植物生理学实验：光合作用、呼吸、蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400光合仪的日常检查和测量过程
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
2、预热后检查
2.5 检查匹配阀
检查匹配阀是否工作； 应该在每天开始测量前，进行一次匹配。当全天都在 相同的CO2浓度下做实验，一般每20到30分钟就应当 匹配一次。如果做实验时，每次测量都要改变CO2浓
度，那么每改变一次CO2浓度，就需要进行一次匹配。
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
2、预热后检查
2.2 检查CO2和H2O IRGAs零点
将两个化学管都旋至完全Scrub位置，完全闭合叶室； 如果CO2读数在±5微摩尔以内，H2O在±0.5毫摩尔每摩
等待大约5分钟，参比室和样品室CO2和H2O会降到零附近。
尔以内，说明零点正常，不需要校准。如果它们超过这个
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
1、预热期间检查
1.3 检查大气压传感器
检查g行Prss_kPa值是否合理。 一般在海平面大气压值约100kPa ，海拔300m大气压 为 97 kPa ，海拔1500约83 kPa且随天气变化，大气
压可能会有1到2 kPa的变化。
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
LI-6400/XT光合仪日常检查和校准
报告人：贾子毅
北京力高泰科技有限公司 基因有限公司
主要内容
一、日常检查
二、校准（Calib Menu）
三、测量过程
一、LI-6400/XT光合仪日常检查
1、预热期间检查 2、预热后检查
日常检查的必要性——依据计算公式
蒸腾速率(E) 流速(Flow)、参比室和样品室H2O摩尔比、叶面积
2、控制环境条件的测量步骤
手动测量
实验一 光合作用测定实验报告
实验一:光合作用测定实验报告一、实验目的了解和掌握LICOR6400便携式光合蒸腾仪测定光合速率的使用方法二、实验原理植物的净光合速率可以用单位时间内单位面积氧气的生成量、单位时间内单位面积二氧化碳的消耗量、单位时间内单位叶面积干物质的生成量来表示。
该仪器采用气体交换法来测量植物光合作用，通过测量流经叶室的空气浓度的变化来计算叶室内植物的光合速率。
中CO2三、实验材料、设备1.实验材料大小合适的小麦活体叶片2.设备和仪器LICOR6400便携式光合蒸腾仪四、操作步骤1.开机预热将LICOR6400光合仪打开预热30分钟，目的使LICOR6400光合仪性能更加稳定。
分析器调零2.CO2按照显示器中的提示进行操作，待数值稳定后按确认键确认分析器调满3.CO2标准气接出来的管子，接上“IN”并确认，把管子接有把已知浓度的CO2分析器校准界面下按照显示器上的提示进行调瓶子的的那头放到室外。
然后在CO2满操作，输入气源浓度360ppm。
4.选择开路测量方式，把安装叶室手柄上的两个管子分别与仪器面板上对应的接口相连，然后把叶室手柄上的传感器电缆插头插到面板上的“手柄接线”插座上并拧紧。
选择手动测量方法，按确认键。
5.记录实验数据五、结果处理1.实验结果2.实验结果计算与分析（1）小麦净光合速率的计算去掉一个最大值2.93（umol/ m2﹒s）一个最小值-0.25（umol/ m2﹒s）后计算Pn=(0.46+0.48+0.76)/3=0.567（umol/ m2﹒s）（2）实验结果分析由于当天的环境条件不稳定且阴天，利用的人工光源光强度较弱，所以测定的结果不具有可靠性。
出现了一个最大值表明光合速率旺盛，出现了一个负值表明小麦的光合作用小于其呼吸作用。
影响其光合作用主要的因素有①光照②温度浓度③大气湿度④CO2六、注意事项1.本仪器使用前必须预热，以保证仪器性能的稳定性。
2.本仪器在每次开机测量时，都要先对CO2分析器进行调零，调零工作在测定一段时间后也要进行。
LI-6400便携式光合仪操作使用规程
LI-6400便携式光合仪操作使用规程仪器使用范围：植物单叶或群体光合速度、蒸腾速率、气孔导度、光饱和点和补偿点、二氧化碳饱和点和补偿点等。
1、开机：打开位于主机右侧的电源开关。
仪器在启动后将显示“Is the IRGA connected? (Y/N)”选择Y2、叶室配置选择：选择Factory default（常规）或他叶室（6400-02B红蓝光源），然后回车自动进主菜单。
3、手动测量：按F4“New Measurements”菜单进入测量菜单。
①设定文件：按F1“Open Logfile”建立新文件。
回车后输入自己设定的文件名。
