Jurkat细胞Kv1.3钾通道的基本电生理学特性及动力学特征

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电压门控钾通道

电压门控钾通道电压门控钾通道，简称Kv通道，是一种广泛存在于生物体内的离子通道，在神经肌肉系统的正常功能中起着至关重要的作用。

它们能够调节细胞内外的离子浓度，控制细胞的膜电位，最终影响细胞的兴奋性和传导速度。

Kv通道的结构特点Kv通道的结构是由四个亚单元组成的，每个亚单元包含一个膜蛋白，每个膜蛋白有六个跨膜区域，第四个和第五个跨膜区域相互连通，在通道开放和关闭时发挥重要作用。

在Kv通道的膜蛋白中还存在许多不同的结构域和功能区域，如电压传感器区域、磷酸化调节区域、钙离子调节区域等，各种功能模块相互协作，共同实现钾通道的正常功能。

Kv通道的功能Kv通道是一种电压门控离子通道，它的开放和关闭状态取决于细胞膜电位的变化。

当细胞膜电位变为负值时，Kv通道会开放，允许大量的钾离子从细胞内向外流出，使细胞的膜电位进一步降低，对于神经组织细胞而言，这种反应称为超极化。

当细胞膜电位回归正常值时，Kv通道会逐渐关闭，从而阻止继续的钾离子流出。

细胞膜电位的恢复过程称为去极化，这种过程是神经肌肉系统内大量生理反应的基础。

Kv通道的调节Kv通道的开放和关闭是由多种因素调节的，包括细胞膜电位、离子浓度、药物和蛋白质相互作用等。

其中最为重要的是电压传感器区域上的功能位点，这些位点能够感应到外部的膜电位变化，并将信号传递到通道的内部，从而调节通道的开放和关闭。

Kv通道还可以通过磷酸化等化学修饰作用进行调节，磷酸化是一种常见的调节方式，常常与钙离子的浓度调节结合使用。

通过这些方式，Kv通道的开放和关闭能够被精细调节，以满足不同生理环境下细胞膜电位的需求，维持生物体内稳定的电活性状态。

Kv通道的药理学应用Kv通道在药物研究中具有广泛的应用前景，例如一些药物能够直接或间接地作用于Kv通道，从而调节神经肌肉活性。

此外，Kv通道还在癌症治疗和心血管疾病治疗中扮演着重要的角色。

目前，Kv通道钠离子通道阻滞剂开发市场的前景十分广阔，因为这些药物能够阻止过度的细胞兴奋反应，防止心肌细胞复极前过度兴奋、减轻缺血区域的酸化及心脏节律失常等病理现象。

Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1钾通道在缺氧性肺血管收缩中的作用

Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1钾通道在缺氧性肺血管收缩中的作用杜以梅;席姣娅;唐碧;Jurgen Hescheler;唐明;刘长金;洪志刚;柯琴梅;狄久芳;骆红艳;胡谋先;胡新武【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2004(020)009【摘要】目的和方法:雄性Wistar大鼠随机分为两组:常氧对照组和低氧组.用酶消化的方法获得单个大鼠肺内动脉平滑肌细胞(PASMC).采用全细胞膜片钳技术,记录PASMC静息膜电位(Em)和电压门控性钾通道电流(IKv),通过细胞内灌流Kv1.2/Kv1.5/Kv2.1抗体混合液(1:125),探讨Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1钾通道在缺氧性肺血管收缩(HPV)中的作用.结果:①低氧组膜电位明显去极化,由(-51.8±0.8)mV 去极到(-47.2±0.7)mV,P＜0.01,IKv与常氧组相比显著降低,在测试电压-30mV 时,IKv由(6.16±0.58)pA/pF降为(3.31±0.37)pA/pF(P＜0.01).②细胞内灌流Kv1.2/Kv1.5/Kv2.1抗体混合液可显著抑制常氧对照组PASMC的IKv,使Em去极化,然而细胞内灌流Kir2.1/Kir2.3/Kir4.1(1:125)抗体混合液对常氧对照组PASMC 的IKv和Em无显著影响.③细胞内灌流Kv1.2/Kv1.5/Kv2.1抗体混合液和Kir2.1/Kir2.3/Kir4.1抗体混合液对低氧组PASMC的IKv和Em均无显著影响.结论:Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1可能是氧敏感型通道,并介导了低氧性肺血管收缩.【总页数】5页(P1537-1541)【作者】杜以梅;席姣娅;唐碧;Jurgen Hescheler;唐明;刘长金;洪志刚;柯琴梅;狄久芳;骆红艳;胡谋先;胡新武【作者单位】华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病科,湖北,武汉,430022;滕州中医院麻醉科,山东,滕州,277500;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030;Institute of Neurophysiology University of Cologne D-50931 Cologne Germany【正文语种】中文【中图分类】R331.3.2【相关文献】1.K+v通道在缺氧性肺血管收缩中的作用 [J], 崔建修;赵国栋2.双孔钾通道TASK-1与缺氧性肺血管收缩的研究进展 [J], 田真;蔡鑫;唐碧3.K+v通道亚型在急性缺氧性肺血管收缩中的作用研究 [J], 崔建修;孙强;赵国栋4.电压依赖性钾通道在急性缺氧性肺血管收缩中的作用 [J], 崔建修;孙强;赵国栋5.电压依赖性钾通道与Miconazole在低氧性肺血管收缩中的作用 [J], 周敏;冯玉麟;杨小东;廖大清;缪世坤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Kv1.3离子通道在急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及与药物相关性的研究

