霉菌毒素检测方法综述
酶联免疫吸附法(ELISA)检测霉菌毒素
酶联免疫吸附法（ELISA）检测霉菌毒素霉菌毒素主要是指霉菌在其所污染的食品或是饲料中产生的有毒代谢产物，在饲料的加工、运输和贮存过程中都可能会产生。
据统计，已知的霉菌毒素有300多种，常见的毒素有：黄曲霉毒素，玉米赤霉烯酮/F2毒素，赭曲毒素，T2毒素，烟曲霉毒素，赭曲霉毒素，呕吐毒素，麦角毒素等。
霉菌毒素污染多为复合型，饲料中大多存在3种以上的霉菌毒素污染。
霉菌毒素通过饲料或食品进入人和动物体内，引起人和动物的急性或慢性毒性，损害机体的肝脏、肾脏、神经组织、造血组织及皮肤组织等。
因此，霉菌毒素的检测必须引起重视，防患于未然。
1霉菌毒素检测方法饲料中霉菌毒素检测方法主要有目测法，薄层色谱法（TLC），高效液相色谱法（HPLC），酶联免疫吸附法（ELISA），放射免疫法（KIA）及快速试纸检测法。
其中酶联免疫吸附法（ELISA）此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
经过三四十年发展，ELISA技术已经作为一个成熟的快速筛选方法，应用于不同的行业，美国USDA，EPA将众多ELISA的方法作为官方快速筛选方法。
2酶联免疫吸附法（ELISA）酶联免疫吸附法（ELISA）的基本原理是，在合适的载体上，酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体结合成酶标记抗体抗原复合物，在酶底物的参与下，复合物上的酶催化底物使其水解成为另一种带色物质，其核心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色深浅来进行分析。
该法优点突出，1）灵敏度高，干扰小：抗体抗原的免疫反应特异性很强，结构类似物、荧光物质、有色物质对检测的干扰很小。
2）操作简便快捷：由于特异性强，简化了样品的预处理和提取纯化过程，同时测定时间短。
3）安全性高，污染少，成本低廉：不需要昂贵的测定仪器，且所用试剂也相对较少，毒素标准品的浓度可以很低，减少了对检测人员和环境的潜在危害和污染。
尤其适用于大批量样品的快速测定。
3试剂盒ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。
霉素检测操作方法
霉素检测操作方法
霉素检测操作方法包括以下步骤：
1. 样品准备：将待检测样品进行处理，以保证准确的检测结果。
对于食品样品，一般需要将样品进行研磨或切割成均匀的粉末或块状样品。
对于环境样品，需要将样品进行适当的处理，如过滤或离心等。
2. 提取：将样品中的霉菌毒素提取出来，以便进行后续的分析。
提取方法可以根据不同的检测要求选择。
常用的提取方法包括溶剂提取、固相微萃取等。
3. 分析：将提取得到的样品进行分析，检测霉菌毒素的含量。
常用的霉素检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、酶联免疫吸附试验等。
根据不同的分析方法，还需要准备相应的试剂和仪器设备。
4. 结果判读：根据分析结果，判断样品中霉菌毒素的含量是否超标。
可以根据国家相关的标准或指标进行判定，判断样品是否合格。
需要注意的是，在进行霉素检测时，应严格按照实验操作规程进行，避免样品污染和操作误差的发生。
同时，还需注意个人防护，以保证实验操作的安全。
饲料中霉菌毒素快速检测技术
Veratox 组胺检测试剂盒
检测线2.5-50ppm
检测结果
NEOGEN公司ELISA试剂盒特点
1-操作简单,速度快-所有的霉菌毒素检测只需移液器和酶标 仪就可以获得准确结果,并且所有试剂盒操作步骤几乎一 样;大部分试剂盒的前期样品处理时间不超过3分钟,检测时 间不超过20分钟,同传统方法相比有明显的优势; 2-使用广泛-世界各地普遍使用,适合于目前中国大多数饲料 企业实验室检测; 3-质量可靠-试剂盒灵敏度和重复性非常高,其它公司产品无 法达到;黄曲霉毒素试剂盒是美国农业部指定使用产品,呕 吐毒素试剂盒是世界同类产品金标准,玉米烯酮试剂盒为 AOAC官方方法;
Veratox 伏马毒素试剂盒
检测线1-6ppm和 50-600ppb
检测结果
Veratox T-2毒素试剂盒
第一步 样品处理 1-取代表性的样品,粉碎,使75%的样品过20目筛; 2-取5g到25ml 50%甲醇溶液中,震荡3分钟; 3-静止2-3分钟,过滤，收集滤液;。 第二步 检测 1-向每个红色微孔中加入100ul酶结合物溶液； 2-再分别加入100ul标准品和样品处理液，混匀； 3-从红色微孔中取100ul到抗体孔中，室温下温育5分钟； 4-洗涤3-5次； 5-每孔加入100ul底物，室温下温育5分钟； 6-每孔加入100ul终止液，混匀； 7-在酶标仪上读数。
Veratox黄曲霉毒素试剂盒 (美国农业部指定使用产品 USDA认证号#2005-102)
Veratox黄曲霉毒素试剂盒 (美国农业部指定使用产品,USDA认证号 #2005-102)
