有机小分子荧光探针的研究1

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一种小分子荧光探针及其制备方法与应用与流程

一种小分子荧光探针及其制备方法与应用与流程

一种小分子荧光探针及其制备方法与应用与流程
小分子荧光探针作为一种重要的生物分子探测工具,在生命科学领域中具有广泛的应用前景。

本文将介绍一种新型的小分子荧光探针及其制备方法与应用与流程。

首先,该小分子荧光探针的制备方法非常简单,只需要将荧光染料与一种特殊的载体分子结合即可。

这种载体分子具有良好的生物透性和生物相容性,可以在细胞膜上自发结合,并产生强烈的荧光信号。

其次,这种小分子荧光探针的应用范围非常广泛。

它可以用于细胞分子成像、酶活性检测、蛋白质定位等多种生物学实验中。

例如,它可以用于检测细胞内的一些生物活性分子的水平,如钙离子、离子基团、ATP等,具有高灵敏度和高分辨率。

最后,该小分子荧光探针的实验流程也非常简单。

只需将其加入到细胞培养液中,等待一定的反应时间,即可通过荧光显微镜或其他荧光成像仪器观察到荧光信号的强度和分布情况。

总之,该小分子荧光探针具有制备简单、应用广泛、实验流程简便等优点,将为生命科学研究提供更多的实验工具和方法。

同时,我们也期待该小分子荧光探针在其他领域中的应用,为相关领域的研究带来新的突破。

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分子荧光探针的设计及其在细胞成像中的应用

分子荧光探针的设计及其在细胞成像中的应用

分子荧光探针的设计及其在细胞成像中的应用荧光探针是一种广泛应用于生命科学、环境科学和材料科学等领域的功能性化合物。

随着现代研究方法的不断发展,传统的染色剂和荧光探针已经无法满足对微小结构和复杂细胞机制的高要求,因此分子荧光探针应运而生。

本文将介绍分子荧光探针的设计和原理,并重点探讨其在细胞成像中的应用。

一、分子荧光探针的设计原理所谓分子荧光探针,就是将某种荧光基团与目标分子相连而制成的一种探针。

分子荧光探针的设计基础是化学反应的原理,而其荧光探针的特殊结构,则是其实现功能的关键所在。

通常而言,荧光探针的设计包括以下几个方面:1. 氨基酸基团的化学反应氨基酸基团的化学反应是实现分子荧光探针对生物分子的特异性辨别的关键。

其中,包括了一些典型的反应如华夫硫酸反应等。

2. 空间构象的影响空间构象的影响通常是通过三维分子构象的压制实现的。

分子内部的静电作用能够使分子的构象大幅改变,从而引起荧光探针发光。

3. 共振能级耦合结构的优化共振能级耦合结构是分子荧光探针设计中的一项关键因素。

通过一些与结构相关的化学反应,能够通过调整探针的共振能级耦合结构,从而赋予其特定的光谱性质。

二、分子荧光探针在细胞成像中的应用分子荧光探针在细胞成像中的应用主要基于其良好的细胞渗透性、高选择性和稳定性。

这种探针可以通过荧光显微镜等非侵入性手段,在细胞层面上实现对生物活体的实时监测。

1. 细胞膜成像分子荧光探针的主要应用是在细胞膜成像方面。

该领域应用的最常见方法是通过化学修饰细胞膜的荧光探针,从而获取细胞膜的直观图像。

这项技术广泛应用于细胞生物学、药物研发和医学等领域。

2. 细胞内成像除了细胞膜成像,分子荧光探针还可以用于细胞内成像。

在这种应用中,可以通过探针对细胞内部荧光的识别,进一步了解细胞的结构和功能。

同时,这些探针还可以通过与生物分子结合,实现对生物分子水平的高灵敏检测。

3. 生物分子成像生物分子成像是分子荧光探针在生命科学中的常见应用之一。

小分子生物硫醇荧光探针研究进展

小分子生物硫醇荧光探针研究进展

