兽医生物制品学第八章兽用疫苗生产与质量控制演示课件
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兽用疫苗生产与质量控制PPT课件
更强更持久，如脂多糖、多糖、缓释微球、
细胞因子，免疫刺激复合物等。
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普通制品：指用一般方法制备的、未经浓 缩和纯化处理，或仅按毒（效）价标准稀 释的制品。如现有国内的大部分传统疫苗 均为普通制品。
精制生物制品：将普通制品（原制品）经 浓缩和纯化处理，去除无效成分，毒（效） 价高于普通制品效力更好，如精制破伤风 毒素和精制结核菌素等。
亚硝基胍 醋酸坨 洗衣粉
高温 紫外线
适应非易感动物 或细胞 杂交减毒
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疫苗《制造及检验规程》
任何一种疫苗都有其《制造及检验规程》，它是 国家法定标准。
疫苗的生产必须严格按《规程》规定的方法进行 生产和检验，若要改变方法，则要提供研究材料 证明是可行的，并报农业部评审批准，形成新 《规程》才能进行生产。
配苗
传代细胞
培养收获 灭活病毒液
灭活
配苗（混匀、乳化）
原料 配制 灭菌
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菌 （毒）种分类
菌（毒）种分强毒和弱毒 强毒：通常指从得病动物体内分离到的致
病毒株，只能用于制造灭活疫苗和检验用 弱毒：通常是采用人工的方法用强毒致弱
而成，一般于制造活疫苗
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菌 （毒）种质量标准
生物学特性明显、历史清楚：形态、培养特性、 生化特性及血清免疫学特性等明显，易于鉴别； 人工感染动物引起稳定一致的临床症状和病理变 化特征；原始细菌或病毒株的来源地区、动物品 种流行资料清楚；分离鉴定资料完整；传代、保 藏和生物学特性检查方法明确。
佐剂制品：为了增强疫苗制剂诱导动物机体的免疫应答反 应，提高免疫效果，在疫苗制备的过程中加入适量的佐剂， 如氢氧化铝胶、油佐剂等，这类制品称为佐剂制品。
最新兽医生物制品学第八章兽用疫苗生产与质量控制ppt课件
➢ 工艺的稳定性
• 培养条件 • 工艺技术（各种参数如种子接种量、培养时间、收
获时间等）
传统病毒类疫苗抗原增殖技术 • 动物增殖 • 禽胚增殖 • 细胞增殖
5、疫苗检验
• 活疫苗
➢ 物理性状（冻干苗） ➢ 无菌检验（纯粹检验） ➢ 鉴别检验：特异性血清中和检验。 ➢ 外源病毒检验（病毒类疫苗）：中和法检验。 ➢ 活菌计数（细菌类疫苗）：平板计数。 ➢ 病毒含量测定（病毒类疫苗） ：EID50、ELD50
或TCID50。
➢ 安全检验：动物或鸡胚（剂量几倍至几十倍） ➢ 效力检验：攻毒保护或微生物含量测定。 ➢ 水份测定（冻干苗）：4%以内。 ➢ 真空度测定（冻干苗）：白色、粉色或紫色辉
光。
• 灭活疫苗
➢ 灭活检验：半成品检测：EID50、ELD50或 TCID50 。
➢ 物理性状：外观、剂型、稳定性、粘度检验。 ➢ 无菌检验：培养基检测 ➢ 安全检验：动物检验 ➢ 效力检验：攻毒保护或测抗体。 ➢ 灭活剂含量测定：化学分析
• 生产过程评价 • 检验结果评价
➢ 安全性 ➢ 效力 ➢ 稳定性
• 临床使用效果评价（国家标准与企业内控 标准差异）
➢ 自家苗？
五、疫苗研究发展方向
• 传统疫苗改进
➢ 精制化（减少副反应）； ➢ 规模化（改进工艺、提高产能、降低成本）； ➢ 耐热化（有利于保存和运输）； ➢ 多联多价化（减少动物应激）； ➢ 高效化（改进疫苗质量，提高内控标准，增强