第一步 样品处理 1-取代表性的样品,粉碎,使75%的样品过20目筛; 2-取5g到25ml 70%甲醇溶液中,震荡3分钟; 3-静止2-3分钟,过滤，收集滤液; 第二步 检测 1-向每个红色微孔中加入100ul酶结合物溶液； 2-再分别加入100ul标准品和样品处理液，混匀； 3-从红色微孔中取100ul到抗体孔中，室温下温育2分钟； 4-洗涤3-5次； 5-每孔加入100ul底物，室温下温育3分钟； 6-每孔加入100ul终止液，混匀； 7-在酶标仪上读数
饲料中霉菌毒素检测技术
霉菌毒素是霉菌产生的次级代谢产物
酵母
次
级 代
抗生素
真菌
霉菌
谢
产
物
霉菌毒
素
蕈菌
精品PPT
一、饲料(sìliào)中霉菌毒素的危害
2、霉菌毒素(dú sù)产生的原因
霉菌无处不在，它们可在农作物生长、收获、运输 和储存期间生长并产生毒素 农作物作为饲料原料在生产、销售、储存、运输 过程中如果受到霉菌污染也会发生霉变、遭受霉 菌毒素污染
2、竞争(jìngzhēng) ELISA 的原理
精品PPT
三、ELISA法的操作(cāozuò)要点及注意事项
2、检测(jiǎn cè)步骤及注意事项
（1）准备阶段 • 详细阅读说明书
• 确认试剂盒试剂组成、数量及其用途
• 试剂配制 • 试样的制备、提取及稀释
• 试剂盒试用前要充分回温
• 实验室室温最好控制在20-25℃ • 准备好实验器具（移液枪机及枪头） • 确认仪器设备运行正常
GB/T19540-2004
DB51/T 1080-2010
饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 免疫亲和柱净化－高效液相色谱法 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 半定量薄层色谱法 饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱-串联质谱法 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 胶体金法 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 免疫亲和荧光光度法 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 时间分辨荧光免疫层析法 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 高效液相色谱法 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法
取样 GB/T14699.1 2005 饲料 采样
食品中霉菌检测方法与标准
食品中霉菌检测方法与标准简介:食品是人们日常生活中不可或缺的一部分，然而，食品中的霉菌污染却是一个严重的问题。
霉菌不仅会降低食品的品质和口感，还可能产生毒素对人体健康造成危害。
因此，如何有效地检测食品中的霉菌成为了食品安全的重要环节。
本文将介绍食品中霉菌检测的方法和标准。
一、常用的霉菌检测方法：1. 细菌计数法细菌计数法是一种常用的传统霉菌检测方法，它通过将食品样品在适当的培养基上培养，然后通过观察和计数菌落形成单位（CFU）来确定食品中细菌的含量。
这种方法简单易行，可以得出定量结果，但需要较长的培养时间，通常需要24-48小时才能获得结果。
2. PCR法PCR法是一种基于核酸扩增技术的霉菌检测方法，它能够快速准确地检测食品中的霉菌污染。
该方法使用特定的引物和酶扩增食品样品中霉菌的特定基因序列，然后通过荧光信号的检测确定是否存在霉菌。
PCR法具有高灵敏度和高特异性，且检测时间短，只需数小时。
3. 快速测试法快速测试法是近年来发展的一种新型霉菌检测方法，它利用生物传感技术和免疫分析技术对食品中的霉菌进行快速检测。
常见的快速测试方法有免疫层析法、生物芯片技术和蛋白质酶技术等。
这些方法具有操作简便、检测时间短、灵敏度高等优点，但需要特殊设备和试剂的支持。
二、食品中霉菌污染的标准为了确保食品安全，各国针对食品中霉菌污染制定了一系列的标准，其中包括食品中霉菌的限量标准和毒素限量标准。
1. 霉菌限量标准霉菌限量标准规定了食品中霉菌的最大容许限量。
各国的限量标准不同，通常根据食品类型和使用目的进行区分。
例如，食品中霉菌限量通常为每克菌落形成单位（CFU/g），而对于某些特定食品如牛奶和奶制品，标准可能为每毫升。
2. 毒素限量标准霉菌主要通过合成毒素对食品造成危害。
因此，针对食品中霉菌合成的毒素制定了相应的限量标准。
各类毒素的限量标准根据具体毒素和食品类型进行规定，如黄曲霉素在谷类制品中的限量为每千克10微克。
霉菌和毒素的检测方法
实用文档
2.1.4.1 结果
计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相 应稀释倍数计算。
若所有平板上菌落数均大于 150 CFU，则对稀释度最高 的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌 落数乘以最高稀释倍数计算。
霉菌和酵母计数。
02 方法
食品中霉菌和酵母
计数 PetrifilmTM
测试片法。
