大肠菌群-原始记录
大肠菌群测定原始记录
时间：检验地点：本厂化验室
检测样品名称：来源：
生理盐水的配制：8.5g氯化钠加1000ml蒸馏水溶解待用。
1.取225ml生理盐水于标签为1:10的300ml锥形瓶中，
取9ml生理盐水于标签为1:100的50ml锥形瓶中。
2.LST溶液的配制：取LST7.1g加水100ml（双料），溶解至透明，
取1:100的稀释样1ml于标有0.01g的3只试Байду номын сангаас中，
5．培养：放入36℃的培养箱中培养48h。时间起始：
24h产气管数：
48h产气管数：
6．BGLB溶液复发酵试验：配制BGLB溶液，称取BGLB4g溶液100ml水中，均分倒入对应产气标号的标有标示并放有聚气管的试管中，放入灭菌锅灭菌15min。用接种针粘一环产气管液于标有对应的以灭菌的BGLB溶液的试管中，于36℃的培养箱中培养48h。
倒入10ml于3只标有1g的并放有聚气管的试管中;剩余溶液加一倍水配成单料倒入标有0.01g，0.001ml的6只试管中，每只10ml,并放有聚气管(试管要求180×18mm)。
放入灭菌锅灭菌15min.
以上1；2；同时一起灭菌，灭菌起始时间(喷气开始计时)：
压力表指针回零后打开放气阀，开盖取出，冷至常温。
培养起始时间：
48h产气管数：
7.检索MPN表结论：
备注：
3.样品稀释：于225ml灭菌的生理盐水中加入样品25g，混匀，配成1:10的稀释样；
从1:10的稀释样中取1ml到入标有1:100的9ml灭菌的生理盐水中混匀，配成1:100稀释样;
4.初发酵试验：取1:10的稀释样10ml于标有1g的3只试管中，
取1:10的稀释样1ml于标有0.1g的3只试管中，
大肠菌群原始记录
样品编号
LST肉汤初发酵试验培养温度℃，培养开始时间年月日点分，培养结束时间年月日点分。
用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，接种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，培养观察。
样
品
编
号
BGLB肉汤复发酵试验
培养温度℃，培养开始时间年月日点分，培养结束时间年月日点分。
结果报告
MPN/mL
备注：+：阳性-：阴性
绥芬河出入境检验检疫局综合技术中心密山实验室
ZJ-03-107大肠菌群检验原始记录
样品名称：样品号：
检验日期：验讫日期：标准物质Biblioteka 号检验依据设备编号
大肠菌群计数
第一法大肠菌群MPN计数法：取检样25g(ml)+225ml，用均质器均质1min，制成1:10的样品匀液。按10倍递增稀释，选取6个适宜的稀释倍数，接种LST肉汤管，每个稀释度接种三管，培养观察。
20-6.大肠菌群检验原始记录
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
3
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
4
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长大肠菌群检验原始记录来自检验项目大肠菌群
样品状态
□完好□异常
检验
方法
GB 4789.3—2016（第二法）
仪器
设备
样品
处理
□固体样品：无菌操作称取25g加入到225mL无菌生理盐水均质袋中，拍打1～2min
□液体样品：无菌吸管吸取25mL加入到225mL灭菌生理盐水中，充分混匀
样品
序号
培养过程
稀释倍数
结果计算
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
5
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
琼脂
对照
0 CFU/皿
盐水
对照
0 CFU/mL
检验人：
复核人：
检验日期：
报告CFU/g
100
10-1
10-2
10-3
1
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
2
大肠菌群检测原始记录
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
审核：
年月
日
编号： 样品名称：
检验依据：GB/T4789.3-2016 培养开始时间： 年 月 培养结束时间： 年 月
稀பைடு நூலகம்度
1
稀释度
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
2
稀释度
3
稀释度
4
稀释度
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1
2
3
5
1
2
3
1
2
3
检验员：
大肠菌群检测原始记录
批次：
日时
日时
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
恒温时间： h 恒温温度：36℃±1℃
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
大肠菌检验原始记录
养生坊大肠菌群检验原始记录表检样名称：样品编号：检验依据：大肠菌群（MPN/100ml）检验方法：每个样品，选择三个连续稀释度的样品稀释液。
1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性。
稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期：检验时间：检验员：检样名称：样品编号：检验依据：大肠菌群（MPN/100ml）检验方法：每个样品，选择三个连续稀释度的样品稀释液。
1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性。
稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期：检验时间：检验员：检样名称：样品编号：检验依据：大肠菌群（MPN/100ml）检验方法：每个样品，选择三个连续稀释度的样品稀释液。
1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性。
稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期：检验时间：检验员：。
大肠菌群测定原始记录
要求：初发酵试验：36℃±1℃；24h±2h或48h±2h。复发酵试验：36℃±1℃；48h±2h。
初发酵：＿月＿日＿时至＿月＿日＿时；复发酵：＿月＿日＿时至＿月＿日＿时。