Kv1.3离子通道在急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及与药物相关性的研究摘要目的：探究Kv1.3表达与药物的相关性及其在急性淋巴细胞白血病细胞Jurkat中表达。

方法：分析Kv1.3的mRNA含量与药物敏感性组学库中药物的相关性，并采用蛋白质印迹法检测Jurkat细胞的Kv1.3蛋白表达情况。

结果：Kv1.3与其同家族的钾离子通道Kv1.2的mRNA水平对药物敏感具有高度相似性，并且Kv1.3通道在Jurkat细胞中高表达。

结论：Jurkat细胞高表达Kv1.3通道，为Jurkat细胞的药敏实验提供理论依据。

关键词：Kv1.3通道；Jurkat细胞；T-ALL急性T淋巴细胞白血病在成人中占ALL病例总数的25% [1]，T-ALL因常规治疗疗效差，长期生存率低，预后差且易复发，成为临床治疗的一大难题。

Kv1.3通道是由6个跨膜部分组成的一类Shaker型钾离子通道，在多种肿瘤内表达，并成为多种肿瘤治疗的新靶标。

本文分析了Kv1.3的mRNA水平与药物相关性，并采用蛋白质印迹法分析Kv1.3在Jurkat细胞中表达情况。

1材料与方法1.1实验材料1.1.1细胞株与试剂Jurkat细胞购自中国科学院细胞库。

RPMI Medium 1640培养基（美国Gibco公司）；胎牛血清（以色列Biological lndustries）；一抗Kv1.3（以色列Alomone Labs）；BCA蛋白浓度测定试剂盒、RIPA裂解液(碧云天生物技术有限公司）；ECL化学发光底物（兰杰柯科技有限公司）。

1.1.2实验仪器电泳仪和转膜仪（北京六一生物科技有限公司）；iBright™成像仪（Invitrogen公司）。

1.2实验方法1.2.1采用药物敏感性基因组学数据库分析钾离子通道Kv1.3及Kv家族中Kv1.1和Kv1.2钾离子通道的mRNA含量和库内200余种抗肿瘤药物的相关性。

p< 0.05为有统计学差异。

1.2.2细胞培养Jurkat细胞用RPMI 1640培养基于培养箱（37℃、5%二氧化碳）中培养，调整细胞浓度为1.5×105个/mL，培养48 h。

大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的电生理学特性

１２试剂．
浴箱中孵育酶解４
ＨＰＳ液洗涤两次后低速离心５ｒｉ，上清液，入低钙Ｓａｎ弃加ＨＥＥＰＳ液４ｍ１用尖端抛光、口较大的Ｐｓｅｒ吸管轻柔地，开ａｔｕ
迄今大多数学者认为低氧性肺动脉高压（Ａ以及低氧ＰＨ）
性肺血管收缩（Ｖ）发病机理是由于低氧抑制了平滑肌细ＨＰ的胞膜上的钾离子通道，使细胞膜去极化，而激活电压门控的从钙通道，引起细胞外钙离子内流，致肺动脉平滑肌细胞收缩，从而启动ＨＰ［Ｖ。Ｋ通道既是ＰＡＨ和ＨＰＶ发病过程中的重要环节，也是药物作用的重要靶点［。基于此，２］我们利用传统的全细胞膜片钳技术对急性分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞（ａＭＣｓｋ通道的电生理学特性进行了研究，ＰＳ）＋旨在进一步阐
摘要目的：研究大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的电生理学特性。方法：用急性酶分离法分离单个大鼠肺动脉平滑肌细
胞，采用全细胞膜片钳技术对肺动脉平滑肌细胞钾通道的电生理学特性进行研究。结果：在一定的实验条件下可记录出钙激活性钾电流（ｃ）电压门控性钾电流（）ｃＫａ和Ｋｖ。Ｋａ可被四乙胺阻断，ｖ电流由快速失活ＫＫ电流（）缓慢失活钾电流（ｓ）Ｋａ、Ｋｔ和延迟整
肌细胞进行全细胞膜片钳记录［。反向将经过过滤的平滑５］
肌细胞电极内液冲灌电极，用微操纵仪移动电极进入平滑肌细