当显示屏出现提示“Enter Remark”时，输入需要的标记(英文，用于标记样地、植物种类、样品号等)。
继续回车，文件设置结束。
在夹入叶片之前如果ΔCO2大于0.5或小于-0.5，按F5“Match”进行匹配。
②测量：选取需要测量的植物叶片(3-5次重复)。
测量时间尽量选择在晴朗的上午10：00-11：30间最好。
③向Bypass方向拧紧碱石灰管和干燥管上端的螺母。
夹上叶片(尽量让叶片充满整个叶室空间，面积为6cm2，小叶片需测量面积，并在测量菜单状态下按数字“3”后按F1来修改叶面积值，关闭叶室，旋紧固定螺丝至适度位置。
④等待C行PHOTO读数稳定（小数点后最后一位数字的波动在2左右）后即可记录 (按F1“LOG”按钮或者按分析仪手柄上的黑色按钮2秒即可记录一组数据。
⑤换叶片进行下一次测量。
重复②--④步骤。
4、自动测量与环境条件控制LI-6400可以控制的环境条件包括温度、CO2浓度、光强等。
一般而言，需要控制环境条件的实验有两种情况。
一种是环境变化剧烈，无法准确进行同等环境条件的测量。
另一种情况是进行光曲线和ACI曲线测量。
环境控制只需要在手动测量时，按数字来切换菜单。
具体各菜单情况如下图所示。
温度控制：按数字2，按F4控制温度(输入需要的温度回车即可，注意温度控制范围是环境温度的±6℃)。
LI-6400基本测量原理介绍
6400-40 荧光叶室
Gene Company Limited
Agricultural & Environmental Division
荧光仪测量参数
最大荧光（Fm）
光下最大荧光（Fm’）
初始荧光（Fo）
光下最小荧光（Fo’）
LI-6400基本测量原理介绍
基因有限公司 北京力高泰科技有限公司
2006年5月6日 成都
内容介绍
光合作用测量方法 红外线气体分析法(IRGA) LI-6400 气体交换测量系统 LI-6400气体交换测量系统使用功能与
应用
光量子
CO2
H2O
(CH2O)
O2
酶
Gene Company Limited
● 叶温(TL)
● 气温 （Ta）
● 相对空气湿度(RH) ● 饱和蒸气压亏缺（VPD）
Gene Company Limited
Agricultural & Environmental Division
LI-6400的使用功能2
2、计算参数包括：
● 表观量子效率(AQY) ● 羧化效率(CE)
● 气孔限制值(Ls)
genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisionco2co2辐射源滤光片检测器信号输出genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisionco2co2cogenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision光强度光强度叶片温度叶片温度coco22水蒸气水蒸气不仅要测量这些因子而且要控制这些因子不仅要测量这些因子而且要控制这些因子genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision净coco22流量流量同化作用或呼吸作用同化作用或呼吸作用气孔导度气孔导度g胞间coco22浓度浓度cici电子传递电子传递植物胁迫指示植物胁迫指示genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisionlili64006400genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision红外气体分析的原理红外气体分析的原理是是lilicorcor公司生产的第三代气体交换测量系统公司生产的第三代气体交换测量系统分析器位于传感器头部分析器位于传感器头部具有两组完全独立的具有两组完全独立的非扩散性的非扩散性的开路的红外开路的红外分析器分析器同时测量同时测量coco22和和hh22oo的绝对浓度的绝对浓度可连续测量参比室和样品室的可连续测量参比室和样品室的coco22和和hh22oo绝对浓绝对浓度度达到实时测量叶片的动态指标达到实时测量叶片的动态指标lili64006400genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision蒸腾作用蒸腾作用和光合作用和光合作用改变了叶室空气中水改变了叶室空气中水蒸气和蒸气和co
植物叶片光合蒸腾速率气孔导度与呼吸速率的测定
1P ： 小 区 号 ， 用 户 输 入 ； 按
设置菜单3
1 P:01 R:01 FREE RECORDS nnn
“1”键可改变，输入范围01-89 R：记录号，如改变小区号， 记录号重新设置为01；
按“Y”键仪器进入预热状态， 屏幕显示:
