医学科研入门——科研设计和撰写申报书

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
组别 口服 肌注

目的
口服小剂量地塞米松对过敏反应的作用 口服中剂量地塞米松对过敏反应的作用
处理组A 0.1 mg/kg 处理组B 0.5 mg/kg
处理组C 1.0 mg/kg
处理组D 处理组E

0.1 mg/kg 0.5 mg/kg
口服大剂量地塞米松对过敏反应的作用
肌注小剂量地塞米松对过敏反应的作用 肌注中剂量地塞米松对过敏反应的作用
in vitro, in vivo, ex vivo • 须对处理因素敏感 • 反应须稳定 • 体内外实验相结合
人体实验常见的设计类型
• 病例报告 为疾病的发病表现、机理及诊治提供详尽的感性资 料。病例报告往往是识别新出现或不常见的疾病或疾病罕见表 现的第一线索。 • 横断面研究 包括普查和抽样调查。




实验设计主要为了保证科研结果符合 四个性:
-有用性:目的性和可行性
-独创性:先进性
-可重复性
-经济性
科 研 设 计
• 概论 • 医学科研的基本要素
• 科研设计的基本原则
• 科研设计的基本步骤 • 统计学设计
是否主动施加干预?
1. 实验研究(干预):
受试对象:人——临床试验(clinical trial)
单因素单水平
表3-1细菌脂多糖对人外周血单个核细胞干扰素γ分泌的影响 组别 LPS 目 的
观察LPS(1μg/ml)刺激后人外周血单个核细胞干
扰素γ分泌水平
对照 溶剂(PBS),其他条件与实验组一致,排除非处 理因素引起的变化
单Βιβλιοθήκη Baidu素多水平
孕激素对滋养细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响
组别 目 的
孕激素1×10-7 mol/L 观察不同浓度的孕激素对滋养细 孕激素1×10-6 mol/L 胞表达基质金属蛋白酶-9的影响 孕激素1×10-5 mol/L 空白对照 排除非处理因素的干扰
3. 灵敏性和特异性:
指标的互补性、可靠性和稳定性(标准化)
科 研 设 计
• 概论 • 医学科研的基本要素
• 科研设计的基本原则
• 科研设计的基本步骤 • 统计学设计
试验设计的原则
• 对照的原则: -意义:消除系统误差,鉴别处理和非处理因素的差异 -类型:空白对照、阳性对照、阴性对照、自身对照、 相互对照 • 随机的原则: - 对照组和处理组除处理因素不同外,其余应全部相同。 - 动物实验随机分组;观察切片也应随机选择视野 • 重复的原则: - 随机原则可排除大部分非处理因素的影响,但不能全 部消除;因此,有必要重复,以反映客观真实性。
医学科学研究入门
2. 科研设计与课题申请书的撰写
Background – mini review
Unclear Controversial Not reported Shortcomings Further investigation
Hypothesis Experiments Conclusion Significance Future Investigation
• 家兔对体温变化十分敏感,宜选用做发热、解热及致热源检查实验。 • 观察避孕药对排卵影响的实验宜选用兔、猫;对具有雌激素活性的药 物进行避孕药效研究,不能选用小鼠与大鼠。 • 以高胆固醇膳食饲喂兔、鸡、猪、狗、猴等动物,均可诱发高脂血症 或动脉粥样硬化,而猴和猪的心脏冠状动脉前降支还形成斑块及大片 心肌梗死,情况与人更为相似,故动脉粥样硬化实验多选用猪、猴及 兔。 • 家犬的胰腺、胃较小,宜用于胰腺摘除术及胃肠道生理的研究。 • 大鼠无胆囊,不会呕吐,故不能用于胆功能观察;狗、猫、猴等动物 呕吐反应敏感,适宜用于呕吐实验。 • BALB/c小鼠与其他近交系相比,肝、脾与体重的比值较大,对放射线 甚为敏感,故常用于制备单克隆抗体。 • C57BL/6小鼠具有干扰素产量高、对放射物质中等耐受、补体活性高、 易诱发免疫耐受等特性,是肿瘤学及免疫学研究的常用品系。 • 如遗传性高血压大鼠、糖尿病小鼠、自身免疫病小鼠等。 • 还可利用某些特殊缺陷型小鼠,如胸腺缺陷的裸鼠,由于缺乏T细胞, 故可接种人肿瘤,用以筛选抗肿瘤药等。


