用于液相色谱的各种溶剂的性质
液相色谱中磷酸和甲酸的区别
液相色谱中磷酸和甲酸的区别液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是一种广泛应用于化学分析和分离的技术。
液相色谱根据溶剂的选择可以分为不同类型，其中包括反相色谱、正相色谱、离子交换色谱等。
在液相色谱中，磷酸和甲酸是两种常见的有机酸，它们在分析中具有不同的性质和应用。
分子结构：
磷酸（Phosphoric acid）是一种含有磷原子的有机酸，化学式为H3PO4。
磷酸具有高度极性的特点，常用作缓冲剂和催化剂。
甲酸（Formic acid）是一种含有羰基和羟基的有机酸，化学式为HCOOH。
甲酸具有较强的酸性，具有还原性和腐蚀性。
酸性：
磷酸是一种中强度酸，其酸性较高，可与碱反应生成相应的盐。
甲酸是一种较强的酸，其酸性比磷酸更强，可与碱反应形成相应的盐。
用途：
磷酸在液相色谱中常用作缓冲剂，可调节溶剂的酸碱度，使得分离效果更好。
此外，它还可以作为螯合剂在液相色谱中用于金属离子的分离和测定。
甲酸在液相色谱中常用作过渡金属络合剂，用于增强某
些化合物的分离效果。
它还可以作为质谱中草酸质子化试剂，用于质谱分析中的离子化。
总结来说，在液相色谱中，磷酸和甲酸的区别主要体现在分子结构、酸性和用途上。
磷酸具有高极性和中强度的酸性，主要用作缓冲剂和催化剂；而甲酸具有较强的酸性，常用作过渡金属络合剂和离子化试剂。
甲醇和乙腈的在液相色谱中的作用
在反相色谱中, 甲醇和乙腈是最常用的有机溶剂，二者性质的差异表现在LC性能上的区别。
（1）价格，乙腈高于甲醇在分析成本上，HPLC级的乙腈，价格比HPLC级的甲醇高的多。
因此，一般的LC 分析有机试剂首选甲醇为多。
但文献所示的条件多用乙腈。
（2）吸光度，乙腈低于甲醇图3.2和图3.3 分别是乙腈和甲醇的市售HPLC级和优级纯的吸收光谱。
所谓的HPLC级是指除去具有吸收UV的物质, 在规定的吸收波长上的吸光度小于规格值, 但并不是指绝对的纯度高。
从这四种试剂的吸收光谱看，HPLC级的乙腈吸收最小，尤其在低波长范围。
因此在UV检测时，其产生的噪音最小，在低波长尤其明显。
在UV低波长检测时，高灵敏度检测用HPLC级乙腈最合适。
另外，在梯度分析用UV检测时，HPLC级乙腈产生的鬼峰最少，同时由于其低的吸收值，梯度变化使吸收值变化最小，较大范围内的反相有机试剂梯度用HPLC乙腈最适宜。
HPLC级和优级甲醇的吸收光谱相差不大，但优级不能保证低吸光度，因此还是尽量使用HPLC级甲醇。
（3）压力，乙腈低于甲醇色谱柱的压力降同很多因素有关，包括柱长度、内径、填料颗粒大小、填料性质、流速、温度及流动相组成等。
但在实际分析过程中，色谱柱确定后，影响压力变化的因素主要是流动相中有机溶剂和缓冲液混合比例的不同，图3.4中显示了水/乙腈，水/甲醇混合液的比例与压力的关系。
从图中可以看到，甲醇与水混合后随着甲醇比例的增大压力先增高后降低，而乙腈以同样比例与水混合并不如此，乙腈明显优于甲醇。
同时我们也看到温度对压力的影响，温度升高，压力下降。
（4）流动相脱气，乙腈要注意。
这里只讨论预先混合的流动相配置问题。
甲醇与水混合时会发热，温度升高，多余溶解的空气较易变为脱出气泡，容易脱气。
而乙腈与水混合是吸热反应，随着温度慢慢回到室温，产生气泡，所以要考虑脱气。
（5）洗脱强度，一般而言，乙腈大于甲醇。
乙腈和甲醇与水组成混合流动相，当二者比例相同时，一般情况下，乙腈的洗脱能力强，尤其是混合比例低时。
液相色谱流动相的选择依据及使用注意事项
液相色谱（Liquid Chromatography, LC）是一种常用的分离和分析方法，它使用液体作为流动相，在不同组分之间进行分配和分离。
在液相色谱分析中，流动相是至关重要的，它直接影响分离效果、分析速度和结果准确度。
合理选择液相色谱流动相并注意使用时的一些问题是非常重要的。
一、液相色谱流动相的选择依据1. 样品的性质液相色谱中流动相的选择应考虑样品的性质，包括溶解性、稳定性、挥发性等。
对于极性样品，常使用极性溶剂作为流动相；对于不容易溶解的非极性样品，可以选择非极性溶剂作为流动相。
2. 柱子的选择不同的柱子需要选择不同的流动相，以保证分离效果。
对于反相色谱柱，一般使用的是乙腈或甲醇和水的混合物作为流动相；对于正相色谱柱，则需要选用不同的极性溶剂作为流动相。
3. 分离效果流动相的选择应考虑到所需的分离效果。
对于需要高分离效果的分析，流动相的组成和流速需要进行精细调控；对于一些不需要高分离效果的分析，可以适当简化流动相的组成，提高分析效率。
4. 色谱柱的保护对于某些对色谱柱有损害的物质，可以考虑在流动相中添加一些保护剂，以延长柱子的使用寿命。
二、使用注意事项1. 流动相的配制在使用液相色谱分析时，需要注意流动相的配制。
流动相的配制应准确、稳定，避免在实验中因流动相的质量问题导致结果失真。
2. 流速的控制流速的控制对于分析结果的准确性和重现性有着重要影响。
在选择流速时，需要根据分离效果的要求以及柱子的性能来进行合理的设定。
3. 流动相的贮存流动相在储存和使用过程中需要注意避免受到污染和氧化。
定期更换和清洗流动相的储存容器，保持流动相的纯净度和稳定性。
