液基细胞学

液基细胞学在妇科与非妇科肿瘤筛查中的应用

佛山市中医院病理科毛荣军主治医师

病理学诊断的概念及作用

⏹概念：应用病理学的研究技术对病变的组织或细胞性质、病因等作出分析判断的过程以及

预后评估和对治疗的指导。

⏹作用：定性、定源、定因、预后评估、指导治疗、医疗科研、鉴定医疗纠纷的最重要最直

接的证据。

病理学的研究方法

⏹组织病理学检查

⏹细胞学检查

⏹电子显微镜超微结构检查

⏹组织化学方法

⏹免疫组织化学及荧光标记技术

⏹分子病理技术

细胞学检查--诊断细胞病理学

⏹细胞学检查是临床诊断病理学一个重要组成部分，包括以下内容：

⏹妇科：以宫颈细胞学检查为代表。

⏹非妇科：呼吸道细胞学检查（痰液、支气管刷片、针吸物及气管肺泡灌洗液）、消化道刷

检物及冲洗液、胸腹水、尿液、脑脊液、分泌物、渗出物及囊肿液等。

宫颈细胞学检查方法

⏹宫颈传统巴氏涂片

1945年¡ª¡ªPapanicolaou提出宫颈细胞涂片检查-巴氏涂片（Papsmear test）。宫颈传统巴氏涂片：木制刮板刮取宫颈及其阴道上皮细胞，均匀涂抹于载玻片上， 95%酒精固定15分钟以上，HE染色，封片。

⏹液基薄层细胞学技术

1996年¡ª¡ª美国食品和药品管理局(FDA)批准使用薄层液基细胞学检测：优化涂片质量、细胞采集量多、背景干净、清晰透明,厚薄均匀,染色效果好。

宫颈传统巴氏涂片

⏹优点：价格便宜、操作简单、使用方便。

⏹缺点：高达50%~90%假阴性。

⏹漏诊误诊原因：取材器上的病变细胞大多数没有被转移到载玻片上，研究表明，常规涂片

有80%以上细胞随取材器被丢弃；涂片质量差,不均匀、过厚、过多的黏液、血液或炎细胞遮盖了不正常细胞。有40%的涂片因涂片质量影响正确诊断。

液基薄层细胞学技术

⏹主要方法：膜式液基薄层细胞学制片技术(TCT)及自然沉淀式液基薄层细胞制片术

(LCT/LBP) 。

⏹发展趋势：膜式法(TCT)逐渐被自然沉淀法(LCT/LBP) 取代。

⏹我国液基细胞学开展及应用现状：膜式(TCT)向离心沉淀式(LCT/LBP) 发展并被取代之；

由进口产品逐步向国产方向发展。

⏹基本技术方法：

TCT：标本收集--放入细胞保存液--转移至微孔膜--清洁玻片--染色--光镜观。

LCT/LBP ：标本收集--放入细胞保存液--高速离心沉淀---清洁玻片--染色--光镜观察。

⏹主要技术特征：清除杂质，多量病变细胞转移至玻片，细胞均匀平铺，背景干净，易于观

察。

传统巴氏涂片细胞学在宫颈癌前病变及恶性肿瘤筛查中的评估

宫颈癌筛查现状

⏹宫颈癌有明确的癌前病变并且持续很长时间。

⏹巴氏涂片成功应用50余年，有效降低了宫颈癌的死亡率。

⏹即使在宫颈癌筛查进行很好的地区，宫颈癌也未能被完全消灭。

巴氏涂片达不到筛查的原因

⏹患者原因：不进行年度的巴氏涂片检查和其他健康检查。

⏹隐瞒高危病史

20岁以前有性活动

多于俩个性伙伴

有ASC 或SIL史

有性传播疾病(包括HPV)

免疫缺陷(包括HIV)

