生物实验室常用试剂的配制

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生物实验室常用试剂的配制

生物实验室常用试剂的配制
3.乙酸 带有刺激味的无色液体,纯乙酸在 16.7℃以下凝固, 故名冰乙酸。乙酸固定液的常用浓度是0.3~0.5%。乙酸能凝固 细胞核内的蛋白质 (核蛋白),对染色质或染色体的固定,染色 较好。用乙酸溶液固定材料,可使细胞膨胀和防止收缩,组织 也不会硬化。它常跟乙醇、甲醛、铬酸等易引起硬变的收缩的 液体组成混合固定液,效果较好。
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液,待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制:取0.2g苏丹IV,放入 无水乙醇中,加热,使它充分溶解,成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制:0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸-生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸,使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银,溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸,即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里, 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时,颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin),固定材料常用5%甲醛溶 液,保存生物标本常用4一5%的,消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液,加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛

分子生物学实验室常用试剂配方

分子生物学实验室常用试剂配方

分子生物学实验室常用试剂配方:医药观察之我见2. 常用试剂配方(Prescriptions of Ordinary Reagents)(高媛). (217)(1) PBS (217)(2) 胰酶Trypin (217)(3) Tris-NH4Cl (217)(4) Running buffer (218)(5) Washing buffer (218)(6) 湿转液 (218)(7) LB培养基 (218)(8) LB培养板 (218)PBS:PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。

主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

配置方法:NaCl : 320g 优级纯Na2HPO4. 12H2O 61.44gKCl 8gKH2PO4 8g三蒸水4L烧杯溶解后用HCl调PH为7.2-7.4,细胞用需要高温灭菌,放于超净台冷却,贴上封口膜及标签。

胰酶:Trypsin 一种胰蛋白酶,通过在特定位置上降解蛋白,使细胞膜上和培养皿壁结合处蛋白降解,使两者分离。

细胞消化胰酶常用工作浓度为0.25%,PH为7.2-7.4,储存液放在-20冻存,使用液放在4度。

Tris-NH4Cl :红细胞裂解液,是一种从人,鼠及其他哺乳动物等体内烦人组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,应用低渗的原理,改变红细胞渗透压,使得红细胞胀大破裂。

配置方法:2L 体系:NH4Cl : 14.94g 溶于1800mL ddH2O 混匀HCl调节PH为7.2-7.4 过滤Tris : 5.15g 溶于200mL ddH2O3L体系NH4Cl : 22.41g 溶于2700mL ddH2O 混匀HCl调节PH为7.2-7.4 过滤Tris : 7.725g 溶于300mL ddH2ORunning buffer: 4L (5X)Tris: 60.6gGly: 288.3gSDS: 20gddH2O 3.78LWashing buffer: 4L (10X)Tris : 48.6gNaCl : 116.9gTween 20 : 40mLddH2O: 3.9L湿转液:4L (10X)Tris: 121.4gGly: 576.6gddH2O 3.57LLB液体培养基:名字来源于英语lysogeny broth 即溶菌肉汤,应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。