4. 流动相的回收在实验结束后，应注意对流动相进行回收和处理，避免对环境造成污染。
总结回顾：液相色谱分析中流动相的选择和使用是至关重要的。
合理选择流动相，可以提高分析的准确性和重现性；注意使用时的一些问题，可以延长柱子的使用寿命并保护环境。
需要根据样品的性质、柱子的选择以及分离效果来综合考虑流动相的配制和使用。
关于高效液相色谱仪流动相的选择如何呢
关于高效液相色谱仪流动相的选择如何呢高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于生命科学、化学、医药、环境等多个领域。
其中，流动相的选择对于色谱分离性能和分析结果的准确性有着重要的影响。
一、流动相的组成流动相是指用于在高效液相色谱仪中运载样品溶液，推动样品通过固定相柱的溶剂体系。
一般情况下，流动相由溶剂和缓冲剂组成。
溶剂用于将样品带入色谱柱，而缓冲剂则用于调整流动相的pH值。
在选择流动相的溶剂时，主要要考虑以下因素：1.溶剂极性：色谱柱的固定相特性和待分析的样品特性决定了所需的溶剂极性。
一般来说，溶剂可以选择非极性溶剂、极性溶剂或者两者的混合物，以适应不同的分析要求。
2.溶剂选择：常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等有机溶剂，以及水。
甲醇和乙腈是最常用的有机溶剂，由于它们的极性较低，因此溶解性广泛。
水是最常用的极性溶剂，可以提供更好的分离效果。
3.透过性：一些样品需要在其中一种溶剂中分离，因此选择适当的溶剂对于分析结果的准确性至关重要。
在选择缓冲剂时，需要考虑以下因素：1.pH值的调整：一些分析需要在特定的pH值下进行，需选择合适的缓冲剂，以维持所需的pH值。
2.缓冲能力：缓冲剂应具有良好的缓冲能力，以维持流动相的pH值的稳定性，避免pH值对分离效果的干扰。
3.溶解度：缓冲剂应具有较高的溶解度，以便在高浓度下使用，从而提供稳定的pH值。
二、常用的流动相系统1.等相流动相系统（Isocratic elution）：等相流动相系统是指流动相组成在整个分析过程中保持不变。
这种系统适用于分离度较差的样品，具有简单、稳定、易操作的特点。
2. 梯度流动相系统（Gradient elution）：梯度流动相系统是指在分析过程中，通过改变流动相组成来实现样品的分离。
这种系统适用于需要分离程度较高的样品，提供了更好的分离效果。
用于液相色谱的各种溶剂的性质
用与于液相色谱的溶剂的性质溶剂①紫外截止波长nm③折光率④沸点℃粘度(Cp 25℃)P`⑤FC-78*（*）210 1.267500.4<-2 FC-75210 1.2671020.8<-2 FC-43210 1.291174 2.6<-2197 1.389990.470.1异辛烷（2.2.4三甲基戊烷）（*）正庚烷（*）195 1.385980.40.2正己烷（*）190 1.372690.30.1正戊烷（**）195 1.355360.220环己烷200 1.423810.9-0.2环戊烷（*）200 1.404490.42-0.2 1-氯丁烷（*）220 1.4780.421 1-氯丁烷（*）380 1.624460.340.3 2-氯丙烷（**）230 1.375360.3 1.2四氯化碳265 1.457770.9 1.6正丁醚220 1.3971420.64 2.1三乙胺 1.398890.36 1.9溴乙烷（*） 1.421380.382异丙醚（**）220 1.365680.38 2.4甲苯285 1.4941100.55 2.4对二甲苯290 1.4931380.6 2.5氯苯 1.5211320.75 2.7溴苯 1.557156 1.04 2.7碘代苯 2.8苯基醚 1.58258 3.3 3.4苯乙醚 1.505170 1.14 3.3乙醚（**）218 1.35350.24 2.8苯280 1.498800.6 2.7磷酸三各甲苯酯 4.6碘代乙烷 1.51720.57 2.2正辛醇205 1.4271957.3 3.4氟苯 1.46850.55 3.1苄醚 1.538288 4.5 4.1二氯甲烷（**）233 1.421400.41 3.1苯甲醚 1.5141540.9 3.8异戊醇 1.405130 3.5 3.7 1.2-二氯乙烷228 1.442830.78 3.5叔丁醇 1.38582 3.6 4.1正丁醇210 1.397118 2.6 3.9正丙醇240 1.38597 1.94四氢呋喃（*）212 1.405660.464丙胺（*） 1.385480.35 4.2乙酸乙酯（*）256 1.37770.43 4.4异丙醇205 1.38482 1.9 3.9氯仿（*）245 1.443610.53 4.1苯乙酮 1.532202 1.64 4.8甲乙酮（*）329 1.376800.38 4.7环己酮 1.451562 4.7硝基苯 1.55211 1.8 4.4苯乙腈 1.526191 1.2 4.8二恶烷215 1.42101 1.2 4.8四甲基脲265 1.4491756喹啉 1.625237 3.45吡啶 1.5071150.88 5.3硝基乙烷380 1.391140.64 5.2丙酮（*）330 