磷酸酶抑制剂(50×)
5型磷酸二酯酶抑制原理
5型磷酸二酯酶抑制原理【实用版】目录1.引言2.5 型磷酸二酯酶的概述3.5 型磷酸二酯酶抑制原理的详细解释4.5 型磷酸二酯酶抑制剂的应用5.结论正文【引言】在生物化学和药理学领域，5 型磷酸二酯酶（PDE5）是一个重要的研究对象。
该酶参与了细胞内多种信号传导途径，并对许多生理过程具有调控作用。
因此，研究 5 型磷酸二酯酶抑制原理及其应用具有很高的理论和实际意义。
【5 型磷酸二酯酶的概述】5 型磷酸二酯酶（PDE5）是一种在细胞内广泛存在的酶，属于磷酸二酯酶家族的一员。
该酶的主要作用是水解细胞内环磷酸鸟苷（cGMP）为 5"-磷酸鸟苷（5"-GMP），从而降低细胞内 cGMP 的浓度，调控细胞内的信号传导。
【5 型磷酸二酯酶抑制原理的详细解释】5 型磷酸二酯酶抑制原理主要涉及以下几个方面：1.抑制剂与酶的结合：5 型磷酸二酯酶抑制剂通过与酶活性中心上的亲核性残基发生共价结合，形成共价中间物。
2.抑制剂与酶的反应：抑制剂与酶结合后，通过降低酶的催化活性或改变酶的构象，从而降低酶对底物的亲和力。
3.抑制剂的选择性：5 型磷酸二酯酶抑制剂在与酶结合时，通常表现出较高的选择性，即优先与 5 型磷酸二酯酶结合，而非其他类型的磷酸二酯酶。
【5 型磷酸二酯酶抑制剂的应用】5 型磷酸二酯酶抑制剂在医学和生物学领域具有广泛的应用，如下所示：1.治疗勃起功能障碍：5 型磷酸二酯酶抑制剂可以阻止 cGMP 的降解，从而增加细胞内 cGMP 的浓度，促进平滑肌松弛，有利于血液流入海绵体，达到治疗勃起功能障碍的目的。
2.对抗肿瘤：5 型磷酸二酯酶抑制剂通过抑制肿瘤细胞内 cGMP 的降解，降低细胞内 cGMP 的浓度，从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖。
【结论】5 型磷酸二酯酶抑制原理涉及到抑制剂与酶的结合、反应及选择性等方面，具有重要的理论意义和实际应用价值。
钙调磷酸酶抑制剂
非器官特异性自身免疫病
多器官/组织
系统性红斑狼疮 类风湿性关节炎 干燥综合征
自身免疫性疾病
自身免疫病肾上腺细胞
脑/脊髓 眼 胃肠道
胃 小肠 大肠
心脏
肾/肺 肝脏
原发性肾上腺皮质萎缩 （Addson病）
多发性硬化 葡萄膜炎
恶性贫血 麦胶性肠病 溃疡性结肠炎和克隆氏病 心肌炎 风湿性心脏病 肾炎肺出血综合症 自身免疫性肝炎
钙调磷酸酶抑制剂
在移植免疫方面的研究方兴未艾,目前临床上应用 最多的是子囊霉素衍生物 环孢素A(cyclosporine A, CsA) 他克莫司(tacrolimus,FK506) 匹美莫司(pimecrolimus) 它们具有相似的理化 性质，作用机理和作用效果
免疫系统的三大功能
免疫功能
免疫防护 免疫自稳
3.狼疮肾炎 lupus nephritis ,LN
肾脏系统疾病
CsA Ⅳ型LN的疗效较好,有效率达90%
首剂量 : 5mg/(kg·d) 分2次口服, 维持3个月后每月减 量1 mg/(kg·d)至每天3mg/(kg·d)口服维持。
监测血药浓度: 开始200～400µg/L 维持治疗时100～200µg/L
初始量: 3-3.5mg·kg-1 ·d – 1 最大剂量: 5mg·kg-1 ·d - 1
一旦临床缓解, 应下调至最低有效量。单用 疗效不充分者可联用小剂量皮质激素。
胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)
胰岛素依赖型糖尿病多因胰岛B细胞自身免疫性破 坏所致. CsA可引起胰岛细胞抗体的消失, 似乎仅对胰 岛的损害起部分保护作用, 以减慢破坏过程, 但不能 防止破坏的发生.