20几种常用试剂配置方法

20几种常用试剂配置方法

20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。

本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。

二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。

该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。

三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。

该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。

四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。

通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。

五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。

通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。

六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。

通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。

七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。

八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。

该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。

九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。

通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。

十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。

十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。

十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。

十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。

TAKARA实验室常规试剂配制方法

TAKARA实验室常规试剂配制方法

TAKARA实验室常规试剂配制方法TAKARA实验室是一家提供生命科学研究和临床诊断解决方案的公司。

其产品线包括分子生物学试剂、细胞培养耗材、蛋白质研究试剂和临床诊断试剂等。

在TAKARA实验室产品的使用过程中,常规试剂的配制方法是非常重要的一部分。

本文将介绍一些TAKARA实验室常规试剂的配制方法。

1. Tris缓冲液的配制方法Tris缓冲液可用于蛋白质电泳,DNA和RNA电泳等实验中。

配制方法如下:1)将Tris酸粉末称取至容器中。

2)加入蒸馏水溶解,并调节pH至所需值(一般为8.0)。

3)使用0.22μm的滤器进行过滤。

2.PBS缓冲液的配制方法PBS缓冲液是一种常用的生理盐水缓冲液,在细胞培养和免疫染色实验中经常使用。

配制方法如下:1)将NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4按指定比例称取至容器中。

2)加入蒸馏水溶解,并调节pH至所需值(一般为7.4)。

3)使用0.22μm的滤器进行过滤。

3.LB培养基的配制方法LB培养基是一种常用的大肠杆菌培养基,在分子生物学实验中经常使用。

配制方法如下:1)将Tryptone、Yeast Extract和NaCl按指定比例称取至容器中。

2)加入蒸馏水溶解,并使用自动调pH仪调节pH至所需值(一般为7.0)。

3)将容器密封,并在121℃高压灭菌器中高压灭菌15-20分钟。

4. RNase-Free水的制备方法RNase-Free水在RNA实验中非常重要,保证实验的可靠性和准确性。

制备方法如下:1)将蒸馏水倒入洁净的玻璃烧杯中。

2)放入微波炉中加热,每隔一段时间取出搅拌一次,直至水沸腾。

3)冷却后,使用0.22μm的滤器进行过滤。

4)将过滤后的水贮存在RNase-Free的容器中。

5.甲醛溶液的配制方法甲醛溶液可用于细胞固定和染色实验。

配制方法如下:1)将甲醛溶液称取至容器中。

2)加入蒸馏水溶解,使浓度达到所需值(一般为4%)。

3)使用0.22μm的滤器进行过滤。

生物 化学 实验室 常用试剂 大全

生物 化学 实验室 常用试剂 大全

试剂配制方法一、实验室常用储备液(1)0.5mol/L EDTA(乙二胺四乙酸)在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O,在磁力搅拌器上剧烈搅拌。

用10mol/L NaOH调至PH8.0(约用10mol/L NaOH 50ml),补加超纯水至1L。

分装后高压蒸汽灭菌。

室温贮存。

注意:EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0,才会溶解。

(2)1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中,用浓盐酸将PH值调至设定值。

PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后,方可最后调定PH值。

加超纯水定容至1L,分装后高压蒸汽灭菌。

如果配制的溶液呈现黄色,应予丢弃。

并使用质量更好的Tris。

Tris溶液的PH值因温度而异,温度每升高1℃,PH值大约降低0.03个单位。

(3)10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,用蒸馏水定容至1L,过滤除菌,室温贮存。

乙酸铵在热水中分解,含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。

(4)甘油(10%,V/V)用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。

用0.22μm过滤器过滤除菌。

分装成1ml每份,-20℃贮存。

(5) 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶,磁力搅拌数小时,以确保其完全溶解。

然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,于4℃避光保存。

注意:溴化乙啶是一种诱变剂,必须小心操作。

(6) 70%乙醇(C2H5OH)100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。

(7) 50×葡萄糖Glucose(150ml储备液)将54g D-葡萄糖溶于超纯水,磁力搅拌至完全溶解,并将体积调至150ml,过滤除菌,室温贮存。

(8) 10mol/L氢氧化钠(NaOH)将400g NaOH颗粒,加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中,磁力搅拌至完全溶解。

实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法实验室中,常用试剂的配制方法非常重要,准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。

以下是几种常用实验室试剂的配制方法:1.缓冲溶液的配制:缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度,常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。

以Tris缓冲液为例,其配制方法如下:1) 称取所需量的Tris氯化物(Tris-HCl)。

2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中,搅拌使其彻底溶解。

可以加热水浴促进其溶解。

3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。

可以使用酸(如盐酸)或碱(如氢氧化钠)来调节pH值,同时使用pH计监测溶液的pH值。

4)将溶液转移到容量瓶中,用去离子水稀释至最终体积。

2.浓度溶液的配制:浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。

以下以NaCl浓度溶液的配制为例:1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积,计算所需的NaCl质量。

可以使用以下公式进行计算:质量(g)=浓度(mol/L)×体积(L)×摩尔质量(g/mol)。

2)称取所需质量的NaCl。

3)加入去离子水溶解NaCl,搅拌使其溶解。

4)如果需要,通过使用pH计校正溶液的pH值。

3.酶溶液的配制:酶溶液常用于生物学实验中。

以下以酶的配制为例:1)根据酶的活力或浓度,计算所需酶的质量或体积。

2)称取所需量的酶,可以在低温环境中操作以保持酶的活性。

3)加入合适的缓冲液溶解酶,并按需添加其他辅助试剂,如辅酶等。

4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。

5)根据需要,将溶液分装至小容器中,如冰盒中保存。

4.染色剂的配制:染色剂常用于细胞培养、组织切片,或者蛋白质凝胶电泳等实验中。

以下以伯克氏液的配制为例:1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝(Methylene Blue)。

2)加入足够的去离子水,用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。

3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。

4)将溶液分装至小容器中,并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。

生物学实验室常用试剂的配制方法

生物学实验室常用试剂的配制方法

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA 的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