1.356560.3 5.1苄醇 1.538205 5.5 5.7四甲基胍 6.1甲氧基乙醇210 1.4125 1.6 5.5丙烯碳酸酯 6.1乙醇210 1.35978 1.08 4.3氧二丙腈 6.8苯胺 1.584184 3.77 6.3乙酸 1.37118 1.16乙腈190 1.341820.34 5.8N，N-二甲基乙酰胺268 1.4361660.78 6.5二甲基甲酰胺268 1.4281530.8 6.4二甲基硫酰268 1.47718927.2N-甲基-2-吡咯烷酮285 1.468202 1.67 6.7六甲基磷酸三酰胺 1.45723337.4甲醇（*）205 1.326650.54 5.1硝基甲烷380 1.381010.616间甲酚 1.54202147.4N-甲基甲酰胺 1.447182 1.656乙二醇 1.43118216.5 1.11甲酰胺 1.447210 3.39.6水 1.3381000.8910.2①（*）表示低粘度（〈0.5cp）、沸点适当（〉45℃）的溶剂；（**）表示粘度很小，沸点也很底的溶③指近似截止波长，低于该值时溶剂不透明。
简述液相色谱中流动相的选择
简述液相色谱中流动相的选择
液相色谱 (Liquid Chromatography, LC) 中的流动相，也叫做溶
剂或移动相，是指样品在色谱柱中流动的溶液。
液相色谱的分离效果受到流动相的选择和配比的影响，因此流动相的选择是液相色谱分离技术中十分重要的一环。
液相色谱中常用的流动相包括有机溶剂、水、酸、盐酸/氢氧
化钠、醋酸/乙酸盐以及缓冲液等。
不同类型的溶剂或混合溶
剂可以用来分离不同性质的化合物：
1. 极性化合物的分离一般采用水和一些极性有机溶剂（如甲醇、乙醇、乙腈等）的混合物作为流动相。
2. 非极性化合物的分离则需要使用非极性有机溶剂（如正己烷、甲苯、乙酸乙酯等）或者混合有机溶剂（如乙醚和正己烷的混合物）作为流动相。
3. 酸类化合物和有机酸类化合物的分离用含有少量酸的水溶液（如醋酸溶液等）作为流动相。
4. 离子性化合物的分离则需要使用缓冲液作为流动相。
如果需要可逆电渗析检测器，则流动相需要含有离子对。
需要注意的是，在选择流动相时，不仅要考虑其相容性、带电性、缓冲效应等因素，还要考虑其挥发性、毒性和成本等因素。
因此，流动相的选择应该根据需要的分离效果、性质、成本和实验条件等综合因素进行考虑和选择。
色谱专用溶剂
色谱专用溶剂
色谱专用溶剂主要用于色谱分析中，作为流动相，帮助分离样品中的各个组分。
以下是一些常见的色谱专用溶剂及其应用：
1. 水：在高效液相色谱（HPLC）中，水是最常用的溶剂，尤其在生物化学和环境分析中。
它可以与许多有机化合物混溶，有助于样品的分离。
2. 甲醇：在气相色谱（GC）和液相色谱（HPLC）中，甲醇是一种常用的强溶剂，尤其适合分离极性化合物。
3. 乙腈：在液相色谱中，乙腈是一种常用的中等强度溶剂，适合分离多种有机化合物。
4. 丙酮：在气相色谱中，丙酮是一种常用的溶剂，特别适合分离含氮和含硫的化合物。
5. 二甲基甲酰胺：在液相色谱中，二甲基甲酰胺是一种常用的强溶剂，尤其适合分离多肽和蛋白质。
6. 醋酸：在液相色谱中，醋酸常被用作添加剂，调节流动相的pH值，影响样品的离子状态，从而实现更好的分离效果。
以上就是一些常见的色谱专用溶剂及其应用。
需要注意的是，选择合适的溶剂需要考虑到样品的性质、分析的目标以及色谱仪的性能等因素。
一篇长文让您完全理解液相色谱中的溶剂效应
一篇长文让您完全理解液相色谱中的溶剂效应液相色谱（liquid chromatography, LC）是一种常用的分析技术，广泛应用于化学、生物、环境等各个领域。
在液相色谱中，溶剂是一个重要的组成部分，并且溶剂的选择和使用会对色谱分离的效果产生显著影响。
本文将详细介绍液相色谱中的溶剂效应，帮助读者更好地理解并优化液相色谱实验。
溶剂在液相色谱中的作用溶剂在液相色谱中具有多重作用，主要包括：1. 分离基质的溶解：溶剂的主要作用是将待分离的混合物中的样品物质溶解为液相。
溶剂的极性和溶解度会影响样品物质在液相中的溶解度，进而影响样品的分离效果。
通常情况下，选择与样品物质相似或足够极性的溶剂可以提高样品物质的溶解度。
2. 液相的选择：液相色谱分为正相液相色谱和反相液相色谱两种类型。
正相液相色谱（Normal Phase Chromatography, NPC）使用极性溶剂作为流动相，极性固定相对样品物质进行分离；反相液相色谱（Reverse Phase Chromatography, RPC）使用非极性溶剂作为流动相，非极性固定相对样品物质进行分离。
溶剂的选择和组合会直接影响分离效果和分离机理。
3. 色谱峰的形状和保留时间：溶剂的性质和使用量会影响色谱峰的形状和保留时间。
峰形的对称性、峰高、峰宽等参数会受到溶剂的选择和使用方式的影响。
溶剂选择不当或使用不当可能导致峰形不对称、峰形分离不良，以及保留时间不稳定等问题。
4. 色谱柱寿命：溶剂的选择和使用方式也会影响色谱柱的寿命。
某些溶剂会对色谱柱产生腐蚀或破坏作用，从而缩短色谱柱的使用寿命。
此外，溶剂的质量和纯度也会对色谱柱的寿命产生影响。
溶剂效应的影响因素液相色谱中的溶剂效应受多个因素的影响，主要包括：1. 溶剂极性：溶剂的极性与待分离物质的极性需相匹配。