实用文档
2.1食品微生物学检验霉菌和酵母计 数
实用文档
实用文档
2.1.1 样品的稀释
2.1.2 培养
实用文档
2.1.3 菌落计数
肉眼观察，必要时可用放大镜， 记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母 数。以菌落形成单位（colony forming units，CFU）表示。
实用文档
2.2.5 气相色谱和气 质联用法 实用文档
液相 色谱
高效液相色谱法较 早用于霉菌毒素的检测 常用的检测器有荧光、 紫外、二极管阵列、蒸 发光散射等检测器，目 前使用最广泛的检测霉 菌毒素的方法 涉及到畜 牧化工和食品等各行业。
实用文档
2.2.4 微柱法
微柱法：将样品提取液通过氧化铝-硅镁型吸附剂填 充的微柱，样品中的杂质被氧化铝吸附，霉菌毒素则被 硅镁型吸附剂吸附，在紫外分析灯下观察荧光环与标准 比较定量 本法简便快速、灵敏度高。主要用于饲料中黄 曲霉毒素的筛选。
实用文档
微柱凝胶免疫监测仪
2.2.5 薄层色谱法
薄层色谱法：将样 品提取液在薄层板上点 样， 展开后，用吸收 法或荧光法对被测样品 与标准品扫描测定。对 于黄曲霉毒素B1的检测， 我国国标采用(TLC)法， 该方法更适于确认黄曲 霉毒素 存在与否。
食品中的霉菌检测方法
中文摘要摘要随着社会经济的高速发展，食品安全问题日益受到公众的关注，提出灵敏性高、快速高效的检测方法，对于食品中霉菌的精确检测和控制是至关重要的一项任务。
食品中的霉菌毒素的毒副作用较大，造成的食品污染通常具有无法避免及分布不均匀等特点，严重影响消费者的健康安全。
本文首先对食品中主要霉菌毒素的结构及理化性质进行介绍，进而介绍现有的霉菌毒素检测方法，主要从物理检测、免疫学检测及其他方法三大类进行描述。
但由于不同的检测方法存在不同的检测精度和准确度，因此在实际应用中，应当根据检测霉菌种类、样品的实际情况及检测环境条件等因素，科学选择对应的检测方法，保证食品中霉菌检测的准确性与可靠性。
关键词：食品安全；霉菌毒素；检测方法目录摘要 .......................................................................................................................... - 1 -1 前言 (1)2 霉菌毒素 (1)2.1霉菌毒素的定义及分类 (1)2.2霉菌毒素的结构及理化性质 (1)2.3霉菌毒素的危害 (2)2.4 食品中主要霉菌毒素分析 (3)2.3.1黄曲霉毒素 (3)2.3.2黄变米毒素 (3)2.3.3镰刀菌毒素 (3)2.3.4赭曲霉毒素 (4)2.3.5展青霉毒素 (4)2.3.6青霉酸毒素 (4)2.3.7交链孢霉毒素 (4)2.3.8杂色曲霉毒素 (4)3 霉菌检测方法 (6)3.1 物理检测方法 (6)3.1.1平板培养法 (6)3.1.2近红外光谱法 (7)3.1.3气相色谱法 (7)3.1.4高效液相色谱法 (7)3.1.5薄层层析法 (8)3.2 免疫学方法 (8)3.2.1荧光免疫法 (8)3.2.2胶体金技术 (9)3.2.3酶联免疫法 (9)3.3 其它检测方法 (10)3.3.1适配体芯片技术 (10)3.3.2 生物传感器法 (11)结论 (12)参考文献 (13)食品中的霉菌检测方法1 前言随着社会经济的发展和人们生活水平的提高，食品安全问题层出不穷，严重制约着经济的稳定发展及公众的健康安全，同时人们对食品安全的重视程度也与日俱增。
饲料中霉菌毒素检测技术
紫外检测器 荧光检测器
荧光检测器 荧光检测器 串联质谱 需柱前化学衍生 荧光检测需柱前 化学衍生
甲醇-水
甲醇-水 甲醇-水
免疫亲和柱
免疫亲和柱 免疫亲和柱 SAX净化柱
四、HPLC法在饲料霉菌检测中的应用
2、免疫亲和柱净化原理
加入待净化样本 洗涤干扰物 洗脱目标物
四、HPLC法在饲料霉菌检测中的应用
检测方法
高效液相色谱法（荧光） 酶联免疫吸附法 薄层色谱法 液相色谱-串联质谱法 胶体金法 荧光光度法 免疫层析法 高效液相色谱法 高效液相色谱法（荧光） 薄层色谱法 酶联免疫吸附法 高效液相色谱法 液相色谱-串联质谱法 高效液相色谱法（紫外） 薄层色谱法
高效液相色谱法
黄曲霉毒素
NY/T 2071-2011 NY/T 2550-2014 NY/T 2549-2014 NY/T 2548-2014 DB37/T 2617-2014 GB/T 28716-2012
四、HPLC法在饲料霉菌检测中的应用
1、HPLC法检测霉菌毒素的关键点比较
霉菌毒素 名称
黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮
提取液
甲醇-水 乙腈-水 水
净化
免疫亲和柱 多功能净化柱 免疫亲和柱 免疫亲和柱
检测器
荧光检测器 串联质谱 荧光检测器 串联质谱
备注
荧光检测需柱前 光化学衍生
脱氧雪腐镰刀菌 烯醇（呕吐毒素） 赭曲霉毒素A
•
•
加洗液不要溢出微孔，防止交叉污染
拍板用力适当，看不到明显液体为宜
三、ELISA法的操作要点及注意事项
2、操作要点及注意事项(续)
