实验八 果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告一、实验原理双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。
唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。
并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。
唾腺染色体广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。
二、实验材料果蝇的三龄幼虫三、实验器材双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。
四、实验试剂生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。
五、实验步骤1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
剔除脂肪体并弃除无关物质。
2.解离：加一滴45%乙酸溶液于腺体上，作用5-7s。
用滤纸吸干溶液。
在唾腺组织上滴一滴1mol/lLHCl，解离30-40s，以松软组织，利于染色体的分散。
3.吸去 HCl，用水冲洗2-3次.4.染色：滴加改良苯酚品红染液染色30min,染色时间不可过长，否则背景也着色。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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一、试验目标
1.了解唾腺CS特点 2. 学习分离唾腺技术 3. 掌握唾腺CS制片方法
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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二、试验原理
• 永久间期CS • 复制而不分开 与观察
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果蝇唾腺染色体特点：
• 剥离唾腺置载片中央,加一滴HCl,解离23
• 吸去HCl,冲洗23次,吸干;加1d染液,染色5
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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4. 压片及观察
• 载片置平整处,加盖 片,轻敲;压片
• 低倍至高倍镜检
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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果蝇唾腺染色体的制片与观察
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果蝇唾腺染色体的制片与观察
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五、注意事项
1. 水不可太多,不然幼虫会漂浮而且活跃 2. 一定加生理盐水,不然唾腺易干 3. 将脂肪组织去除洁净 4. 吸水时勿将唾腺一起吸走 5. 染色时间不可过长,不然背景也着色 6. 压片时要揉,用力要均匀
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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六、作业
1. 制效果很好唾腺CS暂时片1-2张 2. 真实绘制观察到唾腺CS绘图 3. 思索题P66 1-2
4.Puff结构：幼虫不一样发育期，浓缩染色质纤维会成群解 旋、松开，形成泡状涣散结构，使对应基因得以表示，这 种泡状结构称Puff结构，亦称染色体疏松。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第7页
三、试验材料、器具、药品试剂
• 大果蝇(D. virilis)活体三龄幼虫 • 解剖镜,显微镜,培养箱;培养瓶,
1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um， 长约400um，相当于普通染色体100—150倍，因而又称为巨 大染色体。
实验八果蝇唾腺染色体的观察
【实验项目二】果蝇唾腺染色体的观察实验八果蝇唾腺染色体的观察〖目的和要求〗观察果蝇的唾腺染色体，学习唾腺染色体的制片方法。
〖实验原理〗果蝇唾腺染色体是果蝇幼虫期唾腺细胞核内染色线连续复制，但细胞核不分裂，而形成的多线染色体，又称为巨型染色体。
它比果蝇其它细胞的染色体长100－200倍，有1000－4000条染色体的拷贝。