如果待分离物质和溶剂的极性相差太大，可能导致溶液不稳定、溶解度不足或溶解度过高等问题。
2. 溶剂选择：不同的样品物质可能需要使用不同的溶剂才能得到较好的分离效果。
色谱溶剂知识点总结
色谱溶剂知识点总结一、色谱溶剂的选择1.1 有机溶剂的选择色谱分析中常用的有机溶剂包括甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈等。
选择有机溶剂时需要考虑其极性、挥发性、毒性、成本等因素。
不同的有机溶剂适用于不同的样品及分析条件，常用的有机溶剂选择如下：甲醇：适用于极性化合物的分析，易挥发，毒性较低，成本适中。
乙醇：用于非极性化合物的分析，具有一定的极性，且毒性较低，价格适中。
乙酸乙酯：适用于中极性混合物的分析，具有一定的极性，挥发性较好，成本适中。
丙酮：适用于非极性化合物的分析，挥发性较好，价格适中。
乙腈：适用于中极性混合物的分析，挥发性好，成本较高。
1.2 水的选择水是色谱分析中常用的极性溶剂，其纯度和质量对分析结果有着重要影响。
实验室通常使用的水分为纯化水、蒸馏水、去离子水和超纯水等，其中超纯水（18.2 MΩ·cm）是色谱分析中最常用的水质标准。
在选择水质的时候需要考虑其纯度、离子含量、微生物污染等因素。
1.3 配制溶液的选择在色谱分析中，常常需要使用一些配制溶液来进行前处理或者对样品进行预处理，这些配制溶液的选择也将直接影响到色谱分析的结果。
常用的配制溶液如酸、碱、盐溶液等，在选择时需要考虑其成分、浓度、pH值等因素。
二、色谱溶剂的性质2.1 极性色谱溶剂的极性直接影响着对样品分子的溶解度和相互作用力。
通常情况下，有机溶剂的极性越大，其溶解极性化合物的效果越好，反之亦然。
选择色谱溶剂时需要根据样品的极性来进行相应的选择。
2.2 挥发性色谱溶剂的挥发性对色谱分析结果和分离效果有着重要影响。
挥发性好的溶剂能够在分离过程中较快地蒸发，有利于色谱柱的稳定性和分离效果。
因此，在选择色谱溶剂时需要考虑其挥发性对分离的影响。
2.3 溶解性色谱溶剂的溶解性直接影响样品在溶剂中的溶解度和稳定性。
对于极性化合物或者对溶解度要求较高的情况，需要选择合适的色谱溶剂来确保样品的溶解度和稳定性。
2.4 毒性色谱溶剂的毒性是影响实验人员健康和安全的因素之一，因此在选择和使用溶剂时需要尽量选择低毒性或无毒性的溶剂，并确保实验室内通风良好，以减少毒性溶剂对实验人员的影响。
液相色谱常用溶剂的性质-阿拉丁色谱溶剂
1.51 4 1.40 5 1.44 2
77 142 89 38 68 110 138 132 156
258 170 35 80 未知 72 195 85 288 40 154 130 83
0.9 1.6 0.64 2.1 0.36 1.9 0.38 2
0.38 2.4
0.55 2.4 0.6 2.5 0.75 2.7 1.04 2.7
1.8 4.4
1.2 4.8
1.2 4.8
未知 6
3.4 5
0.88 5.3 0.64 5.2 0.3 5.1
5.5 5.7 未知 6.1 1.6 5.5
0.7 Ⅱ 混溶 12.5 0.7 Ⅱ 20.1 17.5 0.82 Ⅱ 混溶 20.3
0.57 Ⅲ 混溶 7.6
未知 Ⅰ 混溶 5.3
0.58 Ⅵa 9.8 6
230
1.37 5
36
0.3 1.2 0.29 Ⅵa
水在 溶剂 中的 溶解 度⑧
未知
未知
未知
0.01 1
0.01
0.01
0.01 0.01 2 0.01 4 未知
0.00 5 未知
介电 常数 ⑨
1.88 1.86 1.9
1.94
1.92 1.88 1.84 2.02 1.97 7.4 2.64 9.82
苄醇
四甲基胍 甲氧基乙 醇
未知 未知 210
1.38 5 1.39 7 1.38 5
1.40 5
1.38 5
1.37
1.38 4 1.44 3 1.53 2 1.37 6 1.45
1.55 1.52 6 1.42 1.44 9 1.62 5 1.50 7 1.39 1.35 6 1.53 8 未知
乙腈 色谱级
乙腈是一种常见的有机溶剂，也被广泛应用于色谱分析中。
色谱级乙腈具有高纯度和低杂质含量，适用于高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）等高性能色谱技术。
以下是详细信息：
外观：乙腈为无色透明液体。
纯度：色谱级乙腈的纯度通常在99.9%以上，可以达到高纯度要求。
杂质含量：色谱级乙腈的杂质含量非常低，常见的杂质包括水分、酸性物质、碱性物质和杂质有机化合物。
高质量的色谱级乙腈通常具有非常低的水分含量，通常在10 ppm以下。
向空气中的湿度敏感性：乙腈具有向空气中快速吸湿的性质，因此在开瓶后需要严格地密封保存，以避免吸湿影响其纯度。
应用：色谱级乙腈主要应用于液相色谱分析，包括HPLC、超高效液相色谱（UHPLC）和Flash色谱等。
它作为溶剂，可以与其他色谱试剂和样品一起用于分离、富集和分析化合物。
安全使用：乙腈是一种有毒溶剂，对人体及环境均有一定风险。
在使用乙腈时，应戴好个人防护装备，并确保在通风良好的实验室环境中操作。