吸烟

⏹取材前期处理不当

涂片前24小时性交或灌洗，去掉了有诊断意义的上皮细胞。

⏹临床医生原因

没能做到满意的巴氏涂片

没有提供相关的临床资料

没有随访不正常的涂片

没有对可疑病变取活检

未注意到可疑临床症状

短期内重复取材

不顾“标本不满意”的提示，采纳“阴性”诊断

⏹取材工具及制作涂片因素

取材器的形状影响取材（棉签，塑料刮板等很难取到颈管细胞）

取材器上的细胞不能充分转移到载玻片上

⏹影响诊断的因素

涂片中过多的血液，粘液及炎细胞。

涂片厚，上皮细胞重叠。

不正常细胞少、小、形态温和。

大量明显低度病变细胞掩盖了小的高度病变细胞。

有些高度病变早期ASC是唯一发现。

存在“诉讼”细胞或拥挤的细胞团使诊断困难

视力疲劳，注意力不集中。

“金标准”有错。

⏹细胞学制片因素

染色欠清晰

染液中漂浮物污染

贴错标签

⏹病变本身因素

不能脱落足以诊断的细胞

位置高难取到

黏液质地影响涂片

病变越重出血坏死越明显满意标本率越低，假阴性率越高

有些肿瘤巴氏涂片诊断较困难，如：疣状癌，微偏腺癌，腺癌，腺鳞癌，淋巴瘤和肉瘤有些肿瘤生长快可在两次常规筛查之间出现

宫颈细胞学检查的改进措施

⏹有性活动的女性每年都应做宫颈细胞学检查，有连续3次以上阴性、满意的涂片后可根据医

生指导适当延长检查间隔。

⏹所有不正常涂片都必须随访，观察到的可疑病变必须活检，祛除不满意因素后重复取材。

⏹取材前24小时应禁止灌洗和性交。

⏹取材工具采用宫颈刷。

⏹取材必须在直接观察下进行，必须有一定压力，不能擦洗、清洁宫颈，窥器除水外不能用

其他润滑剂。涂片要快、薄、充分，固定及时，标记明确，申请单要填写完全。

⏹染液要新鲜，要经常过滤，妇科和非妇科分开染。

LCT/LBP液基细胞学在宫颈病变

筛查中的应用

⏹宫颈癌的危害：宫颈癌的发病率位居女性恶性肿瘤第二位，仅次于乳腺癌。全世界最新统

计，每年有近60万新发病例，死亡人数在20万以上，发病率以每年2%-3%的速度递增。目前我国的宫颈癌发病率和死亡率呈上升趋势，并明显趋向年轻化，以36岁至50岁最为集中。

我国已知宫颈癌患者40余万人，死亡率达11.3%

⏹，已经远远高于发达国家4%的死亡概率，成为城市中死亡率增长最快的癌症。

⏹宫颈疾病的病变时间：宫颈疾病从早期发现到恶性癌变需6-10年的时间，在这段时间内，

现代医学手段完全可以把癌前病变检查出来。

⏹LCT/LBP筛查实用人群：

从未接受过宫颈液基细胞学筛查的患者

过早性生活（18岁以前性交）

性伴侣数目较多者

曾患与性行为有关的疾病，如梅毒、艾滋病等

HPV病毒感染

长期慢性宫颈炎

注意：在常规体检中，宫颈细胞学筛查重点是中青年人群，而不是老年人。

⏹技术优势

几乎保留了取材器上的所得到的全部样本

成比例的提取，细胞成分全、分布均匀

祛除样本中过多的血液和黏液，减少了对上皮细胞的覆盖

细胞单层平铺减少了重叠

大大降低了不满意标本的比率

湿固定标本结构清晰易于鉴别

每张涂片观察细胞量减少，减轻视力疲劳

有利于辅助细胞学诊断工作开展

宫颈LCT/LBP液基细胞学技术步骤

塑料宫颈刷采集宫颈及阴道脱落细胞，置细胞保存液中，震荡30秒，加4ml细胞分离提取液；全自动样本转移机转移8ml样本，离心2min，去上清，再次离心10min，倒出上清，震荡30秒；全自动制片染色机制片、染色，酒精脱水、二甲笨透明，封片。

宫颈LCT/LBP液基细胞学技术关键

标本的取材是重点之一

⏹主要分为采样、漂洗、紧固、记录、送检几个步骤。

取材：应尽可能避开月经期。取材24小时以前，不能作阴道上药及冲洗，不能过性生活，宫颈分泌物较多时，应用棉签轻轻擦去粘液（不可用力擦），再行取材取材应在直视