甲砜霉素、氟苯尼考检测方法记录

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氟苯尼考注射液检验标准操作规程

题目氟苯尼考注射液检验标准操作规程第 1 页共 2 页编码制定人制定日期执行日期审核人审核日期复印份数份批准人批准日期颁发部门分发部门变更原因及目的目的：建立氟苯尼考注射液检验标准操作规程，规范氨茶碱的检验操作。

范围：适用于公司氟苯尼考注射液的质量检验。

责任：质量管理部经理、检验员。

内容：执行标准：《氟苯尼考注射液质量标准》1. 性状：取本品适量，置洁净干燥的透明玻璃容器中，目测观察。

本品应为无色至微黄色的澄明液体。

2. 鉴别：2.1 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

3. 检查：3.1 颜色：3.1.1 操作方法：取本品，与黄色4号标准比色液比较，不得更深。

3.2 水分：3.2.1 取本品，照水分测定法（第一法）测定，含水分不得过2.0%。

3.3 无菌：3.3.1 取本品，转移至200ml无菌丙二醇中，混匀，用薄膜过滤法处理后，依法检查，应符合规定。

3.4 装量：3.4.1 操作方法：取本品3支；开启时注意避免损失,将内容物置于相应体积并预经标化的干燥容器内，读出每个容器内容物的装量，均应符合规定。

如有1个容器装量不符合规定，则另取3支复试，应全部符合规定。

3.5 可见异物：3.5.1 操作方法：照可见异物检查法检查，应符合规定。

4. 含量测定：4.1 试剂：乙腈、冰醋酸、氟苯尼考对照品、甲砜霉素对照品4.2 仪器与用具：分析天平、高效液相色谱仪4.3 操作方法：4.3.1 色谱条件及系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸（100：197：3）为流动相；检测波长为224nm。

取氟苯尼考与甲砜霉素对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含氟苯尼考50μg与甲砜霉素30μg的混合液，作为系统适用性试验溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，甲砜霉素峰与氟苯尼考峰的分离度应大于4.0，理论板数按氟苯尼考峰计算不低于2500。

水产品中甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺酶联免疫多残留测定

间，测范围为０２～１５ｇＬ检．２／。该方法可同时测定甲砜霉素、氟苯尼考及其标示残留物氟苯尼考胺等３种化合物残留量。方法灵敏度、密度和准确度均能满足兽药残留筛选检测要求。精
［键词］甲砜霉素；关氟苯尼考；氟苯尼考胺；多残留；酶联免疫法Ｍｕｌｉ— ｒｓｄｔｃｉｎｏｔｅｉｕｅＤｅｅｔｏｆＴｈｉｍｐｎｃｌＦｌｒｅｉｏｎａｈｅｉｏ，ｏｆｎｃｌａｄ
Ｆｌｒｅｉｏｏｆｎｃｌ—ｎｅｉｕａｉｏｕｃＳＡ
ＬＵＺｉｏｇＨＵＮａｌｇＷＡＧＸａＪＮＹｎ—ｚｅｇＷＡＮｅ— ｉ，Ｉｈ —ｈｎ，ＡＧＹｏ— ｉ，Ｎｉ，ｉｎＩｈｎ，ＧＨｊａ
２１，４１）１／００４（２：～５刘智宏，等
中国兽药杂志
水产品中甲砜霉素、苯尼考和氟氟苯尼考胺酶联免疫多残留测定
刘智宏，黄耀凌，霞，汪金银珍，王鹤佳，妮，琪，叶刘张聪敏
（国兽医药品监察所，京中北１０８）００１
Ｔｈｒｓｅｃｏｓ—ｒａｔｖａｅｒｎｅｆｒ３ｋｉｄｓｏｍｐｅｃｌｓｆｏ３ｅｃｉｅｒｔａｇｏｎｆａｈｎｉｏｓｗａｒｍ０％ｔ５ｏ１６％．Ｔｉｔｏｅｅｔｎｗａ３ｈｅｌｍｉｆｄｔｃｉｓ６．ｏｇ・ｋｇ一ｎ１ｘｇ・ｋｉｓｎｈｉｓｌｅｐｃｉｅｙＴｈｅｏｅｙｒｔａｇｓｆｏ４ａｄ６．Ｉｇ一ｎｆｈａｄｓｒｍｐｍｕｃｅｒｓｅｔｖｌ．ｉｅｒｃｖｒａｅｒｎｅｗａｍ０％ｔｒｏ１０％ｉｓａｄｈｒｍｐ２ｎｆｈｎｓｉｍｕｃｅｉｓｌ．Ｔｈｍｅｓｉｎｒｎｅｅａｕｒｇａｇｗａｏ０．２ｏ２Ｉｇ・Ｌ～．Ｉｃｕｄｓｆｍｒｔ１５ｘｔｏｌｄｅｅｍｉｅｔｒｎｔｉｍｐｅｃｌｆｏｆｎｃｌａｏｆｎｃｌＳｍａｋｒｒｓｄｅｆｒｅｉｏｈａｈｎｉｏ，ｒｅｉｏｎｄｆｒｅｉｏ ’ ｒｅｅｉｕｏｆｎｃｌ— ａｎｅａｈａｉ．Ｔｅｓｎｉｌｔｌｌｌｍｉｔｔｅｓｍｅｔｍｅｈｅｓｂｉｙ，ｉｐｅｉｉｎａｄａｃｒｃｆｔｅｍｅｈｄｃｕｄｓｔｆｈｅｄｏｃｅｎｎｅｅｉａｅｉｕｓｒｃｓｏｎｃｕａｙｏｈｔｏｏｌａｉｙｔｅｎｅｆｓｒｅｉｇｖｔｒｎｒｒｓｄｅ．ｓｙ