FREE RECORDS 器剩余存储数量。
F
光 源
气 室
滤检
光测
整
片器
流
显 示 屏
放
大
2. 气路系统工作原理
IRGA只能进行CO2浓度和水蒸气浓度的测定， 不能直接测定植物叶片的光合参数。要测定光合参 数必须与同化室组成一定的气路系统。
常用的气路系统主要有：
（1）密闭式气路系统 （2）开放式气路系统
（1）密闭式气路系统
公式：Pn=△C/△t×V/S
SET PLC：选择叶室 1:BROAD：标准叶室 2:UNIVERSAL：通用型叶室
设置菜单1 设置菜单2
1 REC: M 2 INT: 0 FLO:300
1REC： 记 录 类 型 ；A 自 动 记 录 ; M手动记录。按“1”键在A和M间 转换。按“1”键选择M。 2INT：自动记录时间间隔；M记
nnn：存储
WARM UP DELAY TPS TEMP.= 40
完显成示预“热测后定(菜55单)，”C+:/参-nn比nC分O析2浓气度与，参单比位气pCpOm2;浓度差;
Q:光量子通量密度，单位μmol·m-2·s-1
C nnnn +/-nnn Q nnnn H:参比水蒸气压，单位毫巴(0.0~75.0)
低氧气体（2～3％O2，360ppmCO2） 与正常空气（21％O2，360ppmCO2） 6.控制温度下光合速率的测定
li-6400光合作用测定仪的简单操作方法
实验二水分对植物的影响附录Ⅰ CM-3000 叶绿素测定仪的使用方法(1)按［On/Off］打开仪器，检查电池是否可用。
(2)准备。
首先要保证光源，最好是自然光源，因为叶绿素测定仪仅对700~840nm的光敏感。
(3)调节仪表前方一个带白点（聚四氟乙烯）的黑色盒子垂直于太阳光，同时还要保证植物叶片和镜头所在线与太阳光线平行。
(4)测量。
保持目标叶片垂直于太阳光线，按动手柄上的按钮，进行记录。
尽管该仪器可以进行数据保存，但由于不能设定文件夹，只能通过记录号来进行数据管理，所以必须在记录本上记录某一样品的测量记录号；另外，测量时一定要有一个一致的背景，可以用手或黑色背景。
尽量不要离体测量。
错误结果可用［Clear］删除，重新记录。
(5)关闭仪器。
(6)数据导出。
安装CM1000软件，用数据线将仪器和计算机连接，打开软件，开始下载数据。
(7)将数据在Excel或SPSS中打开，进行统计分析，做出统计图，分析结果。
附录Ⅱ LI-3000叶面积仪操作方法(1)按［On］打开仪器(2)建立文件。
按［FILE］建立一个文件，文件名将按顺序号自动指定，要求ENTER REMARK输入标记，用来标记地点或样地，然后进行测量。
字母的输入方法：如果希望打入上档字符，首先按↑，然后按字母所在按钮即可输入该字符；如果下档字符则按↓，再按字符所在按钮。
(3)测量。
用手指按住扫描头上部的把手，把扫描头上部抬起来，并把叶片夹在扫描头上下部中间，利用左手的拇指和无名指夹住叶片的叶柄处，同时无名指和食指夹住长度编码索一同匀速拉动，直到完全抽出叶片。
测量后可以按［STORE X］来存储。
抽动速度不能高于1 m/s，否则将显示错误信息，错误结果可用［CLEAR X］键来删除。
拉动编码索时要保证编码索水平，测量过程中不要来回拉动；当测量完成时要缓慢释放编码索，不要猛拉猛放。
(4)如果要测量一株植物所有叶面积的累计值（Y行），测量一片叶片就应该按［ADD］按钮一次来进行添加；如果按“SUB”按钮，则把最后一个数值从累加值中删去。
植物生理学实验-光合、呼吸速率、荧光参数测定
.
1
实验五. 植物叶片光合、蒸腾与呼吸速率的测定
一、概述 二、红外线气体分析仪（IRGA）工作原理 三、TPS-2光合作用测定系统操作方法
.
2
一、概 述
（一）意义
●光合作用是唯一能把太阳能转化为稳定的化 学能贮藏在有机物中的一个化学过程，是农 作物产量形成的决定性因素。
按“Y”键显示 正确不修改)
1P：小区号，用户输入；按“1”
设置菜单3
1 P:01 R:01 FREE RECORDS nnn
联体测定
.
5
二、红外线气体分析仪(IRGA)
工作原理
.
6
1、原理
由异原子组成的气体分子吸收红外光。 红外光经过CO2气体分子时被气体分子吸收， 透过的红外线能量减少，被吸收的红外光能量 的多少与该气体的吸收系数（K），气体浓度 （C）和气层的厚度（L）有关，并服从朗伯-比 尔定律，可用下式表示：
原则上可以测定任一反应物的消耗速率或产
物的生成速率来表示光合速率。
测定方法：CO2的吸收
O2的释放
有机物的积累
.
4
1、氧气的释放 氧电极（实验20） 离体测定
2、干物质的积累 半叶法（实验21） 离体测定 群体光合能力 离体测定
3、CO2的吸收测定光合速率
①化学滴定法, 主要测定呼吸（实验22） ②pH法（已经淘汰） ③红外线气体分析仪(IRGA)法
.
