细菌培养基本技术
12-2微生物的培养技术及应用【新人教生物一轮复习课前自主预习案】
第十二单元生物技术与工程课前自主预习案2 微生物的培养技术及应用素能目标★考向导航基础梳理——系统化知识点一微生物的基本培养技术1．培养基2．无菌技术3．微生物的纯培养（1）概念：由繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得的过程就是纯培养。
（2）过程：包括、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
（3）常用方法：法和法。
（4）实例——酵母菌的纯培养知识点二微生物的选择培养和计数一、微生物的选择培养1．实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时其他微生物的生长。
2．稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。
（1）系列稀释操作移液管需要经过灭菌。
操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm处。
操作过程如下：（2）涂布平板操作）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板，放入中培养1～2 d。
二、微生物的数量测定1．稀释涂布平板法（1）计数原理：当样品的时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
（2）计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为的平板进行计数。
（3）计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为、适于计数的平板。
在下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出。
（4）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计结果一般用来表示。
2．显微镜直接计数法（1）计数原理：利用特定的或，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。
（2）优点：是一种常用的、的测定微生物数量的方法。
（3）缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。
三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数基能过关——问题化一、判一判（判断正误并找到课本原话）（一）微生物的基本培养技术1．微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。
医学实验室中的基础技术
医学实验室中的基础技术医学实验室是医疗行业中的重要组成部分。
从小药店到大型医院，都离不开医学实验室。
医学实验室是医生诊断疾病并给出治疗方案的关键所在。
医学实验室涉及的基础技术也很多，下面将分别介绍常见的实验室技术。
一、培养细菌培养细菌是医学实验室中最基本的实验室技术之一。
这项技术可帮助医生确定患者是否感染了细菌，从而选择适当的抗生素。
细菌培养需要用到培养基，不同种类的细菌需要不同种类的培养基。
培养基通常可以分为以下几类：富含营养物质的培养基、缺乏营养物质的培养基和选择性培养基。
富含营养物质的培养基是最常用的培养基之一。
我们可以使用这种培养基来培养一般细菌，如大肠杆菌和链球菌。
缺乏营养物质的培养基通常用于分离和培养特定类型的细菌，如肠杆菌科的沙门氏菌。
选择性培养基是为了分离或识别某些特定类型的细菌而制备的，如选择性培养基可用于筛查霍乱、鼠疫等疾病。
二、酶联免疫吸附法 (ELISA)酶联免疫吸附法是一种常用的试剂盒化学技术。
ELISA 可以用于测定抗原和抗体浓度。
ELISA 包括以下步骤：1、将特定抗体覆盖在微孔板上2、加入样品3、加入二抗（标记有酶的抗体）4、加入底物反应5、测定底物的吸收值通过这一技术，我们可以检测一些传染性疾病，如乙肝病毒、艾滋病病毒等。
三、聚合酶链式反应 (PCR)PCR 是一种针对 DNA 片段的放大技术。
PCR 可以用于检测某些基因的变异，从而帮助医生确定诊断。
PCR 的基本步骤包括以下几个步骤： DNA 片段的变性、引物结合、扩增和回收。
PCR 的应用范围非常广泛，如检测乙型肝炎、艾滋病、肺结核等。
四、血细胞计数 (CBC)血细胞计数是医生可以使用的最常见的实验室测试之一。
CBC 可以检测血样中的红细胞、白细胞和血小板数量以及其他诸如红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度等指标。
CBC 可以用于检测和诊断贫血和其他血液病，如白血病和淋巴瘤。
五、组织切片及染色组织切片及染色技术可用于确定是否存在癌变，例如肺癌、前列腺癌和子宫颈癌等疾病。
细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
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实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
18
实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
19
第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
细菌分离培养、接种技术及培养方法-精品医学课件
革兰染色法
Gram staining
临床微生物与免疫学检验教研室
一、实验目的
1.掌握细菌涂片制作方法； 2.掌握革兰染色法和细菌的基本形态； 3.了解革兰染色法的临床意义。
二、革兰染色原理
原理
细胞壁学说 等电点学说 化学学说
革兰阳性菌 细胞壁肽聚糖形成网状 结构，乙醇处理时，脱水 引起网状结构孔径变小， 通透性降低，结晶紫-碘 复合物不易脱去
实验步骤和方法
1)连续划线分离法：①将接种环火焰灭菌，待冷后取标 本少许；②左手持平板，五指固定平皿盖边缘，向外反 转手掌，装有培养基的平板于手掌内用拇指、小指和 无名指固定，并将平板边缘稍微提高呈现30～45度角， 置酒精灯前上方5～6cm；③右手持已取材的接种环， 先在平板一端涂布，然后快速大幅度左右来回以密而 不重的曲线形式作连续划线接种，使整个平板布满曲 线④划线完毕，将平板作好标记，置35℃孵育18-
革兰阴性菌