3、保证措施——管理软件
• 软件：是指企业对管理体系中采用的全部 要素、要求和规定编制成各种制度、标准 和程序形成文件系统，在实施中及时正确 地记录执行情况且保存完整的执行记录。 从组织架构、工作标准到记录（凭证）等 都进行了详细的制定，它是质量控制的重 要保证。
• 培养条件 • 工艺技术（各种参数如种子接种量、培养时间、收
获时间等）
传统病毒类疫苗抗原增殖技术 • 动物增殖 • 禽胚增殖 • 细胞增殖
5、疫苗检验
• 活疫苗
➢ 物理性状（冻干苗） ➢ 无菌检验（纯粹检验） ➢ 鉴别检验：特异性血清中和检验。 ➢ 外源病毒检验（病毒类疫苗）：中和法检验。 ➢ 活菌计数（细菌类疫苗）：平板计数。 ➢ 病毒含量测定（病毒类疫苗） ：EID50、ELD50
或TCID50。
➢ 安全检验：动物或鸡胚（剂量几倍至几十倍） ➢ 效力检验：攻毒保护或微生物含量测定。 ➢ 水份测定（冻干苗）：4%以内。 ➢ 真空度测定（冻干苗）：白色、粉色或紫色辉
光。
• 灭活疫苗
➢ 灭活检验：半成品检测：EID50、ELD50或 TCID50 。
➢ 物理性状：外观、剂型、稳定性、粘度检验。 ➢ 无菌检验：培养基检测 ➢ 安全检验：动物检验 ➢ 效力检验：攻毒保护或测抗体。 ➢ 灭活剂含量测定：化学分析
• 生产过程评价 • 检验结果评价
➢ 安全性 ➢ 效力 ➢ 稳定性
• 临床使用效果评价（国家标准与企业内控 标准差异）
➢ 自家苗？
五、疫苗研究发展方向
• 传统疫苗改进
➢ 精制化（减少副反应）； ➢ 规模化（改进工艺、提高产能、降低成本）； ➢ 耐热化（有利于保存和运输）； ➢ 多联多价化（减少动物应激）； ➢ 高效化（改进疫苗质量，提高内控标准，增强
3、保证措施——管理软件
• 软件：是指企业对管理体系中采用的全部 要素、要求和规定编制成各种制度、标准 和程序形成文件系统，在实施中及时正确 地记录执行情况且保存完整的执行记录。 从组织架构、工作标准到记录（凭证）等 都进行了详细的制定，它是质量控制的重 要保证。
第8章 兽药管理 PPT课件
第六节兽用生物制品及兽用新生物制品管理
兽用新生物制品的概念:兽用新生物制品系指我国创制或首 次生产的用于畜禽等动物疫病预防、治疗和诊断的生物制 品。对已批准的生物制品所使用的菌(毒、虫)种和生产工 艺有根本改进的，亦属新制品管理范畴。 分类: 第一类：我国创制的制品；国外仅有文献报道 而未批准生产的制品。 第二类：国外已批准生产，但我国尚未生产的制 品。 第三类：对我国已批准的生物制品使用的菌(毒、虫) 种和生产工艺有根本改进的制品。
诊断制剂
第六节兽用生物制品及兽用新生物制品管理
3.中间试制：中试产品的批次应达到5~10批。 4.区域试验：所用中试产品应达到3批以上。观察动物数目应符合下列 要求：
疫苗 大动物 中小动物 禽类 鱼 诊断制剂 1 000 头 10 000 头(只) 20 000 羽(只) 20 000 尾 1 000 头(只)
第七节进出口兽药管理
进口兽药：通过合法途径从国外购买兽药。 进口兽药的注册：国外企业生产的兽药首次向我国销售前，必须 向我国申请，并提供规定的资料和样品，经审核合格，同意进口的， 发给《进口兽药注册证书》的行政管理制度。
申请注册的兽药分类： 第一类 中华人民共和国药典、兽药规范和农业部专业标准已收载的； 第二类 中华人民共和国药典、兽药规范和农业部专业标准未收载，但国外药 典、兽药典、付药典 或饲料法规已收载的； 第三类 国外药典、兽药典、付药典或饲料法规未收载，但生产国（地区）政 府兽药管理机关已批准在本国生产和销售的，并符合中华人民共和国 有关兽药使用规定的。