甲砜霉素检验记录

干燥失重（%）
平均值（%）
标准规定
减失重量不得过1.0%
项目结论：
炽灼
残渣
样品号
1
2
供试品质量（m0）
炽灼前坩埚的重量（m1）
炽灼后坩埚和残渣的重量（m2）
计算公式：m2-m1
炽灼残渣= *100%
m0
炽灼残渣
平均值
标准规定:残渣的重量不得过0.1%
项目结论
复核人：检验人：
有限公司
原辅料检验记录辅页
本品的熔点为163-167℃.
吸收
系数
取本品，精密称定，加水溶解（约40℃加热助溶）并稀释成每1 ml中约含200ug的溶液，照分光光度法（附录17页）在266和273nm的波长处有最大吸收，吸收系数（E1cm1%）分别为25~28和21.5~23.5；取上述供试品溶液1ml，加水稀释成20ml在224nm的波长处有最大吸收，吸收系数（E1cm1%）为370-400。
（3）应显氯化物的
鉴别反应规定
（3）检查：
1、氯化物应符合规定规定
2、干燥失重不得过1.0%规定
3、酸碱度应符合规定规定
4、吸收系数应符合规定规定
5、炽灼残渣不得过0合规定规定
8、熔点应为163-167℃规定
（4）含量测定：
按干燥品计，含规定
检查结果：
酸碱度
取本品0.2g，加水20ml溶解，加溴麝香草酚蓝指示液0.1 ml，如显蓝色，加0.02mol/L盐酸溶液0.10 ml，应变为黄色，加0.2mol/L氢氧化钠溶液0.10 ml，应变为蓝色。
检查结果：
氯化物
取本品0.5g，加水30ml，振摇5分钟滤过，取滤液15 ml，加稀硝酸1.5 ml，并立即加入0.1mol/L硝酸银溶液1 ml；在暗处放置2分钟，依法检查（附录51页），与标准氯化钠溶液5.0 ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。

氟苯尼考质量标准+氟苯尼考检验操作规程

氟苯尼考质量标准文件类别SMP 起草：年月日审核：年月日批准：年月日执行日期：年月日文件名称氟苯尼考质量标准文件编码 SMP-QMP20302 目的：制定氟苯尼考的质量标准。