稀释度
管号
接种量
（ml）
初次发酵
导管有
无气泡
阴
阳
性
复发酵
导管有
无气泡
阴
阳
性
大肠菌群最有可能数（MPN/100g）
LST肉汤
BGLB肉汤
大肠菌群测定原始记录
编号：
样品名称
规格型号
生产批次
抽样数量
检验标准
GB4789.3-2010
生产日期
检验日期
样品
处理
无菌操作取检样25g，加225ml无菌生理盐水，均质处理得1:10稀释液，再用灭菌生理盐水按梯度稀释，得1:100、1:1000稀释液，选择三个连续的适宜稀释度接种发酵管，双料发酵管接种稀释液10ml，单料发酵管接种稀释液1ml。
备注：
检验员：年月日校核员：年月日
1:10
1
24h( ) 48h( )
2
1
24h( ) 48h( )
3
1
24h( ) 48h( )
1:100
1
1
24h( ) 48h( )
2
1
24h( ) 48h( )
3
1
24h( ) 48h( )
1:1000
1
1
24h( ) 48h( )
2
1
24h( ) 48h( )
3
1
24h( ) 48h( )
菌落总数、大肠菌群原始记录
检样细菌总数：
□cfu/mL □cfu/g
大肠菌群最近似值：检验依据 GB/T4789.3
样 品 稀释度 样品接种量 毫升管号 1 10mL 2 3 1 1mL 2 3 1 0.1mL 2 3 标准值： □MPN/100mL □MPN /100g □MPN/mL □MPN /g 结 论： LST 肉汤 初发酵试验 BGLB 肉汤 复发酵
YSJL01-002
菌落总数、大肠菌群检验数据原始记录
样品编号____________
主要仪器设备：□电子天平( )、 □电热恒温培养箱(
第ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
页共
页
)
)、 □显微镜(
菌落总数：检验依据 GB/T 4789.2
样品稀释度 检 测 值： □cfu/mL □cfu /g 计算平板菌落数 cfu 标 准 值： □cfu/mL □cfu/g 结论：
检样大肠菌群最近似值：
检样大肠菌群最近似值相当于： □MPN/100mL □MPN /100g
备注：
检验人员、检验日期 校核人员、校核日期
大肠菌群检验原始记录
初发酵（月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤，）支）
产气管数（支）
复发酵(煌绿乳糖胆盐
肉汤，
37℃，,48h)
产气管数（支）
10-1
10-2
10-3
检验结果
（MPN/100g）
检验人：复核人：
大肠菌群检验检验原始记录
样品名称
明胶
样品编号
样品状态
生产日期
检验依据
GB4789.3-2010
检验日期
大肠菌群检验过程：
1、称取样品25g样品放入盛有225ml灭菌的生理盐水中，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。
2、初发酵试验：大肠菌群每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内产气情况。如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。
三、复发酵试验：（大肠菌群的测定）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。
微生物检验原始记录(大肠菌群)
微生物检验原始记录(大肠菌群)检验原始记录编号：报告类别：微生物共页项目：大肠菌群coliforms 检验地点：样品名称：样品编号：样品状态：符合检验要求；其他境条件：实验依据及步骤GB4789.3-2016样品稀释固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225ml生理盐水或磷酸盐缓冲液的无菌均质容器内均质，或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中拍击式均质器拍打，制成为1:10样品匀液。
依次进行10倍递增稀释。
液体样品：以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中混匀，为1:10样品匀液。
样品匀液的ph应在6.5-7.5之间，必要时分别用1mol/lNaOH或1mol/lHcL调节。
取1mL1∶10稀释匀液沿管壁缓缓注入9ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成1:100样品匀液。
按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸量管。
从样品匀液制备到样品接种完毕，全过程不得超过15min。
初发酵试验（9管法）每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤）36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内是否有气泡产生。
产气者进行复发酵试验，未产气则继续培养至48±2h，产期进行复发酵试验。
未产气者为大肠菌群阴性。
复发酵试验（证实试验）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。
数据分析与结果一、菌落计数根据证实为大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群的最可能数。
大肠菌群检测原始记录(平板法)
微生物检验原始记录
检测项目：□大肠菌群
样品名称样品编号样品状态和特性生产单位
使用仪器设备及实验
环境生化培养箱、压力蒸汽灭
菌器
依据GB4789.3
检测项目培养基10010-110-210-310-4空白
平板计数结晶紫中性红胆盐琼脂
证实试验
选择的平板可
疑菌落数
稀释倍数
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、大肠菌落数CFU/ml(g)
检测人：
检验日期：年月日
验讫日期：年月日。
大肠菌落原始记录
×××产品质量计量检测所
产品检验原始记录
No
产品名称样品编号技术标准
检测地点温度湿度
大肠菌群的测定
一、设备和材料
培养箱（36℃±1℃）；恒温水浴锅（46℃±1℃）
二、操作步骤
1、称取（吸取）25g（ml），放于盛有225ml生理盐水的无菌锥形瓶中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
