KB纸片法 ppt课件
《折纸》PPT课件
互动性和参与感。
观众自由创作时间
提供纸张和工具
为观众提供足够的纸张和必要的工具，如剪刀、胶水等，方便他 们进行自由创作。
鼓励创新和尝试
鼓励观众在掌握基本技巧的基础上，尝试创作自己的折纸作品， 可以是模仿经典作品，也可以是全新的设计。
现场指导与答疑
在自由创作时间内，提供现场指导，解答观众在折纸过程中遇到 的问题，帮助他们顺利完成作品。
将创意折纸作品作为家居装饰品，如 墙贴、挂饰等，为室内空间增添趣味 性和艺术气息。
礼品赠送
将个性化折纸作品作为礼品赠送给亲 友或客户，表达心意和祝福，展现独 特的创意和匠心。
教育与亲子活动
将创意折纸引入教育领域和亲子活动 中，通过动手实践培养孩子们的创造 力、想象力和动手能力。
商业展示与宣传
将创意折纸作品应用于商业展示和宣 传活动中，吸引眼球、传递信息、提 升品牌形象。
优秀作品展示与交流
作品收集与筛选
在自由创作时间结束后，收集观众的作品，并从 中筛选出具有创意和技巧的优秀作品。
优秀作品展示
将筛选出的优秀作品进行展示，让观众欣赏彼此 的创作成果，激发对折纸艺术的兴趣和热爱。
交流与分享
邀请优秀作品的作者上台分享他们的创作灵感和 技巧，促进观众之间的交流和学习。
谢谢聆听
06 折纸活动与互动环节
现场折纸教学示范
折纸基本技巧讲解
01
介绍折纸的基本技巧，如对折、山折、谷折等，以及纸张的选
择和处理方法。
经典作品现场示范
02
展示并现场示范几个经典的折纸作品，如千纸鹤、纸飞机等，
让观众对折纸有更直观的认识。
观众跟随教学
03
邀请观众跟随示范，一起动手尝试完成简单的折纸作品，增加
抗菌药物敏感性试
• 在贴条过程中， 90mm 平皿只能贴 2 条，同时不同的试纸条高浓度 的一段应该向背；若贴 2 条含有酶抑制剂的试条应将含有酶抑制剂的 一端贴在同一侧。 • 贴条注意事项：试条事先恢复室温： 10 分钟左右。 • 试条的数量与角度： 4-6 条、 1-2 条。 • 贴条的时间：平皿多余水分已经消失。 • 试条的方向：高浓度端向外。 • 贴条的动作：平稳、流畅、不拖拉。 • 气泡的处理：尽量向一端赶。 • 3.孵育同 K-B 法 • 注意孵育时间、环境温度及酸碱度。 • 读数原则：杀菌剂读清晰的边缘见图 1 ，抑菌剂读大菌落与小菌落的 交界见图 2 。变形杆菌读最小的 MIC 值，后两张为含酶抑制剂抗生 素的测试结果。
抗菌药物敏感性试验规范化 卫生部北京医院 艾效曼
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学习目标 1 、了解抗菌药物敏感性试验的意义、我国抗菌药物敏感性试验应遵循的规 则。 2 、掌握纸片扩散法和 E 试验原理，牢记试验的操作步骤及各步骤中的注意 事项，在日常工作中进行规范化的操作。
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抗菌药物敏感性试验的意义是什么？我国抗菌药物敏感性试验应遵循哪些规 则？ 一、基本内容 药敏试验的意义： （一） 药敏试验的意义： 1.查出耐药，减少治疗错误，便于医生选择个体化疗方案、节省费用。 2. 进行 耐药监测 ，为医院感染控制部门提供防治依据，为经验用药提供可靠 依据。 3.利用耐药监测结果控制抗菌药物应用，减少耐药菌株的出现，延长新药使 用寿命。 4. 为新药的研究和评估提供有价值的信息。 ）、药物敏感试验规则 （二）、药物敏感试验规则
