冲洗水无杂质后烘干。
3.使用的纯水源要消毒或使用级别较高的纯水。
2. 储存方式超滤离心管在储存时也需要注意，可以进行以下步骤：1.将超滤离心管存放在阴凉干燥处。
2.存储前应对离心管进行清洁和干燥，并在离心管口塞上纯棉垫。
超滤管使用指南
超滤管使用指南超滤管使用指南1.简介超滤管是一种常用的水处理设备，其通过滤膜对水中的杂质、微生物等进行分离和过滤，达到净化水质的目的。
本文将详细介绍超滤管的使用方法和注意事项。
2.安装2.1 准备工作在安装超滤管前，需要先确保以下几点：●确定超滤管的规格和型号，以满足实际需求；●检查管道系统是否符合超滤管的连接要求；●确保超滤管的安装位置距离供水源和出水口的距离合适。
2.2 安装步骤●将超滤管从包装中取出，检查是否有损坏；●根据超滤管连接口的类型（常见有螺纹、法兰等），选择合适的连接方式；●将超滤管连接到管道系统中，并确保连接紧固；●如果超滤管需要固定在支架上，确保支架稳固且超滤管固定牢固；●检查超滤管与管道系统的连接是否密封，排除漏水的可能性。
3.操作3.1 准备工作在启动超滤管之前，需要进行以下准备工作：●检查供水源的水质，确保水质符合超滤管的使用要求；●检查超滤管的滤膜是否干净、完好；●检查超滤管上是否有杂质、污垢。
3.2 启动操作步骤●打开供水源；●缓慢开启超滤管的进水阀门，观察水流情况；●确保水流稳定后，逐渐打开出水阀门；●根据需要，调节出水阀门的开度，控制出水流量。
4.清洗与维护4.1 清洗为保持超滤管的滤膜清洁，定期进行清洗是必要的。
具体清洗方式根据超滤管的型号和使用要求而定，一般有以下几种方式：●反冲洗：用清水倒灌超滤管，以冲洗掉滤膜上的污垢；●化学清洗：使用合适的清洗剂进行超滤管的化学清洗。
4.2 维护●定期检查超滤管的滤膜状况，如有破损或老化，及时更换；●定期清洗超滤管，保持滤膜的通透性；●定期检查管道系统的连接是否松动，如有需要，及时紧固。
附件：1.超滤管安装示意图2.超滤管清洗记录表法律名词及注释：1.水质：指水中所含的各种物质和微生物的性质及其数量。
2.滤膜：超滤管中的薄膜，用于过滤和分离水中的杂质。
3.反冲洗：一种通过向超滤管中注入逆流水来清洗滤膜的方法。
本文档涉及附件，请在相关章节参考。
超滤管的使用事项
超滤管使用的注意事项
超滤管分为0.5ml、4ml、15ml三种上样体积，并有3kd、10kd、30kd、50kd、100kd五种截留分子量。
可用于生物样品纯化、蛋白质浓缩、脱盐和缓冲液更换等。
具体操作使用的时候一定要注意几个点。
1、首先，要选择合适的超滤管，主要是选择多大的截留分子量。
这个要根据自己的实际情况，通常没有特别需要的话，截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3。
比如，目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、一般情况下，刚买来的超滤管是干燥的，在使用前要进行一定的预冷。
先要加入水量过膜的MilliQ水，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
操作的时候动作要轻。
3、不同离心机的转速有所不同，注意转速和加速度不要太快，否则直接对超滤膜就有损坏，在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、对超滤管要进行有序的处理，以实现重复利用的效果。
以下是简单的步骤：倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次。
然后在室温情况下，平衡超滤管加入0.2M的NaOH溶液。
离心10min，倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。
一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。
离心超滤管的使用方法
超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon—Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管.若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤（离心机预冷至4度)。
膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）.在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白.如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。
离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管.若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项⒈管理和存储⑴确保超滤管的包装袋完好无损，避免污染和损坏。
⑵将超滤管存放在干燥、清洁和通风良好的环境中，远离化学物质和高温。
⑶避免超滤管与尖锐物体接触，以免刺穿滤膜。
⑷在使用前，检查超滤管是否受到损坏，如有损坏请更换。
⒉准备工作⑴在使用前，确保不锈钢夹持器和橡胶密封圈的清洁和完好。
⑵检查超滤管连接接口的严密性，确保没有松动或漏水。
⒊操作步骤⑴使用前，将超滤管放入去离子水中洗涤10分钟，排除管道表面的杂质和微生物。
⑵将洗涤后的超滤管插入夹持器中，确保滤膜被夹持器均匀夹紧。
⑶连接进水管和出水管，打开进水阀门，将待过滤液缓慢注入超滤管，避免冲击和过量注入。
⑷当出水速度明显减慢时，可轻轻拧紧夹持器，增加滤液压力，促使更多的液体通过。
⑸当超滤管滤液流出完全停止时，关闭进水阀门，断开与出水管的连接。
⒋清洗和消毒⑴在使用后，将超滤管取出，并用去离子水彻底冲洗管道和滤膜，确保无残留。
⑵将超滤管浸泡在含有次氯酸钠等消毒液中，按指定时间进行消毒。
⑶清洗和消毒后，将超滤管晾干，完全干燥后存放。
注意事项:⒈使用过程中应注意个人防护措施，如佩戴手套和口罩，避免接触超滤管和滤液。
⒉避免将超滤管用于超过其规定范围的温度和压力条件下。
⒊不得使用尖锐物体直接接触或刮擦超滤管滤膜，以免引起损坏。
⒋严禁超滤管长时间接触有机溶剂和酸碱性溶液，以免损坏滤膜。
⒌当超滤管使用寿命结束或损坏时，应及时更换，以保证过滤效果和使用安全。
附件：⒈超滤管使用示意图（如有）⒉超滤管规格参数表（如有）法律名词及注释：⒈消毒液：指用于杀灭或去除超滤管表面附着的细菌、和其他微生物的化学药剂。
⒉次氯酸钠：一种常用的消毒剂，具有杀菌和消毒作用，常用于食品加工、医疗消毒等领域。
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
到底选择多大截留分子量比较合适呢？10kDa、 5kDa、还是30kDa？通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤（离心机预冷至4度）。
不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档，减小对膜的压力。
注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。
在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。
超滤管使用指南(二)
超滤管使用指南（二）引言概述：超滤管是一种常用的水处理设备，在家庭和工业领域都有广泛应用。
本文将介绍超滤管的使用指南，包括超滤管的基本原理、使用前的准备工作、使用方法和注意事项。
通过本文的指南，读者可以更好地了解超滤管的使用要点，以便正确有效地使用超滤管进行水处理。
正文：一、超滤管的基本原理1. 超滤管的过滤机制：了解超滤管的过滤机制，理解其通过微孔膜的排除分离作用来实现对悬浮固体和微生物的过滤。