细胞壁肽聚糖含量低， 脂类物质含量高，乙醇处 理时，脂类物质溶解，细 胞壁的通透性增加，结晶 紫-碘复合物易脱去
三、实验器材和试剂
1.标本 ：金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的培养物。 2.试剂 ：革兰染液。 3.其他 ：载玻片、生理盐水、接种环、酒精灯、显微镜。
四、操作步骤
1. 细菌涂片制备 ⑴涂片：取洁净载玻片一张，按无菌的方法取1~2环生 理盐水于载玻片上，按无菌的方法各取葡萄球菌和大肠埃 菌 培养物少许，在生理盐水中均匀研磨，涂好的菌膜直径 1cm左右。 ⑵干燥：室温下自然干燥或于酒精火焰半尺高处烘干。 ⑶固定：火焰加热法。目的是杀死细菌，并使菌体与载 玻片粘附牢固，染色时不致于被染液和水冲掉。
培养方法
2 二氧化碳培养法 (1)二氧化碳孵箱：能自动调节二氧化碳的含量和温度， 使用较为方便。 (2)烛缸法：取有盖磨口标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨 口处涂以凡士林。将接种细菌的培养基放入缸中，点燃 缸内蜡烛，加盖密封。当蜡烛燃烧时会消耗缸内氧气并 产生CO2，随着缸内氧气的逐渐减少，蜡烛会自行熄 灭，此时缸内CO2浓度约为5％左右。 (3)化学法(重碳酸钠一盐酸法)：（自学）
《细菌的培养方法》课件
细菌的培养是一项重要的实验技术，本课件将介绍细菌培养的各种方法和技 巧，以及培养过程中需要注意的条件和控制。
培养基的选择
培养基的种类和配方
了解不同种类和配方的培养基，选择适合特定细菌的培养基。
不同细菌所需的基本营养成分
掌握不同细菌所需的营养成分，为其提供合适的生长环境。
3
接种
学习不同接种方法，将细菌转移到培养基上进行生长。
4
培养箱的使用
了解培养箱的操作和使用技巧，提供稳定的培养环境。
常见细菌的培养方法
普通细菌的培养
介绍培养常见细菌的 方法和技巧，如大肠 杆菌等。
必需营养物细菌 的培养
了解必需营养物细菌 的培养方法，满足其 特殊的营养需求。
厌氧菌的培养
掌握培养厌氧菌的技 术，为其提供合适的 生长环境。
培养技术
1 纯培养
学习如何进行细菌的纯培养，以获得纯净的 细菌培养物进行研究。
2 混合培养
了解混合培养技术，用于培养多种细菌共存 的环境。
3 原代培养
学习如何进行原代培养，从样品中分离出单 个细菌菌落进行培养。
4 经过子代培养
掌握细菌的连续培养方法，保持菌株的稳定 性和可用性。
培养条件的控制
温度
难以培养细菌的 培养
解决难以培养细菌的 挑战，探索新的培养 方法和技术。
语
细菌培养的实际应用
探索细菌培养在科学研究、医学和工业中的实际应 用。
细菌培养的限制和进展
讨论细菌培养所面临的限制，并展望未来的发展和 创新。
了解细菌对温度的适 应性，并控制培养环 境的温度以促进生长。
pH值
掌握细菌生长所需的 最适pH范围，并调节 培养基的酸碱度。
微生物培养及实验基本操作技术
微生物培养及实验基本操作技术一、培养基配制培养基是指人工配制的、适合于微生物生长繁殖或累积代谢产物所需的各种营养物的混合基质。
配制培养基是进行微生物检验工作的基础,甚至是任何与微生物有关工作的基础。
注意事項–灭菌锅的使用①加水盖过底部铁板—②放入东西—③关门—④調整溫度時間—⑤关紧泄压阀灭菌結束後，等压力降回零時才可打開門進入灭菌锅之物品，蓋子不可關太緊或太鬆拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套培养基中的主要成分及其作用：营养物质：N源、C源、无机盐、生长因子、水常用的N源：蛋白胨、牛肉膏、肉浸汁、酵母膏常用的C源：糖、醇类物质（单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖；多糖：淀粉、纤维素、菊糖；醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油）水：用蒸馏水，不能用自来水凝固剂：琼脂、明胶、血清等抑制剂：1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率2、种类：盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素指示剂1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。
2、常用的指示剂：酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。
培养基的类型：●根据培养基的物理状态来区分：1、液体培养基：主要用于增菌培养、鉴别性培养2、固体培养基：用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定3、半固体培养基：观察微生物的动力，有时用来保藏菌种4、脱水(商品)培荞基：脱水培养基也称为商品培养基、预制干燥培养基。
●将各种营养成分按比例配制完全,制成脱水的干粉状,装瓶出售;使用时只需按比例加人定量的水溶化、灭菌便可。
●根据培养基的用途来区分：➢增殖培养基选择培养基鉴别培养基1、增殖培养基：在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。
微生物的基本培养技术(教学课件)-高二生物人教版(2019)选择性必修3
第2节 微生物的培养技术及应用
一 生物的基本培养技术（第2课时）
一.微生物的纯培养
P11
1.相关概念 ①培养物：
在微生物学中，将接种于
培养基
内，在合适条件下形成的
含 特定种类微生物 的群体。
②纯培养物：由 单一个体繁殖 所获得的微生物群体。
③纯培养：获得 纯培养物 的过程。 2.纯培养的步骤步骤： 配置培养基 → 灭菌 → 接种 → 分离和培养 。 3.菌落 （P11） ①概念：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼 可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。 ②获得单菌落的方法： 2、方法： 平板划线法 和 稀释涂布平板法 。
避免周围环境中微 生物的污染
灼烧灭菌，防止瓶口 的微生物污染培养基
防止皿盖上的冷凝 水珠落入培养基， 造成污染
随堂练习
2.下列关于倒平板的叙述，错误的是( C ) A.待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板
B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行