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目前世界上通用的规则是德国和欧洲标准，而我国主要以临床试验室标准化 委员会（ CLSI ），即美国国家实验室标准委员会 (NCCLS) 的规则为标准， 这个标准主要包括 CLSI 纸片扩散法（ M2 ）和需氧菌稀释法（ M7 ）。 ）、抗菌药物敏感性试验结果参照标准 （三）、抗菌药物敏感性试验结果参照标准 1.标准的正确使用 M100 – 即新表 M100-S17 ，每年更新 1 次；包括 M2 和 M7 文件， M2 – 即 纸片扩散法 (DD) 文件 M2-A9 ， M7 – 即 MIC 文件 M7-A7 。 M2 、 M7 文 件每 3 年更新一次 ；使用文件时应注意文件是否已更新，避免使用旧文件造 成判断结果失误。 2.获得文件的方法 如果购买厂家的纸片可向厂家索取标准，每年国际化会议也会颁发此文件的 中心内容。 表内容： （四）、 CLSIM-100 表内容： CLSIM-100 表主要包括版本中的更新要点、各版本抗菌药物分组、 M2 纸片 扩散法用的表、 M7 MIC 用的表、 M7 MIC 用的表及词汇表等内容。
折纸基本技法ppt课件
CATALOGUE
目 录
• 折纸概述与基本工具 • 基础折法训练 • 进阶折法掌握 • 创意折纸设计与实践 • 折纸在生活中的应用 • 总结回顾与展望未来
01
CATALOGUE
折纸概述与基本工具
折纸起源与发展
折纸起源于中国，最 早可追溯到公元6世 纪
现代折纸融合了东西 方文化，呈现出多样 化的发展趋势
折纸在日本得到广泛 传播和发展，形成了 独特的日本折纸艺术
折纸艺术特点与魅力
折纸艺术具有立体性、形象性和 趣味性等特点
折纸作品可以展现作者的创意和 想象力，具有独特的审美价值
折纸过程具有益智性，可以锻炼 人的手眼协调能力和空间思维能
力
基本工具介绍及使用技巧
纸张选择
一般选用正方形或长方 形的纸张，纸质要柔韧
感谢观看
随着文化交流的不断深入，折纸艺术将融合更多元的文化 元素和创意表现。
折纸艺术与科技的结合
现代科技手段如3D打印、虚拟现实等将为折纸艺术带来新 的创作空间和表现形式。
折纸艺术在教育领域的拓展
折纸作为一种富有创造性和趣味性的手工活动，将在教育 领域发挥更大的作用，培养学生的动手能力和创新精神。
THANKS
学员成果展示评价
学员作品展示
展示了学员们在课程期间完成的优秀作品，体现了学员们的创意和 技巧水平。
学员心得分享
邀请部分学员分享学习过程中的心得体会，以及对折纸艺术的感悟 和理解。
教师点评与建议
教师对学员作品进行点评，肯定优点并提出改进意见，鼓励学员继续 探索和创新。
折纸艺术发展趋势预测
折纸艺术的多元化发展
动物世界
折纸动物作品欣赏，如恐龙、 鲸鱼、孔雀等。
K-B 纸片扩散法测定抗生素敏感试验
平板霉素类似物生物活性评价平板霉素对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐万古霉素肠球菌(VREF)等耐药菌具有很好的抑制活性。
抗菌活性的测试主要针对MRSA和VREF进行测定和相比。
最小抑制浓度（MIC）被确定抑制细菌生长的最低浓度。
通过生物活性数据的反馈，进一步指导平板霉素类似物的合成方向，希望获得活性更高、药效活性更好的抗耐药菌抗生素和药物先导化合物。
纸片扩散法测定抗生素敏感试验及MIC：1.原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。
纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。
在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
2.仪器及试剂仪器：纸片、试管、移液枪、烘箱、培养皿、培养箱、镊子、pH试纸、量筒、天平、高压灭菌锅、三角瓶、打孔器、超净工作台试剂：样品溶液、培养基3.菌液的配置从琼脂平板挑取新鲜分离的菌落数个或从保存的斜面上移种至3～5mL LB肉汤培养液中37℃培养2～8h，以待生长至轻微或中等浊度。
也可直接从孵育18～24h的琼脂平板上挑去纯菌落制成肉汤。
为保证药敏试验的准确度和精度，必须对接种菌液的浓度做相应的控制。
因此，将菌液稀释并校正浊度至0.5麦氏标准浓度，稀释时使用无菌肉汤或生理盐水，此时菌液的浓度约为1.5×108CFU/mL。
4.接种平板在超净工作台中，用量筒量取15mL配置好的灭菌培养基，倒在平板中，冷却凝固。