（5）显色 • • • • 加显色液要快速准确 回形振荡混匀，消除气泡 严格按照说明书控制温度、时间及避光要求 防止微孔内液体挥发，加以密封
霉菌毒素检测方法
霉菌毒素检测方法1.呕吐毒素(DON)的检测ELISA法测试前请仔细阅读本说明在2—8℃冷藏—不要冻结1.简介 DON毒素脱氧瓜萎镰菌醇（DON，）是单端孢菌素烯烃中的一种，它通常是由生长在谷类物品（如小麦、玉米、大麦和秣草）霉菌镰红菌素生成的。
脱氧瓜萎镰菌醇的毒性效应包括：呕吐、不想进食、胃肠炎、腹泻、免疫抑制和血液病。
研究表明猪对脱氧瓜萎镰菌醇很敏感。
当脱氧瓜萎镰菌醇含量≥1ppm时，它们就拒绝进食。
其毒性也会对其他物种产生毒性效应，各种物种对脱氧瓜萎镰菌醇的敏感性各不相同。
研究表明脱氧瓜萎镰菌醇会使已加工食物发生问题，包括使可吃的谷类制品产生臭味、对生面团质量产生负面影响。
因此，精确测定可能含有脱氧瓜萎镰菌醇的食物和食品就现得十分重要。
FDA（美国食品和药品管理局）已经制定了脱氧瓜萎镰菌醇含量的强制标准。
美国食品药物管理局已经颁布的DON毒素建议限量如下：2.方法原理本测试盒的测试原理是一种竞争性的直接酶联免疫吸附剂测试方法（ELISA），可准确检测出样品中ppm级的DON毒素。
样品和标准控制液中游离的DON毒素与轭合物中的DON毒素竞争抗体结合位置。
清洗后，加入底物，底物与轭合物反应出现兰色，兰色越深表明DON毒素越少。
将其置于微型孔阅读器中可读出透光度，以控制标准液的透光度作标准曲线，将样品的透光度与标准曲线比较计算出样品中DON毒素的准确浓度。
3.贮存要求本试剂盒存放在2～8℃时，可以一直使用到标签上注明的到期日期。
4.试剂与仪器4.1已提供的材料48个包被了抗体的孔；48个红色标记的混合孔；5瓶2ml浓度为0、0.25、0.5、1、3 ppmDON毒素控制标准液(黄色标签)；1瓶DON毒素-HRP轭合物溶液(兰色标签)；1瓶24ml底物溶液(绿色标签)；1瓶32ml红色终止液（红色标签）4.2需要但未提供的材料提取材料；蒸馏水或去离子水；100ml量筒；150ml的具塞三角瓶；滤纸；样品收集具塞试管；漏斗；粉碎机；称量为5～25克的秤；带450nm滤光片的酶标仪；200μl移液器；200μl吸咀；纸巾或等效的吸水材料；计时器；防水记号笔；洗瓶；移液器用的试剂槽；蒸馏水或去离子水；计时器等5.注意事项本测试盒不使用时应在2～8℃下存放。
霉菌毒素检测方法综述
•霉菌毒素检测方法综述由于产生毒素的霉菌无处不在，以及我们对大多数有利于霉菌生长和霉菌毒素产生的条件控制不力，造成食品和饲料的霉菌毒素污染问题越来越成为现代农业生产中不可忽视的重大难题。
在各种农产品上生长着的各种各样的霉菌，这些霉菌都能产生霉菌毒素，霉菌毒素是有毒的化合物，有些甚至是致癌的。
霉菌毒素有很多种(CAST,2003)，包括黄曲霉毒素，主要是黄曲霉毒素B1和M1(Aflatoxins，FB1、FM1)；赭(棕)曲霉毒素A(OchratoxinA，OA)；杂色(柄)曲霉毒素(Terigmatocystin)；展青霉素(Patulin,PTL)；玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN(F－2));串珠镰刀菌素(Moniliformin,MF)，三硝基丙酸以及属于单端孢霉烯族化合物(Trichothecenes)的T－2毒素(T－2toxin,T－2)；脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)(Deoxynivalenol,DON)；二乙酰镳草镰刀菌烯醇(Diacetoxyscirpenol，DAS)等。
联合国粮农组织在近期的报道中指出，全世界至少99个国家，占世界人口的87％，针对粮食和饲料的霉菌毒素污染问题都有相关的规定。
在未来的几年里，与不断变化的全球气候有关的气象突发事件的增多将进一步向我们提出挑战。
霉菌毒素污染给食品企业、粮油加工企业、畜禽养殖场以及饲料的加工企业造成了巨大的经济损失。
目前霉菌毒素检测常用的方法如下几种：一、薄层层析法：TLC法是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来，经柱层析净化，再在薄层板上层析展开、分离，利用霉菌毒素的荧光性，根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。
TLC 法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多，在展开时影响斑点的荧光强度。
二、色谱法：色谱法，包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱等，一直是最重要的霉菌毒素的化学分析方法。
评估霉菌毒素脱毒产品的体外方法
评估霉菌毒素脱毒产品的体外方法霉菌毒素是一种由霉菌产生的毒性物质，可以对人和动物的健康造成危害。
为了降低霉菌毒素的风险，许多公司和实验室开发了各种脱毒产品。
这些产品可以降低食品和饲料中的霉菌毒素含量，保护人和动物的健康。