基础研究阶段：
① ② ③ ④ 文献资料的收集、整理和试验设计 原药初产品的制备 药物分析研究 药剂学研究
临床前药理研究：
① 药效学研究 ② 药代动力学研究 ③ 毒理学研究：一般毒性试验、特殊毒性试验
兽医生物制品学第八章兽用疫苗生产与质量控制图文
免疫原性不足问题及其改进方法
抗原含量不足
疫苗中抗原含量不足可能导致免疫效果 不佳。应优化生产工艺，提高抗原产量 和纯度；同时加强质量控制，确保每批 疫苗中抗原含量符合标准。
VS
佐剂选择不当
佐剂能够增强疫苗的免疫原性，但选择不 当可能导致免疫效果不佳。应根据疫苗类 型和目标动物选择合适的佐剂，并进行充 分的试验验证。
智能化生产技术应用前景
自动化生产线
采用机器人、自动化设备等实现疫苗生产流程的自动化， 提高生产效率和质量稳定性。
01
数字化工厂
利用物联网、大数据等技术实现疫苗生 产过程的数字化管理，实现生产数据的 实时采集、分析和优化。
02
03
智能制造
结合人工智能、机器学习等技术，实 现疫苗生产的智能化决策和优化，提 高生产效率和降低成本。
将纯化浓缩后的疫苗原液与佐 剂、稳定剂等按一定比例混合， 然后Байду номын сангаас行分装。
病毒或细菌培养
选择合适的培养基，在特定的 温度和pH条件下进行病毒或 细菌的培养。
纯化与浓缩
通过超滤、层析等方法去除杂 质，提高疫苗纯度；同时采用 浓缩技术提高疫苗效价。
冻干与保存
对部分疫苗进行冻干处理，以 便长期保存和运输。
关键生产环节介绍
确保供应商具有合法资质和良好信誉，能够提供符合质量标准的原 材料。
原材料检验
对每批次的原材料进行严格的质量检验，包括外观、纯度、活性等 指标，确保原材料质量符合要求。
储存条件控制
对原材料的储存条件进行严格控制，确保在规定的温度、湿度和光 照条件下储存，避免原材料变质或失效。
生产过程质量控制
01
生产工艺控制
污染问题及其预防措施
兽用疫苗生产和质量控制专家讲座
稳定性试验
筛选出毒力强、抗原性好、生长稳定、纯净毒株，用于制备疫苗、诊疗液和治疗 用抗体或疫苗效力检验用
兽用疫苗生产和质量控制专家讲座
冻干、冷冻或冷藏保留
第27页
弱毒菌（毒）种选育
弱毒菌（毒）种选育
自然弱毒株分离
人工诱变致弱
同源动物 （如NDV LaSota株）
异源动物 （HVT FC126株）
化学路径
分比对应病毒组成，其特点是能够延缓病毒释 放，提升疫苗安全性和免疫效果。
兽用疫苗生产和质量控制专家讲座
第12页
活疫苗特点
可在体内繁殖 系统免疫反应和局部免疫反应 免疫力持久，产量高，成本低 有毒力增强和反祖危险 抗原干扰现象 保留条件苛刻
兽用疫苗生产和质量控制专家讲座
第13页
死疫苗（killed vaccine）
非特异性免疫，从而使动物机体对其它抗
原物质特异性免疫力更强更持久，如脂多
糖、多糖、缓释微球、细胞因子，免疫刺
激复合物等。
兽用疫苗生产和质量控制专家讲座
第6页
普通制品：指用普通方法制备、未经浓缩 和纯化处理，或仅按毒（效）价标准稀释 制品。如现有国内大部分传统疫苗均为普 通制品。
精制生物制品：将普通制品（原制品）经 浓缩和纯化处理，去除无效成份，毒（效） 价高于普通制品效力更加好，如精制破伤 风毒素和精制结核菌素等。
抗病血清（antiserun）：或高免血清，为含 有高效价特异性抗体血清，能用于治疗或 紧急预防对应病原体所致疾病。
兽用疫苗生产和质量控制专家讲座
第5页
微生态制剂（probiotics）：又称活菌制剂， 是用非病原微生物如乳酸杆菌、双歧杆菌
等活菌制剂，口服治疗畜禽肠道正常菌群
第 八 章 兽医生物制品 制造基本程序-文档资料
4．病毒性疫苗有哪几类，各有何优缺点?