给药方案: CsA+波尼松
CsA+波尼松+CTX
5型磷酸二酯酶抑制原理
5型磷酸二酯酶抑制原理介绍5型磷酸二酯酶是一类重要的酶，在细胞内起着调控信号转导和基因表达的关键作用。
它们通过水解DNA和RNA上的磷酸二酯键，参与DNA复制、修复、转录和翻译等生物过程。
因此，研究和开发5型磷酸二酯酶的抑制剂具有重要的理论和应用价值。
5型磷酸二酯酶的结构5型磷酸二酯酶主要分为两个亚型：核酸酶A（RNase A）和核酸酶H（RNase H）。
它们的结构都由α-螺旋和β-折叠片段组成，形成一个共同的酶活性中心。
5型磷酸二酯酶的催化机制5型磷酸二酯酶的催化机制涉及到两个关键的步骤：亲核攻击和离去基团。
1.亲核攻击：在催化过程中，一个活性位点上的亮氨酸残基（Tyr）通过质子化形成带正电荷的亮氨酸阳离子。
这个亮氨酸阳离子通过催化剂中心的镁离子与底物的磷酸二酯键发生亲核攻击，形成一个磷酸酯中间体。
2.离去基团：在亲核攻击后，产生的磷酸酯中间体将底物的一个酯基取代，并释放出一个磷酸基团。
这个磷酸基团与亮氨酸阳离子形成一个稳定的过渡态，然后离开酶的活性位点。
5型磷酸二酯酶抑制剂的分类根据它们与酶结合的方式，5型磷酸二酯酶抑制剂可以分为两类：竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂。
1.竞争性抑制剂：竞争性抑制剂与酶的底物结合位点相同，通过与酶竞争底物结合来抑制酶的活性。
这类抑制剂通常具有与底物相似的结构，可以通过酶的底物结合位点的氢键、离子键和范德华力与酶结合。
2.非竞争性抑制剂：非竞争性抑制剂与酶的底物结合位点不同，可以通过与酶的其他部位结合来抑制酶的活性。
这类抑制剂通常具有与酶的非底物结合位点的氢键、离子键和范德华力相互作用。
5型磷酸二酯酶抑制剂的研究进展近年来，许多研究人员致力于开发5型磷酸二酯酶的抑制剂，并取得了一些重要的进展。
以下是一些已知的5型磷酸二酯酶抑制剂：1.竞争性抑制剂–磷酸二酯类似物：这类抑制剂具有与底物相似的结构，可以与酶的底物结合位点竞争。
例如，阿德福韦（Adefovir）是一种用于治疗乙型肝炎和艾滋病的抗病毒药物，它通过竞争性抑制病毒反转录酶的活性来抑制病毒复制。
蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(植物样品抽提用, 50X)
蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(植物样品抽提用,50X)货号：P1262规格：100T保存：-20ºC保存，有效期12个月。
产品组成：产品名称规格保存蛋白酶抑制剂混合物(植物样品抽提用,50X)2×1mL-20ºC避光磷酸酶抑制剂混合物(50X)2×1mL-20ºC产品说明：植物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。
因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法本产品用于植物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂/氨基肽酶抑制剂，以及丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。
以1:50的比例把蛋白酶抑制剂混合物(植物样品抽提用,50X)以及磷酸酶抑制剂混合物(50X)加入裂解液中，即可用于植物细胞或组织蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解适用范围：抑制植物细胞或组织提取物中的各种蛋白酶(如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等)和磷酸酶(如丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶等)。
适用于Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。
使用方法：1、蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物（植物样品抽提用，50X），使用时分别按照1:50的比例加入到裂解液中，混匀后即可使用。
含有蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。
2、由于产品中的金属蛋白酶抑制剂能与亚铁等二价金属离子形成红色或紫色的螯合物，所以产品可能呈现浅粉红色；如果裂解液或样品中含有较高浓度亚铁等二价金属离子，可能出现较深的红色，但不影响使用。