评估这些脱毒产品的效力和安全性是非常重要的，体外方法是一种有效的评估方法。
1.酶联免疫吸附测定法：这种方法利用特异性抗体检测霉菌毒素含量。
将样品与特异性抗体结合，形成免疫复合物，然后利用酶标记的二抗与免疫复合物结合，产生信号，从而测定霉菌毒素的含量。
这种方法操作简单、灵敏度高，但是不能区分霉菌毒素的不同类型。
2.高效液相色谱法：这种方法利用色谱柱分离样品中的霉菌毒素，并通过检测色谱峰的面积或积分来确定霉菌毒素的含量。
这种方法可以用于分离不同类型的霉菌毒素，但是操作复杂，需要较长的分析时间。
3.质谱法：这种方法利用质谱分析技术，对样品中的霉菌毒素进行分析和鉴定。
质谱法具有高度的特异性和灵敏度，可以鉴定霉菌毒素的种类和含量，但是需要昂贵的设备和专业的技术。
以上方法都需要对脱毒产品和霉菌毒素进行分离和提取。
因此，还需要一些样品制备技术，如固相萃取、液液萃取和离子交换层析等。
除了上述方法外，还可以使用细胞毒性测试和动物毒性测试来评估霉菌毒素脱毒产品的安全性。
细胞毒性测试主要通过观察脱毒产品对细胞的影响，评估其细胞毒性。
动物毒性测试则通过观察脱毒产品对动物的影响，评估其毒性和安全性。
然而，这些方法的操作和数据解读都比较复杂，需要专业的技术和设备，成本也相对较高。
总之，评估霉菌毒素脱毒产品的体外方法很多，不同方法都有其独特的优势和局限性。
为了准确评估脱毒产品的效力和安全性，需要选择合适的方法并结合实际情况进行评估。
霉菌毒素的检测方法概述
菌量一般为 １ ０ 个／ ｇ 左右。有８ ４ ． ４ ％的样品中检出曲 霉属 ，有６ ６ ． １ ％的样 品中检出青霉属 ，有４ ０ ． ０ ％的
样 品 中检 出镰 刀菌 属 ，有 ３ ０ ． ６ ％的样 品 中检 出毛 霉
（ Ｆ Ａ Ｏ） 估计全世界粮食每年由霉菌造成 的直接经 济损失达数百亿美元 ，而且逐年递增 。 由霉变饲 料所致畜禽中毒而造成的经济损失更不计其数 。
当人 或 畜 、禽采 食 了霉 变 的粮 食 制 品 或饲 料 后 就 会 发生 多种 中毒 病 ，统称 为真 菌毒 素 中毒 。
真 菌毒 素检测方 法大致包括化学检验方法 、
免 疫学 检验 方法 和生 物学 检验方 法 。
１ 化 学 检 验 方 法
即利用化学方法检验真菌毒素 ，主要包括提 取 、脱脂 、净化 、分离 、鉴定和定量等程序。 １ 。 １ 取样和样品的制备 ：取样必须有代表性 ，应 尽量将样品磨细 ，以利提取。 １ ． ２ 提取 ：根据 水溶剂 能渗透 到亲水性植 物组 织 的原 理 ，用氯仿一 水 、二氯甲烷一 水等作为萃取
２ ０ １ ３ 年 第１ 期
综述
霉菌毒素的检测方法概述
张 德 安
（ 吐鲁番地 区畜牧工作站 ，新疆 吐鲁番 ８ ３ ８ ０ ０ ０ ）
摘要 ｉ通过对饲料 中霉菌毒素 的中毒危 害的现状分析 ，介 绍 了化 学检验 方法、免疫学检验方法和生物 学检验方法等３ 种
真茵毒素检测方法 。
关键词 ：真 菌毒素 ；中毒 ；检测 ；化学检验
中图分 类号 ｉ￥ ８ ５ ９ ． ８ ７
文献标识 码 ：Ｂ
变的饲料或饲草被动物食用后 ，常可 引起各种真
菌 毒 素 中 毒病 。据 张海 彬 （ １ ９ ９ ４）等对 江苏 省 各 地 区 的饲料 （ 草 ）样 品调查 研 究 ，在 １ ８ ０ 份 样 品 中
食品中霉菌毒素的检测与控制技术
食品中霉菌毒素的检测与控制技术食品安全一直是人们关注的重要问题，霉菌毒素是食品安全的一个重要方面。
霉菌毒素是由霉菌产生的一类有毒化合物，在食品中的存在对人体健康带来潜在危险。
因此，及时检测和控制食品中的霉菌毒素是非常重要的。
本文将从检测方法和控制技术两个方面来探讨食品中霉菌毒素的问题。
一、检测方法目前，主流的霉菌毒素检测方法主要包括生物学方法、化学方法和免疫学方法。
生物学方法是最早被使用的一种方法，它利用了细胞生物学的原理，通过观察霉菌或霉菌毒素对生物体的影响来进行检测。
例如，可以利用小麦胚芽或动物实验来检测食品中的黄曲霉毒素。
然而，这种方法需要较长的时间，且结果可能受到环境因素的影响。
化学方法则是基于化学分析的原理，通过测定食品样品中霉菌毒素的含量来进行检测。
这种方法通常需要使用特定的仪器设备和试剂，例如高效液相色谱仪和气相色谱仪。
化学方法的优势在于其高效且准确，但也有一些缺点，如贵、繁琐和需要专业人员进行操作。
免疫学方法则是利用免疫学原理进行检测的方法，常见的有酶联免疫吸附法（ELISA）。
这种方法需要利用特定的抗体与霉菌毒素结合，再利用染色或荧光等技术来检测结合的结果。
免疫学方法的优势在于其快速、灵敏且具有高通量性，可以进行大批量的样品检测。
综上所述，不同的检测方法各有优劣，各自适用于不同的实际需求。
在实际应用中，通常会综合考虑多种方法来进行食品中霉菌毒素的检测，以提高检测结果的准确性和可靠性。
二、控制技术除了检测方法外，控制食品中霉菌毒素的产生也是非常重要的。
以下介绍几种常见的控制技术。
首先，良好的卫生管理是控制霉菌毒素的基本方法之一。
饲养环境的卫生状况对食品中霉菌毒素的产生具有重要影响，因此，定期清理和消毒饲养环境对于控制霉菌污染非常重要。
其次，湿度和温度的控制也是一项关键技术。