微生物实验室常见20种培养基配方大全

微生物实验室常见20种培养基配方大全

微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。

2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。

另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。

将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。

蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。

迟缓反应需观察14~30d。

二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。

三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。

将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。

在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。

甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。

滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。

实验室常用溶液配制管理规程

实验室常用溶液配制管理规程

实验室常用溶液配制管理规程一、普通试剂1、无二氧化碳的水将水注入烧瓶中,煮沸IOmin,立即用装有钠石灰管的胶塞塞紧,放置冷却。

2、中性乙醍一乙醇混合试剂将乙醵一乙醇按2:1的比例混合均匀,加酚猷指示剂,用碱液中和至恰好变为淡红色为止。

3、三氯化碳一冰乙酸混合试剂将三氯化碳(氯仿)与冰乙酸按2:3的比例混合均匀,置棕色试剂瓶中备用。

4、饱和碘化钾溶液称取14g碘化钾,溶于IOnIL水中,保持溶液中有晶体,置于棕色瓶中,须现用现配。

5、0.lmol∕L碘液称取13g碘及35g碘化钾,溶于少量水中,完全溶解后稀释,定容至1000mL,摇匀。

6、0.05mol∕L碘液称取6.5g碘及17.5g碘化钾,溶于少量水中,完全溶解后稀释,定容至1000mL,摇匀。

7、pH^5.8磷酸二氢钾一磷酸氢二钾缓冲溶液称取13.6g磷酸二氢钾,溶于蒸偏水中,定容至IOOOmL;称取16.42g磷酸氢二钾,溶于蒸储水中,定容至1000mL;吸取a液50mL、b液4∙5mL,混合后用蒸储水定容至IOOmL o8、1.5%乙酸镁乙醇溶液称取1.5g乙酸镁,溶于IoomL95%的乙醇中。

9、辂酸洗液称取25g重辂酸钾溶于50mL热水中,冷却后,边搅拌边缓慢加入浓硫酸,至总体积为50OnIL,冷却,置棕色瓶中备用。

10、氨一氯化核缓冲溶液10.lpH≈10氨一氯化锭缓冲溶液甲称取54.Og氯化铁,溶于水,加入350mL氨水,稀释至IOOOmLo10.2pH≈10氨一氯化锭缓冲溶液乙称取26.7g氯化铁,溶于水,加入36mL氨水,稀释至IOOOmL o11、氨水溶液11.12.5%氨水溶液量取103mL氨水,稀释至IOOOmLo11.210%氨水溶液量取400mL氨水,稀释至IOOOmLo12、盐酸溶液12.110%盐酸溶液量取24OmL浓盐酸,稀释至IOOonIL。

13.215%盐酸溶液量取370mL浓盐酸,稀释至1000mL。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。

配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

生化试剂配制实验报告(3篇)

生化试剂配制实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。

2. 熟悉实验操作规范,提高实验技能。

3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。

二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用,它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。

本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂,加深对实验原理和操作步骤的理解。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。

2. 试剂:氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。

四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚,置于烧杯中。

实验室常用试剂配制

实验室常用试剂配制

实验室常用溶液及试剂配制实验室常用溶液、试剂的配制表一普通酸碱溶液的配制表二常用酸碱指示剂表三混合酸碱指示剂表四容量分析基准物质的干燥表五缓冲溶液的配制1、氯化钾—盐酸缓冲溶液2、邻苯二甲酸氢钾—氢氧化钾缓冲溶液3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、乙酸—乙酸钠缓冲溶液5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂—氢氧化钠缓冲溶液7、氨水—氯化铵缓冲溶液8、常用缓冲溶液的配制实验室常用试验方法2九、柠檬酸(C6H8O7·H2O)称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三角瓶内,加入水50ml溶解,加酚酞指示剂3滴,用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点,同时做空白试验。

计算:X%(一水)= (V1-V0)×C×0.06404 m×(1—0。

08566)×100X%(无水)= (V1—V0)×C×0.06404 m×100V1--——-消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;V0—---—空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;C—----—氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;m———样品质量。

十、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等)称取2g(精确到0。

0002g)样品,用10ml盐酸(1+1)溶解,转移至100ml容量瓶中定溶,用移液管吸取10ml于250ml 锥形瓶中,加50ml水,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三乙酸胺(1+1),1ml乙二胺(1+1),1滴孔雀绿指示液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L)至无色,再过量10ml,加0.1g盐酸羟胺(每加一种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在黑色背景下用0。

05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。

Ca%= C×V×0.4008 m ×100C—-——-—EDTA标准溶液的浓度,mol/L;V-—-—-消耗EDTA标准溶液的体积,ml;m—---样品质量.(二)氟(Fˉ)含量的测定:1、标准曲线的绘制;2、试样含量的测定:称取0.5g(精确到0.0002g)置于50ml纳氏比色管中,加1mol/L盐酸10ml,密闭提取1h(不时摇动),避免粘于管壁,提取后加总离子强度缓冲液25ml,加水至刻度,以滤纸过滤。

实验室常用试剂的配制

实验室常用试剂的配制

2.5%X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮 存于-20℃ 17. DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水 加100ul DEPC 于100ml 水中,使DEPC的体积分数为0.1%。在37℃温浴至少12h,然后在15 psi 条件下高压灭菌20min,以 使残余的DEPC失活。DEPC 会与胺起反应,不可用DEPC处理Tris缓冲液。 18. TE(用于悬浮和贮存DNA) 成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量 10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA 水1ml 1mol/L Tris-HCl(pH7.4-8.0,25℃) 200ul 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 98.8ml 19. 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液 成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量 445 mmol/L Tris碱 445 mmol/L 硼酸盐 10 mmol/L EDTA 水54g 27.5g 硼酸 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 补足1L
16. 5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠 颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅 拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。 10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定 容至1L。 2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。 100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前 配制)