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明产品编号：C7610包装规格：50Assays产品组成:胞质提取Buffer55mL线粒体溶解Buffer5mL蛋白酶抑制剂60μL磷酸酶抑制剂300μLDTT60μL产品简介胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒提供独特的组份可以提取动物细胞及组织中的胞质蛋白和线粒体蛋白。
该方法先将完整的有活性的线粒体和胞质蛋白分离，再处理后获得高纯度的有活性胞质蛋白和变性的线粒体蛋白，不需要超速度离心，方法简单，可靠，快速。
可用于1D，2D电泳，Western Blot，Elisa等蛋白质实验。
提取的完整线粒体也可以经过活性溶解液处理，再用于免疫共沉淀，凋亡，细胞信号传导，能量代谢等生理学研究，或进行线粒体DNA提取，用于基因组学后续研究。
本试剂盒可以每次从1×107个培养细胞或200mg组织中提取所需要的蛋白质，可以使用50次。
产品特点1.整个实验过程大约只需要1小时左右。
2.可以从50×107个培养细胞或50×200mg组织中提取所需要的蛋白质或活性线粒体。
3.活性线粒体的提取量高，高效线粒体溶解Buffer提取的蛋白质，可以用于线粒体蛋白质组学研究。
4.不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件常温下运输，收到后将线粒体溶解Buffer、DTT和蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂于-20℃保存，胞质提取Buffer于2-8℃保存，保质期1年。
操作步骤1.收集不少于1×107细胞，用冷PBS（pH7.4）洗涤细胞两次，每次3000rpm（800g）离心5min；组织样本（200mg）尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，于冰上剪碎，再用冷PBS（pH7.4）洗涤三次。
2.在上述细胞或组织样本中加入1mL胞质提取Buffer（使用前每mL胞质提取Buffer加入1μL蛋白酶抑制剂，5μL磷酸酶抑制剂和1μL DTT），置玻璃匀浆器冰上均质30～50次，置于冰上冷却。
蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在-20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保存1个月。
分子量：685.9使用：贮存浓度1mg/ml，使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。
EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4℃稳定至少6个月分子量：372.24使用：工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8~9时再加入。
钙调磷酸酶抑制剂
血液系统疾病
4.再生障碍性贫血 (AA)
CsA治疗AA有三种方案 ①递增方案由3.5-5 mg· (kg· d)-1逐渐增加到 10mg· (kg· d)-1 ②负荷剂量10-12 mg· (kg· d)-1开始至疗效稳定后改为维持 剂量2-5mg· (kg· d)-1 ③常规剂量5mg· (kg· d)-1,以上方案都同时服用雄激素 控制血浓度在300-500ng/ml(荧光偏振免疫法,FPIA) CsA治疗纯红细胞再障(PRCA)和重型再障(SAA)的一线药 物,血药浓度在200-300ng/ml为宜, 疗程不应少于3个月
CsA初始剂量:5～6mg/(kg· d) 血药浓度:100～300µg/L ,平均3个月显 效。
血液系统疾病
2.特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP）
应用CsA治疗ITP，可使血小板数目上升，出血症 状得到改善。 剂量: 4～10 mg/(kg· d)，每日2～3次口服 疗程: 3周～3个月，有效率75%～81.4%
报道FK506
成功地治疗皮质激素难治性自身免疫性慢
活肝, 使肝酶恢复正常, 儿童生长发育恢复, 疲
乏减轻, 对肝病组织学也有改善。
但对病毒性慢活肝的疗效报道不一, 一般认为疗 效甚微。
消化系统疾病
2.溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis UC)
CsA治疗有效 口服剂量： 8mg·kg-1 ·d – 1 静脉注射： 4mg· kg-1 · d -1 灌肠法剂量：CsA 250-300mg/ 100ml, 每晚1 疗效: 治疗轻、中型UC患者, 临床改善率40-70%, 口服和静脉注射给药平均有效率80%。 推荐作为对皮质激素治疗无效又不愿手术的重型 uc患者的短期治疗首选药。
长效PDE-5抑制剂-他达拉非的时间战略：给你自由长久的爱
长效PDE-5抑制剂-他达拉非的时间战略：给你自由长久的爱勃起功能障碍（ED）在世界范围内发病率较高，严重影响患者及其伴侣的身心健康和生活质量。