适用范围：氟苯尼考的检验责任人：化验员、化验室主任、质量部长。

标准依据：《中国兽药典》2010年版一部内容：5．内容：本品为[R-（R *，R *）]-2.2-二氯-N-[1-氟甲基-2羟基4-甲基磺酰]苯基]乙基乙酰胺。

按无水物计算,含C 12H 14Cl 12FNO 4S 不得少于98.0%。

【性状】本品为白色或类白色粉末或结晶性粉末，无臭。

本品在二甲基甲酰胺中极易溶解,在甲醇中溶解,在冰醋酸中略溶,在三氯甲烷中极微溶解，在水中几乎不溶。

熔点本品的熔点为152～156℃。

比旋度取本品，精密称定，加二甲基甲酰胺溶解并制成每1ml 中约含50mg 的溶液，依法测定，比旋度为-16至-19º。

【鉴别】（1）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

（2）本品红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

【检查】酸度取本品0.1g,加水20ml,振摇，滤过,取续滤液依法测定,PH 值为4.5～6.5。

氯化物取本品0.5g,加水30ml,振摇，滤过,取续滤液15ml,依检查,与标准氯化钠溶液5.0ml 制成的对照液比较,不得更浓(0.02%)。

氟取本品约40mg,精密称定,照氟检查法测定,按无水物计算,含氟量不得少于4.8%。

有关物质取本品适量,用流动相溶解并制成每1ml 中含氟苯尼考0.5mg 的溶液,照含量测定下方法试验,取10ul 注入液相色谱仪,记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍。

供试品溶液如显杂质峰,按峰面积归一法计算,最大杂质峰面积不得过0.5%,杂质峰面积的和不得过2.0%。

水分取本品,照水分测定法第一法)测定,含水分不得过0.5%。

动物可食性组织中甲砜霉素、氟苯尼考胺及氟苯尼考残留的测定

动物可食性组织中甲砜霉素、氟苯尼考胺及氟苯尼考残留的测定作者：***来源：《品牌与标准化》2024年第03期【摘要】建立高效液相色谱法测定动物可食性组织中氟苯尼考、氟苯尼考胺和甲砜霉素残留量。

试样经过乙腈-乙酸乙酯-氨水（体积比5∶15∶80）混合提取液提取，4%氯化钠溶液和正己烷液分配净化，再经HLB固相萃取柱净化，高效液相色谱仪测定，外标法定量。

结果表明，甲砜霉素在25～5000 ng/mL、氟苯尼考胺和氟苯尼考在5～500 ng/mL浓度范围内呈现良好的线性关系，甲砜霉素检测限为10μg/kg，氟苯尼考及氟苯尼考胺检测限为2.0μg/kg，回收率均值为73.6%～91.2%，批内、批间RSD值均小于20%。

本方法专属性强，灵敏度高，适用于动物可食性组织中甲砜霉素、氟苯尼考胺及氟苯尼考残留的测定。

【关键词】动物可食性组织；氟苯尼考；氟苯尼考胺；甲砜霉素；高效液相色谱法【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.03.002Determination of Thiamphenicol， Flufenicomide and Flufenicol Residues in Edible Animal TissuesLIU Kai（Liaoning Inspection， Examination & Certification〔Liaoning Institute forAgro-product Veterinary Drugs and Feed Control〕， Shenyang 110036， China）Abstract： A high-performance liquid chromatography method has been established for the determination of flufenicol， flufenicomide， and thiamphenicol residues in edible animal tissues. The sample was extracted with a mixed extraction solution of acetonitrile-ethyl acetateammonia （volume ratio 5∶15∶80） and purified by 4% sodium chloride solution and n-hexane liquid-liquid distribution， and then purified with HLB solid-phase extraction column. The sample was determined by high-performance liquid chromatography and quantified using an external standard method. The results showed that there was a good linear relationship between the concentration range of 25 ng/mL to 5000 ng/mL of thiamphenicol， and between the concentrations of 5 ng/mL to 500 ng/mL of flufen icol and flufenicomide. The detection limit of thiamphenicol was 10μg/kg， while that of flufenicol and flufenicomide was 2.0μg/kg. The average recovery was 73.6% to 91.1%， and the RSD wereKeywords： edible tissues of animals； flufenicol； flufenicomide； thiamphenicolresidues；high performance liquid chromatography method甲砜霉素和氟苯尼考是氯霉素的主要替代品，应用较广，具有潜在的体内蓄积危险[1-3]，并且由于操作不慎引起残留的可能性很大。

