1-1商业性组织培养实验室的设计与主要设备

(四)、pH值
1.培养基适宜PH值5.0-6.5，一般为5.6－5.8； 可用0.1M的NaOH和HCl溶液进行调整。
2.ｐH值影响培养基的硬度。
PH＞6.5 PH＜5.0
培养基会变硬 培养基不易凝固
3.灭菌之前，培养基的ｐH要比标准提高0.2 －0.3个单位。
(五)、气体(必要条件)
1.培养瓶内氧气的充 足与否与封口材料有 关。 可用棉塞或特制的封 口塑料。通气最好的 是棉塞，但棉塞易使 培养基干燥，夏季易 引起污染。
第一章
植物组织培养基本理论与操作技术
本章主要教学内容
一、组织培养实验室的设计与主要设备 二、培养基及其配制 三、无菌技术 四、组织培养植株再生的途径 五、植物组织培养中常见问题及解决办法
第一节 组织培养实 验室的设计与主 要设备
教学目的与要求
（1）掌握组培室的功能布局与设计要求 （2）掌握组培常用的实验仪器设备及使用 （3）掌握调控组培的主要环境条件
冰箱
2、配药室
功能：培养基母液的配制、 药品贮藏等。
配备：工作台；冰箱、各类天 平、酸度计、药品橱、移液器、 各类玻璃容器等。
要求：干燥、洁净。
工作台 药品橱
电子天平 电光分析天平
托盘天平
3、贮藏室
•功能：贮藏各种上玻璃器皿、日用品等。 •结构：明亮、干燥。 •面积：根据需要而定
4、接种室
组织培养实验室场所的选择
植物组织培养需要一个无菌的环境。因此， 选择场所时应远离闹市和主干道，周围无 污染源，阳光充足、交通便利。
一、组培室的基本组成
组培实验室
准 备 室
炼苗室 培养室 接种室 贮藏室 配药室
案例1：实验室平面设计
培养室 培养室 培养室
走廊
门 厅
准备室
洗涤室 配药室 缓冲室 接种室
★有的材料愈伤组织的诱导需光或需暗； ★光照强，幼苗生长健壮；光照弱，幼苗生
长弱小，容易徒长。
2.光质
★不同波长的光对细胞的分裂和器官的 分化有影响。
如： ①红光促进杨树愈伤组织的生长,
蓝光阻碍其生长;
②白光促进小花天竺葵愈伤组织的 生长，蓝光则无作用。
3.光照时间
•根据植物生物学特性 决定; •光照长短对试管内花 的形成有重要影响； •在胡萝卜组织培养中 随着日照长度的增加， 而促进生长。
•功能：用于植物材料的无菌接种、培养 物的转移、试管苗的继代等。 •结构：缓冲室+接种室 •面积：尽量越小越好，一般10－20m2
配备：空气交换机、超净工作台、搁架、医 用平车、解剖镜、紫外灯、酒精灯、各种接 种器械等。
设计要求:地面平坦无缝、顶棚及墙壁密闭光 滑，干爽安静，清洁明亮，配置横拉门，门 窗严密。
1、准备室
功能：用于玻璃器具的清洗、 干燥和贮存；接种材料冲洗； 培养基配制、分装、高压灭 菌等。 设计要求：通风、洁净、易 清洗，水、电来源方便。
配备：水槽；塑料筐；干燥箱； 晾干架；纯水机、高压锅等。
面积：根据规模，一般40m2 。
电炉
纯水发生器
蒸气压力灭菌器
酸度计
恒温水浴锅
磁力搅拌器
(五)、气体(必要条件)
2.培养基内氧气充足与否与培养基的种 类和培养方式有关。 ◆固体培养基可加进活性炭来增加通气 度,以利于发根。 ◆液体培养时，可考虑采取振荡培养的 方式，以增加通气性。
(六)、渗透压
1、1-2个大气压促进生长。 2、２个大气压以上就对生长有阻碍作用， 5－６个大气压生长就完全停止，６个大气 压细胞就不能生存。
单人单面水平送风
双人单面水平送风
显微镜
人工气候箱
干燥箱
5.培养室
功能：人工条件下培养接种物及试管苗的场 所。 设计要求：恒温、恒湿， 地面平坦、清洁明亮。
配备：培养架、照明设 备、定时器、空调器、 干湿温度计、换气扇等。Baidu Nhomakorabea
面积：根据规模而定
培养室
5、炼苗室
功能：提供组培苗炼苗的环境。 要求：能够控温调湿、控光通风。 面积：根据规模来定。
二、设备和器材
1、玻璃器皿 2、器械用具 3、仪器设备
1、玻璃器皿
（一）对玻璃器皿要求： 1、耐腐蚀； 2、耐高温、高压； 3、透明度好； 4、便于接种。
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（二）玻璃器皿的规格：
三角瓶：100、250、500ml或用250ml罐头瓶代替。 培养皿：6、9、12cm 试管：18×180mm或20×200mm 量筒：10、50、100、500、1000ml 烧杯：50、100、200、500、1000ml 容量瓶：100、200、500、1000ml 试剂瓶（棕色）：50、100、250、500、1000ml 移液管：0.2、0.5、1.0、2、5、10ml 微量移液器
(三)、湿度
1.瓶内的湿度：
主要受到培养基含水量和 封口膜透性的影响。如培养 基过硬，则不利于外植体接 触和插入培养基，导致生长 迟缓；封口膜过于透气，也 会使瓶内湿度下降。
(三)、湿度
2.环境湿度:
过低会使培养基丧失大 量水分，渗透势升高，影 响材料对营养物质的吸收， 也会阻碍外植体的生长。 一般为70－80%。
2、器械用具
(5).其它：周转筐、搪瓷
盘、移液管架、玻璃棒、 酒精灯、试管架等。
细菌过滤器
三、培养条件
（一）、温度
1.一般控制25±2ºC。 2.植株种类及外植体的不同，
其最适温度也是不同的。 如百合20℃；月季25－ 27℃；番茄28℃。
△
（二）、光照
1.光强
★影响外植体细胞 的增殖、组织和器 官的分化。
玻璃棒、酒精灯
2、器械用具
(1)、镊子类：接种、转 移材料或分离茎尖用，以 100ml三角瓶为培养瓶， 可用20cm长。
2、器械用具
(2)、剪刀类：医用剪刀， 剪切割外植体或继代培养 时分离材料。
(3)、解剖刀：切割芽、 茎段、愈伤组织等，继代 时分离材料，也可用于微 小外植体的接种等。
(4)、解剖针：转移细胞或 愈伤组织，微茎尖分离及 接种等。
培养基中添加白糖可有 效提高培养基的渗透压。
实训一
在参观完学院的植物组织培
？
养室后，你认为有存在什么问题？ 如果给你一块空地，请你设计一 个合理的组培实验室以及需要配 置的仪器设备。
9、静夜四无邻，荒居旧业贫。。21.3.421.3.4Thursday, March 04, 2021