幸运的是，除却生活方式和行为习惯的调整之外，尚有明确有效的药物可以治疗大部分患者。
在众多治疗ED的药物中，5-磷酸二酯酶抑制剂（PDE-5 抑制剂）是当前勃起功能障碍的一线用药。
在海绵体中，5-磷酸二酯酶（PDE-5）水解环磷鸟苷（cGMP）；PDE-5 抑制剂抑制PDE-5 的水解作用，使细胞内 cGMP 浓度升高，导致平滑肌松弛、血流增加，产生勃起。
较早出现的短效 PDE-5 抑制剂（如西地那非、伐地那非）改善了男性的勃起功能、硬度等，但由于时间上的局促，容易造成女伴的不满足感。
实际上，ED 的治疗目标已经从「充分勃起完成性交」提升为「全面康复；达到和维持坚挺的勃起硬度，并恢复满意的性生活」1。
事实证明，男性也更容易在女伴的快乐中找回自信，获得愉悦，从而更快回归 ED 前的健康状态。
长效 PDE-5 抑制剂的出现让这一目标得到实现。
长效 PDE-5 抑制剂—起效快，作用时间长乍一听长效，很多人可能会认为是起效慢的意思。
其实三种 PDE-5 抑制剂的起效时间相差不大（1-2h）。
长效意味着疗效长，三种PDE-5 抑制剂的半衰期不同，西地那非和伐地那非的半衰期都相对短，分别约为3-5h、3.9-4.8h，需要在相对接近性活动的时间里服药2,3。
而他达拉非的半衰期长达 17.5 h4。
这种较长的半衰期使其每日服用可维持有效治疗浓度，偶尔漏服不影响疗效，不需要补服。
药物服用与性活动分开使患者能自由决定用药时间和性活动时间。
他达拉非因其17.5h 的长半衰期，是目前首个被美国 FDA 和中国 CFDA 批准用于每日一次治疗 ED 的 PDE-5 抑制剂。
他达拉非助力「随心所欲」的性生活他达拉非的时间战略，除了「长效」，还有个性化的治疗模式。
《2013 高品质国民性福指数调查报告》显示，86% 的女性期待性爱的发生「随心随性、自然而然」5。
磷酸酯酶PDE和其抑制剂概述
5pAMP 5pGMP
作为神经递质、激素、光和气味等物 质的第二信使，广泛作用于靶器官。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
种类 最适底物
主要分布
部分抑制剂 抑制剂作用
PDE1ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱPDE2 PDE3 PDE4
Ca2 + / CaM 依赖型
心,脑,肺，肾上腺组织， 淋巴细胞
长春西汀
cGMP 刺激型
心,血管，气管平滑肌， 血小板等
• 催化区是高度保守同源的区 域，有20 %～25 %的序列是 一致的,也是PDE 非选择性 抑制剂的作用靶点。
• 各种PDE同工酶的调节区 与未知功能区在氨基酸链长 度与顺序上有很大差异。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
ATP AC GTP GC
[cAMP] PDE1-4,8,10 [cGMP] PDE5,7
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
三 PDE4分布，特点及其抑制剂
• PDE 4 主要分布于各种炎性细胞内,包括肥 大细胞、巨噬细胞(MΦ) 、嗜酸粒细胞 ( EOS) 、淋巴细胞和上皮细胞等。
• 研究发现PDE Ⅳ有2 种同工酶,即HPDE Ⅳ 和LPDE Ⅳ,对于HPDE Ⅳ的抑制会引起严 重的胃肠道副作用,而抑制LPDE Ⅳ则有较 好的疗效。在此基础上进行第二代PDE Ⅳ 抑制剂的开发研究。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
洛利普兰(rolipram)
• 商品名为Adeo，约十年前由Schering AG开发研 制，后由日本明治精工株式会社生产，目前正处 于上市申请阶段。
• Rolipram 起初被用于精神抑郁症的治疗，后来发 现其抑制PDE4的作用可用于哮喘和COPD的治疗。
爱宁达钙调神经磷酸酶抑制剂
中强效外用激素和/或TCI
第2阶段
弱中效外用激素和/或TCI
基础治疗（保湿润肤剂, 寻找和避免刺激因素）
2006年EAACI和AAAAI联合推出的成人和儿童特应性皮炎诊断和治疗指南
保湿润肤剂，TCS，TCIs在AD病程中的搭配使用
AD病程图
(急性发作期-中重度)
(急性发作期-中轻度)
(超强效TCS)
穿透皮肤
8.0 7.0 0.40 0.35
经皮吸收
皮肤浓度 (g/cm2)b
血液浓度 (g/ml/h)
6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0
0.30 0.25
0.20
0.15
0.10
0.05 0.00
0.0
吡美莫司
他克莫司
吡美莫司
他克莫司
吡美莫司透皮渗透性较他克莫司低9-10倍，提示吡美莫司的系统吸收率低
治疗AD:新突破?