总之，色谱级乙腈是一种高纯度的有机溶剂，特别适用于高性能色谱分析。
液相色谱特点及主要类型
01
02
03
硅胶色谱
硅胶作为固定相，具有高 稳定性、高分离效能和广 泛的应用范围。
活性炭色谱
活性炭作为固定相，具有 高吸附性能，常用于分离 大分子物质。
凝胶色谱
凝胶作为固定相，根据分 子大小进行分离，常用于 分离大分子物质。
按流动相类型分类
有机溶剂色谱
使用有机溶剂作为流动相，具有较高的分离效能和选择性。
该方法适用于分离具有较强疏水性的化合物，如脂肪酸、酯等。
有机溶剂流动相液相色谱具有较高的分离效能和灵敏度，但有机溶剂的使 用可能对实验操作人员和环境造成一定危害。
缓冲液流动相液相色谱
缓冲液流动相液相色谱使用 缓冲液作为流动相，以调节 pH值和改善待测组分在固定
相上的保留能力。
该方法适用于分离酸性和碱 性化合物，如氨基酸、蛋白
水溶性色谱
使用水或水溶液作为流动相，常用于分离水溶性物质。
离子交换色谱
使用离子交换剂作为固定相，根据离子的性质进行分离。
液相色谱的特点
CHAPTER
高分离效能
液相色谱法采用固定相和流动相的相 互作用，使不同组分在色谱柱中实现 高效分离。通过优化色谱条件，可以 实现复杂样品的高效、快速分离。
质等。
缓冲液流动相液相色谱具有 较高的分离效能和稳定性， 但缓冲液的选择和配制可能 较为繁琐。
谢谢
THANKS
通过选择合适的检测器，可以实现对目标化合物的灵敏、 准确和专属性的检测，提高分析方法的可靠性。
04 液相色谱的主要类型及特点
CHAPTER
硅胶基质液相色谱
硅胶基质液相色谱是一种常用的液相色谱类型，其分离原理主要基于硅胶表面的硅 醇基与待测组分之间的相互作用。
液相色谱流动相基础知识-扫盲篇
液相色谱流动相基础知识-扫盲篇一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在SPME填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。
因此，k值是流动相组成的函数。
塔板数N一般与流动相的粘度成反比。
所以选择流动相时应考虑以下几个方面：①流动相应不改变填料的任何性质。
低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料会计考试有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。
碱性流动相不能用于硅胶柱系统。
酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。
②纯度。
色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
③必须与检测器匹配。
使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。
当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相溶剂瓶，以提高灵敏度。
④粘度要低（应<2cp）。
高粘度溶剂溶剂瓶会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压降增加，使分离时间延长。
最好选择沸点在100℃以下的流动相。
二、液相色谱流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。
对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸会计考试的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。
分析弱酸经济师样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互网上培训作用，减轻或消除峰拖尾现象。
如何选择液相色谱流动相PH和溶剂要求
如何选择液相色谱流动相PH和溶剂要求0000另外要注意以下3个方面:1.所选用流动相一定要能将峰检出--这个是基础条件，相信大家都知道。
2.流动相如为缓冲液，它的pH值应在它本身PKa的上下1个pH值内，如超出此范围，缓冲作用将大大减弱。
3.一般检测柱是C18，但使用C18柱时，流动相的pH值应在2~8之间，否则对柱子伤害较大。
根据以上要求，请选择适合自己实验的流动相。
c18反相柱对非极性的物质保留充分峰形对称，所以如果你的化合物是弱酸，记得好像流动相pHpKa-2时，弱酸就会基本以游离态存在，呈非极性，达很好保留出很好峰形!所以你的流动形相就的选择2~2.5当溶液PH值等于化合物的pKa时，化合物半解离。
在pKa±1.5的范围内，保留随PH值的变化而变化，超过此PH值范围，化合物完全解离或不解离，保留随PH值的变化很小。
了解化合物的pKa值，可在pKa±1.5的范围内调节流动相的PH值，以改变其保留，达到成分分离的目的。
或者，使流动相PH值超出这一范围，以保持保留的恒定，使建立的方法具有耐用性。