吸取稀释好的菌液500μL于洁净的灭菌试管中，加入4500μL的培养基，冷却到不烫手，摇匀，均匀倾倒置已凝固的平板表面，放置冷却至凝固。
5.粘贴药敏纸片用纸片分配器或无菌镊子取纸片（直径6mm，厚度1mm），贴于平板表面，并用镊子尖轻压一下纸片，使其贴平。
每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm。
细菌耐药性原理-抗菌药物敏感试验kej
但价格较高。
操作方法： 1.挑取16～20h的菌落 2.用无菌生理盐水制备成0.5麦氏比浊管浊度的菌液。
3.用无菌棉签浸入细菌悬液中，将拭子在试管上壁轻轻挤压以挤去过多 的菌液。棉签在三个方向平均涂抹琼脂表面（每次转60℃）使菌液均匀 分布，最后沿平板内缘涂抹一周。
联合药敏试验的方法
• 棋盘稀释法
• 原理 先测定两药单药时各自的MIC值，再将各种稀释度的两药混合， 测定两药联合时各药的MIC值，比较两药联合时MIC值与其单独MIC 值，计算部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concectration，FIC)， 作为协同、相加、无关和拮抗的判断。
大肠埃希菌 头孢噻肟
浓度 0.5
1
2
4 ug/ml
3.抗菌药物敏感性试验的方法
浓度梯度法（E-Test）药敏试验
E-Test即浓度梯度（多点药物浓度法）琼脂扩散试验。E试纸条背面含 有干化、浓度由高至低连续梯度分布的抗菌药，药物浓度按log2梯度递 减。抗菌药物从具有浓度刻度的塑料试纸条中向琼脂中扩散，在试纸条 周围抑菌浓度范围内受试菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈，抑 菌圈与试纸条的横向相交处的读数刻度为MIC值。
抗菌药物的临床实践
剂量 方案
血药浓度/时间
药代动力学 PK
其他组织或体液药 物浓度/时间
感染部位药物 浓度/时间
药理学或 毒副作用
抗菌作用/ 时间
药效动力学 PD
＋ PK：反应体内药物浓度 变化与时间关系
PD：反应抗菌药物在体 外抗菌活性变化过程
MIC MBC PAE MPC
019-3KB法药敏试验
1.目的保证纸片扩散法（KB法）药敏结果的可靠性。
2.方法K—B法3.材料3.1培养基Mueller-Hinton琼脂平板，只适合肠杆菌科、铜绿假单胞菌、不动杆菌、葡萄球菌、肠球菌、霍乱弧菌；HTM琼脂，只适合嗜血杆菌；GC琼脂＋1％特定的生长因子，只适合淋病奈瑟菌；Mueller-Hinton琼脂＋5％羊血，只适合链球菌。
3.2药敏纸片来源于北京天坛药物生物技术开发公司3.3质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。
3.4菌液比浊管接种菌液浓度为1.5x108/ml，相当于0.5的麦氏比浊管。
4.方法4.1制备接种菌液：挑选琼脂平板上，形态相同的菌落移种于M-H液体培养基中，置350C温箱中孵育4小时，用生理盐水稀释至相当于0.5麦氏浊度标准，或用接中环挑取菌落，置浮于生理盐水中振荡混匀后与标准化浊管比浊，调整浊度相当于0.5麦氏浊度标准。
4.2接种平板：用无菌棉签蘸取已制备好的接种好的菌液，在管壁上旋转挤压，去掉过多的菌液，涂布整个M-H培养基表面，并将平板旋转60℃，反复几次，最后沿平皿周边绕两圈，保证涂布均匀。
4.3贴纸片：待平板上的水分被琼脂完全吸收后（约15分钟），用无菌镊子取纸片贴在琼脂平板表面，并用镊尖轻压一下，使其贴平。
每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。
4.4孵育：把贴好药敏纸片的平皿放进350C孵平板，最好单独摆放，不超过2个叠在一起，孵育18-24小时后，读取结果。
4.5判定结果：培养后取出平板，用尺测量抑菌环的直径，抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限，然后根据抑菌环直径大小、NCCLS判断细菌的敏感性，并加以记录。