5．简述类毒素制备的基本过程。
兽用生物制品与检测课件
第八章
鸡胚选择:
受精卵必须来自SPF鸡群,从受精卵入 孵开始至培育全过程都应保持无菌，要求 一定的温度和湿度，且需不断翻动。 5～8日龄胚适用于卵黄囊接种：9－ 11日龄胚用于尿囊腔接种；10～12日龄胚 适于羊膜腔接种；11～13日龄胚用于绒毛 尿囊膜接种。
兽用生物制品与检测课件
兽用生物制品与检测课件
第八章
血液采集与血清的提取
（一） 血液的采集 1 全放血 2 部分采血 （二） 血清的提取 1．自然凝结加压法 2．枸橼酸盐血浆分离血清法
兽用生物制品与检测课件
第八章
三 .几种主要的抗血清制备方法
（一） 猪瘟抗血清 （二） 破伤风抗毒素 （三） 卵黄抗体
兽用生物制品与检测课件
① 治疗时应用越早效果越好。 ② 血清用量根据动物的体重和年龄确定。 ③ 静脉注射血清的量较大时，将血清加温 至30℃左右再注射。 ④ 皮下或肌肉注射，当血清量大时，可分 为几个部位注射，并揉压使之分散。 ⑤ 对不同动物源的血清应事先脱敏。
兽用生物制品与检测课件
第八章
1．解释：类毒素、高免血清、卵黄抗体。 2．细菌性灭活疫苗的制备包括哪些过程? 3．细菌性活疫苗的质量受哪些因素的影响?
兽用生物制品与检测课件
第八章
消毒，分离蛋黄。 加入生理盐水进行稀释(卵黄抗体琼 扩效价不低于l:16一l:32)，加青、链 霉素各1 000u，加硫柳汞浓度达1/10 000，充分搅拌后分装，4℃贮存。 效价测定、细菌培养和安全试验，合 格后出厂。
兽用生物制品与检测课件
第八章
免疫血清及卵黄抗体使用注意事项
兽医生物制品学第八章兽用疫苗生产与质量控制-PPT精选文档
菌 （毒）种分类
菌（毒）种分强毒和弱毒 • 强毒：通常指从得病动物体内分离到的致 病毒株，只能用于制造灭活疫苗和检验用 • 弱毒：通常是采用人工的方法用强毒致弱 而成，一般于制造活疫苗
菌 （毒）种质量标准
• 生物学特性明显、历史清楚：形态、培养特性、 生化特性及血清免疫学特性等明显，易于鉴别； 人工感染动物引起稳定一致的临床症状和病理变 化特征；原始细菌或病毒株的来源地区、动物品 种流行资料清楚；分离鉴定资料完整；传代、保 藏和生物学特性检查方法明确。 • 遗传学上相对纯一与稳定：菌毒种在传代增殖过 程中某些遗传形状会发生改变和分离，如形态特 征、毒力、反应原性、免疫原性等方面，因此要 求制造生物制品的菌（毒）种的这种改变和分离 越小越好，应经常进行挑选，纯化和克隆。
活疫苗
灭活疫苗
检验
病毒性组织疫苗的制造工艺流程
基础种毒 健康动物或SPF鸡胚等 生产用种毒 健康动物或SPF鸡胚等 动物或SPF鸡胚等
感染动物或胚胎
收获感染组织或胚液 原料 配制 保护剂 配苗 分装冻干 检验 活疫苗 配苗、乳化 分装、扎盖、贴签 纯化配制成含毒悬液 灭活 灭活病毒液 原料 配制 佐剂
原料
分装、扎盖、帖签 灭活疫苗
检验
分装冻干、扎盖帖签 活疫苗
病毒性细胞疫苗的制造工艺流程
健康动物（或胚胎） 组织 基础种毒 细胞悬液 生产用种毒 配制 灭菌 原料 生长细胞 病毒液 配苗 分装冻干、扎盖帖签 培养收获 灭活 传代细胞 灭活病毒液 原料 配制 灭菌 佐剂 原料 细胞培养液
配制
保护剂
配苗（混匀、乳化） 分扎盖帖签装 检验
弱毒菌（毒）种的选育
弱毒菌（毒）种的选育
自然弱毒株的分离
人工诱变致弱
兽医生物制品学兽用疫苗生产和质量控制
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
1、疫苗生产基本条件
➢ 产品批准文号 ➢ 菌（毒）种 ➢ 疫苗《制造及检验规程》 ➢ GMP厂房、设施和仪器设备
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
产品批准文号
• 农业部颁发批准文号 • GMP证书(具备该疫苗生产线) • 产品复核检验(具备生产该疫苗的能力) • 标签、说明书样稿审查(符合规程规定) • 省级文号？