可参考《药物分析》化学工业出版社，盛龙生等P235~237谢谢楼上各位的热心解答，但你们讲的都不大一样，我该怎么确定呢?根据分析化学,当弱酸(弱碱)溶液中溶液中离子浓度是分子浓度的100倍时,可以认为是完全电离的,化合物完全以离子形式存在;当弱酸(弱碱)溶液中溶液中分子浓度是离子浓度的100倍时,可以认为是完全不电离的,化合物以分子形态存在.因此,为了防止HPLC中峰的拖尾,应当保证化合物全部以分子或离子形态存在,即溶液的pH值应与pKa有2个单位的差别(pH≥pKa±2).如果化合物的pKa是4.5,溶液的pH值至少应该是2.5或6.5.考虑到色谱柱的耐受性(pH=2~8;甚至是2.8~4.5)\保留时间\样品的复杂性要求,理论上你可以选择低pH值的流动相(pH2.5),也可以选择高pH值的流动相(pH6.5).至于最终选哪一个,做个对比就ok了.一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
高效液相色谱法常用的流动相
高效液相色谱法常用的流动相
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和分析技术，其流动相的选择对分离效果至关重要。
常用的流动相分为以下几种：
1. 甲醇：甲醇是一种常用的有机溶剂，具有良好的溶解性和极性。
在反相色谱中，甲醇常与水混合作为流动相，以实现对极性物质的分离。
2. 乙腈：乙腈是一种有机溶剂，具有较高的极性。
与甲醇类似，乙腈也可以与水混合作为流动相，用于反相色谱中对极性物质的分离。
3. 水：水是一种无机溶剂，具有良好的极性。
在正相色谱中，水常与有机溶剂（如甲醇、乙腈等）混合作为流动相，以实现对极性物质的分离。
4. 乙酸乙酯：乙酸乙酯是一种有机溶剂，具有较弱的极性。
在正相色谱中，乙酸乙酯可以与水混合作为流动相，用于分离弱极性物质。
5. 庚烷：庚烷是一种非极性有机溶剂，适用于分离非极性物质。
在反相色谱中，庚烷可以与甲醇或乙腈混合作为流动相。
6. 混合溶剂：根据被测物的极性和分离需求，可以选用两种或多种溶剂混合作为流动相。
例如，甲醇与水混合用于反相色谱，乙腈与水混合用于正相色谱等。
流动相的选择应考虑以下因素：
1. 被测物的极性：根据被测物的极性选择相应的流动相，以实现良好的分离效果。
2. 固定相的选择：根据固定相的极性，选择与之匹配的流动相。
3. 检测器的要求：某些检测器对流动相的极性有要求，需根据检测器类型选择合适的流动相。
4. 实验条件：如流速、柱温等实验条件，也会影响流动相的选择。
在高效液相色谱法中，常用的流动相包括甲醇、乙腈、水、乙酸乙酯、庚烷等，具体选择需根据被测物的极性、固定相、检测器要求等因素综合考虑。
液相色谱的应用范围
液相色谱的应用范围一、化学领域化学领域是液相色谱应用最为广泛的领域之一。
液相色谱可以快速、准确地分离和测定化合物的成分，例如确定药物、食品添加剂、环境中的污染物等。
在化学领域中，常用的液相色谱技术包括正相高效液相色谱（RP-HPLC）和反相高效液相色谱（RP-HPLC）。
它们可以分离和测定非极性、半极性和极性化合物，如烷基酚、酰胺、杂环化合物、氨基酸、核酸、蛋白质等。
液相色谱也可以用于物化性质的研究，如表面积、亲疏水性等。
二、生物领域生物学领域中，液相色谱被广泛用于生物大分子的分离、纯化和检测。
在研究蛋白质组学中，RP-HPLC可以分离复杂的混合物，如蛋白质混合物和酸性蛋白质，以及富集靶分子或去除冗余蛋白，实现蛋白的纯化和初步鉴定。
反相高效液相色谱也被广泛应用于核酸的纯化和检测。
三、医药领域在医药领域中，液相色谱被广泛用于药物研究和质量控制。
在新药研发和药品生产中，液相色谱被用于药物的纯化、分离和鉴定，以及药品质量控制中药品杂质和质量指标的分析。
液相色谱在药物代谢研究中也有广泛的应用，能够检测药物和代谢产物之间的相互作用。
四、食品领域在食品领域中，液相色谱被广泛用于食品添加剂、污染物和食品中的天然成分的分析。
可以使用正相高效液相色谱来测定食品中的香料和甜味剂，以及反相高效液相色谱来测定药物或重金属污染物和食品中的营养成分。
液相色谱还可用于鉴定、分离和纯化稀有的食品成分，如海洋生物中的活性成分和食品中的酚类类化合物。
五、环境领域在环境领域中，液相色谱被广泛用于分析和检测环境中的污染物，如有机污染物、微量元素、溶解有机气体和非极性有机物等。
在环境分析中，液相色谱技术被用于检测地下水中的有机污染物、城市空气中的挥发性有机污染物和工业废水中的重金属和痕量元素等。
液相色谱技术在各个领域中都有广泛的应用，可以用于各种不同的化合物分离和检测。
未来随着液相色谱技术的不断发展，其在各个领域中的应用范围也将不断拓展。
色谱溶剂是什么原理的应用
色谱溶剂是什么原理的应用背景介绍色谱溶剂是色谱分析中的重要组成部分，其作用主要是作为溶解样品的介质。
色谱溶剂的选择和使用对于色谱分析的结果具有重要的影响，因此了解色谱溶剂的原理和应用是进行色谱分析的基础。
色谱溶剂的原理色谱溶剂的原理主要涉及到溶剂的物理化学性质，主要包括极性、挥发性、稳定性等。
极性色谱溶剂的极性直接影响着样品在色谱柱上的保留时间，极性较高的溶剂可以加快样品在色谱柱上的分离速度。
一般来说，常用的色谱溶剂有极性溶剂和非极性溶剂两种类型。
极性溶剂包括水、醇类、酮类等，而非极性溶剂包括石油醚、丙酮等。
挥发性色谱溶剂的挥发性对于色谱分析的准确性具有很大的影响。