纸片扩散法药敏试验
纸片扩散法药敏试验纸片扩散法（K-B法）药物敏感试验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有抗菌药的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈大小，并根据相关解释标准进行结果分析，从而得出受试菌株药物敏感性的结论。
中文名纸片扩散法药敏试验临床意义得出受试菌株药物敏感性的结论目录.1试验原理.2试验步骤.3结果分析.4注意事项基本信息中文名纸片扩散法药敏试验临床意义得出受试菌株药物敏感性的结论试验原理纸片扩散药敏试验的原理：将含有定量的抗菌药物的纸片贴在接种有待测菌的固体培养基上，通过抗菌药物在培养基上的扩散，观察是否出现抑菌环，推断是否抑制细菌的生长。
药物扩散的距离越远，药物浓度越低抑菌能力越强，因此可根据抑菌环的大小，判定药物对细菌的抑制作用强弱。
试验步骤1. 待测菌株接种物制备（1）通用情况：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌（1-2）*1012CFU/mL浓度。
（2）特殊情况：嗜血杆菌属（本程序中所指的嗜血杆菌仅包括流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌）：从过夜孵育的HTM平板，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌（1-2）*1012CFU/mL浓度。
2.接种平板（1）调整好悬液的浊度后，用无菌棉签浸入悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去棉签上多余的液体，但也应适度。
（2）用拭子划线整个琼脂表面，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程（一共三次）每次旋转平板约60度，确保每次接种菌液均匀分布，最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈，防止有流动的菌悬液，并使菌液涂布于整块平板的每个角落。
（3）涂布菌液完成的平板，可在室温放置一会（3-5分钟），以便在放置含有药物的纸片前使琼脂吸收表面多余的水分，但放置时间不应超过15分钟。
KB纸片法 ppt课件
K—B纸片法缺点
试验过程受培养基的质量 、细菌接种量 、培养基 、 药敏纸片的质量 、纸片含药的准确性和均匀性等诸 多因素的影响较大 ，目前尚未规范其影响因素，为了 减少各种因素的影响，在实行方法的标准化方面有很 多问题有待解决 。建议制定统一标准 ，采取必要的 控制措施，以统一试验材料 ，固定试验条件，减少试 验误差 ，提高 K—B纸片扩散法结果的准确率 。
第二部分
实验方法
实验方法
培养基制备 药敏纸片制备 细菌制备 接种
培养基制备
培养基的种类： 进行细菌药敏试验所用的培养基种类较多。M—H 培养 基琼脂浓度越大、抑菌圈直径越小。有研究证明3种不同 M—H 培养基进行纸片扩散法，实验结果相同。 浓度1．0 ～ 2．0 、pH 7．4左右 培养基的质量： 4 mm 厚平板，允许±1mm误差，如此控制平板厚度即 可满足试验要求。有研究证明，平板每增厚或减薄1mm， 抑菌圈相应减小或增大0．7mm。
第三部分
实验结果
班内实验结果
结果判读
用尺子准确测量抑菌环的直径(mm)，抑菌圈的边缘 以肉眼见不到细菌明显生长为限。结果报告应以最小 抑菌圈的的直径为准。
结果判读
结果判定
有的菌株可出现蔓延生长进入抑菌圈，磺胺类药的抑 菌圈内会出现轻微生长，这些均不作为抑菌圈边缘。 按抑菌圈直径判断细菌的敏感性。
结果判定
第四部分
实验优缺点
K—B纸片法优点