安全篇
治疗前
治疗后
Flash File
比较糖皮质激素与吡美莫司诱导郎格汉斯细胞凋亡
对照组 吡美莫司 氢化可的松 氯氟美松
mean rel. int. MHC II
2.2%
2.7%
10.6%
22.3%
mean rel. int. TUNEL Hoetzenecker, Elbe, Stingl et al. J Invest Dermatol 2004;122:673–84
Eichenfield L et al. J Am Acad Dermatol 2002;46:495–504 Patients aged 1–17 years; mild to severe AD
特应性皮炎 爱宁达®乳膏 2次 / 天
蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X)
白酶、金属蛋白酶等)和磷酸酶(如丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶等)。适用于 Western Blot 和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。
使用方法： 1、蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物（50X），使用时分别按照 1:50 的比例加入到裂解液中，混 匀后即可使用。含有蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。 2、根据需要，0.05M 的 EDTA 也按照 1:50 的比例加入到裂解液中。
蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提ห้องสมุดไป่ตู้, 50X) 货号：P1264 规格：100T 保存：-20ºC 保存，有效期 12 个月。
产品组成：
产品名称 蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用，50X)
磷酸酶抑制剂混合物(50X) 0.05M EDTA, pH 8.0
规格
2×1mL 2×1mL 2×1mL
北京索莱宝科技有限公司
保存 -20ºC 避光
-20ºC RT
产品说明： 细菌提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而
影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的 有效方法。
本产品用于细菌蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋 白酶抑制剂/氨基肽酶抑制剂，以及丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。如用于检测金属 蛋白酶活性，则不宜添加 EDTA。以 1:50 的比例分别把蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X)和 0.05M EDTA 加入裂解液中，即可用于细菌蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。
磷酸二酯酶(PDE)及其抑制剂概述
《药理》书上写道： 药理》书上写道：
• 氨茶碱
抑制PDE,使环磷酸腺苷(cAMP)的水解速度 减慢,升高组织中cAMP/cGMP比值，松弛气道平 滑肌。
• 双嘧达莫
可逆性地抑制PDE,使血小板中的的cAMP增 多，从而抗血小板聚集。
同样抑制PDE,药理作用却有很大差异? 同样抑制PDE,药理作用却有很大差异?