这种染色体可以观察到由一个“中心”和五个臂组成(2n＝8)。
这是由于各染色体的着丝粒周围的异染色质部分相互结合在一起，形成一个“中心”，又由于同源染色体紧密配对，第Ⅱ、第Ⅲ中位着丝粒的染色体各有左右两条臂，Ｘ染色体是端着丝粒染色体，只能看到一条染色体臂，第Ⅳ染色体则呈点状，所以可见五条臂。
而且每条染色体臂上还呈现不同的横纹(band)。
根据果蝇的表现型和它的唾腺染色体上横纹染色的深浅、宽窄及其它特征可为基因与性状的关系提供一定的依据，并可作出基因的细胞学图。
所以，唾腺染色体是细胞遗传学研究的极好材料。
〖实验材料〗果蝇的三龄幼虫。
〖用具和药品〗双筒解剖镜、普通生物显微镜、解剖针、镊子、载玻片、盖玻片、1％醋酸地衣红或石碳酸品红、0.7％生理盐水、1mol·1-1HCl、蒸馏水等。
〖实验步骤〗1、取16－18℃条件下培养的果蝇三龄幼虫的雌体（鉴别见附录）置于载玻片上，滴加0.7％生理盐水。
2、双筒解剖镜下，用解剖针针尖掀住幼虫靠前端三分之一处，以固定幼虫，再用镊子或解剖针夹紧其口器的头部，用力把头部从身体中拉开。
位于幼虫前端食道两侧的唾腺便随之而出，弃去殊余部分，并剔除唾腺上黄色脂肪。
3、将唾液置于载玻片上，①滴1-2滴45％乙酸溶液于腺体上，5~7s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。
②再滴1滴1mol/L HCL于于腺体上，30~40s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。
③滴1滴蒸馏水于腺体上，1~2s后用滤纸吸干。
4.染色。
①滴1~2滴乳酸-乙酸-地衣红或石碳酸品红染色于腺体上，染色30~45 min（染色过程中要随时添加染色液）。
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
实验八果蝇唾腺染色体的观察
2．取唾腺
挑选生长肥大的三龄幼虫放入表面皿中，用0.7％ 的生理盐水尽量洗去幼虫体表所沾附的培养基，然后 将幼虫置载玻片上，滴1-2滴0.7％生理盐水，找到具有 口器的头部(有一小黑点)，用一手解剖针刺入(或压住) 头部，将虫固定，另一手用摄子夹紧幼虫下半部(尾端 1/3处)，轻轻向两端拉开，唾腺随头部拉出。唾腺是一 对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织(不透明)。去 除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离 干净。
➢1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 ➢2. 将脂肪组织清除干净。 ➢3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。 ➢4. 染色时间不可过长，否则背景也着色。 ➢5. 压片时要揉，用力要均匀。 ➢6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色 液，再压片。
七、作业
１、制效果较好的唾腺染色体临时片1～2张。 ２、绘出你所观察到的果蝇唾腺染色体略图，并仔细 描绘各染色体臂末端５～１０条横纹。
3．解离
将剥好的唾腺移到载片中央，加一滴1 mol/L HCl 于腺体上，解离２～３min使组织疏松，以便压片时 细胞分散，染色体展开。
4．染色
用吸水纸吸去HCl，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后，小 心吸干。加1～2滴改良苯酚品红或其它染液，染色 10～15min。
5．压片
染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将 片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不 要使盖片移动。
二、实验原理
本世纪初，D.Kostoff用压片法首先在果蝇幼虫的 唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体---唾液腺染 色体。由于它具有许多重要特点而成为细胞遗传学、 发生遗传学、进化遗传学和分子遗传学研究中不可多 四、实验器具、药品试剂
果蝇唾腺染色体观察课件
实验步骤
• 解离：用吸水纸小心吸去生理盐水，加1 滴1N HCl，浸2—3分钟，使组织疏松， 以便压片时细胞分散，染色体散开。 • 染色压片:将唾腺移到另一干净的预先滴 有卡宝品红的载玻片上染色10min后，取 盖玻片和双面刀片，双面刀片放于盖玻 片和载玻片间，吸去多余染液，
实验步骤
盖上盖玻片，在盖片上覆一条吸水纸，用 拇指适当用力压片。（注意：在拨取和染 色过程中勿使腺体干燥） • 观察:低倍镜观察选出典型细胞后用高倍 镜观察，可以看到五条弯曲展开的染色体 臂和一个点状的第6号染色体对,它们在着 丝点构成染色中心并向外展开，自染色体 的终端可分辨横向带纹.