霉菌生长繁殖需要一定的湿度和温度条件，因此，通过控制食品储存环境的湿度和温度，可以有效减少霉菌的生长和毒素的产生。
霉菌毒素检测方法综述
霉菌毒素检测方法综述由于产生毒素的霉菌无处不在，以及我们对大多数有利于霉菌生长和霉菌毒素产生的条件控制不力，造成食品和饲料的霉菌毒素污染问题越来越成为现代农业生产中不可忽视的重大难题。
在各种农产品上生长着的各种各样的霉菌，这些霉菌都能产生霉菌毒素，霉菌毒素是有毒的化合物，有些甚至是致癌的。
霉菌毒素有很多种（CAST,2003），包括黄曲霉毒素，主要是黄曲霉毒素B1和M1（Aflatoxins，FB1、FM1）；赭（棕）曲霉毒素A（OchratoxinA，OA）；杂色（柄）曲霉毒素（Terigmatocystin）；展青霉素（Patulin,PTL）；玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN(F－2)）;串珠镰刀菌素（Moniliformin,MF），三硝基丙酸以及属于单端孢霉烯族化合物（Trichothecenes）的T －2毒素（T－2toxin,T－2）；脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（Deoxynivalenol,DON）；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（Diacetoxyscirpenol，DAS）等。
联合国粮农组织在近期的报道中指出，全世界至少99个国家，占世界人口的87％，针对粮食和饲料的霉菌毒素污染问题都有相关的规定。
在未来的几年里，与不断变化的全球气候有关的气象突发事件的增多将进一步向我们提出挑战。
霉菌毒素污染给食品企业、粮油加工企业、畜禽养殖场以及饲料的加工企业造成了巨大的经济损失。
目前霉菌毒素检测常用的方法如下几种：一、薄层层析法：TLC法是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来，经柱层析净化，再在薄层板上层析展开、分离，利用霉菌毒素的荧光性，根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。
TLC法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多，在展开时影响斑点的荧光强度。
二、色谱法：色谱法，包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱等，一直是最重要的霉菌毒素的化学分析方法。
饲料中霉菌毒素的检测技术
饲料中霉菌毒素的检测技术发表时间：2018-10-01T11:51:13.677Z 来源：《基层建设》2018年第27期作者：梅岩松[导读] 摘要：饲料被污染后，除了可引起饲料变质外，还可导致动物的各种疾病，甚至引起急性中毒性死亡，给养殖业造成了巨大危害。
哈尔滨市兽药饲料监察所黑龙江哈尔滨 150018摘要：饲料被污染后，除了可引起饲料变质外，还可导致动物的各种疾病，甚至引起急性中毒性死亡，给养殖业造成了巨大危害。
论文就霉菌毒素对动物的危害及其在饲料和动物体内的检测方法进行归纳分析，为今后进一步健全霉菌毒素检测方法，减轻霉菌毒素对养殖业的危害提供参考依据。
关键词：饲料；霉菌毒素；检测技术1 霉菌毒素对动物体的危害高浓度霉菌毒素可导致动物的急性中毒甚至死亡，而长期饲喂含有低浓度霉菌毒素的饲料可引起动物体慢性中毒。
其危害主要表现在以下四个方面：（1）破坏或降低饲料的营养成分，影响养分的吸收及代谢；（2）引起动物体肝脏、肾脏、肺脏、肠道等脏器损伤，如黄曲霉毒素的靶器官为肝脏，可引起肝硬化及肝癌等疾病，赭曲霉毒素A、桔青霉素、杂色曲霉毒素具有较强的肾脏毒性，可引起肾小管变性、坏死，导致患畜多尿、血尿及蛋白尿等；（3）引起各种繁殖障碍，导致母畜假发情、脱肛、流产、死胎等，如玉米赤霉烯酮具有较强的激素样作用，可导致动物发情综合症；（4）造成动物体免疫抑制，诱发各类慢性疾病，降低饲料效益。
2 霉菌毒素的检测方法2.1 酶联免疫吸附法（ELISA）ELISA法是利用抗原抗体反应原理，将已知抗原吸附在酶标板上，加入酶标记抗体和样品提取液并混合均匀，充分反应后用去离子水洗去多余抗体，再加入酶的底物，产生有色物质，最后加入终止液使反应终止，用酶标仪测定酶底物的降解量，参照标准曲线计算试样中的抗原量。
柳其芳采用ELISA法在1-20μg/kg范围内测定黄曲霉毒素B1，CV为0.4%-2.6％，回收率为92%-105％。
霉菌毒素检测方法综述
霉菌毒素检测方法综述由于产生毒素的霉菌无处不在，以及我们对大多数有利于霉菌生长和霉菌毒素产生的条件控制不力，造成食品和饲料的霉菌毒素污染问题越来越成为现代农业生产中不可忽视的重大难题。
在各种农产品上生长着的各种各样的霉菌，这些霉菌都能产生霉菌毒素，霉菌毒素是有毒的化合物，有些甚至是致癌的。