阻滞电压门控性钾离子通道Kv13对大鼠动脉粥样硬化斑块发生发展影响

华中科技大学博士学位论文阻滞电压门控性钾离子通道(Kv1.3)对大鼠动脉粥样硬化斑块发生发展的影响姓名：吴晓芬申请学位级别：博士专业：内科心血管指导教师：张存泰2011-04华中科技大学博士学位论文阻滞电压门控性钾离子通道（Kv1.3）对大鼠动脉粥样硬化斑块发生发展的影响华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科博士研究生:吴晓芬博士生导师:张存泰教授中文摘要近年来的研究表明急性冠脉综合征（ACS）的发生发展和炎症有关，其中不稳定性斑块破裂和炎症状态的扩散是导致病人急性冠脉综合症发作的主要原因。

细胞介导的炎症反应，尤其是T淋巴细胞介导的炎症反应在斑块破裂的机制中起到了非常重要的作用。

以往的研究表明粥样斑块内的大多数T淋巴细胞为CD4+的辅助性T淋巴细胞。

本实验室的近期研究证实急性冠脉综合征患者外周血中活化的CD4+T淋巴细胞Kvl．3钾离子通道数目增加，应用Kv1.3离子通道阻滞剂对急性冠脉综合征患者外周血中活化的CD4+T淋巴细胞功能有抑制作用。

我们实验室的研究还证明急性冠脉综合征患者外周血的淋巴细胞Kv1.3离子通道蛋白质表达高于健康对照人群。

然而应用Kv1.3钾离子通道阻滞剂是否对动脉粥样硬化的进展有抑制作用尚待进一步研究。

本研究通过建立大鼠动脉粥样硬化斑块模型, 同时应用KV1.3钾离子通道阻滞剂PAP-1干预, 以了解KV1.3钾离子通道阻滞剂对大鼠动脉粥样硬化斑块的影响及可能的机制。

华中科技大学博士学位论文第一部分实验性大鼠不稳定性动脉粥样斑块的建立目的探索一种建立实验性大鼠不稳定性动脉粥样硬化斑块的可行方法。

方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C组) 、大鼠胸主动脉粥样硬化斑块模型组(A1，A2，A3组)，每组各10只。

A1，A2模型组大鼠使用高脂饲料+维生素D3复合造模，A3组大鼠使用高脂饲料+维生素D3+大鼠血管内皮球囊损伤复合造模。

A1组大鼠喂食高脂饲料1，A2和A3组大鼠喂食高脂饲料2。

七、心肌细胞膜钾通道的特点、生理意义和临床联系

心肌细胞膜的钾通道种类繁多，是一个大群，具有重要的生理意义。

从门控机制的动因来看，有电压门控钾通道如 I to 通道、 I Kr 通道、 I Ks 通道等；也有化学门控通道 I K -ACh 通道、 I K -ATP 通道等。

从门控系统本身来看，有双门控通道如 I to 通道、 I Kr 通道；有单门控通道（或目前尚未发现双门控者）如 I Ks 通道等；也有不具备门控、但却呈现电压依赖性和时间依赖性通透性改变的如 I K1 通道。

上述各种钾通道，在心肌细胞的正常电生理活动和病理状态下的电活动中，各自发挥其特定的作用。

一般而言，电压门控钾通道和乙酰胆碱依赖性钾通道在生理条件下的心肌细胞电活动中起重要作用；而在心肌缺血等病理条件下，化学门控钾通道如 ATP 依赖性钾通道、花生四烯酸（ arAChidonic acid ）依赖性钾通道（ I K-AA ）等变得重要。

本节重点介绍一下延迟整流钾通道快成份 I Kr 通道的重要性。

I Kr 是所有心肌细胞动作电位复极的主要离子流，其幅值大小决定了动作电位复极的速率，也就是决定了动作电位（ APD ）时程的长短。

而有效不应期（ ERP ）的长短，在快反应心肌细胞取决于 I Na 通道的复活速率，在慢反应心肌细胞则取决于 I Ca-L 通道的复活速率，所以 ERP 的长短变化并不一定和 APD 的变化相符合。

这种不一致的变化既可以发生于同一个心肌细胞，也可以发生在不毗邻的心肌细胞（正常和病理心肌），从而导致心律失常。

III 类抗心律失常药物是 I Kr 通道阻滞剂，使 I Kr 幅值变小，动作电位复极速率减慢， APD 延长（ ERP 也相应延长），从而发挥抗心律失常的作用。