C.完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立 即盖上培养皿的皿盖 应是用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,
随堂练习
3.分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如图。有关 叙述错误的是( A ) A.甲中a区域为划线的起始位置
甲图中划线顺序为d→c→b→a
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
接种前、每次划线间隔及最后一次划线结束 均需要灼烧接种环 D.接种后将培养皿倒置并在适宜条件下培养
意味着培养液中02含量不同。 （2）从图中数据你可以得出什么结论?其原因是
生物-微生物的基本培养技术
微生物的基本培养技术[高中生物] 1.概述培养基的成分和配制方法。
2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。
3.概述微生物纯培养的基本操作要求。
一、培养基的配制1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3．培养基种类Error!特别提醒 (1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。
(2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。
4．培养基的营养构成(1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏 5 g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10 g氮源和维生素等NaCl 5 g无机盐H2O定容至1 000 mL水(3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
判断正误(1)用于发酵的微生物主要指细菌和真菌( )(2)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源( )(3)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源( )(4)培养不同微生物的培养基成分完全一样( )答案 (1)√ (2)× (3)× (4)×探讨点 概述培养基的种类和营养构成资料一：配制培养酵母菌的培养基：称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。
向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。
资料二：100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。
(完整版)细菌培养技术
第二节细菌培养检测技术节概述细菌的培养技术是微生物实验中基本技术之一。
大多数细菌均可用人工方法培养，只有将细菌培养出来才能对它进行研究和鉴定知识点导航一.培养基的种类培养基（culture medium）是细菌生长繁殖所需要的各种营养物质的人工制品。
适宜的培养基能使细菌在体外迅速生长繁殖，便于对细菌进行分离和鉴别。
可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧菌用培养基和特殊培养基。
（一）基础培养基只含有细菌生长所需的最基本营养成分，应用最广泛，为制备多种培养基的基础，常见的有肉汤培养基、琼脂培养基。
（二）营养培养基在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的细菌生长需要或增菌用。
如结核分枝杆菌培养基中添加鸡蛋、马铃薯、甘油等。
（三）选择培养基利用不同种类细菌对化学物质的敏感性不同而制成，使分离菌大量繁殖而抑制其它细菌生长的培养基。
培养基中含有的抑制剂能抑制非目的菌生长或使其生长不佳，有利于目的菌的检出和识别。
选择培养基多为固体平板，用于从标本中分离某些特定的细菌。
（四）鉴别培养基培养基中加有某些特定成分，如糖、醇类和指示剂等，用于检查细菌的各种生化反应，以资鉴别和鉴定细菌。
（五）厌氧菌用培养基专性厌氧菌须在无氧条件下才能生长，故需在培养基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸钠等还原剂，降低培养基中氧化还原电势，并应与外界空气隔绝，使培养基本身为无氧的环境。
（六）特殊培养基为某些需要在特殊条件下才能生长的细菌培养之用。
如高渗盐增菌培养基、高渗糖增菌培养基、改良Kagan氏培养基等。
二.培养基的制备制备一般培养基的主要过程基本相似，包括调配、溶化、调整pH、过滤、分装、灭菌及检定和保存。
三.细菌检验室的注意事项及无菌技术细菌培养必须随时为防止污染和病原菌的扩散而进行操作，即无菌操作。
细菌检验室的注意事项如下：1．细菌的培养应在接种罩或无菌室内进行。
有条件的实验室可在超净工作台内进行。
细菌培养的基本技术
例1、根据下面“枯草杆菌的培养和观察”的实验步骤， 回答问题 1、实验前一周，取少许新鲜的干稻草切成碎段，放入 锥形瓶中，加水（水 ：草=10 ：1）并煮沸30分钟后， 即用棉塞塞住瓶口，放在不见光的温暖处，或恒温箱 中。3---5天后，观察到液体混浊，表面出现一层白色 薄膜。 2、用玻璃棒挑少量薄膜，涂在载玻片上，盖上盖玻片， 在高倍镜下可以观察到许多不活动的枯草杆菌群体。
5
方法步骤
一、培养基的配制
1．称量 用天平称取0.5g牛肉膏、1g蛋白胨、
0.5gNaCl、2g琼脂。将称好的牛肉膏、蛋白
胨和NaCl放入烧杯。
2．溶化 向上述烧杯中加入蒸馏水100 mL，
用玻璃棒搅匀后，放到酒精灯上加热。当牛
肉膏和蛋白胨溶化后，加入琼脂，并继续用
微火加热。在琼脂溶化的过程中，要控制火
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6、微生物接种时各项操作必须在___无__菌____条件 下进行.因此必须在___无__菌__箱____中操作.接种环境 在___酒__精__灯____上用灼烧去灭菌,双手用___7_5___% 的酒精消毒. 7、接种时将灭菌的接种环挑取少许___菌__体___,迅 速插入培养基试管里,在斜面上由_____里____向 ___外_____连连续划几道___蛇__形__细___线,然后将试管 口在火焰上灼烧,塞上____棉__塞_______.