医学科研设计是研究医学科学研究中如何科学、合理 地安排实验因素,提高实验效应,及如何排除影响实验的 非处理因素。考虑周全、设计合理的研究方案可收事半功 倍之效,而设计不佳的研究方案常招致失败及时间、经费 的浪费。
专业设计: 指运用专业理论知识和技术进行设计, 主 要是解决研究的有用性、独创性和科学性,以回答、解决 科学问题,验证专业假说。 统计学设计:运用数理统计学理论和方法进行设计, 包括资料的收集、整理、分析全过程的统计学设想和科学 安排,以保证样本的代表性和样本间的可比性,以最少的 调查、实验观察例数进行高效率的统计分析,得出准确的 结果和可靠的结论。
细 胞
• 原代细胞 :经特殊分离方法从胚胎、组织 器官及外周血等初分离的细胞在体外培养 。 • 传代细胞:经传代方式进行再次培养的细 胞称为传代细胞。 • 细胞株:单细胞大量扩增后形成生物学特 性稳定的克隆化细胞群,称为细胞株 。包 括正常细胞株和肿瘤细胞株。 • 基因缺陷和转基因细胞株。 • 悬浮细胞和贴壁细胞。
• 病例对照研究 回顾病例组暴露因素,通过与对照组进行比较, 研究这些暴露因素的发生频率与某疾病之间的关系。(由果到 因) • 队列研究 按照所研究人群是否暴露于某种因素将受试对象分 为实验组和对照组,随访观察两组人群某病的发病率,判断暴 露因素与疾病发病率的关系。分为前瞻性队列研究(由因到果) 和回顾性队列研究。
动物——动物实验( animal experiment ) 临床试验:治疗——临床疗效实验
预防——社区干预实验(community intervention trial)
2. 调查研究(无干预):被动地观察、如实记录 联系: 调查研究可为实验研究提供线索,而实验研究还 需要通过调查研究加以证实。
实验研究的基本要素
多因素单水平
美托康对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
组别 处理组 对照A 对照B 对照C 对照D 脑缺血再灌注 美托康 目 的
观察美托康对大鼠脑缺血再
+
假手术 + 假手术 不手术
+
+ -
灌注损伤的保护作用
观察美托康的影响 观察脑缺血再灌注的影响 排除手术的影响 排除其他因素的影响
多因素多水平
地塞米松抗过敏效应实验研究
细胞库资源
• ATCC (American Type Culture Collection) ,即美国细胞、菌种保藏中 心,目前能提供 3000余种细胞系、15000余种细菌和噬菌体、2500余 种动植物病毒、700余种人癌细胞系。 • Cascade Biologics, Inc.:该公司主要产品为人原代细胞,包括正常人 皮肤细胞、心血管内皮细胞、角膜上皮细胞、黑色素细胞等。网址: http://www.cascadebio.com • 第四军医大学实验动物中心:该中心保存多种肿瘤细胞株。网址: http://www.fmmu.sn.cn/web/anim • 武汉大学中国典型培养物保藏中心:是国内较大且保存品种较多的细 胞保藏中心。E-mail: cctcc@whu.edu.cn • 中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库:是国内较大且保存品种较 多的细胞保藏中心。网址: http://www.cell.ac.cn/cellbank/homepage.htm • 中山医科大学实验动物中心。 • 中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院。
察指标应相关联、客观、精确、灵敏、特异。
1. 客观性:主观指标和客观指标。 2. 精确性:
准确度(accuracy)或真实性(validity) :观察值与真值的接
近程度,受系统误差的影响(如灵敏度、特异度)。 精 密 度 (precision) 或 可 靠 性 ( reliabiliy ) 或 重 复 性 (repeatability) :重复观察时观察值与其均值的接近程度,受 随机误差的影响(如一致百分率、Kappa值)。
分子研究
• •


