临床微生物标本采集规范ppt

国内微生物标本的采集目前存在的问 题
标本送检率低 从全国来看，抗感染治疗前，送 检相关标本可能只占应送标本的一半左右，与抗 菌药物应用率之高形成鲜明的反差。一些医师在 经验性治疗受挫后方送标本，此时已失去阳性培 养的机会。 标本有缺陷 正确收集各种临床标本，关注特 检标本采样与送检的方法和条件，是完成病原学 诊断的先决条件。
（四）注意事项

1. 由于自然排尿收集的标本很难避免会阴部及 下尿道细菌污染，所以需要定量接种、合理评 价才能判断培养的细菌是否与尿路感染有关。 尿标本菌落计数中革兰阴性杆菌数>105CFU/ml 或革兰阳性球菌数>104CFU/ml时有临床诊断意 义。 （不是绝对的，受多因素影响，综合判断）
所谓“双瓶双侧”，是指从一个部位采 血接种一套培养瓶，再从另一部位采血接种 另一套培养瓶。（通常是双臂） 所谓“双侧双瓶”，是指从一个部位采 血接种一个需氧瓶，再从另一部位采血接种 另一个厌氧瓶。 一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视 为单个血培养。

3.采集次数
要求：对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者 ，推荐同时采集2~3套（不同部位）血培养 标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本） 。 婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位 ）血培养标本。 说明：除特殊情况之外，在采取血培养后的2 至5天内，无需重复采取血培养。因为抗菌 治疗的2至5天内，血液中的细菌不会立即 消失。研究证明，血培养只做1套的检出率 为65%，做2套和3套的检出率分别为80% 和96%。单瓶的血培养检出率不高，而且 结果很难做出临床解释。
4.采血量 要求：
成年患者推荐的采血量为每套不少于 10ml， 每瓶不少于5ml。 婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于 2ml。
说明： 血标本采集的量是影响检出率的最重要的因 素。成人血培养采血量在2~30ml之间，病原 菌检出率与采血量成正比例增长。每增加1ml 的血液，病原菌的检出率增加3.2%。儿童患 者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无 需等同于成人。对血液病患者或者血容量相 对较低的患者建议使用儿童瓶来减少血液的 采集量增加病原菌的检出率。

由于婴幼儿患者厌氧菌所致菌血症比较罕见， 婴幼儿血培养可以仅用需氧瓶，为提高检出 率、区分污染菌，应采用两只需氧瓶为一组 血培养。仍然采用双侧双瓶的采血方式。
6.血培养标本的运送
要求：（1）采集后的血培养瓶应在1小时之内 送往实验室。 （2）血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏和 冷冻。 说明：血培养瓶冷藏或冷冻会将一些微生物杀 灭，将装着液体的容器冰冻也会使容器破裂。
7. 泌尿系统疾病手术前； 8. 有尿路感染症状者，前次培养结果阴性或抗 菌治疗48h后仍持续发热。 9. 抗生素停药后，感染症状再次出现。
（二）尿培养标本采集方法
1．清洁中段尿 留取清晨清洁中段尿标本，先 用肥皂水仔细清洗会阴部，再用清水冲洗尿 道口周围；将前段尿排去，留取中段尿10ml 左右于无菌容器内，立即加盖送检，2h内接 种。该方法简单、易行，是最常用的尿标本 收集方法，但是容易受到会阴部细菌污染。
临床微生物标本采集
（一）血培养检测采血指征
临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感 染的患者 1. 发热（≥38℃）或低温（≤36℃） 2. 寒战 3. 白细胞增多（>10×109/L，特别有“核左 移”未成熟的或杆状核白细胞增多） 4. 粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×109/L）
5 . 血小板减少 6．皮肤粘膜出血 7．昏迷，休克 8．多器官衰竭 9. CRP升高 在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧 外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊 液培养。 对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物 治疗之前，应及时采集血培养。
要求： 严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手按 压静脉，除非带有无菌手套。 不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头， 采用真空采血装置能降低污染率。 说明： 无论采用何种采血方法，血培养可接受的污 染率通常是≤3%。研究表明，经过专门培训 的熟练抽血者采集血培养的污染率为3%，而 未经培训的住院医生和护士污染率则达11%。 因此对临床护士就血培养标本采集进行专门 的、严格的培训是非常必要的。
二 、下呼吸道（痰培养）标本采集规范 标本采集方法
医师或护士直视下采集标本 病人先漱口，去除的痰
液
临床上约半数咳痰标本不合格！咳痰途径口 咽部不可避免地受到污染。 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～109/ml。 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾 液严重污染现象。
如何提高细菌阳性检出率
标本采集时机 标本采集方法 标本的质与量 标本的运送与保存 镜检筛选合格标本 高质量、多种分离培养基 培养环境 临床医生对报告单的解读及抗生素合理使 用