Jurkat细胞Kv1.3钾通道的基本电生理学特性及动力学特征

Jurkat细胞Kv1.3钾通道的基本电生理学特性及动力学特征代中华;谭晓秋;闫莉;程秀丽;祝红;郝维;曹济民【摘要】Objective Using the patch clamp technique, this study aimed to record the Kv1.3 current in Jurkat cells, analyze the channel kinetics and experience the essentials for successful recordings. Methods Kv1. 3 currents were recorded by the whole - cell con-figaration in the T lymphocyte leukemia cell line Jurkat E6 - 1. With suitable stimulus scheme, being selected the kinetics of activation, inactivation and recovery of the Kvl.3 channel were also analyzed. Results The Kv1.3 channel in Jurkat cells exhibited voltage -gated characteristics and could be blocked by ShK (100pmol/L). The time constants for activation ( τact ) , inactivation ( τin) and recovery (τrec) were 6.47 ±2.44ms, 622.49 ±93.90ms and 6. 141s, respectively. In the absence of intracellular Ca2+ chelation, theKvl.3cur-rent was always mixed with KCa3. 1 currents. The size of mircelectrode caliber and EGTA in the pipette solution were two key points for a successful recording of pure Kv1.3 current. Conclusion Jurkat cells express functional Kv1.3 channels. This channel shows kinetics characterized with rapid activation, slow inactivation and slow recovery. Removing the KCa3. 1 mixing is essential for the recording of pure Kv1.3 current. This study may provide experiences in the further study of Kvl.3 channel in T lymphocytes.%目的采用膜片钳技术记录Jurkat细胞膜的Kv1.3通道电流,分析通道的动力学特征,并体会成功记录的要领.方法选择T淋巴细胞性白血病Jurkat E6-1细胞系为研究对象,采用全细胞膜片钳记录方式记录Kv1.3电流,选择合适的刺激方案,分析通道的激活、失活和复活动力学特性.结果 Jurkat细胞的Kv1.3电流具有电压门控特性,并能被ShK(100pmol/L)选择性阻断.Kv1.3通道的激活时间常数(Tact)、失活时间常数(Tin)和复活时间常数(Trec)分别为Tact=6.47±2.44ms,Tin=622.49±93.90ms,Trecc=6.141s.在胞内钙没有被螯合的条件下,Kv1.3通道电流常掺杂有中等电导钙激活钾通道KCa3.1电流.玻璃微电极的口径和电极内液是否含EGTA是能否记录到纯净Kv1.3电流的关键.结论Jurkat细胞表达功能性Kv1.3通道,该通道呈现快速激活、缓慢失活和缓慢复活的动力学特征.记录Kv1.3通道须注意剔除KCa3.1电流的掺杂.该工作对研究T淋巴细胞Kv1.3通道的功能具有一定的借鉴意义.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2012(041)012【总页数】4页(P20-23)【关键词】Jurkat细胞;电压门控钾通道;激活;失活【作者】代中华;谭晓秋;闫莉;程秀丽;祝红;郝维;曹济民【作者单位】100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系;100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系;100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系;100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系;100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系;100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系;100005 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系【正文语种】中文Kv1．3通道属于电压门控钾离子通道Shaker家族成员之一，其主要功能是参与细胞膜的复极化过程，在可兴奋细胞中维持细胞的兴奋性，同时也参与了非可兴奋细胞的生理功能调节，例如调节T淋巴细胞增殖和凋亡［1，2］。

kv1.3钾离子通道

kv1.3钾离子通道
Kv1.3钾离子通道是一种在T淋巴细胞和B淋巴细胞中表达的电压门控钾离子通道。

每个T细胞内大约表达300个Kv1.3通道以及10-20个钙激活的KCa3.1通道。

虽然Kv1.3与KCa3.1都对促进并维持Ca2+内流的驱动力有贡献，但两者的表达有所差异。

Kv1.3主要参与效应T细胞的激活过程，选择性抑制Kv1.3通道，可能达到选择性的抑制效应T细胞激活过程的作用，这为与效应T细胞相关的自身免疫性疾病的治疗提供了新的思路。