实验材料
• 普通果蝇野生型或任何突变型的三 龄幼虫活体.选择行动迟缓,肥大,爬 上管壁的三龄幼虫做标本最佳
三龄幼虫
一龄幼虫
两龄幼虫
实验器具和药品
• 实验器具:解剖镜,显微镜,解剖针,载玻 片,盖玻片,吸水纸 •药 品:生理盐水(0.7%Nacl),1mol/L 盐酸、卡宝品红
实验步骤
• 幼虫的培养:较低温度下培养(16-18℃),每 隔2天将羽化的新蝇倒出.取充分发育的三 龄幼虫 • 唾腺分离:取三龄幼虫放在滴有一滴生理盐 水的载玻片上,两手各持一支解剖针.一支 针压在虫体前端1/3处,固定幼虫，另一针 按在头部里突处(口器)稍后，轻缓前移将 头部扯开,唾腺也随之扯开，可看到一对透 明而微白的长形小囊即为唾腺。唾腺的侧 面常带少量白色沫状脂肪体,用针剥离。
实验原理
• 唾腺染色体处于永久性间期中的一种体 细胞同源染色体配对状态,比普通染色体 大得多, 称巨大染色体. 唾腺染色体经 过多次复制并不分开,约有1000-4000根 染色体丝的拷贝,因此又称为“多线染色 体”.双翅目昆虫某些物种幼虫唾腺细胞 内普遍存在,是研究唾腺染色体常用的材巨大，是多线染色体；
果蝇唾液腺染色体制片与观察
三、实验材料
野生果蝇
四、实验步骤
1、剥离果蝇幼虫的唾液腺
取一洁净的载玻片，滴上1滴0.75%生理盐水。在瓶壁 上挑选肥大的充分发育的三龄幼虫放在的生理盐水中，唾 液腺位于幼虫食道的两侧，长度约占身体总长的1/3—— 1/4左右。
解剖时把载玻片放在解剖镜或放大镜下,一手用解剖针压住头部 (外型似一个黑色小点)，压住的地方越小越好，同时，用镊子夹住幼 虫身体1/2处， 轻轻地将幼虫的头部自身体拉开。唾液腺随同内脏一 起拉出。如果头部拉断,腺体没有拉出,可以用解剖针从镊子附近的腹 部缓缓地向头端挤压,也可压出唾液腺。然后在镜下细心分离，理出双 叉形半透明的囊状腺体即为唾液腺，在生理盐水中无论怎样触动它都 不会发生形状改变。
同源染色体的两条臂紧密结合，自由伸展。因 此唾液腺细胞染色体数看不出2n的染色体数， 只能观察到从染色中心向空间伸展的染色体臂。 与其它细胞染色体相比的另一个特点是，唾液 腺染色体上有深浅不同、宽窄不一的带纹，这 些带纹的数目和位置是恒定的，代表着种的特 征和一些基因的位置。
由于这些带纹的存在，染色体上发生缺失、重 复、倒位、易位等很容易在唾液腺染色体上识 别出来。
在显微镜下观察，由单层细胞构成，细胞形状不规则，细胞轮廓 清晰，细胞大，细胞核也大，甚至可以看清细胞核是由染色体卷缩在 一起形成的。唾液腺拉出后，剔除腺体周围乳白色的脂肪组织和身体 的残留部分，只留唾液腺在载玻片上。
2、解离 用滤纸条吸净唾液腺周围的其它物质，然后将唾 液腺放入1N HCl，解离2—3分钟，以松软组织利于 细胞破裂，使染色体散开。 3、水洗 解离后的唾液腺用蒸馏水洗3—4次（或0.4%的 生理盐水），水洗时要注意不要把唾液腺弄丢，水洗 要彻底，目的是洗去盐酸，以免影响染色效果。另外 水洗过程也是细胞低渗过程，使唾液腺细胞膨胀。
果蝇唾液腺染色体的制片与观察实验报告
果蝇唾液腺染色体的制片与观察张茜111070094一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。
2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。
3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。
生理盐水、1％醋酸洋红。
四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。
（一对双叉形透明的囊状腺体）。
2、除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3、染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。
4、显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。
果蝇唾液腺染色体的观察
果蝇唾液腺染色体的观察一、实验目的1)练习剖取果蝇三龄幼虫唾液腺的方法。
2)掌握制作果蝇唾液腺染色体标本的技术3)观察果蝇唾液腺染色体的形态特征。
二、实验原理1）果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般体细胞中的染色体粗1000—2000倍，长100－200倍。
2）唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