微生物标本采集基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检甚至床旁接种尤其是厌氧 培养 5.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养 6.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂 7.送检标本应注明来源和检验目的
（三）采集时间和标本运送
1.应选择在抗菌药物应用前或停用抗菌药物5天 后采集尿液。 2.通常采集清晨第1次尿液送检，确保尿液在膀 胱内停留4h以上，使细菌有足够时间繁殖。嘱 患者睡前少饮水以免尿液稀释。 3.怀疑沙门菌感染时应在发病2周左右采集尿液 培养。
4.对无症状的患者应连续采集3天晨尿送检。 5.怀疑结核分枝杆菌感染时，患者应停药1-2天 后采集晨尿或24h尿的沉渣部分10-15ml送检。 6. 标本采集后应立即送检、及时接种，室温下 保存时间不得超过2h（夏季保存时间应适当缩 短或冷藏保存），冷藏保存标本必须在6h内进 行接种，但冷藏保存的标本不能用于淋病奈瑟 菌培养。
4．小儿收集包 无自控能力的小儿可用收集包 收集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群 污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性 时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临 床进行分析，必要时可使用膀胱上穿刺或导尿 法留取标本进行复检。
5．留置导尿管收集尿液 用导尿管导取1015ml尿液置灭菌容器内送检。长期留置导尿管 者，应在更换新导尿管后留取尿标本。留置导 尿患者应消毒导尿管外部及尿管口，采取无菌 操作方法，用注射器通过导尿管吸取尿液。注 意防止混入消毒剂，不能从尿液收集袋中采集 尿液。

合格标本的判断标准：
外观：观察颜色、粘度、有无血丝或脓。若 标本为水状且很明显是唾液，则应拒收。为了 判定是否来自下呼吸道的痰，需检查是否为合 格的痰标本。白细胞＞25个/低倍镜视野、鳞状 上皮细胞＜10个/低倍镜视野为合格标本。采集 合格标本对细菌的诊断极为重要。
合格痰液标本
不合格痰液标本
为了提高病人血培养的阳性率，最好 的抽血时间是：

A.发热开始时 B.寒战开始时 C.发热最高峰时 D.寒战结束时 E.预计寒战发热前
2.采集部位
要求：从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采 血培养。至少做到“双侧双瓶”。必要时从下 肢静脉采血做第三套血培养。 说明：不建议采集 （1）动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大； （2）静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如 果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静 脉采集另外一个血培养标本，以帮助阳性结果 的判读。
3.由于口腔和咽部存在大量的革兰阳性和革
兰阴性厌氧细菌，而且缺乏可靠的方法区
分它们究竟是致病菌还是定植菌，因此不
主张对咳痰标本进行厌氧菌培养。
4. 约有1/4-1/2肺部感染患者可能发生菌血
症，应同时做血培养。
三 、尿培养标本采集规范
（一）尿培养标本送检指征 1. 有典型的尿路感染症状； 2. 有肉眼脓尿或血尿； 3. 尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性； 4. 有不明原因的发热，无其他局部症状； 5. 留置导尿管的患者出现发热； 6. 膀胱排空功能受损；
2．耻骨上膀胱穿刺 使用无菌注射器直接从 耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液，是评估 膀胱内细菌感染的“金标准”方法，主要用于 厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采 集。 3．直接导尿 按常规方法对会阴局部进行消 毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀 胱尿液，可减少尿液标本污染，准确地反映膀 胱感染情况。但有可能下尿道细菌进入膀胱， 导致继发感染，一般不提倡使用。

2.小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌，用棉
拭子深入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时， 可喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭子上 送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方， 以诱发咳痰。
3.支气管镜采集法
–-经支气管镜直接吸引 –-支气管肺泡灌洗 –-防污染样本毛刷
（三）注意事项
1. 痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。
（一）采集指征

凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或 血性，并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音， 外周白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高， X线检查提示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚 至出现感染性休克和呼吸衰竭等患者，应采 集痰液或下呼吸道标本。
对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、 肺鼠疫等）患者采集检验标本时必须注意生 物安全防护。 对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续 2-3天；不建议24h内多次采集，除非痰液外 观性状改变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰 液送检

（二）采集方法
1、自然咳痰法 以晨痰为佳。用清水反复漱 口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入 无菌容器中，尽快送检。否则有的细菌（如肺 炎链球菌、流感嗜血杆菌）在外界可能死亡。 不能及时送检的标本，室温保存≤2h。要求采 到肺深部的痰液，不要唾液。
在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1-2h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议 的标本 ; 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱 口; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员 指导;