西安电子科技大学食品中微量铁的测定实验讲义(word版本)
测定微量元素铁
测定微量元素铁，主要用邻二氮菲分光光度法测定微量铁原子吸收分光光度计样品的前处理比较重要，根据试样是否无机或者有机，有机试样需消化，通常固体干样0.5-1.5g，湿样2.0-4.0g，液体5.0-10.0g于250ml锥形瓶中，加混合酸（1:4硝酸，高氯酸）20-30ml与电热板上加热消化，如未消化好而酸液过少时，再补加混酸，继续消化，直至无色透明，再加几毫升谁，以除去多余的硝酸，待试液接近2-3ml，取下冷却，用去离子水洗并转移至10ml试管中，加水定容至刻度。
同时取余消化试样相同两的混合酸消化液，安上述做空白试验一、实验目的1.学习如何选择分光光度分析的条件；2.学习分光光度法测铁的操作方法。
二、实验原理可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。
为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件。
这些条件主要包括入射波长、显色剂用量、有色溶液稳定性、溶液酸度等。
（1）入射光波长一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光，这样不仅灵敏度高，准确度也好。
当有干扰物质存在时，不能选择最大吸收波长，可根据“吸收最大，干扰最小”的原则选择波长。
（2）显色剂用量显色剂的合适用量可通过实验确定。
配制一系列被测元素浓度相同不同显色剂用量的溶液，分别测其吸光度，作曲线，找出曲线平台部分，选择合适用量即可。
（3）溶液酸度选择合适的酸度，可以在不同pH缓冲溶液中，加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作曲线，从曲线上选择合适的pH范围。
（4）有色配合物的稳定性有色配合物的颜色应当稳定足够的时间，至少应保证在测定过程中，吸光度基本不变，以保证测定结果的准确度。
三、仪器及试剂1.仪器：分光光度计100.0容量瓶1个、1.0吸量管1个、50.0容量瓶8个、10.0移液管1支、10.0吸量管1支、5.0吸量管3支、2.0吸量管1支2．试剂：铁标准溶液：10.0、氢氧化钠溶液：1.0、邻二氮菲溶液：1.5盐酸羟胺溶液：100.0、醋酸钠溶液：1.0四、准备工作（1）清洗容量瓶、移液管及需用的玻璃器皿。
实验讲义-分光光度法测定微量铁的含量
实验一分光光度法测定微量铁的含量Ⅰ．实验目的(1)掌握用邻二氮菲显色法测定铁的原理和方法。
(2)了解分光光度计的构造及分光光度计的正确使用。
(3)学会工作曲线的制作和样品的测定。
Ⅱ．实验用品仪器：721型(或其他型号)分光光度计、50mL容量瓶、吸量管。
药品：(NH4)2 Fe(SO4)2·6H2O（分析纯）、邻二氮菲（分析纯）、盐酸羟胺（分析纯）、NaAc（分析纯）、无水乙醇（分析纯）溶液配制：（1）. 10.0 μg·mL-1(即0.01 mg·mL-1)铁标准溶液：准确称取１０．０ｍg(NH4)2 Fe(SO4)2·6H2O于烧杯中，用2 mol·L-1盐酸15 mL溶解，移入１０00 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
再准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液；（2）. 0.15％邻二氮菲溶液(临时配制)：先用少许乙醇溶解，再用水稀释；（3）. 盐酸羟胺溶液10％(临时配制)；（4）. NaAc溶液1mol·L-1。
Ⅲ．实验原理在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺或抗坏血酸还原Fe3+为Fe2+，在pH=2~9范围内，使Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物[Fe(C12H8N2)3] 2+，其lgK f=21.3，λmax=510nm。
反应式如下：本方法不仅灵敏度高(摩尔吸光系数ε= 1.1×104L·mol·cm-1)，而且选择性好，相当于含铁量40倍的Sn2+，Al3+，Ca2+，Mg2+，Zn2+，SiO32-,20倍的Cr3+，Mn2+，PO43-；，5倍的Co2+，Cu2+等均不干扰测定。
在分光光度法中，一般均选用有色物质的最大吸收波长λmax作为入射光波长(除非在该波长下有干扰)，这样，测量的灵敏度和准确度都较高。
λmax通常通过制作吸收曲线得到，方法是：取待测物的1个标准溶液，在不同的波长(λ)下测量其吸光度(A)，以A对λ作图，便得吸收曲线，曲线波峰所对应的波长即为最大吸收波长。
食品中铁含量的测定 (2)
• （5）1mol/L NaAC 溶液：称取NaAC固体68g， 置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。 、 (6) 0.4 mol/L NaOH溶液：称取8.0g NaOH固体于试剂瓶 中，加500 ml水溶解。 (7) 2mol/l HCl溶液： 用移液管准确移取浓盐酸10ml于50ml容量瓶中， 定容，摇匀。 (8) 1：1 HCl溶液：用移液管准确 移取浓盐酸25ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。 （9）8mol/LNaOH溶液：称取160.0gNaOH固体 溶于烧杯中，冷却后移入500mL容量瓶，定容， 摇匀。 • 3.实验用品：鸡蛋黄。
。