此外，Kv1.3还参与机体的神经毒性效应以及癌症的发生发展等过程，在多种肿瘤细胞中都检测到了Kv1.3的异常表达。

钾通道

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Ito可以分为对4-氨基吡啶（4AP）敏感的钾电流Ito1，以及对钙敏感的的Ito2，该实质为钙依赖性氯电流。Ito1可被4-AP阻滞，Ito2 可被ryanodine阻滞。
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（3）起博电流（If）其是非特异性阳离子电流，即由一种以上单价阳离子，如K+和a+ 共同携带的离子电流。 If为细胞膜超级化激活的时间依赖性内向整流电流，是窦房结、房室结和蒲氏纤维系统的起博电流之一。
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钾通道及影响钾通道的药物
一、钾通道钾通道是存在于细胞膜上选择性允许K+跨膜通过的离子通道。
1
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钾通道广泛分布于骨骼肌、神经、心脏、血管、气管、胃肠道、血液、腺体等细胞。是目前所发现的亚型最多、作用最复杂的一类离子通道（1987年成功克隆出第一个钾通道基因）。
2
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细胞内外钾离子浓度差别极大，细胞内K+浓度为150mmol/L，细胞外K+浓度为4mmol/L，约40 倍。钾通道在调节细胞膜电位、细胞兴奋性以及肌肉组织收缩舒张活动中具有重要作用。
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二、影响钾通道的药物
影响钾通道的药物包括钾通道阻滞药和钾通道开放药，它们通过阻滞或促进细胞内K+外流而产生各种药效作用。
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*
细胞膜钾通道开放时，K+外流，细胞膜超级化，动作电位时程缩短；继而降低钠通道和钙通道的开放几率，降低细胞膜的兴奋性。细胞膜钾通道阻滞时，K+外流减少或停止，动作电位时程和有效不应期延长。
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2．心绞痛和心肌梗死：PCOs具有
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优先扩张冠状动脉且能防止心肌顿抑，限制心肌梗死面积，模拟缺血预处理等作用。在此方面研究较多的是尼可地尔。尼可地尔是强效抗心绞痛药，不抑制心肌，具有促进KATP开放和增加细胞内cGMP的双重作用；可同时降低心脏前、后负荷，高度选择性地扩张正常及有病变的冠状动脉，改善冠脉血液供应。其对心肌的保护作用和抗心绞痛作用优于其他药物。

慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞Kv1_3_省略_Kv3_1钾通道基因在急性缺氧

( 200 # 35) g, 麻醉后, 无菌条件下开胸取心肺, 浸入冰冷的 D- Hanks 液中漂洗数次。将肺组织固定于胶板上, 从肺门细心分离肺内动脉第二、三级分支 ( 直径 1- 1 4 mm) , 剥去外膜及附着的肺组织, 避免
[ 收稿日期 ] 2001- 06- 25 [ 修回日期 ] 2001- 10- 23
∋ 1192 ∋ [ 文章编号 ]
中国病理生理杂志 1000- 4718( 2002) 10- 1192- 04
Chinese Journal of Pathophysiology
2002, 18( 10) : 1192- 1195
慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞 Kv1 3、 Kv2 1、 Kv3 1 钾通道基因在急性缺氧时表达的影响*
* [ 基金项目 ] 国家自然科学基金重点资助项目( No. 39730190) 通讯作者 , E- mail: DXWang@ tjmu. edu. cn
∋ 1193 ∋
蛋白酶消化 1(2 传代。分别在常氧和缺氧状态下培养至第 6 代。在第 6 代时, 将常氧与慢性缺氧的细胞各分为两组 , 即: NC( normoxic control ) 常氧组, NH ( normoxic control cells challenged by acute hypoxia) 常氧培养后急性缺氧 6 h 组, CH ( chronic hypoxia) 慢性缺氧培养后复氧 12 h 组, CHH ( normoxic control cells chal lenged by acute hypoxia) 慢性缺氧培养后复氧 12 h 再急性缺氧 6 h 组。急性缺氧方法同前, 只是时间不同。 4

Kv1.3钾通道调节人脐静脉内皮细胞LOX-1受体摄取oxLDL

基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１１６００４３）；宁夏回族自治区自然科学基金资助项目（ＮＺ１１２０３）作者单位：７５０００４　银川，宁夏医科大学总医院心内科（何军、杨震）；２７６０３　罗利，美国北卡罗来纳州立大学生物科学系（韩一品）；７５０００４　银川，宁夏医科大学（孙宾、王浩）通讯作者：何军，电子信箱：ｊｕｎｈｅ＠ｎｙｆｙ．ｃｏｍ．ｃｎＫｖ１．３钾通道调节人脐静脉内皮细胞ＬＯＸ－１受体摄取ｏｘＬＤＬ何　军　韩一品　孙　宾　王　浩　杨　震摘　要　目的　观察Ｋｖ１．３钾通道在ＬＯＸ－１摄取ｏｘＬＤＬ中的作用，并探讨其机制。

方法　分别以慢病毒载体ｓｈＲＮＡ－Ｋｖ１．３－ＬＶ３－ｐＧＬＶ－ｈ１－ＧＦＰ－ｐｕｒｏ和Ｋｖ１．３－ＬＶ５－ＥＦ１ａ－ＧＦＰ－Ｐｕｒｏ转染人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣｓ），以获得ＨＵＶＥＣｓ细胞中下调和上调表达Ｋｖ１．３蛋白。