霉菌毒素有很多种(CAST,2003)，包括黄曲霉毒素，主要是黄曲霉毒素B1和M1(Aflatoxins，FB1、FM1)；赭(棕)曲霉毒素A(OchratoxinA，OA)；杂色(柄)曲霉毒素(Terigmatocystin)；展青霉素(Patulin,PTL)；玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN(F－2));串珠镰刀菌素(Moniliformin,MF)，三硝基丙酸以及属于单端孢霉烯族化合物(Trichothecenes)的T－2毒素(T－2toxin,T－2)；脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)(Deoxynivalenol,DON)；二乙酰镳草镰刀菌烯醇(Diacetoxyscirpenol，DAS)等。
联合国粮农组织在近期的报道中指出，全世界至少99个国家，占世界人口的87％，针对粮食和饲料的霉菌毒素污染问题都有相关的规定。
在未来的几年里，与不断变化的全球气候有关的气象突发事件的增多将进一步向我们提出挑战。
霉菌毒素污染给食品企业、粮油加工企业、畜禽养殖场以及饲料的加工企业造成了巨大的经济损失。
目前霉菌毒素检测常用的方法如下几种：一、薄层层析法：TLC法是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来，经柱层析净化，再在薄层板上层析展开、分离，利用霉菌毒素的荧光性，根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。
TLC法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多，在展开时影响斑点的荧光强度。
二、色谱法：色谱法，包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱等，一直是最重要的霉菌毒素的化学分析方法。
饲料霉菌毒素的种类及其检测方法研究
业及 养殖业的健康发展 。本 文介绍 了近年来监测到的畜禽饲料 中主要霉 菌毒素的种类 ， 并就其检测方法进行 了综述 。 关键词 ： 霉菌毒素； 危 害； 检测方 法
ＤＯ１ ： １ ０． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． Ｉ ＳＳＮ． １ ６ ７１ — ６ ０ ２ ７ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ８ ． ０ １ ８
好， 其 方法适用性 、 分离效 率和灵敏度 方面是其他 方法无法
替代的 。气相色谱 法（ Ｇ Ｃ） 从２ ０世纪 ７ ０年代开始用于霉菌
和玉米赤霉烯酮 ， 阳性检 出率 超过 ５ ０ ％， 其 中呕吐毒素和伏 马毒 素甚 至超 过 ８ ０ ％～ ９ ０ ％；黄曲霉 毒素和赭曲霉毒素在猪
毒素检测 ， 气相色谱法近年来也被应用到高风险 的饲料霉变
质谱法是霉 菌毒 素检测 领域 最准确可靠的检测 方法 ， 如
液相色谱 一质谱联用法 ， 但此法检 测速度较慢 ， 适 用于定性
检 测 与实 验 室 研究 。 随着 科 技 的 发展 ， 后 来 又 出现 了一 些 基
于质谱技术 的快速检测方法 ， 如基质辅助激光解析电离 一质
１ ． ２ 几种霉 茵毒素对动物的危害
３ 小 结
大量研究 和生产实践证 明 ， 霉菌毒素可 以使畜禽等产生
多种难 以判断 的综 合病症 ， 并能通过 动物 肉、 蛋、 奶、 内脏进 入人类 的食 品链 中， 危害人类健康 。 中国尤其是南方 ， 由于 自
２ ． ３ 色谱 法
１ ． １ 饲料 中常见霉菌毒素的种类
在饲料原料 中残留的霉 菌毒素大约有 ３ ０多种 ，其 中最 为常见的有黄 曲霉毒素 、 玉米赤霉烯酮 、 呕吐毒 素 、 赭 曲霉毒 素、 伏马毒素 、 Ｔ 一 ２毒素等。 王金 勇等在 ２ ０ １ ２ 年、 ２ ０ １ ３ 年连 续对 中国饲料 和原料霉 菌毒 素进行监测 ， 共检测来 自全 国各地 的包括猪料 、 禽料 、 奶
食品中霉菌毒素的测定(修订)
食品中霉菌毒素的测定:目前的分析方法及其局限性摘要：霉菌毒素是由一系列真菌产生的自然污染物。
它们出现在食物和饲料当中对人类和动物的健康造成了威胁。
这种威胁是通过直接污染农产品或喂养的动物受污染的干草、玉米而“遗留”在动物的代谢产物-牛奶和鸡蛋中的真菌毒素引起的。
由于他们不同化学结构和不同的物理属性,霉菌毒素显示出广泛的生物效果。
个体霉菌毒素可以导致基因毒性、诱变、致癌、致畸和产生雌激素。
为了保护消费者的健康和减少经济损失，监督和控制食品和饲料中的霉菌毒素已经成为生产商、监管部门和世界范围内的研究人员一个主要的目标。
然而,化学结构的多样性使霉菌毒素无法用单一的技术进行分析。
因此,大量的分析方法已被开发和验证。
食物基质的多相性及快速的需求同准确测定多种霉菌毒素，对常规分析带来了巨大的挑战。
本文将讨论的最关键的问题是：（1）代表性样本的收集（2）基于色谱或免疫化学技术的新兴分析方法和经典分析方法的操作（3）官方方法的验证（4）当前方法的局限性及未来的发展前景关键词：霉菌毒素和真菌代谢产物、食品、快速验证的方法、规则、抽样、多样霉菌毒素的测定介绍：常规的霉菌毒素自古以来,人类使用真菌(霉菌,酵母)生产食品,包括奶酪、面包,意大利香肠、啤酒和葡萄酒。