• 用吸量管取蛋黄溶液5ml置于50ml容量瓶中， 加入1.0m 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入1.0mol/L NaAc溶液5.0ml再分别加 入1.5ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容至离 刻度线1cm处测量PH，若PH较小,则加入 8mol/ml的NaOH调节PH至5-6位为止，记 录滴数为10滴，并测量其吸光度。
实验仪器及药品
• 1.主要仪器与设备：721型分光光度计，马福炉， 电热炉，容量瓶，移液管，普通天平，电子天平， 比色管，电子天平，烧杯，移液管，比色皿，漏 斗及漏斗架等。 • 2.试剂： （1）400ug/ml铁标准溶液：准确称取 0.864g 分析纯NH4Fe(SO4)2•12H2O，置于烧杯 中用30ml 2mol/L盐酸溶解后移入500ml容量瓶中， 定容，摇匀。 • （2）20ug/ml 铁标准溶液：由400ug/ml的铁标准 溶液溶液准确稀释20倍而成。 （3） 0.2%邻二氮 杂菲溶液：准确称取邻二氮杂菲1g，置于试剂瓶 中，加500 ml水溶解。 • （4）10%盐酸羟胺溶液：称取盐酸羟胺固体50g， 置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。
微量铁的测定实验报告
微量铁的测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过分光光度法测定样品中的微量铁，掌握该方法的操作技术和数据处理方法，提高实验技能和实验分析能力。
同时，通过实验深入了解微量铁在环境、生物、医学等领域的重要性和应用价值。
二、实验原理分光光度法是一种常用的定量分析方法，其原理基于朗伯-比尔定律。
该定律指出，溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度成正比。
在一定波长下，通过测量溶液的吸光度可以推算出溶液的浓度。
对于微量铁的测定，通常采用邻啡啰啉分光光度法。
邻啡啰啉是一种显色剂，可以与铁离子形成黄色的络合物。
在一定波长下，通过测量该络合物的吸光度可以计算出铁离子的浓度。
具体的实验操作流程如下：1.样品处理：将样品进行适当的预处理，如消解、萃取等，以释放出样品中的铁离子。
2.显色反应：在酸性条件下，加入适量的显色剂邻啡啰啉，与铁离子发生显色反应，形成黄色的络合物。
3.分光光度测量：在一定波长下，使用分光光度计测量络合物的吸光度。
4.数据处理：根据测得的吸光度和标准曲线，计算出铁离子的浓度。
三、实验过程1.实验准备（1）实验仪器：分光光度计、容量瓶、移液管、比色皿等。
（2）试剂：铁标准溶液、邻啡啰啉溶液、浓硝酸、过硫酸铵等。
2.样品处理：根据样品的性质选择适当的预处理方法，如消解、萃取等，以释放出样品中的铁离子。
3.显色反应：取适量处理后的样品溶液，加入适量的显色剂邻啡啰啉，摇匀后静置一定时间，使络合物充分形成。
4.分光光度测量：在波长为510nm处，使用分光光度计测量显色后样品溶液的吸光度。
5.数据处理：根据测得的吸光度和标准曲线，计算出铁离子的浓度。
四、实验结果与数据分析1.标准曲线的绘制：根据不同浓度的铁标准溶液进行显色反应后，在波长为510nm处测量其吸光度，绘制出标准曲线。
标准曲线的线性回归方程为y = 0.007x + 0.002，相关系数为0.999。
说明在该实验条件下，铁离子浓度与吸光度具有良好的线性关系。
食品中铁的测定(邻菲罗啉比色法)实验报告
食品中铁的测定（邻菲罗啉比色法）1 目的熟练掌握直接灰化法的原理，操作及注意事项。
以铁的测定为代表，掌握灰化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握消化法的原理，操作及注意事项。
以铁的测定为代表，掌握消化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握邻菲罗啉比色法测铁的原理、操作及注意事项。
2 原理2.1 灰化食品经高温灼烧至恒重，残留物称重称为灰分；2.2 消化样品与浓硫酸和催化剂一同加热，可使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出，食品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵；2.3 比色法测铁样品经灰化(或消化)，用抗坏血酸将三价铁还原为二价铁，二价铁与邻菲罗啉反应生成红色络合物，在520nm下测其光吸收强度A，根据A值在，再计算样品中铁的含量。
标准曲线上查对应二价铁浓度得C样3 试剂硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、邻菲罗啉、铁标准溶液（C=10ug/mL）。
4 仪器4.1 灰化：瓷坩埚、灰化炉、干燥器、精密天平；4.2 消化：定氮瓶、铁架台、电炉；4.3 比色法测铁：水浴锅、可见光分光光度计、25mL比色管。
5 样品学生营养奶粉6 操作方法6.1 样品的灰化处理及样品中灰分的测定6.1.1恒重处理取大小适宜的两个瓷坩埚（标号1、2）置于高温炉中，在600℃下灼烧0.5h，冷却至200℃以下后，取出，放入干燥器中冷却置室温，精密称量，并重复灼烧至恒重。
6.1.2 样品称量分别向1、2号瓷坩埚中加入奶粉5.0001g和5.0000g后，精密称量。
6.1.3 预灰化把两个坩埚置于电炉上，半盖坩埚盖，以小火加热至样品充分炭化无黑烟产生，取下坩埚，各加入两滴HNO3溶液。