利用全细胞膜片钳技术记录Ｋｖ１．３蛋白过表达和下调的ＨＵＶＥＣｓＫｖ１．３Ｉ／Ｖ曲线。

以ｏｘＬＤＬ与ＨＵＶＥＣｓ共孵育后，分别应用免疫比色法和Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ荧光标记法测定细胞内胆固醇和钙离子相对含量。

经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法测定Ｋｖ１．３、ＬＯＸ－１、ｐ３８、ｐ３８磷酸化水平。

结果　ｓｈＲＮＡ９５０转染组ＨＵＶＥＣｓＫｖ１．３ｍＲＮＡ和蛋白表达量较空白对照组显著降低（Ｐ＜０．０５），过表达转染组Ｋｖ１．３ｍＲＮＡ和蛋白表达量较空白对照组显著升高（Ｐ＜０．０５）。

Ｋｖ１．３表达上调后，Ｉ／Ｖ曲线上移，该效应可被奎尼丁抑制；Ｋｖ１．３表达下调后，Ｉ／Ｖ曲线下移。

Ｋｖ１．３过表达组胆固醇相对水平明显高于对照组（Ｐ＜００５），ｓｈＲＮＡ９５０＋ｏｘＬＤＬ组胆固醇的相对含量低于ｏｘＬＤＬ组（Ｐ＜０．０５）。

Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测显示，Ｋｖ１．３过表达组的ＬＯＸ－１蛋白表达量较对照组升高（Ｐ＜０．０５），Ｋｖ１．３敲低组的ＬＯＸ－１蛋白水平较对照组减低（Ｐ＜０．０５）；Ｋｖ１．３过表达组磷酸化ｐ３８与ｐ３８蛋白水平的比值高于对照组二者的比值（Ｐ＜０．０５），Ｋｖ１．３敲低组磷酸化ｐ３８与ｐ３８蛋白表达量的比值低于对照组两者的比值（Ｐ＜０．０５）。

一种人Kv1.3型钾离子通道活性抑制拟肽、其制备方法及应用[发明专利]

专利名称：一种人Kv1.3型钾离子通道活性抑制拟肽、其制备方法及应用
专利类型：发明专利
发明人：沈秉正,喻研,冯辉,高翔
申请号：CN201910752600.6
申请日：20190815
公开号：CN110590921A
公开日：
20191220
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于生物医药领域，具体涉及一种人Kv1.3型钾离子通道活性抑制拟肽、其制备方法及应用。

人Kv1.3型钾离子通道活性抑制拟肽的分子结构为：本发明提供一种来源于病原真菌
T.benhamiae具有人Kv1.3钾离子通道抑制活性的人工设计、制备的拟肽(天然截短多肽衍生物)。

本发明所述的拟肽在微摩尔浓度水平具有较好的抑制人Kv1.3钾离子通道的活性。

本发明的人Kv1.3型钾离子通道活性抑制拟肽的理论分子量为1594.97，具有抑制人Kv1.3钾离子通道的活性。

申请人：武汉大学
地址：430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学
国籍：CN
代理机构：武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：石超群
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淋巴细胞上钾离子通道及其调控

淋巴细胞上钾离子通道及其调控
傅涛;郝选明
【期刊名称】《内蒙古医科大学学报》
【年(卷),期】2010(000)0S1
【摘要】淋巴细胞膜上的钾离子通道,在淋巴细胞活化过程中发挥重要作用,是免疫功能调节的重要环节。

淋巴细胞膜上的钾离子通道分为2类:电压门控式钾离子通道(Kv)和钙激活的钾离子通道(KCa)。

Kv是维持细胞静息膜电位的主要承担者;Kv 和KCa分别在细胞活化的启动和维持阶段发挥主要作用;Kv和Cl-通道共同调节细胞容积。

对钾离子通道的调节有利于我们对淋巴细胞的发育、活化和增殖等多种生物学过程的进一步了解。

【总页数】5页(P47-51)
【作者】傅涛;郝选明
【作者单位】华南师范大学体育科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】R331.1
【相关文献】
1.力竭运动应激对小鼠T淋巴细胞钾离子通道Kv1.3的调节作用 [J], 傅涛;王丽春;郝选明
2.钾离子通道及作用于钾离子通道的抗心律失常药物 [J], 邝日禹
3.束缚应激上调小鼠脾脏淋巴细胞钾离子通道(Kv1.3)的表达 [J], 鲁洪;宋德懋;冯娟;杨磊;于恩华;范少光
4.电压门控钾离子通道3.4亚基调控口腔鳞状细胞癌的侵袭和增殖 [J], 钱成炜; 戴永铮; 蒋勇
5.长链非编码RNA钾离子电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录本1通过靶向miR-24-3p调控人牙周膜干细胞增殖和成骨分化 [J], 庞鸣;韦红霞;陈茜
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哺乳动物Shaker家族电压依赖型钾通道的晶体结构