LD50 EID50 ELD50 TCID50 血清学实验 攻毒保护实验
稳定性实验
筛选出毒力强、抗原性好、生长稳定、纯净的毒株，用于制备疫苗、诊断液和治疗 用抗体或疫苗效力检验用
冻干、冷冻或冷藏保存
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
弱毒菌（毒）种的选育
弱毒菌（毒）种的选育
自然弱毒株的分离
人工诱变致弱
洁净度：按各功能间洁净度、压力、压差要求设计施 工。有10万级区、万级区和局部百级区。
六大系统：供电、供水、供汽、污水处理、净化、监 控。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
厂房、设施和仪器设备
• 检验设施
质检室 检验动物舍（应配备有符合各类实验动物级别
饲养设施）
• 仓储设施
原辅材料库 半成品库 成品库
• 毒力应在规定的范围以内：用于制造弱毒疫苗的 菌毒种，毒力应尽量弱一些；用于制造抗血清、 灭活疫苗和疫苗效力检测的菌（毒）种毒力应强， 且抗原性要尽量高
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
菌（毒）种的筛选程序和内容
病毒分离
纯粹性试验
致病性试验
抗原性试验
原动物 实验动物
鸡胚
细胞 反应原性 免疫原性
同源动物 （如NDV LaSota株）
1、疫苗生产基本条件
➢ 产品批准文号 ➢ 菌（毒）种 ➢ 疫苗《制造及检验规程》 ➢ GMP厂房、设施和仪器设备
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
产品批准文号
• 农业部颁发批准文号 • GMP证书(具备该疫苗生产线) • 产品复核检验(具备生产该疫苗的能力) • 标签、说明书样稿审查(符合规程规定) • 省级文号？
LD50 EID50 ELD50 TCID50 血清学实验 攻毒保护实验
稳定性实验
筛选出毒力强、抗原性好、生长稳定、纯净的毒株，用于制备疫苗、诊断液和治疗 用抗体或疫苗效力检验用
冻干、冷冻或冷藏保存
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
弱毒菌（毒）种的选育
弱毒菌（毒）种的选育
自然弱毒株的分离
人工诱变致弱
洁净度：按各功能间洁净度、压力、压差要求设计施 工。有10万级区、万级区和局部百级区。
六大系统：供电、供水、供汽、污水处理、净化、监 控。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
厂房、设施和仪器设备
• 检验设施
质检室 检验动物舍（应配备有符合各类实验动物级别
饲养设施）
• 仓储设施
原辅材料库 半成品库 成品库
• 毒力应在规定的范围以内：用于制造弱毒疫苗的 菌毒种，毒力应尽量弱一些；用于制造抗血清、 灭活疫苗和疫苗效力检测的菌（毒）种毒力应强， 且抗原性要尽量高
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
菌（毒）种的筛选程序和内容
病毒分离
纯粹性试验
致病性试验
抗原性试验
原动物 实验动物
鸡胚
细胞 反应原性 免疫原性
同源动物 （如NDV LaSota株）
兽用生物制品的生产和质量管理 (PPT 94页)
验证与核对
验证是一个规定的程序，可提供很高的可信度，使某一特定工艺过 程能稳定地生产符合质量标准的生物制品。验证的内容包括制造工艺、 检验方法、原材料、设备、设施及操作人员等。通过验证，可以考查工 艺、方法及设备的有效性，对生产工艺提出问题，预防生产事故，保证 生产质量的稳定性。
GMP要求对生产全过程，包括生产流程及记录、检定方法及结果、 半成品及成品转移和成品标签等进行核对，对制品转移记录及凭据和发 出制品的检验报告等关键步骤及内容应进行双核对。
强制免疫所需兽用生物制品，由国务院兽医行政管理部门指定的企 业生产。
二、生产管理与质量检验标准