6.1.4 正式灰化炭化后，把两个坩埚放置在600℃高温炉中灼烧至无炭粒，打开炉门，将坩埚移至炉口处冷却至200℃左右，放入干燥器中冷却至室温，称量。
重复灼烧至前后两次称量之差不超过0.5mg为恒重。
6.1.5制备灰化液分别向1、2号坩埚中加入盐酸2mL溶解，并移入100mL容量瓶中，用少量水洗坩埚，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀，制成1、2号灰化液备用。
化学探究实验报告食物中微量铁的测定
西安电子科技大学化学探究实验课程实验报告实验名称食物中微量铁的测定学院班Array姓名学号同作者实验序号实验日期2020 年7 月16日一、实验目的了解分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
掌握朗伯－比耳定律及其应用。
掌握吸收曲线及标准曲线的概念及其应用。
二、实验原理葡萄、大枣、味精及酱油等食品中铁含量的测定可以采用邻菲罗啉可见分光光度法，通过这种测定方法，可以对铁进行定量测定。
分光光度法测定物质含量是应注意的主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂的用量、介质的酸度、显色时间、显色时溶液的温度、干扰物的消除方法等。
测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
本实验主要选用邻二氮菲光度法测铁在入射光波长、络合物溶液的稳定性、显色剂浓度、溶液pH 值的影响等几个方面确定实验的最佳条件。
三、仪器、药品及实验装置仪器721 型分光光度计，1 cm 吸收池，2 mL ,1 mL, 10 mL 吸量管，50 mL 比色管等试剂1.0×10 -3 mol·L -1 铁标准溶液，100μg·mL-1 铁标准溶液，0.15%邻二氮菲水溶液，10% 盐酸羟胺溶液，乙酸钠溶液，四、实验步骤1.吸收曲线的制作和测量波长的选择在50ml 比色管中按次序准确加入以下溶液，10μg/ml 铁标准溶液5ml，10%盐酸羟胺1ml，再加入1mol/LNaAc5ml，0.15%邻二氮菲3ml。
用水稀释至刻度。
在分光光度计上，用1cm 比色皿以水为参比溶液，从440~580nm 之间测定吸光度（A）。
每隔20nm 测定一次，其中从480~540nm，每隔10nm 测定一次。
最后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线。
从吸收曲线上找出最大吸收的波长，用以进行铁的标定。
2.铁含量的测定（1）标准曲线的制作在6 个50ml 比色管中，用吸管分别加入0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml 10μg/ml 铁标准溶液，10%盐酸羟胺1ml，再加入1mol/LNaAc5ml，0.15%邻二氮菲2ml。
微量铁的实验报告
一、实验目的1. 掌握微量铁的测定方法；2. 熟悉分光光度计的使用；3. 学会标准曲线的制作和数据分析。
二、实验原理分光光度法是一种基于物质对特定波长光的吸收特性进行定性和定量分析的方法。
在本实验中，我们采用邻二氮菲分光光度法测定微量铁。
邻二氮菲是一种能与铁离子形成橙红色络合物的有机试剂，其最大吸收峰在510nm处。
根据朗伯-比尔定律，吸光度与溶液中待测物质的浓度成正比。
通过绘制标准曲线，可以测定未知样品中微量铁的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、移液管、容量瓶、具塞比色管、玻璃棒、pH计、磁力搅拌器等。
2. 试剂：邻二氮菲溶液、铁标准溶液、盐酸、氢氧化钠、pH缓冲溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 准备标准溶液：分别移取一定量的铁标准溶液于50ml容量瓶中，加入适量蒸馏水，用盐酸调节pH值至3.5-4.0，加入一定量的邻二氮菲溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
配制成一系列浓度的铁标准溶液。
2. 标准曲线制作：分别取上述标准溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml于50ml具塞比色管中，加入适量蒸馏水，用盐酸调节pH值至3.5-4.0，加入一定量的邻二氮菲溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
以蒸馏水为参比，在510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线。
3. 未知样品测定：取适量未知样品于50ml具塞比色管中，加入适量蒸馏水，用盐酸调节pH值至3.5-4.0，加入一定量的邻二氮菲溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
以蒸馏水为参比，在510nm波长下测定吸光度。
4. 数据分析：根据标准曲线，从横坐标上找到对应吸光度的浓度值，即为未知样品中微量铁的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线制作：根据实验数据绘制标准曲线，得到线性方程为：A=0.046c+0.013，相关系数R²=0.998。
2. 未知样品测定：取未知样品进行测定，得到吸光度为0.278，根据标准曲线计算得到微量铁含量为0.28mg/L。
6食品中铁的测定（可编辑）