正确的是（
）D
A、二者用的都是脱脂棉，可以防止水分吸附
B、二者的都不是脱脂棉，有利于水分的吸附
C、②所用的棉塞应该比①更紧，以防杂菌污染
D、①所用的棉塞应该比②更紧，以防滤一 捆，并且在管口外面包上一层牛皮 纸，然后，用线绳扎好。在每捆试 管外挂上标签，注明培养基名称、 配制日期和制作者姓名
院感细菌培养
院感细菌培养标题：院感细菌培养引言概述：院感细菌培养是指对医院感染病例中的细菌进行培养和鉴定，以便及时采取有效的控制措施。
对院感细菌进行培养可以帮助医院了解感染病例的病原体，指导临床治疗，预防院内感染的传播。
本文将从细菌培养的原理、方法、操作步骤、结果解读和应用方面进行详细介绍。
一、细菌培养的原理1.1 细菌的生长特点：细菌是单细胞微生物，具有快速繁殖的特点，能在适宜的培养条件下迅速增殖。
1.2 营养需求：细菌在培养基中需要提供适当的营养物质，如碳源、氮源、矿物盐等，以支持其生长和繁殖。
1.3 条件要求：细菌培养需要一定的温度、湿度、氧气和pH值等条件，以创造适宜的生长环境。
二、细菌培养的方法2.1 选取培养基：根据细菌的特性选择适合的培养基，如富含血液的富营养基、选择性培养基等。
2.2 接种细菌：将患者样本或分离的纯培养物接种到培养基上，利用无菌技术避免外源性污染。
2.3 培养条件：将接种好的培养基置于恒温培养箱中，控制适宜的温度和湿度，观察细菌的生长情况。
三、细菌培养的操作步骤3.1 样本采集：从患者体液、分泌物或组织中采集样本，避免外部污染。
3.2 培养基接种：将样本接种到含有适宜营养物的培养基上，避免交叉污染。
3.3 培养观察：定期观察培养基上的细菌生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
四、细菌培养结果的解读4.1 菌落鉴定：根据菌落的形态、气味、颜色等特征初步判断细菌种类。
4.2 生化试验：进行生化试验，如革兰氏染色、氧化酶试验等，进一步确认细菌种类。
4.3 抗生素敏感性测试：对分离出的细菌进行抗生素敏感性测试，指导临床治疗。
五、细菌培养的应用5.1 临床诊断：通过细菌培养可以明确感染病例的病原体，指导临床治疗方案的制定。
5.2 感染控制：对院内感染进行细菌培养可以及时发现感染源，采取有效控制措施，预防感染的传播。
5.3 药物研发：细菌培养结果可以为药物研发提供参考，指导新药的开发与临床应用。
微生物检验学之细菌的培养与分离技术
细菌的培养与分离技术一、基本条件二、细菌的接种与分离技术三、细菌培养的方法四、细菌的生长现象五、细菌L型的检查一、基本条件（一）细菌实验室中华人民共和国卫士行业标准中的微生物和生物医学实验室生物安全通过准则。
1.细菌室必须安装严密的门窗，以防室内环境受到外界的污染。
且室内禁用风扇，避免细菌的播散。
2.细菌室必须安装供空气消毒的紫外线灯，置于操作台上面1m处，每天开始工作前照射20min。
3.室内应备有消毒剂，用于试验中发生菌液洒溅时的及时消毒处理。
同时还应备有供工作人员浸手用的盛有消毒剂的水盆、肥皂及自来水源等，应安装冲眼器。
4.室内操作台须每日用消毒剂擦洗，地面至少一周用消毒剂擦洗1次。
5.对接收的标本、无菌器具、用过的物品等应明显分开并放在指定位置。
同时要对用过的物品及时进行灭菌处理。
6.细菌室根据当地的气温特点，安装空调机，以适合细菌实验工作。
同时室内应设置必要的消防设备。
7.细菌室必须安装生物安全柜，工作人员应在柜内处理标本及病原微生物。
（二）无菌实验室无菌实验室是细菌实验室内用于无菌操作的小室，其内部装饰、消毒条件要求更严格。
1.无菌室应完全封闭，人员出入应有两道门，其间应隔有缓冲区。
2.用前应以紫外线消毒30min，定期用乳酸或甲醛熏蒸，彻底消毒。
3.在无菌室中一般仅限于分装无菌的培养基及传染性强的细菌的接种，不进行有菌标本的分离及其他操作。
4.无菌室内应仅限操作人员进入，而且进入无菌室应着隔离衣和专用鞋，操作时戴口罩，随时保证室内的无菌状态。
5.无菌室应配备空调设备，保证不因室温而影响工作。
（三）基本设备和器具细菌实验室内必须具备的设备和器具有：用于细菌培养的温箱、CO2培养箱、厌氧培养设备；用于观察细菌形态及标本直接镜检的显微镜；用于物品灭菌的高压蒸气灭菌器、干烤箱；用于储存培养基、诊断用血清、抗生素及菌种等的冰箱和冷藏柜；用于挑取标本、接种等的接种器具，包括接种环和接种针；制备培养基时用的pH计；细菌检验操作时用于接种器具灭菌的火焰灯或酒精灯；还有各种必用的平皿、试管、吸管等玻璃器皿，以及离心机、天平等。
细菌的分离培养技术
细菌的分离培养技术一、常用培养基的制备（一）肉膏汤培养基 (broth medium)1、成分牛肉浸膏3～5g 蛋白胨10g 氯化钠5g 蒸馏水1000ml2、制法(1)于1000ml蒸馏水中加入上述成份，混合加热溶解。
(2)调整pH为7.4～7.6，煮沸3～5min，用滤纸过滤。
(3)分装于适当容器内，高压灭菌103.43Kpa 20min ,置阴暗处或冰箱中贮存备用。
3、用途供一般细菌培养之用，亦可制备糖发酵管及琼脂培养基用。
（二）肉浸汤培养基(infusion medium)1、成分⑴新鲜牛肉(去脂绞碎)500g 蛋白胨10g⑵氯化钠5g 蒸馏水1000ml2、制法(1)取新鲜牛肉(兔肉)除去肌键、肌膜及脂肪，切成小块后用绞肉机绞碎或用刀剁碎，置于糖瓷或铝制锅中，每500g碎肉加水1000ml混合后置冰箱中过夜。
(2)次日取出肉浸液，搅拌均匀，煮沸30min并常搅拌以免沉淀烧焦。
如蛋白质已凝固，即停止加温，补足失去水分。
(3)用纱布或绒布挤压过滤，使所有肉汁尽量挤出，再用脱脂棉滤入大三角烧瓶内。
