实验室安全与防护

1.何为气溶胶？结合您的工作举例说明哪些情况下可发生气溶胶导致的感染？

气溶胶是悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系（粒径一般为0.001-10μm）。

下列情况下可发生气溶胶导致的感染：动物尸体解剖，毒液滴到物品表面，打开容器的螺旋盖，摔碎有培养物的瓶、平皿，注射器从安瓿抽取毒液，离心时离心管破裂，打开、打碎干燥菌种安瓿管，注射器针尖滴出的毒液，拍打、刷衣服，搅拌，小白鼠鼻内接种。2.何谓生物安全柜？何谓超净工作台？简述两者的区别。

生物安全柜（biological safety cabinet,BSC）是操作有感染性的材料时，用来保护操作者本人、实验室环境及实验材料，使其避免暴露于操作过程中产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的负压排气柜。

超净工作台是为保护试验样品而设计，通过吹过工作区域的层流空气防止试验样品受粉尘或细菌的污染。

3.如何正确处理生物实验室的废弃物

感染性废弃物实验中产生的感染性废弃物，要随时放入盛有适宜消毒液的防碎裂的容器中浸泡，以进行污染清除处理。消毒液在使用时需新鲜配置。

然后把消毒液及废弃物置于合适的容器内进行高压灭菌或焚烧处理。

可重复使用的运输容器应防渗漏，并附带密闭的盖子。

病理性废弃物质粒、细胞、单克隆抗体、临床组织样本及实验动物组织、尸体等废弃物，应集中放置于实验室指定位置，以备高压蒸汽灭菌后废弃。

损伤性废弃物使用过的注射针头（包括不能从注射器上取下的针头等）﹑刀片等锐器不应再重复使用，置于一次性容器中，进行高压灭菌或焚烧处

理。

4.放射性衰变的方式有几种？

5种：α衰变、β- 衰变、β＋衰变、电子俘获衰变EC Decay、γ跃迁

5.电离辐射的随机效应和非随机效应各有何特点？

随机效应（stochastic effect）是指正常细胞因电离辐射事件产生的变化所引起的生物效应。其发生概率随受照剂量的增加而增大，剂量愈大，随机效应的发生概率愈高，即使照射量很小，也会发生。不存在剂量阈值。

非随机效应也称确定性效应指生物效应产生的严重程度随剂量变化而变化的效应。有剂量阈值，在剂量阈值下，不会引起非随机效应，超过阈值，则效应的严重程度随剂量增大而增加。

6.放射性外防护的基本原则是什么？

（1）时间防护

累积剂量与受照时间成正比

措施：充分准备，减少受照时间

（2）距离防护

剂量率与距离的平方成反比

措施：远距离操作

（3）屏蔽防护

7.请简要说明离心机使用时的注意事项，维护措施？

（一）注意事项:

(1)．转子和转子盖必须使用专用工具旋紧，否则严禁离心。

(2)．在装上转子前，清洁马达旋轴和转子插孔。

(3)．旋紧转子前，确保转子和旋轴的温度在10℃和30℃间。

(4)．转子要负载平衡，相对位置必须使用相同的心管，重量一致。

(5)．不要使用有明显腐蚀或机械损伤的转子和吊篮，请定期检查配件。

(6)．离心时严禁敲打和移动离心机。

(7)．只使用原厂建议使用的转子和配件，选择合适的转速。

(8)．转子运行时间过长或频繁离心，样品管会发热，注意离心管生产厂家的性能指标。

(9)．转子运行时间过长或频繁离心，需检查转子与旋轴松紧度，必要时重新旋紧。

(10)．转子工作在高压和很大的扭力的环境下，依靠着电镀层来保护铝制转子免受大部分化学试剂的腐蚀。因此微小的划痕也会造成内部物质的严重伤害。当心腐蚀性的化学试剂，如碱，强酸，汞溶液，铜和其它重金属离子，氯化合物，浓盐和苯酚。如果转子被污染，立刻用中性洗液清洗。

(11)．取出转子时用非金属工具轻轻敲击转子体，反复进行直至震松转子体与电机轴之间的连接。严禁松开螺钉后就直接向上拉拔，以免损坏电机的柔性支承。

(12)．每次使用使用者必须在贵重、精密仪器登记本上进行登记。

（二）保养和清洁

(1)．离心机外壳和腔体要定期用中性溶液清洗，防止残余物质的污染。

(2)．当离心机被污染后，使用者要负责清洗去污。打开盖子，断开电源，卸下转子。只能使用中性溶液去污，腔体只能用湿布擦洗。用去污剂清洁后，橡胶密封圈要要用水清洗，用甘油润滑。为了延长仪器寿命，要当心腐蚀性的化学试剂损伤仪器，请定期检查。

(3)．若腔体内有冷凝水，请用干布擦拭。

(4)．离心机在未使用时，建议打开顶盖，保持离心腔干燥。

(5)．使用柔软抹布或镊子及时清理出离心腔内的赃物、碎片。

(6)．离心有毒、放射性污染样品时必须有特殊的安全保护措施。

(7)．离心机尽量与其它电器设备保持一定距离，并有良好的接地措施，且进行定期检查。

(8)．离心机长期不使用时，应每月低速开机1~2次，每次半小时，保证各部件的正常运转。

8.请简要说明氯仿和乙醇的溶剂特点，防护措施、该溶剂的废液如何处理？

氯仿特点：比重大，挥发性强、脂溶性强、易透皮吸收、肝毒性强。

使用与防护：戴手套取液，不重复使用枪头，取液后立即旋紧瓶盖，皮肤接触后立即大量水冲洗。氯仿易挥发，应旋紧瓶盖置于通风橱或阴凉处，不可在冰箱长期、大量储存。乙醇特点：易挥发、易燃、与空气混合达一定比例易爆炸。

使用与防护：不可倒入下水道，以免集聚引起火灾。远离火源、热源。防止其挥发，保持室内良好通风。实验室内不贮放大量易燃物。

废液处理：废液不可直接倒入水槽！可先大量用水稀释，然后倒入厕所等下水道或水槽，再用大量自来水冲洗下水道或水槽。

9.溴化乙锭（EB）嵌入剂为强致突变剂，请说明操作时的注意事项，以及处理含EB的凝胶、溶液的方法。

使用与防护：

务必戴手套操作！含EB的凝胶、废液需处理后丢弃！

处理含EB的溶液的方法：

(1)．漂白剂处理法：（有争议，但操作方便）

—加等量的漂白剂，放置2—3天

—用NAOH溶液调节PH至4—9后，倒入下水道，大量水冲洗

(2)．活性炭处理法：

—每100ml溶液加入100mg粉末活性炭

—室温搅拌1h后过滤，弃废液、滤纸及活性炭

10.第三类病原微生物的判定标准是什么？属于此类的微生物有哪些？（至少举出6个)

第三类病原微生物是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物；如: 肠道病毒、轮状病毒、肝炎病毒、风疹病毒、流感病毒、疱疹病毒、沙眼衣原体、破伤风梭菌致病性大肠杆菌、脑膜炎球菌、伤寒沙门菌、志贺菌、葡萄球菌、白假丝酵母菌等。