6食品中铁的测定实验六食品中铁的测定一、实验目的1. 了解食品中铁含量测定的意义与原理；2. 掌握分光光度计的使用方法及原理；3. 掌握铁标准曲线的制备方法。
二、基本原理邻二氮杂菲是测定微量铁较好的试剂。
在pH为2~9的溶液中，邻二氮杂菲与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，比色后即可定量。
显色反应如下：三、实验器材1. 仪器：721分光光度计，1cm比色皿，50mL容量瓶10只，5mL 吸液管一支，10mL吸液管一支，200mL烧杯2 只，洗瓶一只。
2. 试剂：（1）盐酸羟胺溶液(100 g/L)：称取100 g盐酸羟胺，用水溶解并稀释至1000mL；（2）盐酸：1：1和1：9溶液；（3）乙酸钠溶液(450g/L)：称取45g乙酸钠,加水溶解并稀释至100mL；（4）0.2[%]邻二氮杂菲：称取0.20g邻氮二杂菲于烧杯中，加60mL水，加热溶解(不超过80℃)，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；（5）铁标准贮备液(1mL溶液含有0.1 mg铁)：准确称取0.8634g 分析纯NH4Fe(S04)2??12H2O于200mL烧杯中，加入20mL 6mol/L HCl 和少量水，溶解后转移至1L容量瓶中，稀释至刻度，摇匀；（6）铁标准使用液(1mL溶液含 2μg铁)：吸取铁标准贮备液20.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，此溶液每毫升含0.02 mg铁，吸取铁标准贮备液10.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，此溶液每毫升含2μg铁。
四、操作步骤1. 样品的处理：（1）干法：吸取25.00mL 试样(V)于蒸发皿中,在水浴上蒸干,置于电炉上小心炭化，然后移入 550±25℃高温电炉中灼烧,灰化至残渣呈白色,取出,加入10mL1＋1盐酸溶解，在水浴上蒸至约2mL，再加入5mL水加热煮沸后,移入50mL容量瓶中，用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶，加水稀释至刻度(V2)，摇匀。
2020 食品中微量铁的测定课件ppt
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4. pH值的选择 表4 酸度pH的选择
pH值 吸光度A
3
4
5
6
7
注意：（1）注意pH的测量范围； （2）吸光度A保留3位有效数字。
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5. 标准曲线的绘制
表5 标准曲线的绘制
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六、数据记录和处理
1. 吸收曲线的绘制
表1 吸收曲线的绘制
波长λ/nm 吸光度A
注意：（1） 入射光的波长范围450-580nm; （2）吸光度A保留3位有效数字。
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2. 显示反应时间的选择
2. 吸收曲线的绘制 用1 cm吸收池，以试剂空白溶液(1号 比色管)为参比，在440-560 nm之间，每隔10 nm测定 一次标准溶液(2号)的吸光度A，以波长为横坐标，吸 光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最 大吸收波长。
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该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优 点。
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在pH=2-9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生
成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+：
3
NN
+ Fe2+
2+
NN
N Fe N
NN
此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，
实验二FeCl3中微量铁的测定
标准曲线制备实例
精密称取对照品1.110mg用甲醇溶解并定容至 10ml，用移液管精密移取0.4ml, 0.8ml，1.2ml， 1.6ml，2.0ml，2.4ml分别定容于10ml容量瓶，以此 为对照溶液，在268nm下测其吸收度，测定结果见 表Table2
Table 2 Linear Relationship of Standard Material
四.操作步骤
1.标准曲线的制作 以标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸 光度为纵坐标，绘制成A-C曲线即为标 准曲线。
具体步骤：
在6只10ml容量瓶中，用吸量管分别加入 0.0,0.4,0.8, 1.2,1.6,2.0ml 铁标准溶液 (硫酸铁铵每ml含Fe3+20μg),分别加入 0.2ml盐酸羟胺,0.4ml邻二氮菲,1.0ml HAc-NaAc缓冲溶液,用水稀释至刻度后摇 匀,放置5min.用1cm比色皿,以0.0ml铁标 液为试剂空白,在所选波长(508nm)下,测 量各溶液的吸光度.以铁含量为横坐标,吸光 度A为纵坐标,绘制标准曲线.