水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、氟苯尼考胺多残留的同时测

第３６卷第３期
２０１５年６月
渔
业
科
学
进
展
Ｖ＿０ｌ＿３６．ＮＯ．３
Ｊｕｎ．。２０１５
ＰＲ０ＧＲＥＳＳＩＮＦＩＳＨＥＲＹＳＣＩＥＮＣＥＳ
ＤＯＩ：１０．１１７５８／ｙｙｋｘｊｚ．２０１５０３２１
（１．中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛２６６０７１；２．山东协和学院医学院青岛２６６００３）济南２５０１００；３．青岛立基质加标标准曲线，对中国对虾、大菱鲆、鲫鱼、鳗鱼、蟹、
口，水产品中氯霉素类药物残留问题一直备受人们关
注。氯霉素类药物残留的检测方法有较多报道，主要
包括气相色谱法（钟惠英等，２００６；刘永涛等，２００７）、气相色谱一质谱法（李鹏等，２００６；冷凯良等，２００７）、高效液相色谱法（张立军等，２００７；林荆等，２０１２）、液相
机制和抗菌谱均与氯霉素相似，但不会使人体产生再生障碍性贫血，将逐步成为氯霉素的替代药（刘智宏
２００２；栾鹏等，２０１２）。食品中氯霉素类药物残留不但严重危害人类健康，也较大限制了我国水产品的出
ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｙｋｘｊｚ．ｃｎ／

氟苯尼考检验记录

检验结论：本品按《氟苯尼考内控质量标准》检验,结果规定.
复核人：检验人:
有限公司
原辅料检验记录报告单
文件编号:00第4页共4页
原辅料名称
氟苯尼考
检验单号
批号
供货单位
供货数量
请验单位
原辅料库
取样数量
取样人
规格
送检日期
年月日
报告日期
年月日
检验依据
<<氟苯尼考内控质量标准>>
检验项目标准规定检验结果项目结论
（1）性状应为白色结晶性粉末规定
（2）鉴别取本品，加甲醇制成每
1ml中含0.2mg的溶液，
照分光光度法测定，在
266nm的波长处有最大
吸收。规定
本品的红外光吸收图谱应
与对照的图谱一致规定
在含量测定项下记录的色
谱图中，供试品溶液主峰
的保留时间应与对照溶液
主峰的保留时间一致。规定
（3）检查：
1、氯化物应符合规定规定
计算公式：m2-m1
炽灼残渣= *100%
m0
炽灼残渣
平均值
标准规定:残渣的重量不得过0.1%
项目结论
复核人：检验人：
有限公司
原辅料检验记录辅页
文件编号:00第3页共4页
含量测定：氟苯尼考室温 ℃湿度 %
主要
分析
仪器
名称
型号
精度
柱温
测定用波长
编号
分析天平
0.00001
____
_______高效液Fra bibliotek色谱仪----
30℃
224nm
色谱柱
C-18
流动相：乙腈-水-冰醋酸 500：985：15

动物源食品中氯霉素,氟苯尼考,甲砜霉素前处理方法

震荡5min
10000rpm，4℃下离心5min
取出离心管，按顺序打开盖子放好，将上清液吸至梨形浓缩瓶
再加入10mL乙酸乙酯至离心管中重复提取一次
合并上清液至梨形瓶
50℃下减压旋转蒸发浓缩至干
1mL5%甲醇溶解震荡，过0.22μm水相滤膜，上机
三、注意事项
动物源食品中
一、试剂准备
标准储备溶液和内标溶液，用5%甲醇稀释至100ng/mL，4℃保存，有效期1个月。
检查：各种溶剂体积，内标物体积，定溶液体积
二、处理步骤
样品称取5.00g于50mL离心管，加标样品加入50μL标液（含量为1.0μg/kg），震荡均匀
每个样品加入内标（ISTD）50μL（含量为5ng）