如图。
3）由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称做明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区和巴尔比尼氏环，其富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，疏松区或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
三、器具和生物实验生物：果蝇的三龄幼虫；器具：双筒解剖镜、显微镜、镊子、解剖针，载玻片、盖玻片实验试剂：醋酸洋红染液、蒸馏水、lNHCI。
四、实验步骤1）准备发育充足、肥大的三龄幼虫（选择在低温下（16°C-18°C培养下，充分发育但尚未化蛹但活动十分活跃的幼虫）；2）剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴蒸馏水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，置于载玻片上。
唾液腺染色体观察
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺的分离技术；2、学习制作唾腺染色体标本的方法；3、观察、识别果蝇唾腺染色体的特征。
二、实验原理果蝇幼虫唾腺的细胞核非常大，唾腺染色体比其他细胞染色体大200多倍。
由于重复复制后的众多染色线没有分开，一条染色体内含有染色体线多达千条以上，是通过核内有丝分裂形成的多线染色体。
一般来说，多线染色体是处于永久性前期中的一种体细胞染色体配对形式，普遍存在于双翅目昆虫某些物种的幼虫唾腺细胞内。
唾腺染色体的特征：巨大；体细胞配对，染色体只有半数（n）；各染色体着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；有深浅不同、疏密各别的横纹。
唾腺染色体经染色后出现的横纹的数目和位置常常恒定，标志着物种的特征。
当染色体上有结构变异，如缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上鉴别。
例如：果蝇Ⅰ号染色体上16A区中有六条横纹的是正常复眼，有12条横纹的是棒状眼，有18条横纹的是加倍棒状复眼。
三、实验材料果蝇三龄幼虫；解剖镜，显微镜，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸，生理盐水，醋酸洋红四、实验步骤1、幼虫培养置于16-18℃下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体的最理想时期。
2、幼虫的解剖将载玻片置于解剖镜下，滴一滴生理盐水，将幼虫置于其中，左手持解剖针按住幼虫前端1/3处，固定幼虫。
右手持针按住幼虫头部正中，快速用力向右拉，把头部从身体拉开，腺体即随之而出。
唾腺为半透明小囊状，其上附有脂肪带，食道两侧各一个。
找到唾腺后尽可能把腺体上的脂肪剔除。
3、染色前处理清除残体，使载片上只留下唾腺。
4、酸解：把腺体放入1N HCl中浸泡2-3分钟，dH2O洗3次。
5、染色滴上几滴醋酸洋红于唾腺上，染色30分钟，染色时用镊子将唾腺稍捣碎。
6、压片在载片上加盖玻片，盖片上覆盖一吸水纸，然后以拇指适当用力压片，将唾腺细胞核压破，以染色体伸展而不破碎为好。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。
本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。
制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。
2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。
3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。
4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。
5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。
6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。
观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。