思考题
• 显色反应操作中,加入的各标准溶液与样
品液的含酸量不同,对显色有无影响?
• 据制备标准曲线测得的数据,判断本次实
验得浓度与吸光度间的线性好不好,分析 其原因.
注意事项
• 待测溶液装量应超过比色皿2/3，但也不
能装得太满。
• 实验过程中，注意不要将溶液撒入机器内
部，如果发生上述情况，请及时清理干净。
• 及显色条件的选择
显色时,溶液PH值应为2～9.若酸度过高 (PH<2）显色缓慢而色浅;若酸度过低,二 价铁离子易水解.最大吸收波长为 508nm,ε= 11100.
仪器与试剂
微量铁的测定方法
微量铁的测定方法微量铁的测定，这可真是个有趣的事儿啊！你想想，那小小的微量铁，就像个调皮的小精灵，藏在各种物质里，得想办法把它给揪出来呢！咱先说最简单的一种方法，比色法。
就好像我们在一堆颜色里找特定的那一抹色彩一样。
把样品处理一下，加入一些特定的试剂，然后这微量铁就会和试剂发生反应，变出一种独特的颜色。
嘿，这时候你就可以通过和标准颜色进行比较，来确定铁的含量啦！是不是挺神奇的？就好像你能一眼看穿那小精灵躲在哪里一样。
还有原子吸收光谱法呢！这就像是给微量铁拍了一张超级清晰的“照片”。
用特定的光线去照射样品，铁原子会吸收特定波长的光，根据吸收的程度，就能知道铁有多少啦！这感觉就像是拿着个神奇的“相机”，一下子就把微量铁给抓住了。
分光光度法也不错呀！它就像是给微量铁穿上了一件特别的“衣服”，这件“衣服”会让它在特定的光线下闪闪发光，然后我们就能根据这光芒来判断它的存在和数量啦。
你说这微量铁的测定是不是很有意思？就像我们在玩一个找宝藏的游戏，只不过这个宝藏是小小的微量铁。
那我们怎么才能玩好这个游戏呢？首先得细心呀，不能放过任何一个细节。
然后要有耐心，可不能着急，慢慢去探索。
在实际操作中，可不能马虎哦！每一步都要认真对待，就像做饭一样，调料放错了或者火候不对，那味道可就差远啦！样品的处理要恰到好处，试剂的选择和使用要准确无误，这样才能得到准确的结果呀。
想想看，如果我们能准确地测定微量铁的含量，那能解决多少问题呀！比如在食品检测中，能确保我们吃的东西安全可靠；在环境监测中，能了解环境的状况。
这可不是小事儿呢！所以啊，大家可别小瞧了这微量铁的测定，它虽然小，但作用可大着呢！就像一颗小小的螺丝钉，看似不起眼，但在整个机器中却有着不可或缺的作用。
让我们都认真对待这个小小的微量铁吧，把它的秘密都给挖出来！让我们在这个探索微量铁的世界里，尽情享受发现的乐趣吧！原创不易，请尊重原创，谢谢!。
实验六十一食物中铁元素含量的测定一、实验目的：通过本实验了解...
实验六十一食物中铁元素含量的测定一、实验目的：通过本实验了解数字化实验和色度计的基本使用方法，培养进行探究性实验的兴趣；二、实验原理：将食物灼烧完全炭化后用酸浸取，可以将食物中的铁元素转化为Fe3＋溶液，Fe3＋在溶液中的浓度越大，对光的吸收程度越大，即透光率（T）越小。
透光率与Fe3+浓度符合以下关系式： lg（1/T）＝Kc 式中T为透光率，可以用色度计测定；K为一常数，它与溶液的性质和溶液液层的厚度有关；c为溶液的浓度，单位为mol/L。
用比色皿分别盛装浓度不同的Fe3+标准溶液，放入色度计中测量它们的透光率，计算出相应的lg（1/T）值，绘制lg（1/T）－c曲线，即标准曲线。
测定由食物转化得到的Fe3+溶液的透光率，计算相应的lg（1/T）值，即可在标准曲线上查到对应的浓度。
三、实验器材：计算机、5104D数据采集器、色度计、试管、试管架、坩埚、酒精灯、石棉网、Fecl溶液、KSCN溶液、硝酸、传感器连接线若干、USB连接线等；3图 1.食物中铁元素含量的测定实验装置图四、实验准备：1.实验试剂配制和材料准备（1）色度计的白平衡（2）标准溶液的配制在1-5号洁净干燥的小烧杯中分别按照下表中的剂量配制，再加入几滴饱和KSCN溶液(注意滴加KSCN溶液的量应该是相同的)，混合均匀。
表1.标准溶液的配制烧杯编号Fe3+(10-3mol/l) HO 标准溶液浓度 10-4mol/L21 10 0 102 8 2 83 64 64 4 6 45 2 8 2（３）红枣中Ｆe3+的提取称取红枣①用天平称取红枣50 g，用手将其撕成小块，放入坩埚中用酒精灯灼烧，使之完全炭化；②用3 mL 2 mol·L-1的硝酸溶解，过滤，再用少量稀硝酸洗涤滤渣2～3次，将溶液转移到100 mL的容量瓶中定容；③取出10mL样品溶液，再滴加几滴饱和KSCN溶液（与配制标准溶液时加入的KSCN溶液的量相同），混合均匀。
实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁【实验目的】1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4.掌握标准曲线绘制及应用。
【实验原理】邻二氮菲是一种有机配位剂，可与二价铁离子形成红色配位离子，在pH=3~9范围内，该反映能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为0.00011，反映十分灵敏，二价铁离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的三价铁离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。
