03：Waters2695高效液相色谱仪操作规程

Waters2695高效液相色谱仪操作规程

使用Waters2695高效液相色谱仪前，请认真阅读使用说明，熟悉仪器的使用方法。

一、自检

开主机和二极管阵列检测器（PADA）（或荧光检测器FD），仪器进入自检阶段。约2分钟后PADA两个灯都亮，正常；主机自检所需时间较长，自检完后显示idle。

二、配置系统

1．项目

管理数据（相当于新建文件夹）

后将出现在运行样品中）。

2．系统

三、运行样品

在采集数据项目栏中选定项目（即将此次实验数据选择存放位置）→确定

出现运行样品表：分为单一与样品组进样。

1．单一进样

样体积，运行时间）

态。

如没有可直接选用的方法组，可以在左栏通过“创建方法组”来设定使用的仪器方法（即对配置系统一步选定的主机和检测器进行参数设置）：创建方法组→选择仪器方法（新建→编辑仪器方法，包括主机和选定的检测器的参数的设置→设置好选另存为保存此仪器方法→关闭）此时上述编辑的仪器方法出现在列表中→下一步→出现“缺省方法项”对话框，点下一步→出现“命名方法组”，设置方法名（与刚才的仪器方法名相同）对话框→完成。返回“运行样品”对话框，选方法组和仪器方法。

Notice:

主机W2695的参数配置主要是针头深度设置，脱气设置，流量(4000psi)，泵模式（等度和梯度），柱温（划√）。

检测器W2699的参数配置主要是输入开始波长和结束波长（200-700nm）。

检测器W2475的参数配置：设定发射波长（λem）、激发波长（λex），增益（默认值为10太大，改为1即可）。

右键→定制通道。对于PADA能看到光谱图和色谱图；但是对于FD没有光谱图，在“运行样品”的右栏只出现一个图谱。

FD回零不好时按面板上的“auto zero”（FD的其余操作可以通过软件调节）

与样品组进样界面相比，多了一个进样按钮（等监视基线平稳后，按中断按钮，再按此按钮即进样分析）。

2．样品组进样

左栏可以设置有关样品的信息（每一栏的设置为下拉式菜单），右栏出图，左下栏给出仪器信息，最下栏显示仪器状态。

与单一进样相比少了进样按钮。代替进样按钮的是“运行”按钮。但是如果没有现成的方法组可用，在选“样品”进行样品组分析前也要先用“单一”分析面板上的“创建方法组”来编辑仪器方法。

（运行过程中可以点中断按钮，也可在编辑下拉菜单中选“改变正在测试的样品”）→运行完后点文件中的“退出”。

四、数据处理

都可以在“浏览项目”中完成。

点开“浏览项目”，选定要要浏览的项目，确定后进入的界面中有如下内容：样品组、进样、通道、方法、结果组、结果等。

1．PDA数据处理

点“通道”→双击要处理的原始数据（点查看图标）→进入查看主窗口（此时点窗口中的工具栏可以看到等高图或3D图）→提取光谱图，找到最大吸收波长→提取色谱图→点“处理方法向导”图标→新建处理方法→

峰1、峰2→积分区域（选定要积分的峰）→给出条件剔除不要的峰→→

PDA光谱对照→处理方法名→完成（然后又出现主窗口，处理结果自动给出）→点“方法组”图标，选好后点“文件”下的“另存为”→“方法组”，设定即可。至此选好处理方法。

，右键选处理→选好方法组（上面设定好的）

A-t）（界面没出现时点“主窗口”）注：通道无论什么时候给出的都是未处理数据。

2．FD数据处理

不用提取光谱图一步，直接点处理方法向导（同PAD）

点“处理方法向导”图标→新建处理方法→在新方法（方法类型中选LC）→其他同上。

编制：审批：日期：