哺乳动物Shaker家族电压依赖型钾通道的晶体结构电压依赖型钾通道，顾名思义，当膜电压发生变化时，会运输钾离子穿越细胞膜，从而通过控制细胞形态以及动作电位的频率来调节神经元的兴奋性。

本文章报道了一个分辨率为2.9埃的哺乳动物的Kv通道（Kv1.2通道）晶体结构，这个通道属于Shaker型钾通道家族成员。

该通道与一个氧化还原酶的β亚基形成复合结构。

在细胞原始环境下，这一氧化还原酶β亚基可以调控哺乳动物的Kv通道。

在通道内端与细胞质之间存在一个很大的侧向入口沟通两者。

侧向入口的静电性能以及T1域和β亚基的位置与门控失活的电生理学研究是吻合的，钾通道可能受到β亚单位的调控。

电压依赖型钾通道是电压依赖型阳离子通道家族的成员，这个家族包括钾通道，钠通道以及钙通道。

这些通道普遍存在于广阔的生物王国中。

在真核细胞中，他们与其他离子通道相互协作共同参与或调控细胞的电生理活动。

这种电生理活动在电敏感细胞如神经元以及肌肉细胞以及非电敏感细胞的许多生理活动中都发挥重要作用。

在典型的易兴奋细胞神经元细胞中，Kv通道帮助膜电压在动作电流后回复到静息电位，并且能够调整动作电流的形状以及控制动作电流的激发率。

我们大部分对于Kv通道的了解来源于对黑腹果蝇Shaker钾通道以及在哺乳动物中其他家族成员的研究。

由于Shaker家族通道可以轻松的在非洲爪蟾蜍卵母细胞中表达，因而被广泛的用于电生理学研究。

但是不同的是，我们对于钾通道结构的了解却仅限于原核生物的研究。

这是因为它们可以在大肠杆菌（Escherichia coli）中高水平表达。

这些研究揭示了很多关于孔、选择性滤器以及门控的知识。

真核生物Kv通道在许多方面都和原核生物有相似之处。

由于选择性过滤器非常保守，我们猜测其结构在所有Kv通道中本质上都是一样的。

‘孔螺旋形成漏斗形，选择性过滤器位于接近胞外的宽口端’这一说法被认为是一个保守的特征。

然而，除了它们保守的孔以及一些调控通道开放的特定的域，真核生物Kv通道有一些与众不同的特征。

酸中毒时心脏克隆钾离子通道Kv1.4的动力学特性

酸中毒时心脏克隆钾离子通道Kv1.4的动力学特性田莉莉;王世敏;蒋学俊;李晓艳;黄从新;杨波;Harold C.Strauss【期刊名称】《国际心血管病杂志》【年(卷),期】2007(34)1【摘要】目的:探讨心脏克隆钾离子通道Kv1.4的C型失活(Kv1.4△N)在非洲蟾蜍卵母细胞上表达后的动力学特性以及酸中毒时的改变. 方法:将Kv1.4△NcRNA(最大体积为50 nl)注入非洲爪蟾的卵母细胞内,于18℃孵育16 h以上.电极采用两步法拉制,微电极由1.5 mm口径的电极拉制.电极内充3M KCl,电阻0.5～1.0MΩ.采用双微电极电压钳制法(two electrode voltage clamp,TEV)在室温下(20～24℃)记录电流. 结果:与正常pH时相比,酸性环境下,Kv1.4△N的峰电流减小,在pH 7.4时通道在去极化至-40mv激活,而pH 6.8时为-30 mv激活;通道在pH 7.4时最大失活为0.384±0.072,而在pH 6.8时为0.197±0.013;在pH 6.8时通道复活减慢(P ＜0.05). 结论:酸中毒导致通道电流减小,并且使通道失活加快和恢复减慢.【总页数】3页(P63-65)【作者】田莉莉;王世敏;蒋学俊;李晓艳;黄从新;杨波;Harold C.Strauss【作者单位】430060,武汉大学人民医院心血管内科;430060,武汉大学人民医院心血管内科;430060,武汉大学人民医院心血管内科;430060,武汉大学人民医院心血管内科;430060,武汉大学人民医院心血管内科;430060,武汉大学人民医院心血管内科;New Yok State University at Buffalo【正文语种】中文【中图分类】R322.1+1【相关文献】1.豚鼠气管平滑肌细胞钾离子通道动力学特性及对拮抗剂的敏感性 [J], 蔡绍曦2.PC12细胞钾离子通道门控动力学的分形特性 [J], 刘向明3.豚鼠支气管平滑肌延迟整流型钾离子通道动力学特性 [J], 蔡绍曦;邹飞4.风湿性心脏瓣膜病患者钾离子通道特性变化的实验研究 [J], 韩斌;邱峰;商国华5.风湿性心脏瓣膜病患者钾离子通道特性变化的实验研究 [J], 韩斌;邱峰;商国华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