20
（二）TPS-2光合系统操作步骤
开机显示主菜单
1REC 2CAL 3DMP 4CLR 5CLK 6DIAG
按“1”进入 测定模式
浙江大学植物生理学实验：光合作用、呼吸、蒸腾和气孔导度(LI-6400)测定方法
2000
50
100
150
200
Photosynthetic photon flux (μ mol photon m-2 s-1)
Photosynthetic photon flux (μ mol photon m-2 s-1 )
4
Photosynthetic rate (μ mol CO2 m-2 s-1 )
（五）数据存取：
12、数据保存和取出。采样完后按１，Close file,按F5，end进入SLEEP（同一班只需一个 file，不同的组可以用<add mark>区分)。与电 脑连接，解除SLEEP，进入F5(Utility Manu) 选择File exchange mode。打开电脑winPX for 6400,在LI-6400/User下把自己要的测定文件拖 入专设目录。在EXCEL下选择所有文件在文 本导向下，选择“，”打开。
数据所代表的中文意义。
Ftime——持续时间(s) Photo——光合速率（μmol.m-2s-1） Cond——气孔导度（mol H2Om-2s-1） Ci——胞间CO2浓度（μl.L-1）
Trmmol——蒸腾速率（mmol.m-2s-1） VpdL——水气压差（mg/L）
Area——叶面积（cm2） BLCond——界面层导度 Tleaf——叶温（℃） StmRat——气孔比率 Tair——气温（℃） TBlk——参比室（℃） CO2S——叶室CO2（μl.L-1）
6CO2+6H2O
6(CH2O)+6O2
1、测干重——改良半叶法：同面积光暗叶片重量差。
三氯乙酸 TCA
暗 中
2、测放O2 ——氧电极法。气相和液相
LI-6400光合作用仪
打开已有文件名：
对于一个已经存在的文件名，可以在OpenLogFile 下直接用下箭头查 找，确定，直接选中，回车，界面出现如下右图所示的提示，提醒用户， 此文件名已经存在，请问有三种选择，O、A、C；
O为Overwrite，即将此文件名下以前记录的数据全部覆盖掉，这种方 式会将之前保存在该文件名下的数据全部丢失，所以一般很少选择； A为Append，即追加，即在该文件名下已有的数据后面继续追加新的 数据记录，这是最常用的选择；
C为Cancel，即取消使用这个文件名，重新建立一个文件名
5.进行测量
预热期间的检查
1）检查温度
检查h行三个温度值Tblock, Tair和 Tleaf，是否合理，且彼此相差应该 在1℃以内； 叶温热电偶的位置是否正确，直接测量叶片温度时，叶温热电偶的结 点位置应高于叶室垫圈约1mm，保证夹叶片时能与叶片充分接触；如果 使用能量平衡方法测量叶片温度，则叶温热电偶的结点位置应低于叶室 垫圈1mm，确保夹叶片时，接触不到叶片。
仪器硬件介绍
CF卡、无线网卡插槽
主机
连接线
分析器
主机
化 学 药 品 管 端 管 线 连 接 端
2.LI-6400XT光合仪测量基本原理
光合作用 光合作用（ Photosynthesis ），即光能合成作用，是 植物、藻类和某些细菌，在可见光的照射下，利用光合色 素，将二氧化碳和水转化为有机物，并释放出氧气的生化 过程。 光合作用是一系列复杂的代谢反应的总和，是生物界 赖以生存的基础，也是地球碳氧循环的重要媒介。
样品测量
（1）打开叶室，夹好测量的样品
（2）按1, F1（Open LogFile）, 选择将数据存入的位置（主 机 or CF卡），建立一个文件，enter ，输入一个remark ， enter （3）等待a行参数稳定，b 行ΔCO2值波动 < 0.2 μmol mol-1， Photo 参数稳定在小数点之后一位； c行参数在正常范围内 （0 < Cond < 1、Ci > 0、Tr > 0）
LI-6400系列便携式光合作用测量系统
LI-6400系列便携式光合作用测量系统由美国LI-COR公司生产,是国内外研究植物光合生理生态的权威仪器，广泛应用于植物生理学、农学、林学、生态学等领域的研究中。
下面以LI-6400P型便携式光合作用测量系统为例对其功能、构造、使用等内容作一简单介绍。
一、功能LI-6400系列便携式光合作用测量系统最基本的功能是研究植物光合作用，同时还具有呼吸、蒸腾、荧光等多项测量功能。
可以测量的光合与水分生理指标主要有：净光合（呼吸）速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间CO2浓度等。
二、构造LI-6400P型便携式光合作用测量系统主要由IRGA分析器即红外线气体分析器、操作控制台和两者之间的连接电缆三部分组成。
红外线气体分析器包括标准叶室、有效光合辐射传感器、叶片温度热电偶、发光二极管（LED）红/蓝光源、H2O/CO2分析器等构件。
其中标准叶室为长方形，长宽分别为3和2cm，也有其他规格叶室可替换。
叶室上面装有外置光量子传感器，下面可根据需要连接野外用支架。
操作控制台主要由系统控制器组成，系统控制器硬件配置为512K RAM（随机存储器）,6M硬盘，4行/每行40字符的显示屏，66键的键盘；软件为LI-6400的操作系统，操作系统有多个版本,本机为4.03版本。
另外，控制台电池仓内装有两节可充电蓄电池，边上装有一个水分干燥管,内装硅胶用于吸收水分、一个碱石灰管,用于吸收CO2,及一个CO2注入系统，底下有支架。
连接电缆由25针和9针RS-232C线缆组成。
三、使用LI-6400P型便携式光合作用测量系统的使用大致包括仪器连接、程序加载、仪器校正、数据测量、数据传输、关闭仪器等六个步骤，下面分别来做一个介绍。