实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

实验室常用试剂配制

实验室常用试剂配制

细胞培养PBS配方PBS即磷酸盐缓冲生理盐水,都是含有H2PO4-、HPO42- 缓冲体系和NaCl,用于调节渗透压,达到与人体相当的水平,分为含钾离子和不含钾离子两种。

1、不含钾离子的PBS配方(由NaCl,Na2HPO4和NaH2PO4三种成分组成,用于其它实验缓冲和稀释用)母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。

配好后加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

* 其他各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19 817.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7 .2、含钾离子的PBS配方(由NaCl,KCl,Na2HPO4和KH2PO4四种成分组成,一般用于组织培养)0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法:(免疫组化常用)称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可,高压灭菌。

超级实用的实验室常用试剂缓冲液的配制方法

超级实用的实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。

2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓HCl调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1 L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6,8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中,加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。

2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。

3.加去离子水将溶液定容至100 ml。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

实验室常用溶液及试剂配制

实验室常用溶液及试剂配制

实验室常用溶液及试剂配制实验室常用溶液、试剂的配制表一普通酸碱溶液的配制名称(分子式)比重(d)含量(w/w%)近似摩尔浓度(mol/L)欲配溶液的摩尔浓度(mol/L)6 3 2 1配制1L溶液所用的ml数(或g)盐酸(HcL) 1.18~1.19 36~38 12 500 250 167 83硝酸(HNO3) 1.39~1.40 65~68 15 381 191 128 64硫酸(H2SO4) 1.83~1.84 95~98 18 84 42 28 14冰醋酸(Hac) 1.05 99.9 17 253 177 118 59磷酸(H3PO4) 1.69 85 15 39 19 12 6氨水(NH3•H2O) 0.90~0.91 28 15 400 200 134 77氢氧化钠(NaOH)(240)(120)(80)(40)氢氧化钾(KOH)(339)(170)(113)(56.5)表二常用酸碱指示剂指示剂 PKHIn 变色范围pH 酸色碱色配制方法百里酚蓝(麝香草酚蓝) 1.65 12.~2.8 红黄 0.1%的20%乙醇溶液甲基橙 3.4 3.1~4.4 红橙黄 0.05%水溶液溴甲酚绿 4.9 3.8~5.4 黄蓝 0.1%的20%乙醇溶液或0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml甲基红 5.0 4.4~6.2 红黄 0.1%的60%乙醇溶液溴百里酚蓝(麝香草酚蓝) 7.3 6.2~7.3 黄蓝 0.1%的20%乙醇溶液中性红 7.4 6.8~8.0 红黄橙 0.1%的60%乙醇溶液百里酚蓝(第二变色范围) 9.2 8.0~9.6 黄蓝 0.1%的20%乙醇溶液酚酞 9.4 8.0~10.0 无色红 0.5%的90%乙醇溶液百里酚酞 10.0 9.4~10.6 无色蓝 0.1%的90%乙醇溶液表三混合酸碱指示剂指示剂组成(体积比)变色点pH 酸色碱色备注一份0.1%甲基橙水溶液一份0.25%靛蓝二磺酸钠水溶液 4.1 紫绿灯光下可滴定一份0.02%甲基橙水溶液一份0.1溴甲酚绿钠盐水溶液 4.3 橙蓝绿 PH3.5黄色PH4.05绿黄PH4.3浅绿三份0.1%溴甲酚绿20%乙醇溶液一份0.2%甲基红60%乙醇溶液 5.1 酒红绿颜色变化极鲜明一份0.2%甲基红乙醇溶液一份0.1%次甲基蓝乙醇溶液 5.4 红紫绿 PH5.2红紫PH5.4暗蓝PH5.6绿色一份0.1%溴甲酚绿钠盐水溶液一份0.1%绿酚红钠盐水溶液 6.1 黄绿蓝紫 PH5.6蓝绿PH5.8蓝色PH6.0浅紫PH6.2蓝紫一份0.1%溴甲酚紫钠盐水溶液一份0.1溴百里酚蓝钠盐水溶液 6.7 黄紫蓝 PH6.2黄紫PH6.6紫PH6.8蓝紫一份0.1中性红乙醇溶液一份0.1次甲基蓝乙醇溶液 7.0 蓝紫绿 PH7.0为蓝绿必须保存在棕色瓶中一份0.1甲酚红钠盐水溶液三份0.1%百里酚蓝钠盐水溶液 8.3 黄紫 PH8.2玫瑰色PH8.4紫色一份0.1%百里酚蓝50%乙醇溶液三份0.1酚酞50%乙醇溶液 9.0 黄紫 PH9.0绿色表四容量分析基准物质的干燥基准物质干燥温度和时间基准物质干燥温度和时间碳酸钠(NaCO3) 500~650℃,40-50min 