DNA、RNA和蛋白质常用的重要数据库为: 基因数据库(http://www.ncbi.nlm. nih.gov/Genbank/) 非编码RNA数据库 (http://biobases.ibch.poznan.pl/ncRNA/) 蛋白质数据库(http://www.expasy.ch/ spot/或 http://www.ebi.ac.uk/swissprot/) 蛋白质组分析数据库 (http://www.ebi.ac.uk/proteome/)
专业设计错误
• 苏联一神经论权威设计了免疫抗体形成的 神经反射机制的实验:他将动物后肢与躯 体分离,仅保留由肢体传入躯体的神经干, 然后在“离体”后肢注射抗原,不久将该 神经干切断。过些时候动物血中出现特异 性抗体。该权威认为特异性抗体是由于抗 原作用于神经感受器经反射而形成的。
• 设计用动物急性感染实验模型研究Th1/Th2 细胞在炎症中的作用。
三要素:1.处理因素;2.受试对象;3.实验效应
其他因素 其他效应
处理因素
降压药
受试对象
高血压病人
实验效应
血压值
处理因素(study factor,treatment)
处理因素是指外界施加于受试对象的因素, 是在实验中需观察并阐明其效应功能的因素。
例:药剂、手术方法、毒物
• 抓住主要处理因素
• 区分处理与非处理因素 • 处理因素必须标准化
• 临床试验 临床试验中的受试对象一般采用随机化原则分为治 疗组和对照组,观察治疗手段的疗效。
动 物 分类
• 按微生物学要求,实验动物可分为4个等级 : I级:普通动物 II级:清洁动物 III级:无特殊病原体动物 (SPF) IV级:无菌动物 (GF) • 按照遗传学特性要求,实验动物也可分为4类: I类:近交系或称为纯系动物 II类:突变系动物,包括转基因动物和基因敲除动物 III类:远交系动物,又称封闭群 IV类:杂交群或称异系杂交
处理组F
对照组H 对照组I


1.0 mg/kg
生理盐水
肌注大剂量地塞米松对过敏反应的作用
排除口服因素造成的影响 排除肌注因素造成的影响 排除其他因素的影响
对照组G 溶剂
受试对象(study subjects)
病例的选择:纳入标准、剔除标准 动物的选择:种类、品系、年龄、体重、 窝别、营养…… 离体器官、组织 细胞 分子
专业设计: 指运用专业理论知识和技术进行设计, 主 要是解决研究的有用性、独创性和科学性,以回答、解决 科学问题,验证专业假说。 统计学设计:运用数理统计学理论和方法进行设计, 包括资料的收集、整理、分析全过程的统计学设想和科学 安排,以保证样本的代表性和样本间的可比性,以最少的 调查、实验观察例数进行高效率的统计分析,得出准确的 结果和可靠的结论。
Method Results Discussion
科 研 设 计
科 研 设 计
• 概论 • 医学科研的基本要素
• 科研设计的基本原则
• 科研设计的基本步骤 • 统计学设计


医学科研设计是研究医学科学研究中如何科学、合理 地安排实验因素,提高实验效应,及如何排除影响实验的 非处理因素。考虑周全、设计合理的研究方案可收事半功 倍之效,而设计不佳的研究方案常招致失败及时间、经费 的浪费。
用细胞做实验的优缺点
优点: • 不受机体内环境因素影响,从而避免个体差异,有利于探讨各种 物理、化学和生物因素对肿瘤细胞生命活动的影响。 • 便于同时从细胞、分子与基因三个水平研究肿瘤细胞的结构、功 能及癌变发生机制。 • 能长期传代、保存,便于观察肿瘤细胞生物学特性和遗传行为的 改变。 • 能快速筛选抗癌药物,适宜进行耐药机制、信号转导的研究。 • 研究周期较短,经济。 缺点: • 不能完全反映体内状况,常与体内实验互相验证。 • 长期培养易改变原有的性状。 • 易发生支原体感染。
分子研究
• 基因与蛋白分子的检测:单个、几个与芯片 的检测; • 基因多态性研究、SNP、微卫星等 • 基因组、蛋白组和代谢酶组的变化 • 基因和蛋白的调控、分子表观遗传学 • 基因和蛋白的结构 • 基因和蛋白的关系、蛋白与蛋白的相互作用
实验效应 (experimental effect)
处理因素作用于受试对象的结果,通过观察指标表达。观
相关文档
最新文档