OECD测试准则蚯蚓繁殖试验

在通风的地方把土壤中的这些干燥成分进行充 分混合（例如用一个大型的实验室用混合机）。在 开始试验前，向人工土壤中加入足够的去离子水， 使其达到最大持水量的的40-60%。使得土壤基质 放在手里压紧时不会有水分流出，且没有积水。人 工土壤的最大持水量（WHC）的测定依照附件2或 ISO11274（15）中描述的程序。
可见的植物残株，磨细）； • 20％的高岭土（高岭石含量最好在30％以上）； • 0.3%至1.0％的碳酸钙（CaCO3，细粉状，分析
级）。 • 70％风干的石英砂（取决于CaCO3的需要量），
主要是含有超过50%的50-200μm之间颗粒的细 砂。
注： • 所成分需，的实Ca验CO前3应量当取通决过于测土量壤土基壤质次（级包样括本食确料定）下的
• 如果试验物质是直接应用于土壤表面或者不必加 水就混合到土壤里，那么所需的水可以在制备土 壤时加入。如果试验物质要先用部分水溶解，那 么所需的额外的水可以和试验物质一起加入（见 后文描述）。
• 在试验开始和结束时的土壤水分含量的测定应遵 循ISO11465，土壤pH值的测定应按照附件3或 ISO10390的描述来进行。对照组和每一个处理 组都要测定。若测试物质为酸性或碱性时，那么 不需要调整土壤的pH值。在整个试验过程中应通 过定期称重容器来监测水分含量（见后文描述）。
蚓(Eisenia fetida，Savigny 1826) 或安德爱胜蚓(Eisenia Andrei ，Andre 1963) 繁殖输出的影响。OECD以前发
布过一个关于蚯蚓的急性毒性试验的准则。一些对蚯 蚓的急性和慢性试验的其他的国际和国家准则已经发 布。 • 赤子爱胜蚓（Eisenia fetida）/安德爱胜蚓（Eisenia Andrei）通常被认为是土壤动物群尤其是蚯蚓物种的 一个代表。在相关资料中可以获得蚯蚓的生态背景资 料和其在生态毒理学测试中的用途。
试验说明——设备
应使用玻璃或其它化学惰性材料制成的约一两 升容量的试验容器。该容器应具有约200cm²的横 截面面积，使得500-600g干燥基质添加进去后潮 湿基质在容器内能够达到5-6厘米的高度。容器盖 的设计应允许底物和大气之间有气体交换，并且透 光（例如通过一个穿孔的透明盖），同时还要防止 蚯蚓爬出。如果试验加入基质的量超过500〜600g， 那么容器中的蚯蚓数目也应该按比例增加。
• 本准则没有考虑试验物质在试验期间发生降解的 可能性。因此，不能认为在整个试验过程中所设 浓度始终是初始浓度。在这种情况下，建议在试 验开始和结束时都对物质进行化学分析。
参考物质
参考物质的NOEC和ECx值必须确定以保证足 够的实验室试验条件和保证试验生物的响应不会随 着时间发生统计学上的改变。建议一年测试参考物 质一次，或者当试验进行频率比较低时，可以与试 验物质的毒性一起测定。多菌灵和苯菌灵已被证明 是对繁殖有影响的合适的参考物质。
试验物质信息
• 在水中的溶解度（water solubility） • 辛醇 - 水分配系数（log Kow） • 蒸气压（vapour pressure） • 有效期和在环境中的特性（例如光解率和水解率，
和应用方式相关）
• 本准则适用于不论其水溶性如何的所有物质。但 该方法不适用于挥发性物质，此处定义为物质的 亨利常数或空气/水分配系数大于1。也不适用于 25 ℃下蒸汽压超过0.0133 Pa的物质。
试验原理
使蚯蚓成虫接触一系列浓度的试验物质，这些试 验物质可以是混合到土壤里，若为杀虫剂时，也可以应 用到土壤或者土壤表面。应用方法视试验目的而定。选 择的浓度范围中要包括在八周的时间内可能会引起亚致 死和致死效应的浓度。在接触试验物质的4周后确定成 虫死亡率和对蚯蚓成虫生长的影响。然后从土壤中取出 成虫，再过四周后通过统计土壤中存在的子代数来评估 对蚯蚓繁殖的影响。处理组的繁殖输出应当和对照相比 较，以确定最大无影响浓度（NOEC，在毒性实验中某 物质对受试生物无不利影响的最大浓度）和/或ECx (例 如： EC10, EC50) 。ECx值 (例如： EC10, EC50)应当 在试验选择的浓度范围内，使得ECx的测定来自插补法 而不是外推法。
常规的实验室设备是必需的，具体如下： • 干燥箱; • 立体显微镜; • pH计和光度计; • 合适的精确天平； • 温度控制设备; • 湿度控制设备（不是必需的，若容器有盖子）; • 孵化器或带空调的小房间; • 镊子，钩或环; • 水浴锅。
Leabharlann Baidu工土壤的准备
在试验中所用的人工土壤应当包含以下组分： • 10％的泥炭（尽可能使pH值至5.5〜6.0，无肉眼
来具体数值。 • 有时需要减少人工土壤中的有机碳含量，可以通
过降低泥炭含量至4-5％或相应地增加砂粒含量。 通过有机碳含量的减少，可以降低土壤中的有机 碳对试验化学品的吸附并增加试验化学品接触蚯 蚓的可能性。有证据表明在有机碳含量较低（如 2.7%）的田间土壤试验时，赤子爱胜蚓遵守该繁 殖有效准则，而且经验表明在有机碳含量5%的人 工土壤中同样遵守该准则。
Organization for Economic Cooperation and Development
经济合作与发展组织，简称经 合组织(OECD)，是由30个市场经济 国家组成的政府间国际经济组织， 旨在共同应对全球化带来的经济、 社会和政府治理等方面的挑战，并 把握全球化带来的机遇。
介绍
• 此测试准则的目的是评估土壤中的化学品对赤子爱胜
蚯蚓的选择和准备
• 试验中所用蚯蚓为赤子爱胜蚓和安德爱胜蚓。应选择 具有环带的两个月至一年大小的成虫。同一个试验中 所用的蚯蚓要来自同一生长环境，并且大小、虫龄尽 量均匀一致（附件4）。虫龄差别最好不要超过四周。
试验的有效性
对照组应满足下列条件才能认为试验结果有效： • 在试验结束时每个重复（包含10条成虫）应当产
生≥30条幼虫； • 繁殖的变异系数应当≤30%； • 在试验开始四周后成虫死亡率应当≤10%。
如果试验不能满足上述条件，那么试验应该终止， 除非可以提供让试验继续下去的正当理由。该理由 应当写进报告中。