(4)在滤液中加入蛋白胨(10g/L)、氯化钠(5g/L)，再加热使其全部溶解。
(5)调整pH至7.6～7.8，煮沸10min，以滤纸过滤。
(6)分装三角烧瓶，塞好棉塞，再用厚纸将瓶口扎好，高压灭菌103.43KPa 20min，冷却后置阴暗或冰箱中保存备用。
3、用途供作基础培养基用，营养较肉膏汤好。
一般营养要求不高的细菌均能生长。
（三）普通琼脂培养基(agar medium)1、成分牛肉浸膏3～5g 蛋白胨10g 氯化钠5g 琼脂20～25g蒸馏水1000ml2、制法⑴将上述成分置于三角烧瓶中，煮沸使其溶解(须防止外溢)，并补足由于蒸发失去的水分。
⑵趁热调整pH至7.6，以绒布过滤，分装试管或烧瓶内，高压灭菌103.43KPa 15min。
⑶琼脂斜面培养基制法：高压灭菌后，趁琼脂尚未凝固前，将其分装在已灭菌的试管内，斜放在台面上，待凝固后即成琼脂斜面培养基。
请简述微生物研究的5个基本技术。
请简述微生物研究的5个基本技术。
微生物研究是生命科学领域内非常重要的一个方向。
微生物是指一类生活在自然界中不被肉眼所能看见的微小生物体，包括细菌、真菌、病毒、原生动物等。
微生物研究的目的是为深入探究微生物的生态、生理、代谢，进而为人类健康、农业农村、环境保护等方面提供基础和应用研究的支撑。
以下将针对微生物研究的5个基本技术进行简述。
一、培养技术培养技术是微生物研究中的核心技术之一，也是最为常用的技术之一。
培养技术通过通过将微生物接种于适宜的培养基上，通过控制培养条件（如温度、湿度、气氛、营养物等）使微生物不断繁殖生长，从而得到微生物的纯种培养。
通过纯种培养，可以进一步对微生物的形态、生物化学性质、生理特性等进行研究，也为微生物应用研究提供了基础。
二、细胞生物学技术微生物研究中，细胞生物学技术是研究微生物细胞结构、形态、运动、分裂、增殖等方面的核心技术。
细胞生物学技术包括细胞培养、细胞染色、光学显微镜、电镜等技术。
通过这些技术，可以深入了解微生物的细胞结构与功能，从而为微生物研究提供了重要的实验手段。
三、基因技术基因技术是现代微生物研究中的重要技术之一，也是微生物分子生物学的核心技术。
基因技术可分为基因克隆、基因测序、基因表达、基因工程等多个方面。
通过基因技术，可以对微生物的基因组结构和功能进行深度研究，为后续的微生物遗传学和微生物分子生态学研究提供实验支持。
四、生化技术生化技术是微生物研究中非常重要的一个技术方向。
微生物代谢途径的研究是生化技术的主要方向之一，包括荧光素醇途径、巴布斯龙烷途径、气体吸收途径等。
利用生化技术，可以深入研究微生物的代谢途径及其调控机制，为微生物代谢工程和微生物药物研究提供了重要基础。
五、分子学技术分子学技术包括许多微生物研究领域提到的技术，例如PCR、蛋白质分离和分析、流式细胞术、基质辅助激光解析电离飞行谱仪分析等。
分子学技术通过对微生物分子结构和功能进行解析，进一步扩展了微生物研究的深度和广度。
细菌纯培养实验报告
一、实验目的1. 掌握无菌技术操作，建立无菌观念。
2. 熟悉细菌纯培养的基本原理和操作步骤。
3. 学习观察和描述细菌菌落特征。
4. 了解培养基的制备和灭菌方法。
二、实验原理细菌纯培养是微生物学实验中的基本技术，通过无菌操作将单一细菌从混杂的微生物群体中分离出来，以获得纯种细菌。
实验原理主要包括以下几个方面：1. 无菌技术：通过一系列的无菌操作，防止微生物污染。
2. 培养基：提供细菌生长所需的营养物质。
3. 纯培养：通过稀释涂布平板法、平板划线法等手段，分离单一细菌。
三、实验材料与试剂1. 材料：金黄色葡萄球菌、牛肉膏蛋白胨培养基、无菌水、无菌棉签、无菌培养皿、酒精灯、接种环等。
2. 试剂：75%酒精、10%氯化钠溶液、无菌生理盐水等。
四、实验步骤1. 培养基制备：- 称取牛肉膏蛋白胨培养基粉末，加入适量无菌水，搅拌均匀。
- 灭菌：将培养基倒入无菌培养皿中，待冷却至50℃左右，用无菌镊子取出培养皿，轻轻晃动使培养基均匀分布。
- 灭菌：将培养皿放入高压灭菌器中，121℃灭菌20分钟。
2. 无菌操作：- 将无菌棉签用75%酒精消毒后，待酒精挥发。
- 用无菌棉签取少量金黄色葡萄球菌，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上划线。
3. 纯培养：- 将划线后的培养皿倒置，放入恒温培养箱中培养24小时。
- 观察菌落特征，挑取单菌落进行纯培养。
4. 菌落特征观察：- 观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等特征。
- 将菌落特征与金黄色葡萄球菌的标准特征进行对比。
五、实验结果与分析1. 无菌操作：在实验过程中，严格遵循无菌操作原则，确保实验结果的准确性。
2. 培养基制备：培养基制备过程中，注意无菌操作，确保培养基的质量。
3. 纯培养：通过观察菌落特征，成功分离出金黄色葡萄球菌纯种。
4. 菌落特征：金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，圆形，表面光滑，边缘整齐。
六、实验结论通过本次实验，成功掌握了无菌技术操作、培养基制备、细菌纯培养等基本技能。
培养细菌和真菌的一般方法
培养细菌和真菌的一般方法
培养细菌和真菌是生物学实验中常见的操作，下面将介绍一般的培养方法。
首先，准备培养基。
培养基是细菌和真菌生长的营养基质，可以根据需要选择
富含营养物质的琼脂培养基或者含有特定抗生素的选择性培养基。
其次，消毒操作。
在进行培养前，需要对实验室器皿和培养基进行消毒处理，
以防止外界微生物的污染。
消毒操作可以采用高温高压灭菌器或者紫外线消毒箱进行。
接下来，接种操作。