应激前后脾脏、胸腺、脑组织中钾离子通道(Kv1.3)表达的变化

应激前后脾脏、胸腺、脑组织中钾离子通道(Kv1.3)表达的变化鲁洪;李志坚;王益光;王凤斌;程秀臻【期刊名称】《预防医学论坛》【年(卷),期】2008(14)2【摘要】[目的]观察应激前后小鼠脾脏、胸腺和脑组织中钾离子通道(Kv1.3)表达的变化。

[方法]利用束缚应激动物模型,以免疫组化实验方法,从蛋白质水平揭示应激前后小鼠脾脏、胸腺和脑组织中钾离子通道(Kv1.3)表达的变化。

[结果]应激16h 后小鼠脾脏、胸腺组织中钾离子通道(Kv1.3)表达水平均明显上调(P<0.05),而脑组织中表达无明显变化(P>0.05)。

[结论]束缚应激状态下小鼠脾脏和胸腺钾离子通道(Kv1.3)表达水平呈明显组织特异性上调,提示束缚应激条件下免疫功能的调节可能与钾通道有关。

【总页数】2页(P108-109)【关键词】应激;钾离子通道;小鼠【作者】鲁洪;李志坚;王益光;王凤斌;程秀臻【作者单位】潍坊医学院生理学教研室;潍坊医学院机能学实验室【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.Kv1.3钾离子通道在卵巢癌细胞株中的表达及活性 [J], 瓮占平;王纯;陶红;宁辉;纪向虹2.孟鲁司特钠对哮喘大鼠肺组织、脾脏、胸腺NF-κB mRNA表达的影响及病理变化的研究 [J], 陈伟;潘家华;倪陈;楼皖玲3.中性粒细胞哮喘与嗜酸性粒细胞哮喘小鼠中Kv1.3钾离子通道表达及电流改变[J], 周倩兰;王天玥;尚云晓4.先天性巨结肠患儿结肠组织钾离子通道蛋白表达的变化 [J], 黄召;黎明;周宇翔;肖雅玲5.束缚应激上调小鼠脾脏淋巴细胞钾离子通道(Kv1.3)的表达 [J], 鲁洪;宋德懋;冯娟;杨磊;于恩华;范少光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Kv 1.4和Kv 4.3在狗心室瞬时外向钾电流中的作用

Kv 1.4和Kv 4.3在狗心室瞬时外向钾电流中的作用张梅【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2001(032)0z1【摘要】研究Kv 1.4和Kv 4.3蛋白在狗心室外向钾电流形成中的作用。

利用免疫印迹和免疫组化技术，证实了在狗心室肌细胞均有Kv 1.4和 Kv 4.3蛋白的表达。

电生理实验也提示在狗Ito电流中有Kv 1.4和Kv 4.3的成分。

与猫、鼠心脏（Kv 1. 4表达仅限于心室内膜）不同，狗的Kv 1.4在整个心室肌层均有表达，故对Ito通道的功能有更重要的作用。

在狗的Ito通道中，β亚单位起着主要的作用，可用来解释在狗心肌上所表现的“表型-转换”现象。

【总页数】4页(P60-63)【作者】张梅【作者单位】美国弗基尼阿大学生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R331.3+8【相关文献】1.慢性心衰大鼠下丘脑室旁核瞬时外向钾通道蛋白Kv4.2和 Kv4.3低表达促进肾交感神经兴奋性 [J], 马柳一;尹玉洁;位庚;李红蓉;张军芳;刘焕;贾振华2.丹酚酸B对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流和L型钙电流的阻滞作用 [J], 冉玉琴;李宁;王蓉蓉;郝素芳;裴娟慧;浦介麟3.Kv1.4通道电流与大鼠心室肌细胞瞬间外向钾电流特性的比较 [J], 李婉;刘千勇;王晓良4.大鼠背根神经节神经元瞬时外向钾电流与非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2通道电流特性的比较 [J], 聂辉;张玉芹;李享元;余文静;罗加烈;胡霞敏;李之望5.实验性高脂血症大鼠心肌瞬时外向钾通道Kv4.2、Kv4.3基因mRNA表达的研究 [J], 霍蓉;李宝馨;姜宏全;杨宝峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。