•另一端较短，称为非钩端。
染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。
通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。
这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。
遗传学实验--果蝇唾腺染色体的压片及其观察
果蝇唾腺染色体的压片及其观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、学会制作唾腺染色体压片3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫，活跃的，雌性幼虫。
盖玻片、载玻片、解剖针、解剖镜、45%醋酸溶液、卡宝—品红染液、盐酸、乳酸醋酸溶液三、实验原理唾腺染色体的特点：大、粗。
唾腺细胞是一个处于间期的细胞，染色体处于一个伸展的状态，所以特别长，因为这个唾腺细胞是一个多倍体的细胞，每条染色体的话有1000到4000条核蛋白纤维丝（包括DNA和蛋白质）。
唾腺染色体的所有的着丝粒聚在一起形成了一个染色中心，伸开五条臂。
X染色体体联会在一起。
果蝇染色体分区：果蝇染色体一共分为120个区，从端部开始1-20为x染色体，21-40在第二染色体的左臂，61-80在第三染色体的左臂，101—102位于点状染色体。
右臂是从基部开始分区，41-60在第二染色体的右臂， 81-100位于第三染色体的右臂。
每一个分区里边又分成段这个段，用A、B、C、D来表示。
四、实验步骤唾液腺制片：1、取一张载玻片，擦干净表面的酒精，放在解剖镜的载物台上。
2、打开解剖镜，使用上光源。
并在载玻片上滴一滴生理盐水。
3、用解剖针取一只黑腹果蝇的三龄幼虫。
4、用一支解剖针固定幼虫头部，另外一支解剖针压入口沟的位置，将其拉断。
找到口沟附近的一对透明的唾液腺，将唾液腺留在中间，用吸水纸将其他的部分擦去。
5、加入45%的醋酸溶液固定，时间为 5—7秒。
让唾液腺离开原来的位置，时间到了之后将多余的液体吸掉。
6、加一滴盐酸起软化作用，再加一滴蒸馏水洗去多余的盐酸，时间大概1—2秒。
让唾液腺离开原来的位置。
7、滴加染液，染色三十分钟。
8、重新做一张制片9、吸掉多余的染液，加一滴乳酸醋酸溶液，将唾液腺充分的洗涤。
吸去多余的溶液。
10、盖上盖玻片，用两层滤纸，中间打折压住盖玻片手点住盖玻片的两个角轻轻的按抚，吸去多余的溶液。
11、压片显微镜观察：先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观实验报告
果蝇唾腺染色体的标本制备和观实验报告
实验目的：
通过制备果蝇唾腺染色体标本，观察果蝇的染色体结构，了解染色体的基本性质和遗
传学规律。
实验材料：
果蝇幼虫、0.5% KCl溶液、氯仿、乙醇、木棒、荧光显微镜。
实验步骤：
1、将果蝇幼虫放入酒精中，使其身体僵硬；
2、用木棒将其身体对称裂开，取出唾腺进行制片；
3、将唾腺放入0.5% KCl溶液中，加热至65℃，使细胞膜破裂；
4、倒入等量的氯仿，轻轻摇匀，放置5-10分钟；
5、离心，移去上层液体，加入冰醋酸铅，固定标本；
6、取出标本，放入70%、95%和绝对乙醇中，依次脱水；
7、将脱水后的标本放在载玻片上，滴上染色液，加热至70℃，并静置5分钟；
8、冲洗并抽干，加入透明胶进行封片；
9、通过荧光显微镜观察唾腺染色体的结构。
实验结果：
在进行染色体标本制备后，通过荧光显微镜观察，果蝇唾腺染色体呈现出沿着中心轴
对称排列、长度相等的形态。
每个染色体被分为两个亚单元，其中有着明显的染色体节间。
每个亚单元又被分成数个不同长度的染色体节，节与节之间也有着清晰可见的连接。
实验结论：
染色体是生物遗传信息的主要携带者，表现出其特定的形态和结构。
通过制备果蝇唾
腺染色体标本，观察了果蝇染色体的基本结构和形态，了解了染色体的基本性质和遗传学
规律。
对于研究生物遗传学以及进行基因工程，染色体的结构和功能有着重要的意义。
果蝇唾腺染色体观察
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果蝇唾腺染色体的特点：
1. 巨大；
2. 多线；
3. 体细胞联会：
4.
- 唾腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配
对几乎完全融合状态。
5.
- 在以后不断的复制中仍不分开，所以唾腺染色体只呈
现二倍体染色体数目的单元数。
6.