第一个步骤：仪器连接测量之前首先要看一看仪器是否连接好，要将仪器连接好后再进入后面的步骤。
仪器的连接主要包括连接电缆与操作控制台之间、连接电缆与IRGA之间的连接，但这些步骤最好由对仪器比较熟悉的人员来完成，一般操作人员最好不随意拆卸和连接。
LI-6400光合仪说明书
前 言1996年以来，在不同时期，公司多次组织技术支持工程师和维修工程师撰写过多个版本的LI-6400系列光合仪的使用手册。
这些使用手册为用户尽快掌握LI-6400系列光合仪的基本原理、操作过程、维护保养和常见问题等发挥了积极的作用，但均存在不同程度的内容偏多、编排不够系统等缺点。
因此，我们在多年培训工作的基础上，结合用户的使用经验和实验需求，对这些使用手册进行了重新整合和优化，进一步提高了使用手册前后的连贯性和一致性。
该使用手册的主要内容包括光合作用测量的理论基础、LI-6400系列光合仪的发展、硬件介绍、使用方法、应用实例、维护和保养等。
对于初学者，该使用手册将缩短其学习时间，达到事半功倍的效果；对于熟练掌握者，该使用手册将进一步提高其应用水平。
第一章光合作用测量的理论基础绿色植物吸收阳光的能量，同化CO2和水，制造有机物并释放氧的过程，称为光合作用。
光合作用所产生的有机物质主要是糖类，贮藏着能量。
一、光合作用的重要性1、把无机物转变成有机物绿色植物合成的有机物质，可直接或间接作为人类或全部动物界的食物（如粮、油、糖等和牧草饲料、鱼饵等），也可以作为某些工业的原料（如棉、麻、橡胶、糖等）。
换句话说，今天人类所吃的食物和某些工业原料，都是直接或间接地来自光合作用。
2、蓄积太阳能光合作用形成的有机物所贮藏的化学能，除了供植物本身和全部异养生物之用外，更重要的可供人类营养和活动的能量来源。
人类所利用的能源，如煤炭、天然气、木材等等，都是现在或过去的植物通过光合作用形成的。
因此，光合作用是今天能量的主要来源。
3、环境保护从清除空气中过多的CO2和补充消耗掉O2的角度来衡量，绿色植物被认为是一个自动的空气净化器。
光合作用的研究在理论上和实践上都具有重要的意义。
光合作用是地球上普遍存在而又特有的一个过程，是其它生物生存的基础，因此光合作用的研究有助于生物科学中其它课题的阐明。
由此可见，光合作用是农业生产中技术措施的核心，也是植物生理学中的主攻方向之一，又是自然科学中的一个重要研究项目。
植物气孔导度的测量方式及测量仪器
气孔是植物进行体内外气体交换的主要场所。
水蒸汽、CO 2、O 2都要共用气孔这个通道，对应植物的蒸腾、光合、呼吸过程。
植物体内外的气体交换速率与植物体与气体的接触面积成正比。
气孔结构大大地增加了叶细胞与气体的接触面。
气孔张开时一般长约7～30µm ，宽约1～6µm 。
而进出气孔的CO 2和H 2O 分子的直径分别约为0.46nm 和0.54nm ，因而气体交换畅通。
气孔越密集，则有效面积就越大，气体交换速率就越快。
植物通过气孔的开闭来控制气体交换速率，直接影响蒸腾、光合、呼吸等过程。
由于与植物体的气体交换，气孔内壁的气体与外界大气存在浓度差，气孔内壁的气体经扩散与大气进行交换，交换速率E 与浓度差△C 成正比写成 leafR C E ∆= 其中leaf R 称为叶片的扩散阻抗，leaf R 由两部分组成，一部分为气孔内壁到叶表面的阻抗s R ，称为气孔阻抗，另一部分为叶表面到大气的阻抗b R ，称为边界层阻抗。
即b s leaf R R R +=常令： sR C 1≡，称为气孔导度。
不同的叶面，气孔导度C 明显不同。
更重要的是C 对气孔的开闭很敏感，C 直接影响植物的蒸腾、光合、呼吸等过程。
气孔计是专业测量气孔导度C 的仪器，其设计原理分动态测量和稳态测量。
ECA-ZT01植物蒸腾/导度仪是动态测量原理，主要用于植物蒸腾速率、气孔导度的测定：1-1多功能：同时测定蒸腾速率、气孔导度和相对湿度、光合有效辐射、叶室温度和叶片温度等项指标。
1-2智能化：多信息的菜单式显示和光标引导操作，即时将测定过程及最终结果屏幕显示、存储和与计算机通讯。
1-3体积小，重量轻，随身携带，单人操作。
1-4性能优良：测量的稳定性、精度、重视性和时间响应同于和优于国外同类先进仪器；1-5适用广泛：能广泛用于大田作物、果树、蔬菜、森木、牧草等多种植物不同形状叶片的测定1-6价格低廉，性价比高，使用成本低，维修方便。
LI-6400光合仪测量使用及怎么测定光合速率
AB B、fFra bibliotekfG
H
I V
二、计算参数 缩写 △CO2_µml 参数 参比室与样本室 的 CO2 浓度差 参比室与样本室 的 H2O 浓度差 净光合速率 气孔导度 胞间 CO2 浓度 蒸腾速率 胞间 CO2 浓度与 空气 CO2 浓度之比 基于叶温的 VpdL 蒸气压亏缺 基于气温的 VpdA BLC_mol 蒸气压亏缺 叶片边界层总导度 kPa mol m s
**光-光合速率响应曲线测定
开机前安装LED光源。LED光源取代上部叶室的位置， LED的光传感器接头替代原叶室的内置光量子传感器接头， 注意不要忘记安放3个O型圈。 开机操作如上述步骤1-2。注意在步骤2中的配置选择中应 选“2×3 Opaque LED”。
进入“New Msmnts”（按F4）后，进行步骤4.1-4.3的 操作。 按“label”键，选择功能菜单5（显示屏最底行），按 “Auto PROG”(F1)进入。 选择“Light Curve”回车，按提示进行文件命名、输入 备注内容等操作。
6. 叶片面积的确定 如果叶片不规则或整体小于叶室，需要使用叶 面积仪来测量叶片在叶室内的实际测量面积， 并在测量菜单内第三行（按键盘键“3”)功能 菜单中AREA下按F1功能键输入实际的测量面 积后再进行测量。