氯化物(NaCl) 500-650℃,干燥40-50min草酸钠(H2C2O4) 150-200℃,1-1.5h 硝酸银(AgNO3)室温,硫酸干燥器中至恒温草酸(H2C2•2H2O)室温,空气干燥2-4h 碳酸钙(CaCO3)120℃,干燥至恒重硼砂(Na2B2O•10H2O)室温,在NaCl和蔗糖饱和液的干燥器中,4h 氧化锌(ZnO)800℃灼烧至恒重邻苯二甲酸氢钾(KHC6H4O4) 100-120℃,干燥至恒重锌(Zn)室温,干燥器24h以上重铬酸钾(K2Cr2O7) 100-110℃,干燥3-4h 氧化镁(MgO)800℃灼烧至恒重表五缓冲溶液的配制1、氯化钾-盐酸缓冲溶液0.2mol/LKCl(ml) 50 50 50 50 50 50 500.2mol/LHCl(ml) 97.0 64.3 41.5 26.3 16.6 10.6 6.7 水(ml) 53.0 85.5 108.5 123.7 133.4 139.4 143.3PH(20℃) 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.22、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液0.2mol/LKHC6H4O4(ml) 50 50 50 50 500.2mol/LHCl(ml) 46.70 32.95 20.32 9.90 2.63水(ml) 103.30 117.05 129.68 140.10 147.37PH(20℃) 2.2 2.6 3.0 3.4 3.83、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液0.2mol/LKHC6H4O4(ml) 50 50 50 50 500.2mol/LHCl(ml) 0.40 7.50 17.70 29.95 39.85水(ml) 149.60 142.50 132.20 120.05 110.15PH(20℃) 4.0 4.4 4.8 5.2 5.64、乙酸-乙酸钠缓冲溶液0.2mol/LHAc(ml) 185 164 126 80 42 190.2mol/LNaAc(ml) 15 36 74 120 158 181PH(20℃) 3.6 4.0 4.4 4.8 5.2 5.65、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液0.2mol/LKH2PO4(ml) 50 50 50 50 50 500.2mol/LNaOH(ml) 3.72 8.60 17.80 29.63 39.50 45.20 水(ml) 146.26 141.20 132.20 120.37 110.50 104.80 PH(20℃) 5.8 6.2 6.6 7.0 7.4 7.86、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液0.2mol/L硼砂(ml) 90 80 70 60 50 400.2mol/LNaOH(ml) 10 20 30 40 50 60PH(20℃) 9.35 9.48 9.66 9.94 11.04 12.327、氨水-氯化铵缓冲溶液0.2mol/LNH3•H2O(ml) 1 1 1 2 8 320.2mol/LNH4Cl(ml) 32 8 2 1 1 1PH(20℃) 8.0 8.58 9.1 9.8 10.4 11.08、常用缓冲溶液的配制PH 配制方法3.6 NaAc•3H2O 8g,溶于适量水中,加6mol/LHAc 134ml,稀释至500ml4.0 NaAc•3H2O 20g溶于适量水中,加6mol/LHAc 134ml,稀释至500ml4.5 NaAc•3H2O 32g溶于适量水中,加6mol/LHAc 68ml,稀释至500ml5.0 NaAc•3H2O 50g溶于适量水中,加6mol/LHAc 34ml,稀释至500ml8.0 NH4Cl 50g 溶于适量水中,加15mol/LNH3•H2O 3.5ml,稀释至500ml8.5 NH4Cl 40g 溶于适量水中,加15mol/LNH3•H2O 8.8ml,稀释至500ml9.0 NH4Cl 35g 溶于适量水中,加15mol/LNH3•H2O 24ml,稀释至500ml9.5 NH4Cl 30g 溶于适量水中,加15mol/LNH3•H2O 65ml,稀释至500ml10 NH4Cl 27g 溶于适量水中,加15mol/LNH3•H2O 197ml,稀释至500ml实验室常用试验方法2九、柠檬酸(C6H8O7•H2O)称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三角瓶内,加入水50ml溶解,加酚酞指示剂3滴,用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点,同时做空白试验。

实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法一、50×TAE:称242g Tris溶于800mL 双蒸水中,加入57.1mL 冰醋酸和18.6g(或100mL 0.5mol/L,pH=8.0)EDTA,再加水定容至1L,室温保存备用。

二、1×TAE:将50×TAE加双蒸水稀释至1×使用。

三、LB液体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)和10g NaCl,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,冷却至室温后4℃保存备用。

四、100mg/mL氨苄青霉素(Amp):称取100mg粉末状氨苄青霉素(Amp)置于1.5mL 离心管中,加入800μL 无菌水使其完全溶解,定容至1mL,-20℃保存备用。

