药物血浆浓度的测定及半衰期的计算

药物血浆浓度的测定及半衰期的计算

姓名：学号：班级：

实验目的

1. 以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物血浆浓度、药物血浆半衰期（t1/2）及表观分布容积（Vd）等

药动学参数的基本方法。

2. 理解常用药动学参数的临床意义。

实验材料

1. 实验动物：家兔1只

2. 器材：试管24支，移液吸管（10ml 1支，1ml 2支，2ml 7支），移液器1支，吸头若干，

试管夹，试管架，离心机，722型分光光度计，手术剪，眼科剪，止血钳，动脉夹，眼科

镊，缝线，药棉，纱布，捆扎绳，注射器（10ml 1支，5ml 1支）。

3. 药品：5%磺胶略啶钠溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，0.5%麝香草酚钠

溶液（溶于20%氢氧化钠浓度内），草酸钾结晶，20%乌拉坦容液，肝索注射液，生理盐水。

实验方法和步骤

1. 取试管6支，依次用A1、A2、A3……A6标记，各加入7.5%三氯醋酸2ml备用。

2. 取试管6支，依次用B1、B2、B3……B6标记，各加人草酸钾结晶几粒。

3. 取家兔1只，称重，以20%乌拉坦溶液1g/kg （5 ml/kg）耳缘静脉注射麻醉，背位固定于

手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心端，并在近心端夹上动脉

夹，以阻断血流，再将放血导管向心脏方向插人颈总动脉内，用线打活结固定。

4. 松开动脉夹，放血约1ml，置于B管，迅速摇匀抗凝，然后耳缘静脉注人5%磺胺嘧啶

钠150 mg/kg （3 ml/kg ），记录注完时间（准确到分钟）。

5. 给药后5、10、20、30、40 min,用同样方法放血约1ml,分别置于B2、B3、B4、B5、B6

管，迅速摇匀，记录取血标本的准确时间，然后B1~ B6管以1500转/min离心5 min，准

确吸取上层血浆50 M加人相应的各A管，各管以1500转1分离心5 min,分别取离心后的上清液1.5 ml,加0.5% 亚硝酸钠溶液0.5 ml,摇勾，再加0.5% 麝香草酚1ml，可见橙红色反应.以给药前血样为空白对照，用722型分光光度计于525m 波长处进行比色，测

定各取血时间点的光密度，用标准曲线方程计算磺胺嘧啶钠浓度。

6. 标准曲线的制作用免血配制不同浓度的磺胺嘧啶钠溶液，按方法 5项进行重氮化及偶联

反应，分别测定吸光度。以磺胺嘧啶钠溶液浓度为横坐标，其吸光度为纵坐标，进行直线 回归，求标准曲线回归方程。

四、实验结果

给药后不同时间点的磺胺嘧啶钠浓度

管号 1 2 3 4 5 6 给药时间 0.058 0.098 0.086 0.075 0.074 0.075 吸光度值 / 30.7124 23.7071 17.2855 16.7017 17.2855 磺胺嘧啶钠浓

度

/

1.4873

1.3749

1.2377

1.2228

1.2377

对数磺胺嘧啶

钠浓度

/ 5 15 20 40 60

K 和t l/2换算

F ^T 1

® Tunc tian LJI imit 二 Funt 卩旺吕

-0. 0072752

五、实验讨论

1. 磺胺类药物检测机制

磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应， 产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红

COEt.

hOfi

1=683. 7Si-2fi. <89

ISO 0.:K12

15 0 074 0. 999A&6

L5 0.047 O.Tfi 0 D 炳

<311 tn logC tiw(Bin)

0. (KJB 30.71344 L 4B7314 5 认 OW 23- 7U70H L 37W78 15 0.075 L7.385S L.2376S2 20 0.074 1ft. 70172 L 222761 40

UC L I JJ C. (-1/2.353)1

slvpo (-K/2. 303)

00728

inlercopi (UU0 Jr 0.016756 j. <76163

ti 2-耳 ya+oue nin

005000500

2 11

狀康肢蓟标崔曲线

色的偶氮化合物。采用分光光度检测法，在525nm波长进行比色测定。根据Beer-Lambert 定律，药物浓度与光密度呈正比关系。

2. 一级消除动力学规律

多数药物在体内按一级动力学的规律而消除，静脉注射给药后，不同时间采血，测定

血浆浓度，以药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其药时曲线常呈直线。

图1.零级&一级消除动力学曲线

该直线的方程为：IgC t=|gC o+(-K/2.2O3)t

根据此曲线方程可求岀斜率b值。消除速率常数K=-2.303b，进而求岀血浆半衰期。

药物血浆半衰期为t1/2 =0.693/K

六、实验反思

实验过程中，家兔在实验过程中发生死亡，在实验过程中每次取血后从动脉导管中反推

肝素，而肝素并不是造成家兔死亡的主因。推测是由于反复逆流推送肝素，可能使心肌前负

荷不稳定改变，心脏搏动异常，以至于发生心室肌颤动，这可能是实验过程中家兔的主要死

亡原因。

除此之外，也可能由于实验时程较长，不断取血，取血量过多后导致家兔缺血性休克的

发生。

B.

A. raer klnetlcB

T liliw -—— - •