7. 关机 按“esc”键，退回主界面，按关机键。 以上为测定环节，一下为数据传输及其它注意 之处。调节CO2和H2O为BYPASS和SCRUB 中间状态。将仪器装箱。
在“Desired Lamp setting ”中输入实验者设计的 光量子通量变化值，如2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 500 300 100 50 20等，各值间以 空格键隔开。 顺序出现的提示问题及回答如下： Minimum wait time (secs) 60 Maximum wait time (secs) 180 Match if |ΔCO2| less than (ppm) 5 程序启动后按“Label”进入功能菜单1，会发现在 “Log”键前出现一个“*”，这表明刚刚设定的自动 程序正在运行，每记录一次数据仪器会鸣叫一声，当 整个程序结束后，“*”会消失。
LI-6400基本测量步骤及注意事项
LI-6400基本测量步骤及注意事项LI-6400光合仪的基本测量步骤目的：测量植物叶片的光合速率或呼吸速率1. 测量准备与硬件连接，在进气口接上缓冲可乐瓶，保证进气稳定。
2. 开机，配置界面选择Factory default，连接状态按“Y”，进入主菜单，预热15 ~ 20分钟。
3. 按F4进入测量菜单。
4. 将苏打管和干燥剂管都拧到bypass位置。
5. 调节叶室闭合螺丝，关闭叶室，等待a行参数：CO2_R、CO2_S、H2O_R和H2O_S值稳定后，对叶室吹一口气，检查CO2_S增加是否超过2 ppm ，否则就是漏气。
判断是否漏气，如果漏气，将叶室闭合螺丝拧紧一些，再吹气判断。
6. 检查零点。
把苏打管完全打至Scrub，等待a行参数稳定后，观察CO2_R参数绝对值< 5 μmolmol-1，然后把干燥剂管完全旋至Scrub，等待a行参数稳定后，H2O_R参数绝对值< 0.5 mmol mol-1。
7. 把苏打和干燥剂管完全旋至bypass。
8. 检查温度是否正常。
拔掉热电偶紫色插头，进入H行，检查如果Tblock与Tleaf差值<0.1℃，热电偶零点正常，否则，调节电位调节器螺丝（位于IRGA下部）至正常范围。
9. 将叶室正对太阳光，按g可查看光强PARin和PARout。
同时查看g行的大气压值是否正常。
10. 按F5(match)，进入匹配界面，待CO2_R与CO2_S、H2O_R 与H2O_S值相等时，按F5，然后按F1等待仪器退回测量菜单，检查b行参数：ΔCO2<±0.5，ΔH2O<±0.05即可。
11. 按F1(Open Logfile)，打开一个数据记录文件，命名，需要的话，添加备注(remark)。
12. 按分析器头手柄，打开叶室，夹好测量的植物叶片。
13. 按3，F1(area)输入实际测量的叶片面积。
14. 控制叶片温度。
2,f4，选择Block温度, enter, 输入目标温度, enter，回到测量界面。
LI-6400光合仪测量使用及怎么测定光合速率 ppt课件
软件及操作说明
PPT课件
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软件及操作说明
1. 开机 仪器硬件连接后，调节CO2、H2O调 节旋钮为完全BYPASS状态，在确认电池已连 接好并且电量充足的情况下，打开主机右侧中 部的黑色电源开关。需要选择所需要的叶室， 确定后，会显示“是否连接叶室和红外气体分 析器，选择 “Y”。确认即可进入系统主菜单 （见右图）。
Tblock℃
冷却器温度
℃
Tair℃
叶室空气温度
℃
H
Tleaf℃
叶片温度
℃
HH:MM:SS
时钟
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6
I
Battery
电池电压
V
二、计算参数 缩写
参数
单位
行号
参比室与样本室
△CO2_µml
的 CO2 浓度差
µmol CO2 mol-1
B
△H2O_µml
参比室与样本室 的 H2O 浓度差
mmol H2O mol-1
测定过程中尽量保持叶片原位状态，包括位置，角度等
2、测定时间：
最适测量时间为上午9:00 ~ 11:00，即双峰植株第一个光合状 况最佳时间，如果是单峰植株，则可以适当延长测定时间。
3、 取样量：
每个测定需要重复，至少3个，具体重复次数应使用统计学的 方法来确定
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8
三、LI-6400光合仪的使用方法
LI-6400光合仪使用讲解
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1
一、原理及构造 二、使用前注意事项 三、仪器操作 四、使用过程碰到的问题
PPT课件
2
一、原理及构造
光合作用基本原理
光合作用呼吸蒸腾和气孔导度测定方法课件
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
LI-6400控制系统侧气管连接
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LI-6400分析器电缆连接
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Dir:/user/configs/Userprefs菜单）。在该菜 单下，选择一与叶室、光源相匹配的内容 （如“red blue source”表示用红兰光源不 透明底叶室） <enter>，仪器显示：
Is the chamber/IRGA connected?