将需要培养的细菌或真菌接种到培养基表面，可以采用平
板法、涂布法或者滴播法进行接种。
接种后需要用消毒棉签沾取75%酒精对接种
环进行消毒，避免交叉污染。
然后，培养条件设置。
根据不同微生物的生长特性，设置适宜的培养条件，包
括温度、湿度、光照等。
一般来说，细菌培养需要在37摄氏度下进行，而真菌培
养则需要在25摄氏度左右进行。
最后，观察和记录。
在培养一定时间后，观察培养皿上的菌落形态和颜色，记
录下生长情况。
可以根据需要进行鉴定和分离培养。
总的来说，培养细菌和真菌的一般方法包括准备培养基、消毒操作、接种操作、培养条件设置以及观察和记录。
通过以上操作，可以有效地进行细菌和真菌的培养工作。
2023年新教材高中生物微生物的基本培养技术讲义(无答案)新人教版选择性必修3
1.2.1 微生物的基本培养技术微生物：难以用___________观察的微小生物的统称。
包括以下类群：病毒（无细胞结构生物）：SARS 病毒、新冠病毒等____________病毒；T 2噬菌体等____________病毒。
细菌（原核生物）：蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等；放线菌：衣氏放线菌等。
真菌（真核生物）：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履虫、变形虫等。
防止____________，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是酵工程的重要基础。
实验室培养微生物的条件：①要为人们需要的微生物提供合适的____________和____________条件；②要确保____________无法混入，并将____________分离出来。
一、培养基的配置 1.培养基的概念和类型（1）概念：人们按照微生物对____________的不同需求，配制出供其____________的营养基质，即培养基。
（2）培养基的作用：用以____________、____________、____________、____________微生物或____________其代谢物。
（3）培养基的类型2.培养基的配制（1）基本成分：水、碳源、氮源、无机盐。
①碳源：a.无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-→____________微生物；b.有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等→____________微生物。
②氮源：a.无机氮源：NH4＋、NO3-、NH3等。
b.有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、____________、氨基酸等。
注意：含C、H、O、N的有机物是____________微生物的碳源、氮源、能源。
如____________等。
（2）特殊需求：某些微生物对______、特殊营养物质以及_______的需求。
特殊营养物质：____________、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加____________；②培养霉菌时，需要将培养基调至____________；③培养细菌时，需要将培养基调至____________或____________；④培养厌氧微生物时，需要提供____________的条件。
细菌培养知识点总结
细菌培养知识点总结一、细菌的培养基本原理1. 细菌培养的基本原理细菌培养是通过提供适当的营养物质和生长条件，将细菌从自然环境中分离出来，使其在人工培养基上进行生长和繁殖。
培养基要提供适当的碳、氮、磷、硫、微量元素、水分和PH值等必需营养物质和生长环境，保证细菌在培养皿中的正常生长。
2. 常用的培养基常用的培养基包括琼脂培养基和液体培养基两种，琼脂培养基是将琼脂和各种营养成分混合后加热灭菌制成，液体培养基是将各种营养物质和水混合后加热灭菌，用于培养细菌的液体培养。
在具体的培养实验中根据实验需要选择适当的培养基。
二、细菌培养的方法1. 空气消毒空气中的微生物是细菌培养的主要污染源，因此在培养前需要进行空气消毒。
通常使用紫外线灯消毒或者酒精灯灭菌等方法对空气进行消毒处理，保证培养环境的清洁。
2. 培养基的制备根据需要选择琼脂培养基或者液体培养基，将培养基加热至沸腾状态后，装入试管或培养皿中，加热灭菌制备培养基。
3. 细菌接种将需要培养的细菌接种到培养基中，用无菌的接种环或吸管在琼脂培养基表面划线或点沾菌，在液体培养基中接种适量的细菌悬液，避免损伤细菌。
4. 培养条件根据细菌的生长特性和实验的需要，选择适当的培养条件进行培养，包括温度、湿度、氧气供应等。
5. 观察和记录在培养过程中定期观察细菌的生长情况，记录细菌的形态、颜色、数量等特征，对细菌培养实验进行记录。
三、常见的细菌培养技术1. 粘液培养粘液培养是利用寒冷条件（通常在4℃）使某些细菌在琼脂培养基上能够产生粘液的一种培养技术。
粘液培养有利于某些细菌的形态特征观察，常用于鉴别凝固反应阴性的细菌。
2. 血培养在琼脂培养基中加入动物或人血液，被培养的细菌可在此基质上生长。
血培养常用于鉴别溶血性细菌。
3. 混合培养将不同的细菌接种在同一培养基上进行培养，观察其在一起生长的生长速度和相互作用，有助于细菌之间的竞争、协同和相互作用的研究。
4. 选择性培养通过添加抑制或选择性抑菌剂以促进特定细菌的生长，或排斥某些细菌的生长，从而进行选择性培养。