2. 超滤管的材料和结构：介绍超滤管常用的材料，如聚酯、聚醚等，以及其结构特点，如空心纤维结构和多膜束结构。
二、使用前的准备工作1. 超滤管的安装和连接：指导用户正确安装超滤管，包括选择合适的连接方式和保证连接的牢固性。
2. 超滤管的清洗和消毒：介绍清洗和消毒超滤管的方法和步骤，确保超滤管在使用前处于良好的工作状态。
三、超滤管的使用方法1. 水质检测和处理前处理：强调在使用超滤管前进行水质检测，根据检测结果选择合适的前处理方法，如预过滤或化学处理等。
2. 超滤管的启动和操作：指导用户正确启动超滤管，并介绍超滤管的操作要点，如调节流量、监测压力等。
四、超滤管的注意事项1. 超滤管的维护和保养：提醒用户定期维护和保养超滤管，包括清洗滤膜、更换滤芯等。
2. 超滤管的故障排除：列举常见的超滤管故障和排除方法，帮助用户快速解决问题。
五、总结通过本文的介绍，读者可以得到关于超滤管使用的全面指南。
通过正确了解超滤管的基本原理、进行必要的准备工作、正确使用超滤管并注意事项，用户可以更好地应用超滤管进行水处理，保证水质的安全和纯净。
在实际使用过程中，用户应根据不同情况和需求，灵活运用超滤管的指南和方法，以取得更好的效果。
超滤管使用方法
超滤管使用方法超滤管是一种常用的分离和浓缩技术，广泛应用于生物医药、食品安全和环境保护等领域。
本文将介绍超滤管的使用方法，帮助读者了解如何正确有效地使用超滤管。
一、超滤管的基本原理超滤管是利用超滤膜的分离性能实现物质的分离和浓缩。
超滤膜具有一定的孔径大小，能够筛选分离溶液中的大分子物质，如蛋白质、细胞等，并保留小分子物质，如盐、小分子有机物等。
超滤膜分为不同的孔径，常见的有10KD、30KD、50KD等规格。
二、超滤管的使用步骤1. 准备工作：首先，检查超滤管的外观是否完好，无破损或污染。
准备好实验所需的其他设备和试剂，并确保操作环境整洁。
2. 连接超滤管：将超滤管的接口与抽吸装置连接，确保连接紧密。
注意检查连接处是否有泄漏。
3. 预处理：首次使用超滤管前，需要进行预处理以去除可能存在的污染物。
将超滤管浸泡在去离子水中，反复冲洗2-3次，直至出水无异味和杂质。
4. 样品处理：将待处理的溶液缓慢注入超滤管中，避免超过超滤管容量的80%。
缓慢注入可以避免溶液在注入过程中产生过大的压力，导致超滤管破裂。
5. 超滤操作：打开抽吸装置，开始超滤操作。
超滤过程中，调整抽吸速度以控制超滤的效果。
注意观察超滤膜的状况，如有堵塞或破裂应及时停止操作。
6. 收集样品：当溶液经过超滤膜后，目标物质会被截留在超滤膜上，小分子物质会通过超滤膜排出。
根据需要，将截留的物质收集起来，可以用洗涤液冲洗超滤膜来提高截留物的回收率。
7. 清洗超滤管：超滤操作完成后，关闭抽吸装置，将超滤管取出，用去离子水反复冲洗超滤膜，去除残留的样品和污染物。
8. 储存超滤管：超滤管干燥后，放置在干燥、清洁的容器中，避免阳光直射和污染。
三、超滤管的注意事项1. 使用前检查超滤管的完整性和清洁度，确保无破损和污染。
2. 缓慢注入样品，避免超过超滤管容量的80%。
3. 调整抽吸速度，以控制超滤的效果，避免超滤膜的堵塞和破裂。
4. 注意观察超滤膜的状况，如有异常应及时停止操作。
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管〔MWCO10kD〕.也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定.可重复使用,使用一次就扔掉太浪费.以下是个人总结的使用方法和注意事项.1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15〔10kD〕.到底选择多大截留分子量比较合适呢？10kDa、 5kDa、还是30kDa？通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管.若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管.认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有.2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟.然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准.操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷.3、平衡.质量和重心二者都要达到平衡.注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜.开始离心超滤〔离心机预冷至4度〕.不同离心机的转速 rpm换算成g 之后,有所不同.具体可参阅附件里的说明书.离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力.注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整〔角转离心机的情况是膜与轴垂直〕.在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命.4、当浓缩到剩下1ml时,[取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白.如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤.要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测],继续加入剩下的蛋白液浓缩〔在冰上操作,防止蛋白受热〕,直到所有浓缩液都加完为止.离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管.若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止.5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer〔经0.22um超滤膜超滤〕,再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况.按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的.6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头〔200ul〕取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完.管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜.最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干.7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤.8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,[若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲]然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管.再离心10min.倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯<1或2L>中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度.50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用 MilliQ水洗干净.9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用.