（一）基本原则——“朱兰质量螺旋曲线”模式
二、生产管理与质量检验标准
（二）《兽药生产质量管理规范》（兽药GMP）
1.GMP的基本内容
我国1989年颁布了《兽药生产质量管理规范》。1994年 又颁布了《兽药生产质量管理规范实施细则》。2002年3月修 订发布了《兽药生产质量管理规范》。
《兽药注册办法》，2004年11月15日经农业部常务会议审议通过并发 布施行。
《兽用生物制品注册分类及注册资料要求》（农业部公告第442号发布）
《中华人民共和国兽用生物制品规程》，农业部兽用生物制品规程委 员会编 。
（四）新兽用生物制品的研制
临床前研究（实验室阶段）：包括菌毒种、细胞株、生物组织等 起始材料的系统鉴定、生产工艺、保存条件、遗传稳定性、实验室安 全、效力试验及免疫学的研究等。
（五）兽用生物制品的生产
开办兽用生物制品生产企业（含科研、教学单位的生物制品生产车 间和三资企业）的单位必须在立项前提出申请，经所在地省、自治区、 直辖市人民政府兽医行政管理部门提出审查意见后报国务院兽医行政管 理部门审批。
验证是一个规定的程序，可提供很高的可信度，使某一特定工艺过 程能稳定地生产符合质量标准的生物制品。验证的内容包括制造工艺、 检验方法、原材料、设备、设施及操作人员等。通过验证，可以考查工 艺、方法及设备的有效性，对生产工艺提出问题，预防生产事故，保证 生产质量的稳定性。
GMP要求对生产全过程，包括生产流程及记录、检定方法及结果、 半成品及成品转移和成品标签等进行核对，对制品转移记录及凭据和发 出制品的检验报告等关键步骤及内容应进行双核对。
强制免疫所需兽用生物制品，由国务院兽医行政管理部门指定的企 业生产。
二、生产管理与质量检验标准
（一）基本原则——“朱兰质量螺旋曲线”模式
二、生产管理与质量检验标准
（二）《兽药生产质量管理规范》（兽药GMP）
1.GMP的基本内容
我国1989年颁布了《兽药生产质量管理规范》。1994年 又颁布了《兽药生产质量管理规范实施细则》。2002年3月修 订发布了《兽药生产质量管理规范》。
《兽药注册办法》，2004年11月15日经农业部常务会议审议通过并发 布施行。
《兽用生物制品注册分类及注册资料要求》（农业部公告第442号发布）
《中华人民共和国兽用生物制品规程》，农业部兽用生物制品规程委 员会编 。
（四）新兽用生物制品的研制
临床前研究（实验室阶段）：包括菌毒种、细胞株、生物组织等 起始材料的系统鉴定、生产工艺、保存条件、遗传稳定性、实验室安 全、效力试验及免疫学的研究等。
（五）兽用生物制品的生产
开办兽用生物制品生产企业（含科研、教学单位的生物制品生产车 间和三资企业）的单位必须在立项前提出申请，经所在地省、自治区、 直辖市人民政府兽医行政管理部门提出审查意见后报国务院兽医行政管 理部门审批。
兽医生物制品学兽用疫苗生产与质量控制50页PPT
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
兽医生物制品学兽用疫苗生产与质量
控制
21、没有人陪你走一辈子，所以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候，留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
谢谢！
36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
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稳定性实验
筛选出毒力强、抗原性好、生长稳定、纯净的毒株，用于制备疫苗、诊断液和治疗 用抗体或疫苗效力检验用
冻干、冷冻或冷藏保存
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弱毒菌（毒）种的选育
弱毒菌（毒）种的选育
自然弱毒株的分离
人工诱变致弱
同源动物 （如NDV LaSota株）