- 由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体
的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。
2. 果蝇唾腺染色体的制备与观察
实验目的：
1. 练习取出果蝇唾腺的技术和制作唾腺染色体标本 的方法。
2. 观察唾腺染色体的特征：巨大、多线、体细胞联 会、横纹、疏松区 等。
3. 绘多线染色体图。
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实验原理：
•果蝇等双翅目类昆虫幼虫期有很大的 唾腺细胞，其中的染色体也很巨大： 宽约5μm，长约400μm，相当于普通 中期相染色体的100-150倍，称巨大染 色体（giant chromosome）
果蝇三龄幼虫。其它？ 剖取唾腺：
盲囊 脂肪体
气管
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唾腺
果蝇的唾腺
编辑ppt
果蝇的唾腺 2010
詹朝宇
柳珍
李连杰
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唾腺与肠道的区别
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步骤
解离：用滤纸吸取多余盐水，在唾腺上 滴一 滴 1M HCl ，解离2-3分钟，用蒸馏水洗净， 然后让唾腺在蒸馏水中吸涨10-15分钟
染色：将水吸干后滴上几滴改良苯酚品红于 唾腺上，染色10分钟（及时补充液）。
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步骤
压片：盖上盖玻片，左手指按压住，同时用 右手大拇指指肚稍用力摁压盖玻片，然后用 铅笔头轻敲盖片，最后用吸水纸吸尽多余染 液，使唾腺细胞核破裂，核中的染色体舒展 开来。
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实验原理
实验用具药品
实验步骤
三、实验原理
果蝇唾腺染色体特点： 果蝇唾腺染色体特点：
巨大， 多线染色体； 巨大，是多线染色体；
正常：间期DNA DNA复制 正常：间期DNA复制 两条染色单体 着丝点裂开 子染色体 核分裂 胞质分裂 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNA不断自我复制 不断自我复制， 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNA不断自我复制，着丝点不 裂开
解剖针 解剖针 唾腺
脂肪体
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
3、腺体解离： 腺体解离：
剥离脂肪体及其他杂物， 剥离脂肪体及其他杂物，分离出纯净的唾腺 ，用 吸水纸小心吸去生理盐水( 吸水纸小心吸去生理盐水(吸水纸不要太靠近标 以免标本丢失) 本，以免标本丢失) 。 加1滴1N HCl，浸2—3分钟，使组织疏松，以便 HCl， 分钟，使组织疏松， 压片时细胞分散，染色体散开。 压片时细胞分散，染色体散开。
2R 3L 4 4 2R 2L 3R X 3L 3R 2L X
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
果蝇唾腺染色体图
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
四、实验用具药品
1．仪器用具：显微镜、双目解剖镜、培养 仪器用具：显微镜、双目解剖镜、 瓶 、 载玻片、 盖玻片、 镊子、 解剖针、 吸 载玻片 、 盖玻片 、 镊子 、 解剖针 、 水纸、酒精灯、火柴等。 水纸、酒精灯、火柴等。 2．药品试剂：无水酒精、冰醋酸、1%醋酸 ．药品试剂：无水酒精、冰醋酸、1%醋酸 洋红、改良品红、生理盐水、1N盐酸、蒸 洋红、改良品红、生理盐水、1N盐酸、蒸 馏水。 3．培养基：玉米琼脂培养基。
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
5、压片： 压片：
用左手食指和拇指固定盖玻片位置，在盖玻片 用左手食指和拇指固定盖玻片位置， 上用解剖针柄轻轻敲压，将染色体完全压散。 上用解剖针柄轻轻敲压，将染色体完全压散。 再用右手拇指使劲按压。 再用右手拇指使劲按压。为使染色体铺展得舒 可站起来把上半身的体重施于右拇指上， 张，可站起来把上半身的体重施于右拇指上， 效果会更好。 效果会更好。
果蝇唾腺染色体模式核型
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
同源染色体紧密配对：体细胞联会，所以染色体只呈 同源染色体紧密配对：体细胞联会， 现单倍数； 现单倍数； 形成染色中心，从染色体中心处伸出5条长臂， 形成染色中心，从染色体中心处伸出5条长臂，1条短 臂； 染色后，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹； 染色后，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹；