【实验仪器与数据】1. 722型或752型分光光度计2. 标准铁储备溶液（0.001mol/L）3. 邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4. 盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5. 醋酸盐缓冲溶液6. 50ml容量瓶7个7. 5ml移液管4只8. 1cm玻璃比色皿2个9. 铁样品溶液【实验步骤】长处的吸光度；在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
3.标准曲线制作在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7好溶液的吸光度，平行测定三次，计算吸光度的平均值；在坐标纸上一吸光度平均值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标制图，绘制标准曲线。
【原始数据】【数据处理】【实验结果】标准曲线线性方程为y=0.1182x-0.0308 由于样品溶液吸光度为0.564所以算得样品溶液的浓度为5.032*10 -5mol/L则样品溶液中铁的含量为：0.001摩尔吸收系数为：11550【实验相关讨论】在实验中，510nm和512nm处吸光度均最大，所以在加测一组当波长为511nm时的吸光度为0.675。
在实验中，配制标准液是应尽量减少操作上带来的误差，尽量使结果精确。
实验报告测定微量铁
一、实验目的本实验旨在通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量，掌握该方法的基本原理和操作步骤，并了解实验过程中的注意事项。
二、实验原理邻二氮菲分光光度法是一种测定微量铁含量的常用方法。
该方法基于铁离子与邻二氮菲在特定pH值下生成稳定的橙红色络合物，其最大吸收波长为510nm。
根据朗伯-比耳定律，吸光度与溶液中铁离子浓度成正比。
通过测定溶液的吸光度，可以计算出微量铁的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：可见分光光度计、721型分光光度计、1cm比色皿、具塞比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
2. 试剂：（1）铁贮备液（100g/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe （SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升11 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0g/mL。
（2）铁标准使用液（20g/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe2的质量浓度为 20.0g/mL。
（3）0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加0.5克邻菲罗啉于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
（4）HAc-NaAc缓冲溶液（pH=5）：准确称取1.8g醋酸铵和2.5g醋酸，加水溶解，定容至100ml。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）准确移取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml铁标准使用液于50ml容量瓶中，分别加入1mlHAc-NaAc缓冲溶液，2ml邻菲罗啉水溶液，用水定容至刻度。
（2）将溶液在510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，铁离子浓度为横坐标绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）准确移取一定量的待测样品于50ml容量瓶中，加入1mlHAc-NaAc缓冲溶液，2ml邻菲罗啉水溶液，用水定容至刻度。
实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验
实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验一、目的要求1. 通过本实验学习确定实验条件的方法；2. 学习Vis-723G型分光光度计的使用方法。
二、基本原理在可见光分光光度测定中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测量其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色反应的完全程度和吸光度的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。
显色反应的完全程度取决于介质的酸度，显色剂的用量、反应的温度和时间等因素。
在建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。
为此，可改变其中一个因素(例如介质的pH值)，暂时固定其它因素，显色后测量相应溶液的吸光度，通过吸光度－pH曲线确定显色反应的适宜酸度范围。