异源动物 （HVT FC126株）
化学途径
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ物理途径 生物途径
亚硝基胍 醋酸坨 洗衣粉
• 遗传学上相对纯一与稳定：菌毒种在传代增殖过 程中某些遗传形状会发生改变和分离，如形态特 征、毒力、反应原性、免疫原性等方面，因此要 求制造生物制品的菌（毒）种的这种改变和分离 越小越好，应经常进行挑选，纯化和克隆。
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• 反应原性和免疫原性优良：反应原性高，即使微 量量的抗原物质进入机体内既能产生强烈的免疫 反应，血清学上会出现很高的特意性；优良的免 疫原性物质能使免疫动物产生完善的免疫应答， 从而获得坚强的免疫力
• 毒力应在规定的范围以内：用于制造弱毒疫苗的 菌毒种，毒力应尽量弱一些；用于制造抗血清、 灭活疫苗和疫苗效力检测的菌（毒）种毒力应强， 且抗原性要尽量高
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菌（毒）种的筛选程序和内容
病毒分离
纯粹性试验
致病性试验
抗原性试验
原动物 实验动物
鸡胚
细胞 反应原性 免疫原性
LD50 EID50 ELD50 TCID50 血清学实验 攻毒保护实验
• 灭菌设备：高压蒸气灭菌柜、干热箱、锅炉等；
• 净化设备：净化机组、无菌室、超净工作台等；
• 微生物培养设施设备：温室、孵化器、细胞培养转瓶机、 各种罐体、生化培养箱等；
• 乳化设备：各种罐体、胶体摸、高压匀浆机等；
• 冻干设备：冻干机；
• 灌装设备：洗烘连动线、自动灌装加塞联动机；
• 包装设备：扎盖机、帖标机；
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菌 （毒）种分类
菌（毒）种分强毒和弱毒 • 强毒：通常指从得病动物体内分离到的致
病毒株，只能用于制造灭活疫苗和检验用 • 弱毒：通常是采用人工的方法用强毒致弱
而成，一般于制造活疫苗
5
菌 （毒）种质量标准
• 生物学特性明显、历史清楚：形态、培养特性、 生化特性及血清免疫学特性等明显，易于鉴别； 人工感染动物引起稳定一致的临床症状和病理变 化特征；原始细菌或病毒株的来源地区、动物品 种流行资料清楚；分离鉴定资料完整；传代、保 藏和生物学特性检查方法明确。
• 冷藏冷冻设施设备：冷库、冷柜、液氮罐等；
• 污水废弃物处理设施设备：灭菌柜、消毒罐、污水处理站；
• 检验仪器设施设备：各种显微镜、水分测定仪、二氧化碳
培养箱、生物安全柜、动物房等。
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福州大北农公司总体布局图
大动物房 小动物房
主 厂房
质检楼
锅炉房
脾林苗
污水 处理站
仓储
办公区 生活区
大门
14
15
高温 紫外线
适应非易感动物 或细胞 杂交减毒
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疫苗《制造及检验规程》
• 任何一种疫苗都有其《制造及检验规程》，它是 国家法定标准。
• 疫苗的生产必须严格按《规程》规定的方法进行 生产和检验，若要改变方法，则要提供研究材料 证明是可行的，并报农业部评审批准，形成新 《规程》才能进行生产。
• 《规程》来源
中华人民共和国《兽用生物制品规程》（常规疫苗） 转让单位（新兽药）
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厂房、设施和仪器设备
• 《GMP》证书是疫苗生产的准入证， 疫苗生产必 需拥有与生产工艺相符合的生产线
• GMP 生产车间设计要求
功能区：抗原制备区、成品生产区、洗涤区、办公区。 各区域和功能间以洁净走廊相连，严格按人流物流分 开原则进行设计。
佐剂 配苗乳化
配苗
保护剂
分装、扎盖、帖签