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
6、观察： 观察：
将制片置低倍镜下找到分散好的标本， 将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野 低倍镜下找到分散好的标本 中心，然后转到高倍镜下观察。 高倍镜下观察 中心，然后转到高倍镜下观察。 分散良好、染色体臂充分伸展的片子 的片子， 对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细 观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序， 观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，对照 模式照片辨认出不同的染色体臂。 模式照片辨认出不同的染色体臂。实验目的来自实验材料实验原理
实验用具药品
实验步骤
五、实验步骤
1、选取幼虫； 、选取幼虫 幼虫； 2、腺体剖取 ； 、 3、腺体解离 ； 、 4、染色； 、染色； 5、压片； 压片； 6、观察； 观察；
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
1、选取幼虫： 选取幼虫：
取三龄幼虫，置于载玻片上， 取三龄幼虫 ， 置于载玻片上 ， 并滴加一滴生理盐 观察幼虫结构： 水 ， 观察幼虫结构 ： 具一钝尾和带黑色口器的尖 头端
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
4、染色： 染色：
用吸水纸吸去盐酸， 用吸水纸吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干， 滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干， 重复3 重复3～4次，洗净残留的盐酸。 洗净残留的盐酸。 加2滴石炭酸品红染液，染色10—20分钟（此过程 滴石炭酸品红染液，染色10 20分钟 10— 分钟（ 应保持腺体一直处于染液的浸泡中） 应保持腺体一直处于染液的浸泡中）。
尾
头
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
2、腺体剖取： 腺体剖取：
取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近头端 处 取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近头端1/3处，固定幼 虫，另一针压住幼虫头部，压点尽可能靠头部口器处。 另一针压住幼虫头部，压点尽可能靠头部口器处。 将解剖针果断、快速、有力前移，使头部与身体拉开， 将解剖针果断、快速、有力前移，使头部与身体拉开，口器 部分断开，体内各器官从切口挤出，一对唾腺也随之而出。 部分断开，体内各器官从切口挤出，
六、作业及思考题
检查你制作的制片， 寻找形态良好、 检查你制作的制片 ， 寻找形态良好 、 分散 适中的图象仔细观察各条臂的特点。 适中的图象仔细观察各条臂的特点。 画图。 画图。
要求：把不用的果蝇培养瓶清洗干净， 要求：把不用的果蝇培养瓶清洗干净，交 给于老师。 给于老师。
遗传学实验操作考试
题目—果蝇唾腺染色体的制片 一、题目 果蝇唾腺染色体的制片 二、考试要求及评分标准 要求在1.5小时内 独立完成。 1.5小时 1、要求在1.5小时内，独立完成。 实验仪器的使用、操作是否规范。 2、实验仪器的使用、操作是否规范。 能否成功辨认、分离出唾液腺腺体。 3、能否成功辨认、分离出唾液腺腺体。 脂肪体分离是否干净、彻底。 4、脂肪体分离是否干净、彻底。 染色是否均匀、深浅适度。 5、染色是否均匀、深浅适度。 唾腺染色体、臂的伸展程度。 6、唾腺染色体、臂的伸展程度。 玻片的清洁程度、即视野背景干净程度。 7、玻片的清洁程度、即视野背景干净程度。 盖玻片的位置是否合适、端正。 8、盖玻片的位置是否合适、端正。 实验结束的用具、仪器，整理是否到位。 9、实验结束的用具、仪器，整理是否到位。
湖州师范学院 生命科学学院生物系
一、实验目的 二、实验材料 三、实验原理 四、实验用具药品 五、实验步骤
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
一、实验目的
了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征； 学习分离果蝇幼虫唾液腺的技术 ； 掌握唾液腺染色体制片方法。 掌握唾液腺染色体制片方法。
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
二、实验材料
野生型果蝇三龄幼虫
图1 果蝇生活史 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫 卵 一龄幼虫 三龄幼虫 蛹 成虫
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
三龄幼虫
蛹
一龄幼虫 两龄幼虫
果蝇不同生活周期形态观察
实验目的
实验材料