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信阳师范学院大学生科研项目

申请书

项目类别(在相应序号上划O

1. 人文社会科学研究项目

②.自然科学研究项目

所属学科:自然科学

淮南麻鸭PPAR和ANGPTL基因课题名称:

编码区序列突变检测研究

申请者:张晓婷

所学专业:生物科学

系(院)名称:生命科学

申请日期:2009-10-10

信阳师范学院制

论证报告

一、本课题的研究现状及意义淮南麻鸭是我国优良的地方家禽品种。主产于河南省信阳市光山、商城、罗山、平桥、固始、新县等县区,1980年经河南省地方优良畜禽品种编委会正式命名为淮南麻鸭。淮南麻

鸭体型中等,具有蛋肉兼用,喜水耐旱,适应性、抗逆性强,耐粗饲,易养,生长快,觅食力强,产蛋较多,肉质肉味好等特点,已被列入《河南省地方优良畜禽品种志》,是河南省重点保护的优良地方品种之一。虽然淮南麻鸭有许多优良特点,但其生长速度、育肥性能与大型蛋肉兼用鸭如北京鸭还有相当差距[1],专门化肉用性能不能突出。而且由于多年来缺乏

系统的选育,加上主产区引入多个肉鸭品种,造成淮南麻鸭品种混杂、退化,其体型、外貌不一致,群体整齐度差,生产性能下降,品种内个体间的生产性能差异显著,严重制约了该品种的饲养和推广[2-3],作为一个地方品种,已经不能满足人们对肉类的高质量的需求,如不进行品种改良,将会在激烈的市场竞争中被淘汰出局。为加快淮南麻鸭的产业化开发进程、提高产肉性能,就必须对其进行遗传改良。

分子育种技术从一诞生就受到科学家的极大关注,现已在畜牧业发展过程中收到了良好的效果[4]。目前淮南麻鸭的育种方法主要是常规的杂交育种,世代周期长,效率较低,而分子育种可明显弥补这一不足,有效加速育种进程。利用现代生物技术手段,从分子水平对麻鸭品种资源进行检测和遗传多样性研究、促进遗传资源保护已成为麻鸭育种的必然趋势。

目前,国内用分子手段研究淮南麻鸭的很少,李慧芳、杨宁、张汤杰等用分子标记技术研

究了国内包括淮南麻鸭在内多个地方鸭种的遗传多样性[5-8],但对淮南麻鸭的系统研究很少,

且不够深入全面,对淮南麻鸭进行功能基因检测的研究未见报道,因此对淮南麻鸭的遗传改良进行更深入的研究是十分必要的。

近年来,随着人们消费水平的提高,改善肉质成为当前畜禽行业面临的主要问题之一。沉积在肌肉内的脂肪是影响肉质和风味的一项重要经济性状。对于家禽而言,研究脂肪性状是家禽育种工作的一个重要方面,从DNA 水平上研究肉质已经成为一个研究热点[9]。

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)基因能够调控许多参与细胞内外脂类代谢的目

的基因,也能够参与脂肪细胞的分化。PPAR基因在不同物种中存在几种亚型,包括种a

丫3种亚型和3亚型,几种亚型在不同组织中的表达量有较大差异。对脂肪代谢有影响的主要是PPAR—o和PPAR- Y用PPAR基因作为家禽脂肪性状的候选基因的研究近几年来逐渐展开。孟和等(2002)以PPAR- a作为影响鸡脂肪性状候选基因的研究结果发现,在编码区大约1.2

kb处存在1个C-T突变,导致了脯氨酸(Thr)变为异亮氨酸(lie),产生了3种基因型,BB基因型与AB和AA基因型相比有较高的腹脂重和腹脂率,推测PPAR- o基因可能是影响鸡脂肪代谢

的主效基因或与控制该性状的主效基因紧密连锁,并能用于对脂肪性状进行分子标记辅助选择[10]。李春雨等(2004)以鸡的PPAR-谨因作为候选基因进行研究,在编码区发现了C292T突

变,表现出3种基因型,在7周龄的腹脂重和腹脂率差异显著[11]。孟和等(2004)经Northern杂

交法研究结果表明,PPAR-谨因在脂肪和肾脏中高量表达[12]。

ANGPTL4 基因( angiopoietin-like 4 gene ,类血管生成素4基因)具有酶抑制剂活性,可以负调控脂蛋白脂酶活性,正性调控脂类代谢,促进脂肪动员,抑制脂肪贮存等作用[13-15]。ANGPTL4基因是过氧化物增殖体激活受体PPAR- 丫的靶基因,而PPAR- 丫主要参与脂肪形

成,因此推测ANGPTL4 基因可能与鸭脂肪含量有一定关系。

综上所述,本研究以PPAR和ANGPTL4基因为侯选基因,以淮南麻鸭为材料,运用

PCR-SSCP、PCR-RFLP和DNA测序技术对所选基因的编码区进行突变检测,旨在为淮南麻鸭的合理开发利用和肉用性能改良提供参考依据。

参考文献

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报,2006,16(3):111-113.

[4] 林金杏,曹学亮.家禽分子育种现状及其发展趋势J].中国家禽.2008,30(5)48.

[5] 李慧芳.中国地方家鸭品种的分子遗传多样性研究[D]. 扬州大学博士研究生学位论文:扬

州,2008.57-85.

[6] 张汤杰. 江淮流域家鸭遗传多样性及高邮鸭产蛋性状的研究[D]. 扬州大学博士研究生学位论文:扬州,

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[8] 李慧芳,李碧春,杨宁,等.华中地区家鸭种质资源的遗传结构研究J].畜牧兽医学报,2008,39

(3):291-295.

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[10] 孟和,王桂华,王启贵,赵建国,顾志良,王宇祥,李辉.鸡PPAR基因单核苷酸多态与脂肪性状

相关的研究[J].遗传学报,2002,29⑵:11》123,

[11] 孟和,李辉,王宇祥.鸡PPARs基因组织表达特性的研究[J].遗传学报,2004,31 (7): 682-687.

[12] 李春雨,李辉. 低脂肪肉鸡遗传选择方法及效果研究进展[J]. 中国家

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[13] 马云.牛三个基因的分离、定位及其与牛经济性状的关联研究[D] 西北农林科技大学博

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[15] 崔宏,赵国强.ANGPTL4的研究进展[J].中国实用神经疾病杂志.2008,11 ( 11): 56-58.

、本课题的研究内容、特色和创新之处,预计突破哪些难题

1. 本课题的研究内容

以随机抽取的淮南麻鸭为材料,采集血样,提取基因组DNA以Gen Ba nk公布的人(或

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