挥发性较好的溶剂可以在样品进样后迅速挥发，从而避免溶剂的残留对于分析结果的干扰。
因此，在选择色谱溶剂时，需要考虑溶剂的挥发性，优先选择挥发性较好的溶剂。
稳定性色谱溶剂的稳定性很重要，特别是在高温和高压的色谱条件下。
稳定性差的溶剂可能会分解或产生气泡，从而影响色谱分析的准确性和重复性。
因此，在色谱分析中，选用稳定性较好的溶剂是很重要的。
色谱溶剂的应用色谱溶剂在各种各样的色谱分析中都有广泛的应用。
以下是一些常见的色谱分析技术及其所用的溶剂：1.气相色谱（Gas Chromatography）：气相色谱是一种在气相载气流的保护下使用色谱柱进行分离的技术。
其中常用的溶剂包括乙醇、丙酮、二甲基甲酰胺等。
2.液相色谱（Liquid Chromatography）：液相色谱是使用液体作为载气流的色谱技术。
在液相色谱中，常用的溶剂包括水、乙醇、醋酸等。
3.薄层色谱（Thin Layer Chromatography）：薄层色谱是一种在薄层介质上进行分离的色谱技术。
常用的溶剂包括正己烷、乙醇、氯仿等。
4.高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography）：高效液相色谱是一种在压力条件下进行分离的液相色谱技术。
在高效液相色谱中，常用的溶剂包括甲醇、乙酸乙酯、水等。
液相色谱固定相种类、性质、选择原则和适用范围
硅胶
ZrO2 /SiO2 的制备工艺为: ( 1)将酸化过的色谱用SiO2 球 浸入到十二烷基硫酸钠( SDS) 表面活性剂溶液中, 待在SiO2 球表面组装一层有机单分子膜 后取出, 洗去表面物理吸附成分, 干燥。( 2)将已被膜包覆的SiO2 球放入氧化锆溶胶中, 磁力搅拌 3 h后分离, 用去离子水充分洗 涤, 干燥。重复进行( 1)、(2 )步 骤多次。( 3)将制备的ZrO2 /有 机膜/SiO2 球在一定温度下焙烧 后得ZrO2 /SiO2 核－壳型色谱 填料, 制备工艺示意图见图4。
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硅胶
图2������
硅球电镜图[10 ]
[10 ] 蒋生祥，刘霞.硅胶基质高效液相色谱固定相[J].Chinese Journal of Chromatography,2007, 25( 2): 164
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硅胶
2 硅胶基质键合正相色谱固定相 3 硅胶基质键合反相色谱固定相 4 硅胶基质手性色谱固定相
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[ 1] Xue Z D, He F, Feng Y Q. Wuhan University Journal, 2002, 48( 2): 142
基质及其种类
硅胶 氧化铝 聚合物
基质的种类
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硅胶
性质： 硅胶是HPLC填料中最普遍的基质。硅胶除了具有良好 的机械强度、容易控制的孔结构和比表面积、较好的化学稳 定性和热稳定性以及专一的表面化学反应等优点外[2] , 还有 一个突出的优点就是其表面含有丰富的硅羟基, 这是硅胶可 以进行表面化学键合或改性的基础[3]。缺点是在碱性水溶性 流动相中不稳定。 适用范围： 硅胶基质填料适用于广泛的极性和非极性溶剂。通常， 硅胶基质的填料推荐的常规分析pH范围为2~8。
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230
四氯化碳
265
正丁醚
220
三乙胺
溴乙烷（*）
异丙醚
（**）
220
甲苯
285
对二甲苯
290
氯苯
溴苯
碘代苯
苯基醚
苯乙醚
乙醚（**）
218
苯
280
磷酸三各甲
苯酯
碘代乙烷
正辛醇
205
氟苯
苄醚
折光率④ 1.267 1.267 1.291
1.389 1.385 1.372
1.355 1.423 1.404
1.04
2.7
2.8
258
3.3
3.4
170
1.14
3.3
35
0.24
2.8
80
0.6
2.7
4.6
72
0.57
2.2
195
7.3
3.4
85
0.55
3.1
288
4.5
4.1
ε。⑥
-0.25 -0.25 -0.25
0.01 0.01 0.01
0 0.04 0.05
0.26
0.15
0.29 0.18 0.25 0.54 0.35
3.4 0.88 0.64 0.3 5.5
1.6
1.08
3.77 1.1 0.34
0.78
0.8 2
1.67
3 0.54
3.1
0.42
3.8
3.7
0.61
3.5
0.44
4.1
0.7
3.9
0.7
4
0.82
4
0.57
4.2
4.4
0.58
3.9
0.82
4.1
0.4
4.8
4.7
0.51
4.7
4.4 4.8
4.8
0.28 0.29 0.26 0.3 0.32 0.35
0.38 0.32
0.5
二氯甲烷
（**）
233
苯甲醚
异戊醇
1.2-二氯乙烷
228
叔丁醇
正丁醇
210