一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏.实验室常用储存液的配置参数1．30%丙烯酰胺溶液[配制方法]将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml 的水中.加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml.用Nalgene滤器〔0.45μm 孔径〕过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温.[注意]丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性.称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具.可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料.一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂〔MB-1Mallinckrodt〕,搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之.在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸.2．40%丙烯酰胺[配制方法]把380g丙烯酰胺〔DNA测序级〕和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中.继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L.[注意]见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定.3．放线菌素D溶液[配制方法]把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1：10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值.放线菌素D〔分子量为1255〕纯品在水溶液中的摩尔消化系数为 21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃.[注意]放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤.药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂.只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用.4．0.1mol/L腺苷三磷酸〔ATP〕溶液[配制方法]在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃5．10mol/L乙酸酰溶液[配制方法]把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌. 6．10%过硫酸铵溶液[配制方法]把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周.7．BCIP溶液[配制方法]把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐〔BCIP〕溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8．2×BES缓冲盐溶液[配制方法]用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双〔2-羟乙基〕-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于 -20℃.9．1mol/L CaCl2溶液[配制方法]在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃.[注意]制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器〔0.45μm孔径〕过滤除菌,然后骤冷至0℃.10．2.5mol/L CaCl2溶液[配制方法]在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.11．1mol/L二硫苏糖醇〔DTT〕溶液[配制方法]用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液〔pH5.2〕溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃. [注意]DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理.12．脱氧核苷三磷酸〔dNTP〕溶液[配制方法]把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0〔用pH试纸检测〕,把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃.13．0.5mol/l EDTA<pH8.0>溶液[配制方法]在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠〔EDTA-Na?2H2O〕,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0〔约需20g NaOH颗粒〕然后定容至1L,分装后高压灭菌备用.[注意]EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解. 14．溴化乙锭〔10mg/ml溶液〕[配制方法]在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温.[注意]小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩.15．2×HEPES缓冲盐溶液[配制方法]用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml.用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃. 16．IPTG溶液[配制方法]IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷〔分子量为238.3〕,在8ml 蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.17．1mol/L乙酸镁溶液[配制方法]在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌. 18．1mol/L MgCl2溶液[配制方法]在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用.[注意]MgCl2极易潮解,应选购小瓶〔如100g〕试剂,启用新瓶后勿长期存放. 19．β-巯基乙醇〔BME〕溶液[配制方法]一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃.[注意]BME或含有BME的溶液不能高压处理.20．NBT溶液[配制方法]把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.21．