甲砜霉素和氟苯尼考药物原料的质量合格性检验

表２甲砜霉素、氟苯尼考原料的熔点范围
（１）甲砜霉素和氟苯尼考药物原料的熔点的测定
（％）。两种药物的干燥条件和水分含量标准如表３所示。
表３甲砜霉素、氟苯尼考原料的干燥条件和水分含量标准
（２）甲砜霉素和氟苯尼考药物原料比旋度的测定预热自动旋光仪１５ｍｉｎ，用电子天平精密称量相应的被检样
５ａｍ，精密称量并记录相应的数据，然后把装供试品的称量瓶放ｒ首先预热熔点仪１５ｍｉｎ，然后用玻璃毛细管装取少量的被测原到已设置为所需温度的干燥箱中干燥３／Ｊ，时，然后将称量瓶的瓶盖料，每组原料平行测试三次，在供试品发生状态改变的一瞬间记盖好，移置干燥器中，冷却３０ａｒｉｎ，精密称量，再在上述温度干燥录此时的温度即为被测物的熔点温度。两种氯霉素类药物熔点范１小时，冷却，称重，直至连续两次称量的差异不超过５ｍｇ为止。围如表２所示。并记录相应的数据，根据减少的重量，计算供试品中水分含量
为ｇ／ｌＯＯｍ１），【ａｌ为比旋度，ａ为旋光度，本实验中Ｌ的长度为
２ｄｍ。

甲砜霉素原料、氟苯尼考原料，由张家港恒盛制药厂提供。
１．２试剂
五氧化二磷，蒸馏水，乙醇，甲醇，丙酮，氯仿，冰醋酸， ① 甲砜霉素比旋度的测定取本品，精密称定，；Ｏｎ－甲基甲酰二甲基甲酰胺，溴麝香草酚蓝指示液，Ｏ．０２ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液，标准胺溶解并稀释成每ｌｍｌ中含５０ｍｇ的溶液，依法测定，比旋度范围氯化钠溶液，素对照品，甲砜霉素对照品，５０％氢氧化钾溶液，为－２１。～－－２４。。甘油，稀硝酸，无水碳酸钠，硝酸银滴定液（０．１ｍｏｌ／Ｌ）等，皆为 ② 氟苯尼考比旋度的测定取本品，精密称定，加二甲基甲酰分析纯。