药敏试 验具有重复性较好 、操作简便 、试验成本相 对较低 、结果直观 、容易 片扩散法虽然是一种传统 、经典的药敏试验 方法 ，但随着计算机的发展为细菌检验自动化奠定 了良好基础 ，全自动微生物分析仪的推广和应用K— B纸片扩散法出现药敏试验假耐药 、受人为因素影响 较大、试验耗时长的缺点也渐渐体现出来，同时快速 性 、准确性方面存在不足。
微生物药敏实验报告
微生物药敏实验报告本实验旨在检测微生物对不同抗菌药物的敏感性，以指导临床合理用药，提高治疗效果。
药敏实验是通过测量抗菌药物在体外对微生物的抑制作用，评估药物对病原菌的抗菌活性。
本实验采用纸片扩散法，将含有不同抗菌药物的药敏纸片放置在培养基上，观察细菌生长情况，计算抑菌圈直径，从而判断细菌对药物的敏感性。
细菌接种：将待测细菌接种于固体培养基上，用无菌棉签均匀涂抹。
药敏纸片放置：选择合适药敏纸片，用无菌镊子将其放置在培养基上，间距至少24mm。
培养：将培养皿置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
结果分析：根据抑菌圈直径判断细菌对药物的敏感性，如敏感、中介或耐药。
青霉素、阿莫西林、头孢拉定对细菌具有较好的抗菌活性，可作为首选药物。
环丙沙星具有较强的抗菌作用，可作为备选药物。
红霉素、四环素、庆大霉素和克林霉素的抗菌效果较弱，可作为辅助治疗药物。
克林霉素和复方磺胺甲噁唑对细菌不敏感，应避免使用。
根据药敏实验结果，建议使用青霉素、阿莫西林、头孢拉定和环丙沙星治疗该细菌感染。
在使用过程中，应注意观察患者反应情况，及时调整用药方案。
同时，应进行定期药敏实验复查，以避免耐药性的产生。
微生物在自然界中广泛存在，而临床微生物鉴定与药敏试验对于诊断和治疗感染性疾病具有重要意义。
本文将介绍临床微生物鉴定的方法和药敏试验的基本原理及其在感染性疾病治疗中的重要性。
临床微生物鉴定是指通过一系列实验方法对临床标本中分离出的微生物进行种类鉴别和抗菌药物敏感性的测定。
这有助于医生正确选择抗菌药物，提高感染性疾病的治疗效果。
细菌鉴定是通过对细菌的形态、染色特性、生化反应、血清学试验等进行测定，以确定细菌的种类。
例如，革兰染色可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌，而血清学试验则可以用于鉴定链球菌、肺炎球菌等。
病毒鉴定是通过病毒的分离培养、抗原抗体检测、分子生物学等方法确定病毒的种类。
例如，分离培养可以用于检测水痘-带状疱疹病毒，而抗原抗体检测可以用于检测乙型肝炎病毒等。
纸片扩散法药敏试验
纸片扩散法药敏试验纸片扩散法（K-B法）药物敏感试验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有抗菌药的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈大小，并根据相关解释标准进行结果分析，从而得出受试菌株药物敏感性的结论。
中文名纸片扩散法药敏试验临床意义得出受试菌株药物敏感性的结论目录.1试验原理.2试验步骤.3结果分析.4注意事项基本信息中文名纸片扩散法药敏试验临床意义得出受试菌株药物敏感性的结论试验原理纸片扩散药敏试验的原理：将含有定量的抗菌药物的纸片贴在接种有待测菌的固体培养基上，通过抗菌药物在培养基上的扩散，观察是否出现抑菌环，推断是否抑制细菌的生长。
药物扩散的距离越远，药物浓度越低抑菌能力越强，因此可根据抑菌环的大小，判定药物对细菌的抑制作用强弱。
试验步骤1. 待测菌株接种物制备（1）通用情况：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌（1-2）*1012CFU/mL浓度。
（2）特殊情况：嗜血杆菌属（本程序中所指的嗜血杆菌仅包括流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌）：从过夜孵育的HTM平板，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌（1-2）*1012CFU/mL浓度。