部分抑制剂
扎普司特,双嘧达 莫
抑制剂作用
治疗视网膜色素变性 诱导T淋巴细胞增殖，治疗 某些免疫功能紊乱 调节生殖细胞的生长，还 可能影响蛋白的亚细胞 分布
PDE8
PDE9
PDE10
所有已知PDE选择 性抑制剂对该 酶均无明显抑 制作用
可能家族管理基因
PDE11
睾丸和前列腺
调节生殖细胞的成长
二 PDE3分布，特点及其抑制剂 PDE3分布，特点及其抑制剂
西洛司特（cilomilast） 西洛司特（cilomilast）
• 是葛兰素史克公司正在开发的新一代PDE4抑 制剂，国外多项临床试验显示长期口服西洛 司特可以缓解COPD患者临床症状，提高生 活质量，阻止患者肺功能下降的趋势； • 由于选择性地与PDEL相结合，其胃肠道不良 反应较第一代的洛利普兰明显减轻； • 目前该药在我国治疗COPD正在做Ⅱ/Ⅲ期临 床试验。
• PDE 4 抑制剂具有明显抗炎、抗过敏、抗 血小板活化作用。甚至有人认为PDE 4 抑 制剂的抗炎作用仅次于肾上腺皮质激素。 • 主要药物：
– 第一代 洛利普兰（ rolipram） – 美国葛兰素-史克公司的西洛司特（cilomilast）, 德国Byk-Gulden 公司的罗氟司特（roflumilast）
磷酸二酯酶抑制剂药理学作用机制和临床应用研究进展
2021年第42卷第2期综述评论•综述•磷酸二酯酶抑制剂药理学作用机制和临床应用研究进展郑刚、赵智勇秦建君2，丛鑫2(1.天津市第三中心医院分院心内科，天津300250: 2.石药集团欧意药业有限公司，河北石家庄050051)摘要：隣酸二酯酶（phosphodiesteras，P D E)可降解机体细胞内环隣酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP)和环憐 酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP)。
PDE抑制剂可降低PDE活性，从而减弱其对cAMP和cGMP的降解能力。
机体不同部位存在不同PD E同工酶，故各亚型PDE抑制剂对机体所产生的影响不同。
本文简要综述了不同PD E同工酶及 其抑制的药理学作用机制和临床应用研究进展，以期为相关疾病新药研发提供参考。
关键词：磷酸二酯酶抑制剂；药理学；作用机制中图分类号：R969 文献标志码： A 文章编号：1672-9188(2021)02-0149-06DOI：10.13683/j.wph.2021.02.012Research progress on phannacological mechanism and clinical application ofphosphodiesterase inhibitorsZHENG Gang1，ZHAO Zhiyong2, QIN Jianjun2, CONG Xin2(/. Department o f C ardiology, Tianjin Third Central Hospital Branch, Tianjin 300250, China; 2. Shijiazhuang Pharmaceutical Group Co., Ltd.,Shijiazhuang 050051, Hebei Province, China)Abstract:Phosphodiesteras (PDE) can degrade cyclic adenosine monophosphate (cAMP) and cyclic guanosine monophosphate (cGM P). PDE inhibitors can reduce the activity of PDE, thus weaken its ability to degrade cAMP and cGMP. There are different PDE isozymes in different parts of the body, so different subtypes of PDE inhibitors have different effects on the body. This article reviewed the pharmacological mechanism and clinical application of different PDE isozymes and their inhibition, in order to provide reference for the research and development of new diugs for related diseases.Key words:phosphodiesterase inhibitor; pharmacology; mechanism机体细胞内的环隣酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和环憐酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,cGMP)是人体组织细胞内的第二信使。