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LI-6400控制系统接线侧
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LI-6400控制系统干燥管和碱石灰管侧
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2、连接仪器各部件
电源连线与控制器正确匹配（管道和线路 切不可接错）， 多孔插线和分析器对准 （红点）插入；硬塑料管带黑圈套的端与 分析器相接并使另一端与控制器“sample” 相接。接上带“buffer”的进气管，接上电 源（切记，除“Sleep”状态外，在电源开情 况下，不可接或卸管道和线路，否则会烧 毁仪器）。
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（三）实验原理 Principles for measuring photosynthesis and respiration
使用LI-COR 6400测量光合步骤及注意事项
LI-6400 便携式光合仪测量光合作用步骤一、光合测定过程1.正确连接IRGA，缓冲瓶（利用大气二氧化碳，将缓冲瓶放置离人较远并悬挂2-3m处）。
接上电池(电源)，开机。
2.安装红蓝（LED）光源。
选Config Menu（F2），选Light Source Control 项，选取Pick Source，选取人工光Lightsource = 6400 - 02B，按F5“ Done”进入“Config Menu ”第一项“Config Status”, 选择F3“Save As”,给一个文件名e.g:“LED Red Blue Light Source”进入“ Config Menu ”最后一项“ Reset Menu ”，选取“Reset to User Configuration”,确认选择“LED Red Blue Light Source”，这样，光源就安装成功了。
以后，不必再安装光源了。
如果这一步已经安装好可以省去直接开机。
3. 根据叶室（一般选择2×3 LED),按Enter，选择Y。
4. 当显示：“Is the IRGA connected?(Y/N)”选择“Y”。
预热二十分钟以上。
5. 调零：调零前确保叶室紧闭，（即上下叶室刚刚接触到，再张开叶室，调紧螺丝半圈）。
选“Calib Menu”（校准菜单即F3）项：①选“Flow Meter Zero”项（流量计调零），按Enter，10 秒后读数稳定，视具体情况，用f1、f2 调节，至读数基本稳定，且在±1mv 范围内，F5 退出；②选择红外分析仪调零“IRGA Zero”：此时要求旋紧碱石灰管和干燥管上端的调节螺母指向Full SCRUB方向，即全虑除状态清空并关闭叶室，按Enter，按Y，按press any key，等待数数分钟，看屏幕确定。
待CO2_R 及 CO2_S 波动范围都小于±0.1时可以按Auto_CO2；待H2O_R 及H2O_S 波动范围都小于±0.01时，可以按Auto_H2O。
使用LI-COR_6400测量光合步骤及注意事项
LI-6400 便携式光合仪测量光合作用步骤一、光合测定过程1.正确连接IRGA，缓冲瓶（利用大气二氧化碳，将缓冲瓶放置离人较远并悬挂2-3m处）。
接上电池(电源)，开机。
2.安装红蓝（LED）光源。
选Config Menu（F2），选Light Source Control项，选取Pick Source，选取人工光Lightsource = 6400 - 02B，按F5“ Done”进入“Config Menu ”第一项“Config Status”, 选择F3“Save As”,给一个文件名e.g:“LED Red Blue Light Source”进入“ Config Menu ”最后一项“ Reset Menu ”，选取“Reset to User Configuration”,确认选择“LED Red Blue Light Source”，这样，光源就安装成功了。
以后，不必再安装光源了。
如果这一步已经安装好可以省去直接开机。
3. 根据叶室（一般选择2×3 LED),按Enter，选择Y。
4. 当显示：“Is the IRGA connected?(Y/N)”选择“Y”。
预热二十分钟以上。
5. 调零：调零前确保叶室紧闭，（即上下叶室刚刚接触到，再张开叶室，调紧螺丝半圈）。
选“Calib Menu”（校准菜单即F3）项：①选“Flow Meter Zero”项（流量计调零），按Enter，10 秒后读数稳定，视具体情况，用f1、f2 调节，至读数基本稳定，且在±1mv 范围内，F5 退出；②选择红外分析仪调零“IRGA Zero”：此时要求旋紧碱石灰管和干燥管上端的调节螺母指向Full SCRUB方向，即全虑除状态清空并关闭叶室，按Enter，按Y，按press any key，等待数数分钟，看屏幕确定。
待CO2_R 及 CO2_S 波动范围都小于±0.1时可以按Auto_CO2；待H2O_R 及H2O_S 波动范围都小于±0.01时，可以按Auto_H2O。
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1.氧电极
氧电极是由嵌在有
机玻璃上的铂和银所构
成，以0.5mol/L KCl为
电解质，电极头外覆盖
一层聚乙烯或聚四氟乙
烯薄膜，其厚度在15～
25μm之间，用“〇”形套
膜环固定，使电极与被
Hale Waihona Puke 测溶液隔离，而溶解在溶液中的氧仍能透过薄
膜，进入电极内。较薄
图3氧电级的构造
的膜易透过氧，因而对
1.Pt极 2.Ag-AgCl极 3.填充物
氧短浓。 度变化的响植应物生时理学间实验：光合作用、(头 液呼环吸氧、6.树薄脂膜)
4.电极柄 7.套膜环
5.电极 8.KCl溶
蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