2.接种平板（1）调整好悬液的浊度后，用无菌棉签浸入悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去棉签上多余的液体，但也应适度。
（2）用拭子划线整个琼脂表面，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程（一共三次）每次旋转平板约60度，确保每次接种菌液均匀分布，最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈，防止有流动的菌悬液，并使菌液涂布于整块平板的每个角落。
（3）涂布菌液完成的平板，可在室温放置一会（3-5分钟），以便在放置含有药物的纸片前使琼脂吸收表面多余的水分，但放置时间不应超过15分钟。
教科版科学《神奇的纸》精品精品课件1
教科版科学《神奇的纸》精品精品课件1一、教学内容本节课选自教科版科学教材四年级下册第七单元《纸》的第一课时《神奇的纸》。
教学内容主要包括：了解纸张的制作过程和基本原理；探究纸张的强度与纸张折叠次数的关系；研究不同材质纸张的性能差异。
二、教学目标1. 知识与技能：学生能了解纸张的制作过程，掌握纸张强度的测试方法，并能运用科学探究的方法研究纸张性能。
2. 过程与方法：学生通过观察、实验、分析等实践活动，培养动手操作能力、观察能力和逻辑思维能力。
3. 情感态度价值观：学生激发对纸张科学的兴趣，养成节约用纸的良好习惯，增强环保意识。
三、教学难点与重点重点：纸张的制作过程、纸张强度的测试方法、纸张性能的研究。
难点：纸张强度与折叠次数的关系、不同材质纸张性能的差异。
四、教具与学具准备教具：PPT课件、实验器材（纸张、剪刀、直尺、胶带、天平等）。
学具：每组一份实验器材，包括不同材质的纸张。
五、教学过程1. 导入：通过展示各种纸张制品，引发学生对纸张的好奇心，提出问题：“为什么纸这么神奇？”2. 新课导入：讲解纸张的制作过程，引导学生了解纸张的基本原理。
3. 实践活动：学生分组进行纸张强度测试实验，观察折叠次数与纸张强度的关系。
4. 例题讲解：分析实验数据，解释纸张强度与折叠次数的关系。
5. 随堂练习：学生运用所学知识，设计并完成一个纸张性能研究的实验。
六、板书设计1. 纸张的制作过程2. 纸张强度与折叠次数的关系3. 不同材质纸张性能的差异七、作业设计1. 作业题目：研究不同材质纸张的强度，分析原因。
答案：根据实验数据，比较不同材质纸张的强度，结合纸张的纤维结构和制作工艺，分析其原因。
2. 作业题目：设计一个节约用纸的方案，并说明理由。
答案：方案如：双面打印、使用电子文件代替纸质文件等。
理由：节约资源、保护环境。
八、课后反思及拓展延伸1. 反思：本节课通过实践活动，学生对纸张的制作和性能有了更深入的了解。
在实验过程中，学生动手操作能力得到锻炼，观察能力和逻辑思维能力得到提升。
第19课纸片插接二第六册
第19 课纸片插接（二）（第六册）第19 课纸片插接（二）教学目的：1、锻炼同学的想想能力；2、利用几个大小、外形相等的硬纸片互相交叉，制作出立体造型；3、培养同学的动手能力；教学重点：了解多种外形和不同的插接方法；教学难点：依照自身的想法，边插边想，组成立体形象；教具准备：剪刀、胶水、水彩笔、油画棒教学过程：一、激发上节课我们完成了纸片插接的资料的准备，这节课我们进行插接的练习二、尝试、示范1、教师展示进行纸片插接的时候，大家要注意纸片插接时可能并不想我们所想象的那样插接得非常紧，而是1文档收集于互联网，如有不妥请联系删除.可能随时松开。
另外有时插接会出现不垂直的现象，这一点只有通过手的调整来防止。
2、注意事项进行插接的时候要边插边想，有时可能插接之前并不知道插接的是什么，但是插了两个之后就能从现有的插接结构中得出灵感。
3、充沛发挥我们共有四种形状，要求同学们分别用四种形状插接出四个作品。
然后可以将这四种形状混用，看你能再插接出什么样的作品。
三、运用（同学进行纸片插接）四、体验展示纸片插接的作品，同学互相评比，评出“最有创意奖”。