甲砜霉素及氟苯尼考胺单克隆抗体的制备及特性鉴定

酰胺醇类抗生素除其代表药物— — 氯霉素外，
还有甲砜霉素和氟苯尼考（甲砜霉素）氟。但是由于氯霉素存在严重的副作用，际上相继禁止或严国格限制使用氯霉素，目前出现了用甲砜霉素和氟苯尼考替代氯霉素使用的趋势 ¨ Ｊ甲砜霉素和氟。
５ＣｈｔｓｃｅｅｎｉｔｉｍｐｅｃｌｍＡｂｗｅｅｅｔｂｉｈｄｂｓｎｎｃｏａｎｉｏｙｈｂｉｏａｔｃｎｌｇｔａｅｒｔｄａｔ — ｈａｈｎｉｏｒｓａｌｓｅｙｕｉｇｍｏｏｌｎｌａｔｂｄｙｒｄｍｅｈｏｏｙ．
ＪＮＹｎ—ｚｅ，Ｉｈ — ｏｇＷＡＧＨｅｉ，ＵＮａｉｇＺＡＧＣｎｍｉＩｉｈｎＬＵＺｉｈｎ，Ｎ —ｊＨＡＧＹｏ—ｌ，ＨＮｏｇ— ｎａｎ
（ｈｎｎｔｕｅｆＶｔｉａｙＤｕｏｔｌｅｉｇ１０８，ｈｎＣｉａ［ｓｔｅｒｒｒｇＣｎｒ，Ｂｉ００１Ｃｉｉｔｏｅｎｏｊｎａ）
Ｔｉｅｓｔａｈｙｒｄｍａ１ｅｒｔｄｍｏｏｌｎｌａｔｂｄｎｃｌｌｎｕｅｎｔｎｎｓｉｅｒ５ ×１ｈｅｔｔｒｈｔｔｅｈｂｉｏｓｃｅｅｎｃｏａｎｉｏｙｉｅｌｉｅｓｐｒａａｔａｄａｃｔｓｗｅｅ１：Ｅ０ａ１×１。ｂｎｉｅｔＥＬＳｒｓｅｔｖｌ．Ｔｓｔｐｓｉｓｉｓｗａｇｂ，Ｉｏｗａｂｕ５ｇｎｄ１：０ｙｉｄｒｃＩＡｅｐｃｉｅｙｈｅｉｏｙｅｎａｃｔｓＩＧ２ｅＣ５ｓａｏｔ１／Ｌ．Ｃｒｓｏｓｒａｔｖｔｏｆｏｆｎｃｌａｄｆｏｆｎｅｌｍｉｅｗｅｅ１４％ａｄ０．ｅｃｉｉｙｔｒｅｉｏｎｒｅｉｏａｎｒ０．ｌｌｎ１８％ｒｓｅｔｅｙ．ｉｌｒｓｅｃｉｉｏｏｈｒｅｐｃｉｌ１ｔｅｃｏｓｒａｔｖｔｔｔｅｖｔｙｃｍｐｏｎｓＭｏｏｌｎａａｔｏｉｓｗｅｅｔｂｅｅｒｔｄｎｉｒｃｌｕｔｒａｄｅｙｐｏｅｔｎ．Ｌｏｏｕｄ．ｎｃｏｌｎｉｄｅｒｓａｌｓｃｅｅｖｔｏｅｌｌｕｅｎｒｏｒｔｃａｔｂｃｎｇ — ｔｒｅｍ

高效液相色谱-质谱法分析(氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素)原始记录

相对偏差（%)
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
氯霉素
氟苯尼考
甲砜霉素
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
质谱扫描模式：MRM
氯霉素
母离子
子离子
定量离子
内标母离子
内标子离子
内标定量离子
氟苯尼考
母离子
子离子
定量离子
甲砜霉素
母离子
子离子
定量离子
定量方法标准曲线
序号
1
2
3
4
5
6
标液浓度（ng/ mL）
氯霉素峰面积（A）
氟苯尼考峰面积（A）
甲砜霉素峰面积（A）
回归方程
氯霉素Y=aX+b a= b= r=
氟苯尼考Y=aX+b a= b= r=
电子天平FA2004
××/××-074-2
样品处理情况
按照GB/T 22338-2008对样品进行处理。
标准溶液名称/浓度
氯霉素和氟苯尼考标准溶液浓度：100μg/ml
色谱条件
色谱柱：UPLC-C18
柱温：40 ℃
流速：0.4mL/min
进样量：10 μL
流动相：甲醇+水梯度洗脱

UHPLC-MSMS法测定氟苯尼考明胶纳米药物在小鼠体内的血药浓度

UHPLC-MS/MS法测定氟苯尼考明胶纳米药物在小鼠体内的血药浓度亓馨怡，侯冰玉，李建科，姚霄月，黄晶晶，李臣贵*（山东农业大学动物科技学院/动物医学院山东泰安271018）摘要：为了建立一种测定氟苯尼考明胶纳米药物在小鼠体内血药浓度的超高效液相色谱-质谱联用（UHPLC-MS/MS）方法。