正丙醇
240
四氢呋喃
（*）
212
丙胺（*） 乙酸乙酯
（*）
256
异丙醇
205
氯仿（*）
245
苯乙酮
甲乙酮（*）
329
环己酮
硝基苯 苯乙腈
二恶烷
215
四甲基脲
265
喹啉
吡啶
硝基乙烷
380
丙酮（*）
330
苄醇 四甲基胍
甲氧基乙醇
210
丙烯碳酸酯
乙醇
210
氧二丙腈
苯胺
乙酸
乙腈
190
N，N-二甲基
乙酰胺
268
二甲基甲酰
胺
268
二甲基硫酰
268
N-甲基-2-吡
咯烷酮
285
六甲基磷酸
三酰胺
甲醇（*）
205
1.421
40
1.514
154
1.405
130
1.442
182
1.431
182
1.447
210
1.338
100
0.61 14
1.65 16.5 3.3 0.89
6 7.4
6 1.11 9.6 10.2
0.64
选择性分组⑦ / / /
水在溶剂中的溶解度 ⑧
介电常数⑨ 1.88 1.86 1.9
P`及0.25ε。 ⑩
/
0.011
1.94
0.1
/
0.01
1.92
用与于液相 色谱的溶剂 的性质
溶剂① 紫外截止波长nm③
FC-78*（*）
210
FC-75
210
FC-43
210
异辛烷
（2.2.4三甲
基戊烷）
（*）
197
正庚烷（*）
195
正己烷（*）
190
正戊烷
（**）
195
环己烷
200
环戊烷（*）
200
1-氯丁烷
（*）
220
1-氯丁烷
（*）
380
2-氯丙烷（*ຫໍສະໝຸດ ）0.5/0.01
1.88
0.5
/
0.01
1.84
0.5
/
0.012
2.02
0.5
/
0.014
1.97
0.6
Ⅵa
7.4
2.8
/
0.005
2.64
1.7
Ⅵa
9.82
3.7
0.008
2.24
2.3
Ⅰ
0.19
2.8
2.4
Ⅰ
2.4
2.4
Ⅵa
9.4
4.3
Ⅰ
0.62
3.9
3.2
Ⅶ
0.046
2.4
2.9
Ⅶ
2.3
3
Ⅶ
5.6
4.1
Ⅶ
5.4
4.1
Ⅶ
Ⅶ
3.7
3.7
Ⅶ
4.2
4.9
Ⅰ
1.3
4.3
4
Ⅶ
0.058
2.3
3.6
Ⅵa
Ⅵa
7.8
4.2
Ⅱ
3.9
10.3
5.8
Ⅶ
5.4
4.6
Ⅶ
Ⅴ Ⅶ Ⅱ Ⅴ Ⅱ Ⅱ Ⅱ
Ⅲ Ⅰ
Ⅵa
Ⅱ Ⅷ
Ⅵa Ⅵa Ⅵa
Ⅶ
Ⅵb Ⅵa Ⅲ Ⅲ Ⅲ
Ⅶ Ⅳa Ⅳ
Ⅰ
Ⅲ Ⅵb
Ⅱ
Ⅵb Ⅵb
Ⅳ
Ⅵb
Ⅲ
Ⅲ Ⅲ
Ⅲ
Ⅰ Ⅱ
0.17 9.2 0.16 混溶 20.1 混溶 混溶 混溶 9.8 混溶 0.072 23.4
1.4
1.624
1.375 1.457 1.397 1.398 1.421
1.365 1.494 1.493 1.521 1.557
1.58 1.505 1.35 1.498
1.51 1.427 1.46 1.538
沸点℃ 粘度(Cp 25℃) P`⑤
50
0.4
<-2
102
0.8
<-2
174
2.6
<-2
83
1.385
82
1.397
118
1.385
97
1.405
66
1.385
48
1.37
77
1.384
82
1.443
61
1.532
202
1.376
80
1.45
156
1.55
211
1.526
191
1.42
101
1.449
175
1.625
237
1.507
115
1.39
114
1.356
56
1.538
205
1.4
125
1.359
78
1.584
184
1.37
118
1.341
82
1.436
166
1.428
153
1.477
189
1.468
202
1.457
233
1.326
65
0.41 0.9 3.5 0.78 3.6 2.6 1.9
0.46 0.35
0.43 1.9 0.53 1.64 0.38 2 1.8 1.2 1.2
止波长，低 于该值时溶 剂不透明。 ④ 25℃时的 折光率 ⑤溶剂极性 参数 ⑥在氧化铝 上液-固色谱 的溶剂强度 参数 ⑧在20℃时 溶解在溶剂 中的水的重 量百分比， 此项值在液固色谱中很 有用的。 ⑨20℃的值
⑩P`函数和正 比于离子对 色谱溶剂强 度的介电常 数
1.38
101
1.54
202
1.447
混溶
0.9 混溶
混溶 混溶
混溶 混溶
混溶
混溶
8.9 4.3 14.7 10.4 12.5 17.5 20.3
7.6 5.3
6 20.3 4.8 17.4 18.5 18.3 34.8 25.2 2.2 23
9 12.4
13.1
16.9
24.6
6.9 6.2 37.5
37.8
36.7 4.7
32
30 32.7
0.56
6
5
5.3
0.71
5.2
0.6
5.1
0.56
5.7 6.1
5.5 6.1
4.3
0.88
6.8
6.3
6
5.8
0.65
6.5
6.4
7.2
0.75
6.7
7.4
5.1
0.95
硝基甲烷
380
间甲酚
N-甲基甲酰
胺
乙二醇
甲酰胺
水
① （*）表示 低粘度（〈 0.5cp）、沸 点适当（〉 45℃）的溶 剂；（**） 表示粘度很 小，沸点也 很底的溶剂 。 ③ 指近似截
99
0.47
0.1
98
0.4
0.2
69
0.3
0.1
36
0.22
0
81
0.9
-0.2
49