酚/氯仿溶液[配制方法]把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl<pH7.6>抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/lTris?HCl<pH7.6>液层,保存于4℃.[注意]酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套与防护镜,穿防护服.所有操作均应在化学通风橱中进行.与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇.22．10mmol/L苯甲基磺酰氟〔PMSF〕溶液[配制方法]用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml〔10mmol/L〕,分装成小份贮存于-20℃.如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液〔100mmol/L〕.[注意]PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛与皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险.一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之.凡被 PMSF 污染的衣物应予丢弃.PMSF在水溶液中不稳定.应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中.PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃.pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性〔pH>8.6〕并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃.23．磷酸盐缓冲溶液〔PBS〕溶液[配制方法]在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2<1034×105Pa>高压下蒸气灭菌20min.保存于室温.24．1mol/L乙酸钾〔pH7.5〕溶液[配制方法]将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中,用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后加入纯水定容到1L,保存于-20℃.25．乙酸钾溶液〔用于碱裂解〕[配制方法]在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液.26．3mol/L乙酸钠〔pH5.2和pH7.0〕溶液[配制方法]在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2或用稀乙酸调节pH值至7.0,加水定容到1L,分装后高压灭菌.27．5mol/L NaCl溶液[配制方法]在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L,分装后高压灭菌. 28．10%十二烷基硫酸钠〔SDS〕溶液[配制方法]在900ml水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶,加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分装备用.[注意]SDS的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无须灭菌.29．20×SSC溶液[配制方法]在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH溶液调节pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌.30．20×SSPE溶液[配制方法]在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4?H2O和7.4g EDTA,用NaOH溶液调节pH值至7.4〔约需6.5ml 10ml/L NaOH〕,加水定容至1L,分装后高压灭菌.31．100%三氯乙酸溶液[配制方法]在装有500g TCA的瓶中加入227ml水,形成的溶液含有100%〔M/V〕TCA.32．1mol/L Tris溶液[配制方法]在800ml水中溶解121.91g Tris碱,加入浓HCl调节pH值至所需值.应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值,加水定容至1L,分装后高压灭菌.[注意]如1mol/L溶液呈现黄色,应予丢弃并置备质量更好的Tris.尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍可向大多数厂商购得合适的电极.Tris溶液的pH值因温度而异,温度每升高1℃,pH值大约降低0.03个单位.例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6.33．Tris缓冲盐溶液〔TBS〕〔25mmol/l Tris〕[配制方法]在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱,加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4,用蒸馏水定容至1L,分装后在151bf/in2<1.034×105Pa>高压下蒸汽灭菌20min,于室温保存.<BR>34．X-gal溶液<BR> [配制方法]X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚 -β-D半乳糖苷.用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液.保存于一玻璃管或聚丙烯管中,装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃.X-gal溶液无须过滤除菌.。
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超滤管使用注意事项
1、选择合适的超滤管。
通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD 左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。
操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤（离心机预冷至4度）。
不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。
离心机的加速度调至最低档，减小对膜的压力。
注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理。
膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。
在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。
离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。
若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。
按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer 的目的。
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