其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。
本实验以邻二氮菲为显色剂，找出测定微量铁的适宜显色条件。
三、仪器及试剂1. 仪器Vis-723G型分光光度计(上海分析仪器厂)；容量瓶50mL，250mL；吸量管5mL，10mL；吸量管25mL，10 mL，5 mL，2 mL；pH计；玻璃复合电极。
2.试剂①铁盐标准溶液准确称取若干克(自行计算)优级纯的铁铵矾NH4Fe(SO4)2·12H2O于小烧杯中，加水溶解，加入6mo1·L－1 HCl溶液5mL，酸化后的溶液转移到250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0．100mg。
然后吸取上述溶液25．00mL置于250mL容量瓶中，加入6mo1·L－1 HCl 溶液5mL, 用蒸馏水稀释至刻度，描匀，所得溶液含铁0．0100mg·mL—1。
②0．1％邻二氮菲(又称邻菲咯啉)水溶液③1％盐酸羟胺水溶液④HAc－NaAc缓冲溶液(pH=4．6) 称取136g优级纯醋酸钠，加120mL 冰醋酸，加水溶解后，稀释至500mL。
⑤0．1mo1．L－1NaOH溶液⑥0．1mo1．L－1HCl溶液⑦广泛pH试纸和不同范围的精密pH试纸注：上述试剂中，有特殊说明的除外，其余均为分析纯试剂或由分析纯试剂所配制。
食品中微量铁的测定实验指导
实验四邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、掌握分光光度计的使用方法和测定原理。
2、掌握标准曲线的绘制方法（绘图法、回归法）。
二、实验原理在pH2-9的溶液中，二价铁离子能与邻二氮菲生成稳定的橙红色络合物，在510nm有最大吸收，其吸光度与铁的含量成正比，故可比色测定。
反应式如下：pH＜2时反应进行较慢，而酸度过低又会引起二价铁离子水解，故反应通常在pH＝5左右的微酸条件下进行。
三、仪器和试剂1、仪器：721或722型分光光度计2、试剂(1) 10％盐酸羟胺溶液（新配）(2) 0.12％邻二氮菲水溶液：避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用(3)1mol／L盐酸溶液(4) 10％醋酸钠溶液（5）铁标准贮备液：1000μg /mL。
准确称取1.000g纯金属铁溶于1+1盐酸50mL 中，用水稀释定容至1000mL。
（也可用硫酸亚铁配制。
准确称取4.979g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)溶于l00m L水中，加入5mL浓硫酸微热溶解，用水定容至l000mL，摇匀，得标准贮备液）（6）铁标准工作液：10μg /mL。
吸取铁标准贮备液10mL，定容至1000mL。
四、实验步骤①样品处理：称取均匀样品10.0g，干法或湿法消化后，加入2mL1+1盐酸，在水浴上蒸干，再加入5mL蒸馏水，加热煮沸后移入100mL容量瓶中，以水定容，混匀。
②标准曲线绘制：吸取10μg／mL铁标准溶液(标准溶液吸取量可根据样品含铁量高低来确定)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于25mL容量瓶中，加入1mol／L盐酸溶液1mL，10％盐酸羟胺1m1，0.12％邻二氮菲lmL，然后加入10％醋酸钠5mL，用水稀释至刻度，摇匀，以不加铁的试剂空白溶液作参比液，在510nm 波长处，用1cm比色皿测吸光度，绘制标准曲线。
③样品测定：准确吸取样液5-10mL (视含铁量高低而定)于25mL容量瓶中，以下按标准曲线绘制操作，测定吸光度，在标准曲线上查出相对应的铁含量(μg)。
《微量铁的测定》课件
通过测定高铁素血红蛋白与铁的反应来测定微量铁的含量。
2
毛细管电泳法
利用毛细管中的电场将铁离子分离并测定其浓度。
3
高效液相色谱法
利用高效液相色谱技术对铁离子进行定量分析。
实验注意事项
安全注意事项
在进行实验前，确保采取合适的安全措施，包括佩戴防护手套和眼镜。
实验条件控制
维持实验室温度和湿度稳定，以确保可靠的实验结果。
常见误差及其避免方法
了解并避免实验中可能导致的常见误差，如货样准备、溶液配制等方面。
实验结果分析
实验数据处理及分析
对实验结果进行数据处理和统计分 析，找出关键信息和趋势。
结果解读
解读实验结果，分析铁的含量和相 关因素对实验结果的影响。
发现与问题讨论
探讨实验中发现的问题和不确定因 素，提出解决方法的优缺点， 以及在特定情况下的应用建议。
实验结果总结
对实验结果进行总结和归纳， 提出主要发现和结论。
对未来实验改进的建议
基于实验过程中的经验和分析， 提出对未来实验改进的建议。
《微量铁的测定》PPT课 件
微量铁的测定是一项重要的实验技术，本课件将介绍微量铁的测定方法、实 验步骤以及结果分析，旨在帮助读者更好地理解和应用该技术。
简介
微量铁是指含量相对较低的铁元素，广泛应用于环境、生物和药物等领域。我们将探讨为什么需要测定微量铁以及 其应用的重要性。
测定方法
1
高铁素血红蛋白法
任务十测定食品中的营养元素2讲课文档
混合酸消化液（硝酸+高氯酸=4+1）、钠及钾标准储备溶液、钾标准使用液、钠 标准使用液。
❖ 8．仪器
火焰光度计、250mL高型烧杯、电热板。
*
21
第21页，共53页。
❖ 四、相关知识
（一）食品中钠、钾含量测定——火焰发射光谱法原理