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例3：在锥形瓶中装入一定量液体培养基，接 入N0个乳酸菌之后密封，放在250C温箱中连续 培养若干小时，其间每30分钟测定一次菌数， 测得数量变化曲线如图。请分析回答。
五、培养 将接种后的试管放入恒温箱 内，在25℃下培养5～7d，或在 37℃下培养24h。
结论 斜面培养基上的细菌生长状况如 何？将观察到的结果和得出的结论 填写在 实验报告上。
讨论 1．在高压蒸汽灭菌开始以前，为什 么要将灭菌锅内的冷空气排尽？ 在高压蒸汽灭菌以前，如果高 压蒸汽灭菌锅内的冷空气没有排尽， 当压力上升到 98 kPa时，锅内的温 度就不会上升到应有的高度，导致 灭菌不彻底。
例：在叶绿体色素提取和分离与利用牛肉膏蛋白 胨培养金黄色葡萄球菌二个实验中，①装色素滤 液的试管和②接种培养基的试管均要用到棉塞。 下列有关①和②所用棉塞的特点及其作用的说法， D 正确的是（ ） A、二者用的都是脱脂棉，可以防止水分吸附 B、二者的都不是脱脂棉，有利于水分的吸附 C、②所用的棉塞应该比①更紧，以防杂菌污染 D、①所用的棉塞应该比②更紧，以防滤液蒸发
3．加盖，并将排气软管插入灭菌桶的排气 槽内。以两两对称的方式，同时旋紧相 对的两个紧固螺栓，以防漏气。
4．排出锅内的冷空气。接通电源，当压力 上升到49kPa时，打开排气阀放气，当压 力降到0时，关闭排气阀。重复上述放气 过程一次，以彻底排出锅内的冷空气。 5．当锅内的压力上升到98kPa时，控制火 力大小，使压力维持在98kPa左右 20min，切断电源。 6．当压力降至0以后，打开排气阀，10min 以后，旋松紧固螺栓，取出试管。最后， 将灭菌锅里的水排放干净。
2．灭菌完毕以后，如果压力未降到 0就打开排气阀，会出现什么现象？ 为什么？ 如果压力未降到零就打开排气 阀，试管内的培养基就会冲出管口。 这是因为高压蒸汽灭菌锅内外压力 不平衡的缘故
3．接种操作为什么一定要在火焰 旁边进行？ 空气中存在有大量的微生物， 而接种灯的火焰旁能形成一个无菌 区域，在这里操作，可以避免杂菌 污染
无菌 6、微生物接种时各项操作必须在_________条件
无菌箱 下进行.因此必须在___________中操作.接种环境
75 酒精灯 在___________上用灼烧去灭菌,双手用_______% 的酒精消毒. 菌体 7、接种时将灭菌的接种环挑取少许________,迅 里 速插入培养基试管里,在斜面上由_________向 蛇形细 外 ________连连续划几道__________线,然后将试管 棉塞 口在火焰上灼烧,塞上_____________.
材料用具
芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌、牛肉膏、蛋白 胨、琼脂。 天平、角匙、200mL烧杯、试管、漏斗、 量筒、玻璃棒、滴管、胶管、弹簧夹、铁架台、 酒精灯、石棉网、三角架、火柴、纱布、棉花、 牛皮纸、线绳、标签、接种环、精密pH试纸(或 pH计)、金属小筐、高压蒸汽灭菌锅、恒温箱。 NaCl、1mol/L的NaOH溶液、体积分数为 75％的酒精溶液、蒸馏水。
三、搁臵斜面 当培养基冷却至50℃左右时，将试管带 棉塞的一端搁在一根木棒上。搁臵的长度要 合适，使培养基形成的斜面的长度不超过试 管总长的一半。
四、接种 1．用肥皂将双手洗净，擦干，再用 酒精(体积分数为75%)棉球擦拭 双手。 2．当手上的酒精挥发完毕后，点燃 酒精灯。注意：一定要等手上的 酒精挥发完毕后，再点燃酒精 灯，否则，容易将手烧伤。
（5）火焰旁将沾有菌种的 接种环迅速伸到斜面培养 基的底部，由里向外画蛇 形细线，线要画得细些。
（6）抽出接种环后， 烧管口，塞棉塞， 接种环灭菌。
例：B图是否正确？
如不正确纠正方法是
不正确。接种管宜放在菌种管上面
4．熄灭酒精灯。实验后的带菌培 养基，如果用的是致病菌，必 须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后方 能倒掉；如果是非致病菌，也 要经加热后再倒掉。 5．接种完毕，将所接菌种、接种日 期、接种者姓名填写在标签上。
6．包扎 每10支试管用线绳捆成一 捆，并且在管口外面包上一层牛皮 纸，然后，用线绳扎好。在每捆试 管外挂上标签，注明培养基名称、 配制日期和制作者姓名
二、灭菌 1．打开高压蒸汽灭菌锅，将里面的灭菌桶取 出，向锅内加水(最好用开水)，水面与底架平 齐为宜。高压蒸汽灭菌锅的构造如右下图所 示。
2．将扎好的试管管口向上竖放在灭菌 桶内，再将灭菌桶放回灭菌锅。注 意：灭菌桶内的物品不能放得太 挤，否则要根据某种细菌的________________ 培养基 牛肉膏蛋白胨 配制特定的________________.其中______________
培养基应用广泛.
2、为使培养基呈固体状态，需要在配制好的各营养 琼脂 成分的液体加入___________,溶化冷却即可. HCl 3、调节培养基的pH值,用浓度为1mol/L的_________ NaOH 或____________溶液进行调节.
4、对培养基进行灭菌就是要利用高温杀死____
___________________________.压力要达到 培养基中的一切微生物 20 _________KPa,维持____________分钟. 98 太低 5、搁臵斜面时培养基不能温度_____________否 固体 则培养基会变成___________应趁热将试管放臵成 斜面形,使管内培养基形成的斜面长度不超过试管 1/2 总长的______________.