采用内标法对比法，以甲砜霉素为内标，利用乙酸乙酯提取血浆中的药物，优化色谱质谱条件，建立了测定氟苯尼考明胶纳米在小鼠血液中浓度的方法。

结果表明，方法特异性良好，氟苯尼考在6.17~789.6 ng·mL-1内线性关系良好，提取回收率、准确度、精密度和稳定性均符合要求。

本试验建立了一个专属性强，灵敏度高，重现性好的UHPLC-MS/MS方法，能够准确的测定氟苯尼考明胶纳米药物在小鼠体内的血药浓度。

关键词：高效液相色谱-质谱联用；氟苯尼考明胶纳米药物；体内药物分析；小鼠中图分类号：S851.34 文献标识码：A 文章编号：1007-1733（2021）01-0007-04氟苯尼考为美国先灵葆雅公司1988年研制，我国1999年批准在中国上市的一种兽用氯霉素类抗生素，广泛应用于敏感菌所致的畜禽及鱼类疾病的防治[1-2]，作为一种动物专用广谱抗生素，在动物细菌性传染疾病的防治中具有巨大的应用前景[3]。

但氟苯尼考在水溶液中几乎不溶解[4-6]，大大限制了在兽医临床中的应用。

前期笔者制备了新型氟苯尼考明胶纳米药物，提高了氟苯尼考溶解性，增加了其在体外的缓释性能。

但尚未建立体内分析方法，无法研究其在体内的释放行为。

本实验旨在建立测定小鼠体内氟苯尼考明胶纳米药物血药浓度的方法，为研究氟苯尼考纳米药物在小鼠体内的代谢动力学提供方法和支持。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 仪器高效液相色谱-质谱联用仪（双高压泵、自动进样器、柱温箱、电喷雾离子化接口、三重四极杆质谱检测器）、色谱工作站、高速离心机（1612–1型，上海医疗器械集团有限公司）、便携式样品浓缩仪（PRO-12L Plus，南京利昭仪器设备有限公司）、超纯水机（威立雅水处理技术(上海)有限公司）、涡旋振荡仪（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）。

甲砜霉素及氟苯尼考胺单克隆抗体的制备及特性鉴定

甲砜霉素及氟苯尼考胺单克隆抗体的制备及特性鉴定金银珍;刘智宏;王鹤佳;黄耀凌;张聪敏【摘要】将氟苯尼考胺与HSA载体蛋白相连作为抗原免疫Balb／c小鼠，经杂交瘤技术获得了两株能稳定分泌抗甲砜霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E及5c。

用间接竞争ELISA方法测定，其细胞株1E单克隆抗体的细胞上清液效价为1：5×10^3，腹水效价为1：1×10^6，抗体亚类为IgG2b，50％抑制浓度（IC50）为15μg/L。

其分泌的单克隆抗体与其结构类似物氟苯尼考及氟苯尼考胺的交叉反应率为10．4％和10．8％，和其他化合物基本无交叉反应。

体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定，可为检测试剂盒提供长期稳定的抗体。

%Balb/c mice were immunized by artificial antigen florfenicolamine- HSA, the hybridoma lines 1E and 5C that secreted anti -thiamphenicol mAb were established by using monoclonal antibody hybridoma technology. The titers that the hybridoma 1E secreted monoclonal antibody in cell line supernatant and ascites were 1:5 ×10^3 and 1 : 1 × 10^6 by indirect ELISA respectively. The isotypes in ascites was IgG2b, IC50 was about 15μg/L. Cross reactivity to florfenicol and florfenicolamine were 10.4% and 10.8% respectively, little cross reactivity to other compounds. Monoclonal antibodies were stable secreted in vitro cell culture and cryoprotectant. Long -term stability of antibody which kit used can be provided.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2012(046)010【总页数】3页(P30-32)【关键词】甲砜霉素;氟苯尼考胺;单克隆抗体;酶联免疫法【作者】金银珍;刘智宏;王鹤佳;黄耀凌;张聪敏【作者单位】中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081【正文语种】中文【中图分类】S859.796酰胺醇类抗生素除其代表药物——氯霉素外，还有甲砜霉素和氟苯尼考(氟甲砜霉素)。