五、LA液体培养基:按照x mL培养基加入x μL的比例将100mg/mL的氨苄青霉素(Amp)加入LB液体培养基中,4℃保存备用。

六、LB固体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)、10g NaCl和15g琼脂粉,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,稍冷却后按照x mL培养基加入x μL的比例加入100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),充分混匀后倒入培养皿中制成琼脂平板,4℃保存备用。

(1L培养基大约可以倒40个平板)七、200mg/mL IPTG:称取2g 粉末状IPTG溶于8mL 双蒸水中,再定容至10mL,配成200mg/mL 溶液,(用0.22μm滤膜过滤除菌,)分装为每份1mL,-20℃保存备用。

八、20mg/mL X-gal:将X-gal溶于二甲基甲酰胺,配成20mg/mL,分装后于-20℃避光保存。

九、DEPC水:将水加入干净玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(v/v),放置过夜,高压湿热灭菌,4℃保存备用。

PB缓冲液及DEAE实验室常用试剂的配制

PB缓冲液及DEAE实验室常用试剂的配制

实验室常用试剂的配制1.无Ca2+、Mg2+Hanks液NaCl 4.5gKCl 0.2gNaHCO3 0.175gNa2HPO4·12H2O 0.076gKH2PO4 0.03g葡萄糖 0.5g0.4%酚红 2.5ml将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO3 调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。

2.甲基红试剂(1)成份甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml95%乙醇 300ml(2)用途:测定甲基红反应。

3.Hanks液(原液)原液甲: NaCl 160gKCl 8gMgSO4·7H2O 2gMgCl2·6H2O 2g上述试剂加入800ml双蒸水。

溶解。

CaCl2 2.8g溶于100ml双蒸水上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。

原液乙: Na2NPO4·12H2O 3.04gKH2PO4 1.2g葡萄糖 20g加入800ml双蒸水,溶解。

0.4%酚红溶液100ml上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。

使用时甲,乙原液按下列比例配成 Hanks 液使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO3调整PH值。

4.0.4%酚红溶液称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒几乎完全解,加入0.lmol/LNaOHl0ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。

5.pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液)Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03gNH4Cl(氯化氨) 3.735g加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。

6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g加蒸馏水 200ml 加热溶解巴比妥纳 10.3g叠氮纳 0.2g加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。