2、用1ml无菌吸管吸取1:10样品匀液1ml，沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中，振摇试管使其混合均匀，制成1:10的样品匀液。
3、按上述操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液，每递增稀释一次，换用一次1ml无菌吸管。
4、选择稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，分别接种ml；ml；ml，在36℃±1℃培养24±2h，未产气者为大肠菌群阴性。
对产气者按下述进行复发酵实验。
5、用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48±2h，产气者，计为大肠菌群阳性管。
三、大肠菌群最可能数（MPN）的报告见下表
检验：审核：检验日期：。
大肠菌群检测原始记录表(多管发酵法)
5
证实试验，上述镜检阴性菌接种乳糖蛋白胨培养液，置 35℃±2℃培养 24h
观察：是否产酸产气
6 结果报告
样品接种量 （ml）
第一次发酵
检测结果
EM 平板生长情 况
革兰氏染色
第二次发酵
结果报告
“-”表示不产酸也不产气；“+”表示只产酸不产气，培养基变黄色；“ ”表示产酸又产气，培养基变黄，并有气泡
1 10g 样品+200mL 稀释液混匀（或原液直接检验）；
2
乳糖胆盐发酵试验：将试样 ml 倒入 乳糖胆盐发酵管中 35℃±2℃培养 24h 观察：是否产酸产气，如有进行下步
3
分离培养，将产酸产气发酵管转种伊红美蓝琼脂平板，于 35℃±2℃培养 24h 观察菌落形态。
4 挑选可疑菌落进行革兰氏镜检，阴性（-），阳性（+）。
检测人：
复核人：
审核人;
项目名称 送样日期 检测依据 检测地点 检验仪器 检测试剂 样品制备
检验程序
样品编号
大肠菌群检测原始记录表（多管发酵法）
项目编号
检测日期
检测方法
多对湿度： %
生化培养箱 菌落计数仪 生物安全柜 超净台 电子秤
固体和半固体样品：无菌称取 10g±1g，剪碎后加入到 200mL 无菌生理盐水中，充分混匀。 □涂抹样品：将采样后棉拭子的试管充分振摇后，吸原液检验。 □液体样品：直接吸原液检验。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
MPN/ml（g）
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
主检：检验日期：年月日验讫日期：年月日
主检：检验日期：年月日验讫日期：年月日
微生物检验原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
大肠菌群
GB4789.3-2010
操作过程：
10ml
1ml
0.1ml
0.01ml
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
4、吸取10-2样品匀液各1mL分别注入三个单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤试管中，再吸取1mL 10-2样品匀液注入盛有9mL生理盐水的试管汇总，制成10-3样品匀液。
5、吸取10-3样品匀液各1mL，分别注入三个单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤试管中。
6、将上述试管于36±1℃的生化培养箱内培养48h±2h,观察倒管内产气情况。
微生物检验原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程：
培养基
100
10—1
10—2
10—3
10—4
空白
cfu/ml（g）
平板计数琼脂培养基
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
2、配制0.85%生理盐水250mL,分别吸取9ml于2个试管中，量取225ml三角瓶中，并加数粒玻璃珠，将上述试管和三角瓶分别加塞用报纸包好，与已包好的吸管（1ml、10mL）一起高压灭菌（121℃20min）。
3、称取25克样品置于225mL已灭菌的生理盐水中，摇匀，制成10-1样品匀液。吸取1ml10-1样品匀液注入盛有9mL稀释液（无菌生理盐水）试管中，摇匀，制成10-2样品匀液。并吸取10-1样品匀液各10mL,注入3各双料试管中。
2、与包好的培养皿、吸管（1mL、10mL）一起高压灭菌（121℃20min）。
3、称取25克样品置于225mL已灭菌的生理盐水中，摇匀，制成10-1样品匀液。
4、用1mL无菌吸管吸取1mL10-1样品匀液,沿管壁注入盛有9mL稀释液（无菌生理盐水）试管中，摇匀，制成10-2样品匀液。
5、用1ml无菌吸管吸取1mL10-2样品匀液,沿管壁注入盛有9ml稀释液（无菌生理盐水）试管中，摇匀，制成10-3样品匀液。
10ml
1ml
0.1ml
0.01ml
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
MPN/ml（g）
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
主检：检验日期：年月日验讫日期：年月日
培养基
100
10—1
10—2
10—3
10—4
空白
cfu/ml（g）
平板计数琼脂培养基
大肠菌群
GB4789.3-2010
操作过程：
1、配制单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤100 mL,分别注入6个试管中约10mL(每个试管里有小倒管).配制双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤100mL，分别注入3个试管中约10mL(每个试管里有小倒管)。
微生物检验原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2ห้องสมุดไป่ตู้2010
操作过程：
1、配制200mL平板计数琼脂培养基于250mL三角烧瓶中，配制0.85%的生理盐水300mL,分别吸取9mL生理盐水置于2个试管中，将三角瓶、试管加塞棉塞，用报纸包好。
6、选择样品匀液10-1、10-2、10-3，分别吸取1ml加入无菌平皿内，分别吸取1mL稀释液（无菌生理盐水）加入平皿内做空白。
7、将15-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养就倾注平板内，并转动平皿，使其混合均匀，待琼脂凝固后将平皿翻转。
8、将平皿于36±1℃的生化培养箱内培养48h±2h,计数。