1024000 总菌数__________个.
t = 10
N=1000×210
(3)在实际培养条件下,乳酸菌增长速度与理想条件 下乳酸菌增长速度不同,如果5h后活菌数的变化趋势 用曲线表示出来.造成菌群密度变化的外界因素是什 么?总细菌数/个
N0 营养物质减少.代谢产物大量积累.pH发生改变。 无氧呼吸 (4)培养基中不断产生的乳酸来自乳酸菌的_________作用. (5)实验过程中,为什么要在250C条件下进行? 250C时酶的催化效率最高.
实验原理 根据某种细菌的营养需要而选择 多种原料配制而成的培养基，不仅含 有这种细菌生长繁殖所需要的各种营 养物质，还要有适宜的pH。本实验所 用的牛肉膏蛋白胨培养基，应用较广 泛，适于芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌 等多种细菌的培养。
配制好的培养基必须经过灭菌。灭菌 是指杀死一定环境中所有微生物的细胞、 芽孢和孢子。对不同的材料，应当采取不 同的灭菌方法。培养基一般采用高压蒸汽 灭菌法，就是将待灭菌的培养基放入密闭 的高压蒸汽灭菌锅内，通过加热使锅内的 水沸腾并产生水蒸汽。当水蒸汽将锅内的 冷空气排尽以后，关闭排气阀并继续加热， 这时锅内的压力就会升高，最终使菌体蛋 白质凝固变性，从而达到灭菌的目的。接 种环是用火焰烧灼灭菌的。
问：在煮沸的新鲜干稻草液中为什么会 出现枯草杆菌？ 枯草杆菌的芽孢可耐高温而不致被杀死， 而在煮沸的情况下其它菌类会因高温使蛋白 质变性而死亡。
例2、以下是关于食品的腐败和食品的保存 的实验步骤； 1、取标有A----F的六只锥形瓶，瓶内各放 入30mL肉汤澄清液 2、在A瓶中加入3角匙食盐；B瓶中加入 15mL食醋；用棉塞塞 住瓶口，A、B瓶 都放在恒温箱中，温度为30---370C 3、C、D、E、F瓶中不加任何物质，都放 臵于空气中暴露1h，然后用棉塞住它们 的瓶口。
3．调pH 用滴管逐滴滴 入1mol/L的NaOH溶液， 边滴边搅拌，并随时用 pH试纸测pH，直到pH为 7.4～7.6为止。 4．培养基的分装 按右图 所示，将培养基趁热分装 到洁净的试管中，培养基 的高度约为试管高度的 1/5。注意：分装时不要 将培养基沾在管口和试管 上段，以免引起污染。
5．加棉塞 培养基分装完毕以后，在管口 上加一个棉塞。棉塞能防止杂菌污染，保 证通气良好。加棉塞时，应使棉塞长度的 2/3在试管口内，如下图所示。
例1、根据下面“枯草杆菌的培养和观察”的实验步骤， 回答问题
1、实验前一周，取少许新鲜的干稻草切成碎段，放入 锥形瓶中，加水（水 ：草=10 ：1）并煮沸30分钟后， 即用棉塞塞住瓶口，放在不见光的温暖处，或恒温箱 中。3---5天后，观察到液体混浊，表面出现一层白色 薄膜。 2、用玻璃棒挑少量薄膜，涂在载玻片上，盖上盖玻片， 在高倍镜下可以观察到许多不活动的枯草杆菌群体。
4、将C瓶放在30---370C恒温箱中，D瓶 放在室温下，E瓶放在40C左右的冰 箱冷藏室内，F放在-100C的冷冻室 内。 5、一周后观察，记录实验结果。 请你根据生物学原理对六瓶中食品 的变化情况作一预测，并简述理由。
答：A、B、F、肉汤不会腐败；因A瓶高 浓度盐抑制微生物的生长和繁殖；B瓶高浓 度的有机酸也能抑制微生物的生长和繁殖； F低温抑制了微生物的生长和繁殖；
总细菌数/个
N0
0 1 2
活细菌数/个
培养时间/小时 3 4 5 6 7 8
分裂生殖 （1）乳酸菌以__________方式生殖,这代表
原核 __________类生物普遍具有的生殖方式.
(2)用N表示总菌数,N0表示初始菌 数,t表示增殖世代数,乳酸菌数量增 长的数字表达式为N=N02t.当在理想 条件下,乳酸菌每30分钟繁殖一代, 按上式算,当N0=1000时,连续培养5h,
将某种细菌接种在彻底灭菌的培 养基上，经过一段时间的培养后，就 能够得到生长良好的细菌群体，它们 在培养基上会呈现出一定的形态特征。
目的要求 1．通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配 制， 了解配制培养基的一般步骤和方法。 2．了解灭菌的基本原理，以及实验室中 常用的灭菌方法。 3．初步学会细菌培养的基本技术。
方法步骤 一、培养基的配制 1．称量 用天平称取0.5g牛肉膏、1g蛋白胨、 0.5gNaCl、2g琼脂。将称好的牛肉膏、蛋白 胨和NaCl放入烧杯。 2．溶化 向上述烧杯中加入蒸馏水100 mL， 用玻璃棒搅匀后，放到酒精灯上加热。当牛 肉膏和蛋白胨溶化后，加入琼脂，并继续用 微火加热。在琼脂溶化的过程中，要控制火 力的大小，并且不断搅拌，以免培养基溢出 或烧焦。待琼脂完全溶化后，补加蒸馏水至 100mL。