板书设计：纸片插接插接练习边插边想混插练习第19 课纸片插接（二）教学目的：2文档收集于互联网，如有不妥请联系删除1、锻炼同学的想想能力；2、利用几个大小、外形相等的硬纸片互相交叉，制作出立体造型；3、培养同学的动手能力；教学重点：了解多种外形和不同的插接方法；教学难点：依照自身的想法，边插边想，组成立体形象；教具准备：一、激发上节课我们完成了纸片插接的资料的准备，这节课我们进行插接的练习二、尝试、示范1、教师展示进行纸片插接的时候，大家要注意纸片插接时可能并不想我们所想象的那样插接得非常紧，而是可能随时松开。
另外有时插接会出现不垂直的现象，这一点只有通过手的调整来防止。
2、注意事项进行插接的时候要边插边想，有时可能插接之3文档收集于互联网，如有不妥请联系删除前并不知道插接的是什么，但是插了两个之后就能从现有的插接结构中得出灵感。
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第二部分
实验方法
实验方法
培养基制备 药敏纸片制备 细菌制备 接种
培养基制备
培养基的种类： 进行细菌药敏试验所用的培养基种类较多。M—H 培养 基琼脂浓度越大、抑菌圈直径越小。有研究证明3种不同 M—H 培养基进行纸片扩散法，实验结果相同。 浓度1．0 ～ 2．0 、pH 7．4左右 培养基的质量： 4 mm 厚平板，允许±1mm误差，如此控制平板厚度即 可满足试验要求。有研究证明，平板每增厚或减薄1mm， 抑菌圈相应减小或增大0．7mm。
药敏纸片制备
A．培养皿烘干法 将浸有抗菌药液的纸片摊平在培养 皿中，于37℃温箱内保持2~3h即可干燥，或放在无 菌室内过夜干燥。
B．真空抽干法 将放有抗菌药物纸片的试管置于干燥 器了，用真空抽气机抽干。
药敏纸片制备
纸片的保存 将制好的各种药物纸片装入无菌小瓶中 置冰箱内保存备用。（纸片不应长期保存于常开的普 通冰箱中，也不要放在其他不能维持适宜温度的容器 中。）收到纸片后应立即保存在-20~4℃中，由于实 验室冰箱频繁地开关而不能维持适宜的温度，故常开 的冰箱中只能放置1周使用的纸片；纸片容器打开前 先置室温平衡（装纸片的容器自冰箱取出后，必须在 室温10min以上才能打开，如立即打开，空气中的水 分会冷凝在纸片上，易潮解），纸片贴毕应把未用完 的放回冰箱中。
结果判定
第四部分
实验优缺点
K—B纸片法优点
药敏试 验具有重复性较好 、操作简便 、试验成本相 对较低 、结果直观 、容易判读、便于基层开展的优 点。
K—B纸片法缺点
K—B纸 片扩散法虽然是一种传统 、经典的药敏试验 方法 ，但随着计算机的发展为细菌检验自动化奠定 了良好基础 ，全自动微生物分析仪的推广和应用K— B纸片扩散法出现药敏试验假耐药 、受人为因素影响 较大、试验耗时长的缺点也渐渐体现出来，同时快速 性 、准确性方面存在不足。
药敏纸片制备
实验常规抗菌药物选择： 在标准中分成A、B、C 、U四组, A组所列的抗生素 为常规首选药敏试验药物,B组为临床使用主要抗生素, 尤其在医院感染时使用的抗生素，可在下列情况下使 用：①对A组同类抗生素耐药；②标本来源不同时， 如三代头孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺胺甲恶 唑使用于尿道分离的细菌；③多种微生物感染；④多 部位感染；⑤感染流行的控制；⑤对A组抗生素 过敏、耐受或无反应。
药敏纸片制备
触酶阳性的G＋球菌：青、苯唑、克林、庆大、环丙 沙星、万古、红霉素、头孢唑林 触酶阴性的G+球菌：青、氨苄、氯、红、利福平、 庆大、环丙沙星、万古 氧化酶阴性的杆菌：氨苄、丁卡、环丙沙星、庆大、 头孢噻肟、复达欣、泰能、哌拉西林 氧化酶阳性的杆菌：头他、庆大、哌拉、丁卡、氨曲 南、环丙、头孢噻肟、泰能
细菌制备