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五、干燥剂 干燥剂对游离水往往具有化学结合的作用,物理吸附作用或 两种作用兼有。选用干燥剂应注意其本身和被干燥的物质有无 化学作用,以免引起被干燥物质的破坏或吸收。常用干燥有: 1、氧化钙 (cao) 白色固体,碱性氧化物,可干燥氧、氨、 氨、胺等气体,不可用来干燥酸性气体,如二氧化碳、氯化氢、 硫化氢。 2、碱石灰 白色固体,呈碱性。它由氧化钙粉末加入氢氧化 钠溶液,经充分混和后置铁皿中于200~250℃下干燥而成。可 以干燥氨、胺等气体。常用于避免水或二氧化碳进入反应系统 的装置中。 3、硅胶 半透明,内表面很大的多孔性固体,对水有强烈的 吸附作用。可干燥氧、氮、氨、胺等气体。常用于干燥器中。 含有钴盐的硅胶,叫变色硅胶,干燥时呈蓝色,吸水后呈粉红 色。硅胶吸附水后可以在120℃烘干再用。 其他的干燥剂还有五氧化二磷、氯化钙、硫酸钙、氧化铝、 氧化钡、硫酸镁、硫酸钠、碳酸钾和高氯酸镁等。
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液,待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。 4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制:取0.2g苏丹IV,放入 无水乙醇中,加热,使它充分溶解,成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制:0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。 5.鉴定DNA的二苯胺试剂 A液:1.5g二苯胺溶于1OOmL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸用 棕色瓶保存 B液:体积分数为0.2%的乙醛溶液。 实验前,将0.1mL的B液加入到10mL的A液中,现配现用。 6.鉴定二氧化碳的试剂 (1)石灰水 取饱和石灰水澄清液,密闭瓶内备用。 (2)氢氧化钡 (Ba(OH)2) 在蒸馏水中加氧化钡。氢氧化钡遇到 二氧化碳,也会生成碳酸钡白色沉淀,使溶液浑浊。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂 1.酚酞试液 取0.1酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里, 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。 2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时,颜色为无色至 蓝色。 3.溴甲酚紫指示剂 将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧 化钠溶液中,加蒸馏水稀释至250mL制得。当pH值由6.2~6.8 时,颜色由淡黄色变为淡紫色,变色点在pH6.7。 二、定性鉴定某些物质的试剂 1.鉴定葡萄糖的试剂 (1)班氏(Benedict)试剂 a.在600mL蒸馏水中溶解173g柠檬酸钠和100g无水碳酸钠, 冷却后稀释到850mL。
化能力,要现配现用。 4.甲醛溶液 它常用来杀灭细菌、病毒。通常以2~5%溶液消 毒器具。本品又可作实验室熏蒸消毒。 5.漂白粉 本品含有效氯为25~30%,有强杀菌力,能消毒、 防腐、防臭和溶解坏死组织,但作用时间短。 十二、麻醉剂 它可分挥发性 (如乙醚)和非挥发性 (如氨基甲酸 乙酷)两类。前者作用时间短麻醉深度容易掌握,动物麻醉后也 容易苏醒;后者作用的时间比较长,用法简单,但麻醉后苏醒 较慢,不大容易掌握麻醉的深浅程度。在中学生物实验申,使 用较多的是乙醚和氨基甲酸乙酷两种。 1.乙醚 无色液体,味灼烈,有强挥发性和易燃性。乙醚能使 中枢神经系统发生暂时性机能麻痹。乙醚吸入法是最常用的麻 醉方法。 2.氨基甲酸乙脂 它是无色的柱状结晶或白色颗粒粉末,其水 溶液是比较温和的麻醉药,安全度大,多数实验动物都可使用, 更适用于小动物。
类很多,常用的有二甲苯、甲苯、苯、氯仿和香柏油。如二甲 苯是应用最广的廉价透明剂。易溶于乙醇又能溶解石蜡,能与 封减剂树胶混和,但不能和水混合,透明力强,作用较快。用 二甲苯透明时,先经纯乙醇和二甲苯等量混合浸 1~2h,以置换 材料中的乙醇,冉置于纯二甲苯中透明,全部时间不宜超过3h。 如是染色后的制片,在二甲苯中经过5~10min即可透明。 十、封藏剂 材料经脱水,透明或染色后,须经封藏才能长期 保存。 1.加拿大树胶 半透明的固体树脂,溶于二甲苯或苯里,用以 封片透明度很好,干后坚硬牢固,可长期保存。 2.甘油 临时封片常用的封藏剂,材料先用 10%的甘油浸润数 日,待水分蒸发,浓缩成纯甘油时,再加盖玻片。 3.松香 取纯松香将其磨碎,放入烧杯内,置于80~100℃处 加热1~2h后,待松香熔解时其中挥发性杂质和气泡外逸,加 入约为松香重量一半的二甲苯,搅拌均匀即成松香封藏剂,本 品原料易得,效果与加拿大树胶相同。缺点是材料不纯或调制 不好时,易发生结晶和褪色。
六、生理盐水 1.各类动物实验常用的生理盐水 两栖类生理盐水是0.65%的 氯化钠溶液;鸟类是0.75%的;哺乳类和人是0.9%。 2.任氏(Ringer's)生理盐水 先把6.5g氯化钠、0.14g氯化钾、 0.2g碳酸氢钠和0.01g磷酸二氢钠分别溶解在少量蒸馏水中,混 和后用蒸馏水稀释到980mL。取0.12g氯化钙溶解在20mL的蒸 馏水中,把氯化钙溶液逐滴加入到上述溶液中,边滴边搅拌, 以免产生不溶性的磷酸钙沉淀。常用于变温动物,如两栖类。 3.乐氏(Locke's)生理盐水 先把9g氯化钠、0.42g氯化钾、 0.1~0.3g碳酸氢钠分别用少量蒸馏水溶解,混和后加蒸馏水到 980mL。再取0.24g氯化钙溶解在20mL蒸馏水中,逐滴加入上 述溶液中,常用于恒温动物,如哺乳类。 七、固定液和保存液 固定液能把有生命的材料迅速杀死,并 尽可能保持它原有的形态和结构,具有防腐和保存和作用。 1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin),固定材料常用5%甲醛溶 液,保存生物标本常用4一5%的,消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液,加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