神秘的疾病与食品消费作为结合体从而导致第一个为食品的立法和检查食品质量体系的成立。
最古老的食品立法是巴比伦人(公元前1700年)和希泰族(公元前1500年)颁布的。
两个具有历史意义的立法已经为我们现代食品法律处理了两个重要的目标：保护健康和预防欺诈。
然而,1961年之后真菌代谢产物不再被认为是潜在的健康危害。
关键事件是1963年英国在进口了被黄曲霉毒素污染的花生之后导致了100000只火鸡的死亡。
随后,有很多可疑事件都与使用霉菌毒素的生化战争试剂有关。
1974年和1981年之间,目击者报告从老挝,阿富汗和柬埔寨难民的暗示指出空袭期间使用了通过空气分散的单端孢霉烯族毒素类细菌。
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霉菌毒素检测方法综述
由于产生毒素的霉菌无处不在，以及我们对大多数有利于霉菌生长和霉菌毒素产生的条件控制不力，造成食品和饲料的霉菌毒素污染问题越来越成为现代农业生产中不可忽视的重大难题。
在各种农产品上生长着的各种各样的霉菌，这些霉菌都能产生霉菌毒素，霉菌毒素是有毒的化合物，有些甚至是致癌的。
霉菌毒素有很多种（CAST,2003），包括黄曲霉毒素，主要是黄曲霉毒素B1和M1（Aflatoxins，FB1、FM1）；赭（棕）曲霉毒素A（OchratoxinA，OA）；杂色（柄）曲霉毒素（Terigmatocystin）；展青霉素（Patulin,PTL）；玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN(F－2)）;串珠镰刀菌素（Moniliformin,MF），三硝基丙酸以及属于单端孢霉烯族化合物（Trichothecenes）的T －2毒素（T－2toxin,T－2）；脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（Deoxynivalenol,DON）；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（Diacetoxyscirpenol，DAS）等。
联合国粮农组织在近期的报道中指出，全世界至少99个国家，占世界人口的87％，针对粮食和饲料的霉菌毒素污染问题都有相关的规定。
在未来的几年里，与不断变化的全球气候有关的气象突发事件的增多将进一步向我们提出挑战。
霉菌毒素污染给食品企业、粮油加工企业、畜禽养殖场以及饲料的加工企业造成了巨大的经济损失。
目前霉菌毒素检测常用的方法如下几种：
一、薄层层析法：
TLC法是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来，经柱层析净化，再在薄层板上层析展开、分离，利用霉菌毒素的荧光性，根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。
TLC法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多，在展开时影响斑点的荧光强度。
二、色谱法：
色谱法，包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱等，一直是最重要的霉菌毒素的化学分析方法。
现在比较普遍的霉菌毒素的分析方法还是液相色谱法，包括液相色谱-质谱联用技术。
该法快速而准确，但需要昂贵的仪器设备，仅限于专业检测机构获得科研和调查分析、监测使用，未能在企业及基层广泛推广使用，而且其结果的滞后效应大大降低了对生产实际的指导效果。
三、免疫化学检测法：（胶体金免疫层析法，酶联免疫吸附法）
免疫学检测方法是基于抗体与抗原或半抗原之间的选择性反应而建立起来的一种生物化学分析法。
通常具有高的选择性和很低的检出限，广泛用于各种抗原、半抗或抗体的测定，一般可分为荧光免疫法、发光免疫法、免疫法及电化学免疫法等非放射免疫法和放射免疫法，其中在饲料霉菌毒素检测中应用较广的主要是酶联免疫吸附法（ELISA）和胶体金免疫层析法。
免疫学检测方法由于其快速、灵敏、准确、可定量、操作简便、无需贵重仪器设备，且对样品纯度要求不高等特性，特别适用于饲料厂、粮油/食品加工厂、养殖场等企业进行原料或成品的检测以及工商质监部门现场检测。
该类方法有以下特点：
1) 灵敏度高
2) 干扰小：抗体抗原的免疫反应特异性很强，结构类似物、荧光物质、有色物质对检测的干扰很小。
3) 操作简便快捷：由于特异性强，简化了样品的预处理和提取纯化过程，同时操作步骤也非常简便，测定时间也短。
4) 安全性高，污染少，成本低廉：不需要昂贵的测定仪器，所用试剂也相对较少，特别是因为灵敏
度高，毒素标准品的浓度可以很低，减少了对检测人员和环境的潜在危害和污染。
以上两表对比了各种方法的优缺点以及各种单位最实用的检测方法分析，希望能对关注霉菌毒素的企业和单位有所帮助，但是同行业也可以从经济成本和样品不同要求出发也有可以找到最适合自己企业适用的检测方法。
下表中针对食品和饲料行业中不同的原料推荐了相应的初筛方法：
黄曲霉毒素快速检测产品试用装领取处：。