从琼脂平板挑取新鲜分离的菌落数个或从保存的斜面 上移种至3～5mLMH肉汤培养液中37℃培养2～8h， 以待生长至轻微或中等浊度。也可直接从孵育18～ 24h的琼脂平板上挑去纯菌落制成肉汤。 为保证药敏试验的准确度和精度，必须对接种菌液的 浓度做相应的控制。因此，将菌液稀释并校正浊度至 0.5麦氏标准浓度，稀释时使用无菌肉汤或生理盐水， 此时菌液的浓度约为1.5×108个/L。
细菌制备
下表为麦氏比浊管制法：
接种平板
①制备好的接种菌液必须在15min内使用。用灭菌好 的棉试子蘸取菌液，在管壁上旋转挤压几次，去掉过 多的菌液。然后用试子涂布整个培养基表面，反复几 次，每次将平板旋转60°，最后沿平皿周边绕两圈， 保证涂布均匀。 ②粘贴药敏试纸 待平板上的水分被琼脂完全吸收后开始贴纸片。用镊 子取纸片一张，贴在琼脂平板表面，用镊子尖轻压， 使其贴平。
接种平板
③15min内置35℃培养箱内培养。培养时，平板需在 培养箱内单独摆放，否则中间的平板达不到培养箱内 的温度而产生预扩散作用，平板培养18～24h后，读 取结果。
应注意：纸片一旦贴上就不能再拿起，因为纸片中的 药物已经扩散到琼脂中。纸片间距离不小于24mm， 纸片中心距平皿边缘不小于15mm。直径为90mm的 平板最好贴6张。
第三部分
实验结果
班内实验结果
结果判读
用尺子准确测量抑菌环的直径(mm)，抑菌圈的边缘 以肉眼见不到细菌明显生长为限。结果报告应以最小 抑菌圈的的直径为准。
结果判读
结果判定
有的菌株可出现蔓延生长进入抑菌圈，磺胺类药的抑 菌圈内会出现轻微生长，这些均不作为抑菌圈边缘。 按抑菌圈直径判断细菌的敏感性。
药敏纸片制备
药敏纸片制备
④纸片浸润、干燥、保存 用无菌操作法将待测的抗菌药物溶液1ml（含药量按 表所列计算，例如，庆大霉素10μg /片×100片 =1000μg /ml），加入摊布于灭菌平皿中的100片 纸片中，置冰箱内浸泡1~2小时，必要时可不时翻动， 使滤纸片将药液均匀吸净，如立即实验可不烘干，若 保存备用可用下列一种方法烘干（干燥的抗菌素纸片 可保存6个月）。
药敏纸片制备
C组药物用于对A组药物耐药的流行菌株或 对A组药物过敏的病人和某些不常见的细菌 （如肠外分离的沙门菌属或耐万古霉素肠 球菌）。 U组仅用于尿道中分离的细菌，不作为尿道 外分离菌的常规药敏试验。
药敏纸片制备
以大肠杆菌为例 ①纸片制备 ：选择优质滤纸，用打孔器制成直径 6mm圆形滤纸片。经120℃2h灭菌后备用 ②药物稀释 每张以吸入20μL药液为标准，如纸片薄，药物原液 需作调整。根据纸片内各种抗菌药物的不同浓度配制 药物原液。 药液浓度见下表。 ③课堂的实验中仅使用了青霉素 链霉素 氯霉素
KB纸片法
K-B纸片扩散法
抗生素敏感性实验
小组成员
查阅资料：阿妹 PPT制作：光光
钰儿 现场演讲：子翔
目录
实验原理
实验优缺点
实验方法及结果
第一部分
实验原理
实验原理
纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了 测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着 扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片 的周围形成一种浓度梯度。在药物扩散的同时，纸片周围 抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，而抑菌浓度范围外的 菌株则继续生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。 不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率 的影响而可能不同，抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药 物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（MIC） 呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小