b.在100mL热蒸馏水中溶解17.4g无水硫酸铜。冷却后稀释到 150mL。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边 加边搅拌,如产生沉淀。要过滤,班氏试剂配制后能长期使用。 如存放较久而产生沉淀时,可取上层清液使用,不必重配。 (2)裴林氏(Fehling's Solution)试剂 a.取35g硫酸铜溶解在400mL蒸馏水里,加蒸馏水到500mL。 b.取85g氢氧化钾 (或70g氢氧化钠)和175g酒石酸钾钠,溶解 在400mL蒸馏水里,加水馏水到500mL。 上述两种溶液耍分别保存,使用时再等量地混和并搅拌。如 溶液里有葡萄糖,加等量裴林试剂,煮沸,会产生红色的氧化 亚铜沉淀。 2.鉴定淀粉用的碘液 取2g碘化钾,溶解在10mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后 用蒸馏水稀释到300mL。即成碘液。溶液在光亮处容易变成氢 碘酸,须保存在棕色玻瓶里。因为I2,不易溶于水,当加入KI 后可大大增与纯乙醇3份混和而成,适 用于动、植物组织和细胞核内DNA的测定。动物的组织固定需 1.5-3小时后,即移入纯乙醇中15分钟,再透明。根尖固定需 15分钟,花药固定需1小时。 八、脱水剂 材料中含有水分,就会降低透明度。脱水剂有利 于材料透明,也有利于材料的永久保存。脱水剂的种类很多、 如乙醇、丙酮、甘油、正丁醇和叔丁醇等。中学生物实验最常 用的乙醇,而甘油则常用于菌类和藻类等。在用乙醇脱水时, 为了避免材料萎缩、僵硬,应从低到高使用不同的浓度,逐渐 脱水,有时还用无水乙醇脱水。一般组织 (除神经组织,柔软组 织外)可从70%乙醇开始经80%、95%、100%乙醇,使它逐步 脱水。对一些柔软组织如胚胎组织、低等无脊椎动物组织,要 从50%或30%或20%乙醇开始,否则组织收缩较严重。 九、透明剂 材料经脱水后,须经透明剂透明,方能浸蜡包埋 或在树胶中封藏。其目的在于使组织中的乙醇或丙酮被透明剂 所替代,使石蜡能很顺利进进入组织和增强组织的折光系数, 便于显微镜的观察,并能和封藏剂混和进行封藏。透明剂的种
(2)硼酸-生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸,使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。 3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银,溶 解在100mL水中即成。 4.用于分离植物根尖细胞的试剂 (1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸,即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。 (2)4%盐酸溶液。 5.用于细胞质壁分离的试剂 (1)30%蔗糖液;(2)5%氯化钠溶 液;(3)5%硝酸钾溶液;(4)24%尿素溶液;(5)1mol/L氯化钙溶 液。 四、染色剂 有些动植物组织和大多数细胞及细胞器是无色透 明的,必须经染色剂染色,才能在显微镜下观察清楚,常用染 色剂的制法和适用范围见P122表。
溶液。甲醛溶液无色透明,有刺激性气味,味灼烈,是良好的 动、植物材料固定液,有强烈的杀菌能力,穿透力大(仅次于乙 酸),防腐性强,固定速度快,效果好。缺点是固定后可使材料 少许膨胀,有浓度过高,能使材料发硬发脆,因此对于精细的 解剖标本,最好用甲醛与甘油、乙醇、石炭酸等混和使用。 2.乙醇(C2H5OH) 有强烈的杀菌作用,渗透力较大,但固定 效果不及甲醛溶液。可使蛋白质凝固,并有较强的脱水作用, 因此,单纯用乙醇固定的材料会产生硬化和收缩,而使体积变 小。对含水量多的材料,固定应从低浓度开始,逐步转入高浓 度。从经济和效果来考虑,乙醇宜与甲醛等固定液混和使用。 常用的乙醇固定液或保存液浓度都是70%左右。 3.乙酸 带有刺激味的无色液体,纯乙酸在 16.7℃以下凝固, 故名冰乙酸。乙酸固定液的常用浓度是0.3~0.5%。乙酸能凝固 细胞核内的蛋白质 (核蛋白),对染色质或染色体的固定,染色 较好。用乙酸溶液固定材料,可使细胞膨胀和防止收缩,组织 也不会硬化。它常跟乙醇、甲醛、铬酸等易引起硬变的收缩的 液体组成混合固定液,效果较好。
十一、消毒剂 优良的消毒剂应具有杀菌力强、性质稳定,易 于溶解和穿透力大的特性,此外还要求对人和动物组织的毒性 低,对器具衣服没有腐蚀性,且价格低廉。 1.乙醇 它可使蛋白质脱水和变性,故有消毒和防腐的作用。 70%乙醇的杀菌力最强,可在3~5mim内杀死细菌。且对人毒 性小,适用于皮肤及器械等消毒。95~100%乙醇能引起菌体表 层蛋白质凝固,形成保护层,使乙醇分子不易继续透入,杀菌 能力反而减弱。 2.碘酒 它是碘和碘化钾的乙醇溶液,有稀碘酒和浓碘酒两种。 市售的是2%的稀碘酒,在10min内能杀死细菌及芽抱,可用于 消毒皮肤,但对皮肤的刺激性很大,故用后应以70%乙醇拭净。 浓碘酒多用于手术后创面消毒。自配碘酒时,可取5g碘化钾和 7g碘溶解在5mL蒸馏水中,再加无水乙醇到1OOmL。 3.高锰酸钾 强氧化剂,遇到有机物即放出新生态氧而使有机 物氧化,其杀菌作用强于过氧化氢。高浓度时有刺激及腐蚀作 用;0.1%水溶液可作创口或粘膜洗涤剂,使皮肤消毒;2~5%水 溶液能在24h内杀死细菌芽孢。本液在空气中易分解,失去氧
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