❖ 样品处理后，导入火焰光度计中，经火焰原子化后，分别测定钾、钠的 发射强度，钾发射波长766.5nm，钠发射波长589nm，其发射强度与其 含量成正比，与标准系列比较定量。
混合酸(硝酸+高氯酸=5+1)、1mol/L盐酸、锌标准储备液、标准使用液。
*
15
第15页，共53页。
❖ 四、相关知识
（一）食品中锌含量测定——火焰原子吸收光谱法原理
❖ 样品经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸 收波长213.8nm的共振线，其吸收量与锌含量成正比，与标准曲线 比较定量。
2．试剂空白液制备
❖ 取与消化试样相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。
3．钙标准系列制备
❖ 分别准确吸取1.0、2.0、3.0、4.0、6.0mL钙标准使用液，分别置于50 mL容 量瓶中，2%氧化镧溶液稀释至刻度，混匀，此标准系列每毫升含钙量分别 为0.5、1.0、1.5、2.0、3.0μg。
❖ 7．试剂
混合酸消化液（硝酸+高氯酸=4+1）、0.5mol/L硝酸溶液、铁标准溶液。 ❖ 8．仪器
原子吸收分光光度计、铁空心阴极灯。
*
7
第7页，共53页。
❖ 四、相关知识
（一）食品中铁含量测定——火焰原子吸收光谱法原理 ❖ 试样经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，铁吸收248.3nm的 共振线，吸收量与其含量成正比，与标准系列比较定量。
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实验三食品中微量铁的测定
一、实验目的
1.了解分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
3.掌握朗伯－比耳定律及其应用。
4.掌握吸收曲线及标准曲线的概念及其应用。
二、实验原理
葡萄、大枣、味精及酱油等食品中铁含量的测定可以采用邻菲罗啉可见分光光度法，通过这种测定方法，可以对铁进行定量测定。
分光光度法测定物质含量是应注意的主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂的用量、介质的酸度、显色时间、显色时溶液的温度、干扰物的消除方法等。
测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
本实验主要选用邻二氮菲光度法测铁在入射光波长、络合物溶液的稳定性、显色剂浓度、溶液pH 值的影响等几个方面确定实验的最佳条件。
三、仪器、药品及实验装置
1.仪器
721 型分光光度计，1 cm 吸收池，2 mL ,1 mL, 10 mL 吸量管，50 mL 比色管等
2.试剂
1.0×10 -3 mol·L -1 铁标准溶液，100μg·mL-1 铁标准溶液，0.15%邻二氮菲水溶液，10% 盐酸羟胺溶液，乙酸钠溶液，
四、实验步骤
1.吸收曲线的制作和测量波长的选择
在50ml 比色管中按次序准确加入以下溶液，10μg/ml铁标准溶液5ml，10%盐酸羟胺1ml，再加入1mol/LNaAc5ml，0.15%邻二氮菲3ml。
用水稀释至刻度。
在分光光度计上，用1cm 比色皿以水为参比溶液，从440~580nm 之间测定吸光度（A）。
每隔20nm 测定一次，其中从480~540nm，每隔10nm 测定一次。
最后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线。
从吸收曲线上找出最大吸收的波长，用以进行铁的标定。
2.铁含量的测定
（1）标准曲线的制作
在6 个50ml 比色管中，用吸管分别加入0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml 10μg/ml 铁标准溶液，10%盐酸羟胺1ml，再加入1mol/LNaAc5ml，0.15%邻二氮菲2ml。
用水稀释至刻度。
摇匀放置10min。
用1cm 比色皿，以试剂为空白（以试剂为空白），在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度。
以含铁量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
由绘制的标准曲线，重新查出相应铁浓度的吸光度，计算Fe2+-邻二氮菲络合物的摩尔吸光系数ε。
（3）试样中铁含量的测定
准确吸取试样试液于50ml 容量瓶中，按标准曲线的制作步骤，加入各种试剂，测量吸光度。
从标准曲线上查出和计算试样中铁的含量μg/ml。
（4）数据处理说明
各种实验曲线以及标准曲线的绘制可以手工也可以使用计算机进行处理。
五、数据记录和处理
1.吸收曲线的绘制
表1 吸收曲线的绘制
波长λ/nm
吸光度A
2.标准曲线的绘制
表2 标准曲线的绘制
铁质量浓度/（mg·L -1）
吸光度A
3.试样含铁量的测定
表3 试样含铁量的测定
编号 1 2 3
吸光度A
铁质量浓度/（mg·L -1）
六、问题与讨论
1.吸收曲线与标准曲线有何区别？在实际应用中有何意义？
2.邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？
3.邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？。