钙调磷酸酶抑制剂
钙调磷酸酶抑制剂（一）器官移植排斥反应1、移植排斥反应人体的免疫系统对各种致病因子有着非常完善的防御机制，能够对细菌、病毒、异物、异体组织、人造材料等“异己成分”进行攻击、破坏、清除，这种复杂的免疫学反应是人体非常重要的一种保护机制。
受者进行同种异体组织或器官移植后，外来的组织或器官等移植物作为一种“异己成分”被受者免疫系统识别，后者发起针对移植物的攻击、破坏和清除，这种免疫学反应就是移植排斥反应（transplantrejection）。
移植排斥反应是影响移植物存活的主要因素之一。
移植排斥反应是非常复杂的免疫学现象，涉及细胞和抗体介导的多种免疫损伤机制，发生原因主要是受体和移植物的人类白细胞抗原HLA（human leucocyte antigen）不同。
因此，供者与受者HLA的差异程度决定了排异反应的轻或重。
除同卵双生外，二个个体具有完全相同的HLA 系统的组织配型几乎是不存在的，因此在供受者进行配型时，选择HLA配型尽可能地接近的供者，是减少异体组织、器官移植后移植排斥反应的关键2、发病机制排斥反应的发生机制主要包括细胞免疫和体液免疫两个方面。
临床最常见的急性排斥反应主要由细胞免疫介导，而超急性排斥反应和慢性排斥反应主要由体液免疫介导。
（1）细胞介导的排斥反应细胞免疫在急性排斥反应发生发展过程中起主导作用。
移植物中供体的淋巴细胞和树突状细胞具有丰富的HLA-Ⅰ和Ⅱ类抗原，是诱发排斥反应的主要致敏原。
在移植物植入受体后，随着移植物的血液循环重建，供者的HLA-Ⅰ和Ⅱ类抗原不可避免的暴露于受者的免疫系统，受者的免疫细胞识别外来抗原后，即可引发下述一系列免疫反应：CD8+细胞毒性T细胞前体细胞与供者HLA-Ⅰ类抗原结合后活化增殖为成熟的细胞毒性T细胞，对移植物产生攻击效应；CD4+T辅助细胞识别供体HLA-Ⅱ类抗原，促使抗原递呈细胞释放IL-I，后者可促进T辅助细胞增殖和释放IL-2，IL-2可进一步促进T辅助细胞增殖并为细胞毒性T细胞的分化提供辅助信号；除了IL-2之外，TH细胞还能产生IL-4、IL-5、促进B 细胞分化并产生抗移植物的抗体，参与移植排斥；此外与迟发变态反应相伴随的血管损害、组织缺血以及巨噬细胞介导的破坏作用，也是移植物毁损的重要机制。
磷酸二酯酶(PDE)及其抑制剂概述
03
药物设计与合成策略
基于结构药物设计
01
利用X射线晶体学或核磁共振(NMR)技术解析PDE的三维结构 。
02
通过分析PDE活性位点与底物或抑制剂的相互作用，设计具有 更高亲和力和选择性的抑制剂。
03
利用结构信息，优化先导化合物的结构，提高药效和降低毒 性。
计算机辅助药物设计
利用分子模拟技术，如分子动力学模拟和蒙特卡罗 模拟，预测抑制剂与PDE的相互作用。
联合用药策略
针对复杂疾病的治疗，单一药物往往难以达到理想的治疗效果。未来，磷酸二酯酶抑制剂有望与其他药 物联合使用，形成多靶点、多途径的治疗策略，提高治疗效果并降低复发率。
06
总结与展望
当前研究成果回顾
01
磷酸二酯酶(PDE)结 构和功能研究
揭示了PDE家族成员在细胞信号传导 中的关键作用，包括调节环磷酸腺苷 (cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平。
磷酸二酯酶(pde)及其抑制剂 概述
目
CONTENCT
录
• 磷酸二酯酶(pde)基本概念与分类 • 抑制剂类型及作用机制 • 药物设计与合成策略 • 生物活性评价与筛选方法 • 临床应用前景与挑战 • 总结与展望
01
磷酸二酯酶(pde)基本概念与分类
定义及作用机制
磷酸二酯酶(PDE)是一类能够水解磷酸二酯键的酶，广泛存在于生 物体内。
深入研究PDE亚型特异性
进一步解析PDE各亚型的生理功能及病理作 用，为开发更具针对性的抑制剂奠定基础。
拓展PDE抑制剂应用领域
探索PDE抑制剂在更多疾病治疗中的应用潜力，如 代谢性疾病、自身免疫病等。
优化现有PDE抑制剂
通过改进药物设计策略，提高PDE抑制剂的 疗效和降低副作用，为患者提供更优的治疗 选择。
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北京雷根生物技术有限公司
磷酸酶抑制剂(50×)
简介：
磷酸酶抑制剂(50×)为多种磷酸酶抑制剂混合液，可有效抑制酪氨酸磷酸酶、丝氨酸磷酸酶、苏氨酸磷酸酶、酸性和碱性磷酸酶等各种磷酸酶。
适用于动物细胞或组织蛋白的提取，能最大程度地保持蛋白质磷酸化，常用于动物细胞或组织中蛋白激酶活性和信号传导的研究。
该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 按照缓冲液:磷酸酶抑制剂(50×)=49:1的比例，配制1×的含磷酸酶抑制剂的工作液，
或者直接把磷酸酶抑制剂加入所需工作液中混匀即可。
注意事项：
1、 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 CS0145 CS0145 Storage 磷酸酶抑制剂(50×) 1ml 5ml -20℃ 使用说明书 1份。