3、红外线CO2分析仪法： CO2吸收4260nm红外线
连接光源和控制器的地缆 植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400控制系统
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
四、操作方法与实验步骤： (一)仪器安装： 1、选择叶室。根据测定对象选择不同叶室进 行安装,本实验选用仪器自备的红兰光源（一 般测定选择红兰光源或自然光源不透明叶室， 荧光测定选择荧光叶室，详见说明书）。
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
二、实验内容和原理： （一）熟悉仪器基本结构，及按装调试。 （二）以绿萝和蚕豆等植物为材料，用LI6400portable photosynthesis system测定它 们的光合作用、呼吸作用、蒸腾速率和气 孔导度及光-光合响应曲线，通过比较分析 其属于什么光合类型植物。
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
三、主要仪器设备： LI-6400 portable photosynthesis system
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
红兰光源叶室和CO2红外分析器
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
实验5-6、植物光合和呼吸作用、 气孔导度和蒸腾速率的测定
• 一、实验目的和要求: • 了解改良半叶法、氧电极法测定光合作
用和呼吸作用的基本原理，掌握红外线 CO2分析仪法测定光合作用和呼吸作用， 蒸腾速率和气孔导度测定的基本原理; • 掌握用LI-6400测定光合作用、呼吸作用、 蒸腾速率和气孔导度的方法，测定光-光 合响应曲线的方法.
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
（三）实验原理 Principles for measuring photosynthesis and respiration
6CO2+6H2O 6(CH2O)+6O2
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400分析器分植析物生电理学缆实验连：光接合作用、呼吸、
蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
(二)开机与校正：
3、插上电池，打开电源开关后。 （仪器自动进行状态检测，并进入
Dir:/user/configs/Userprefs菜单）。在该菜 单下，选择一与叶室、光源相匹配的内容 （如“red blue source”表示用红兰光源不透 明底叶室） <enter>，仪器显示：
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400控制系统接线侧
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400控制系统干燥管和碱石灰管侧 植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400控制系统侧电缆连接
1、测干重——改良半叶法：同面积光暗叶片重量差。
三氯乙酸
TCA 暗 中
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
2、测放O2 ——氧电极法。气相和液相
图2 氧电极装置示意图
1、光源 2、反应杯 3、电极 4、超级恒温水浴 5、触点式温度计 6、泵 7、控制器 8、记录仪
叶室
封闭式： 分析器
单位时间内CO2下降量
叶室
开放式：气体 分析器
出口
参比室
CO2
入口
参比室和叶室CO2差值
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
• Principles for measuring transpiration,stomatal conductance and Ci :
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400控制系统侧气管连接
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400分析器电缆连接
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
LI-6400分析器气管连接 植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
植物生理学实验：光合作用、呼吸、 蒸腾和气孔导度(LI6400)测定方法
2、连接仪器各部件
电源连线与控制器正确匹配（管道和线路 切不可接错）， 多孔插线和分析器对准 （红点）插入；硬塑料管带黑圈套的端与 分析器相接并使另一端与控制器“sample”相 接。接上带“buffer”的进气管，接上电源 （切记，除“Sleep”状态外，在电源开情况 下，不可接或卸管道和线路，否则会烧毁 仪器）。
• Transpiration→H2O → RH↑in leaf chamber → Humidity sensor → computer → transpiration rate → stomatal conductance.
• There is a linear relationship between H2O diffusing in and CO2 diffusing out stomata. Intercellular CO2(Ci) concentration can be calculated in the basis of transpiration rate, stomatal conductance, atmosphere CO2(Ca) concentration.