分装冻干、扎盖帖签 检验
灭活疫苗
活疫苗
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病毒性细胞疫苗的制造工艺流程
基础种毒
健康动物（或胚胎） 组织
细胞悬液
原料 细胞培养液
配制
配制 灭菌
生产用种毒 原料
保护剂
生长细胞 病毒液 配苗
传代细胞
培养收获 灭活病毒液
灭活
配苗（混匀、乳化）
原料 配制 灭菌
佐剂
分装冻干、扎盖帖签
灭活疫苗
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影响疫苗质量的关键环节
• 活疫苗
➢ 生产用菌（毒）种的制备是否优良 ➢ 制苗用抗原制备（微生物增殖）是否高效 ➢ 冻干保护剂的选择和冻干曲线的制定是否合理
• 灭活疫苗
➢ 生产用菌（毒）种的制备是否优良 ➢ 制苗用抗原制备（微生物增殖）是否高效 ➢ 抗原灭活是否彻底 ➢ 乳化工艺是否先进
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菌 （毒）种
• 菌（毒）种是疫苗生产必备的原材料，国 家对菌（毒）的保管和使用有严格的规定 和限制（生物安全问题）。
• 生产疫苗的菌（毒）种来源：中国兽医药 品监察所或新兽药转让单位。
• 菌（毒）种保管和使用：基础种毒由中国 兽医药品监察所或其委托的保管单位进行 生产、鉴定和保管，生产用种子批由企业 生产、鉴定和保管。
分扎盖帖签装
活疫苗
检验
灭活疫苗
检验
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病毒性组织疫苗的制造工艺流程
基础种毒 健康动物或SPF鸡胚等
生产用种毒
动物或SPF鸡胚等 健康动物或SPF鸡胚等
原料 保护剂
感染动物或胚胎
配制
收获感染组织或胚液 纯化配制成含毒悬液
配苗
分装冻干
检验
活疫苗
灭活 灭活病毒液
原料 配制
配苗、乳化
佐剂
分装、扎盖、贴签
检验
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疫苗生产工艺流程
菌（毒）种 培养物（培养基、动 物、禽胚或细胞等） 收获抗原（培养 液、含毒组织、胚液或细胞液等） 配苗
分装 冻干成活疫苗或灭活后制成灭 活疫苗。
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细菌疫苗的制造流程
菌种
蛋白胨、肉浸液等原料
生产用种子
培养基
配制、灭菌
原料
配制、灭菌 灭活 灭活菌液
培养 菌液 菌苗原液
原料 配制、灭菌
疫苗生产工艺介绍
1. 疫苗生产基本条件 2. 疫苗生产工艺流程 3. 生产中影响疫苗质量的关键环节 4. 疫苗抗原制造技术介绍 5. 疫苗检验 6. 疫苗保存
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1、疫苗生产基本条件
➢ 产品批准文号 ➢ 菌（毒）种 ➢ 疫苗《制造及检验规程》 ➢ GMP厂房、设施和仪器设备
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产品批准文号
• 农业部颁发批准文号 • GMP证书(具备该疫苗生产线) • 产品复核检验(具备生产该疫苗的能力) • 标签、说明书样稿审查(符合规程规定) • 省级文号？
洁净度：按各功能间洁净度、压力、压差要求设计施 工。有10万级区、万级区和局部百级区。
六大系统：供电、供水、供汽、污水处理、净化、监 控。
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厂房、设施和仪器设备
• 检验设施
质检室 检验动物舍（应配备有符合各类实验动物级别
饲养设施）
• 仓储设施
原辅材料库 半成品库 成品库
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厂房、设施和仪器设备