小分子生物硫醇荧光探针研究进展硫醇分子是一类含有硫原子的有机化合物,具有广泛的生物活性和生物学功能。

很多生物过程中都涉及到硫醇分子的参与,如蛋白质酶催化、细胞代谢和信号传递等。

因此,对硫醇分子的探测和定量分析在生命科学和医学等领域具有重要的意义。

近年来,小分子生物硫醇荧光探针的研究成为生命科学研究的热点之一。

目前,已经开发出了许多种基于荧光的小分子生物硫醇探针,这些探针具有结构简单、灵敏度高、特异性好等优点,可以用于检测生物样品中低浓度硫醇的存在。

下面将对小分子生物硫醇荧光探针的研究进展进行综述。

1. 分子设计策略小分子生物硫醇荧光探针的设计一般基于硫醇与探针之间的反应机理。

目前,单硫质量法和双硫质量法是较为常用的设计策略。

单硫质量法:探针分子中含有硫醇反应部位,硫醇与探针分子反应后形成稳定的荧光产物。

例如,采用NF-kB转录因子结构域中的保守半胱氨酸螯合靶点,结合染料模块得到SsnB探针。

SsnB通过对半胱氨酸的快速、可逆性荧光猝灭-荧光回复机制,完成对天然细胞内半胱氨酸的高灵敏度、高选择性成像。

双硫质量法:探针分子中含有两个硫醇反应部位,当硫醇与探针分子反应后形成荧光产物,这种方法可以减少假阳性反应。

例如,基于2,3-二环己烯-1,4-二硫醚(DCDHF)结构,可以得到一类荧光染料探针,可以针对硫代谷胱甘肽S-S键的断裂反应进行检测。

2. 探针类型小分子硫醇荧光探针的种类繁多,可以根据其化学结构、光学性质和生物应用等方面分为不同的类别。

(1)巴比妥酸探针:巴比妥酸基团在光激发下能够产生强烈的荧光信号,具有高的选择性和灵敏度检测半胱氨酸。

(2)环状亚油酰亚胺探针:环状亚油酰亚胺荧光探针是一种简单的硫醇探测分子,可以用于检测低浓度的半胱氨酸和谷胱甘肽,由于其荧光信号强度稳定、选择性好,尤其适用于检测天然生物中的硫醇。

(3)吲哚酮类探针:吲哚酮是一类常用的荧光染料,可以通过反应产生持久的差异荧光信号。

有机小分子探针

有机小分子探针

有机小分子探针黄美英 2014010714摘要细胞内生物活性化合物在细胞内作用靶点的确定是化学生物学和药物开发中的关键问题之一。

作为功能蛋白质组学中的一项重要技术, 小分子探针在确定生物活性化合物细胞内作用靶点的研究中扮演着举足轻重的角色。

PH值在生理及病理过程如受体介导的信号传导、酶活性、细胞生长和凋亡、离子运输和稳态调节、钙含量调节、细胞内吞作用、趋化作用、细胞粘附和肿瘤生长等过程中起到非常重要的作用。

本文介绍了几种小分子探针原理,技术和方法,并通过列举近年来该技术应用的成功示例进一步阐明小分子生物活性探针技术的应用原理和重要性。

关键词生物活性化合物;小分子探针;PH值;DNA探针技术一绪论荧光探针是化学传感技术领域在上个世纪八十年代的一项重大发现,目前己有愈来愈多的荧光探针应用于分子水平上进行实时检测。

荧光检测技术由于灵敏度高,操作简便,可视性强,且对细胞、生物体的损伤小,成为了用于临床分析、环境监测、生物分析及生命科学等领域不可缺少的检测工具[1]。

分子荧光探针的检测对象包括各种离子、小分子、自由基、多肽、酶,甚至还包括温度、极性、粘度等。

人们可以使用荧光显微镜、荧光光谱仪、流式细胞仪、荧光活体成像系统等仪器获取荧光探针检测的相关信息,借助荧光成像技术我们能够实时检测活细胞内分子或离子的浓度以及生物大分子结构的变化过程,也可以获得关于生物组织生理代谢过程的相关信息,还可以实现生物活体的荧光成像[2]。

另一方面研究者们能够根据需要设计合成出满足“特定要求”的探针分子,基于此,荧光探针和荧光检测技术在生命科学的发展中起到举足轻重的作用[3]。

通常一个光探针分子由荧光团(Fluorophore)和识别基团(Receptor)通过连接臂(Spacer)以共价键方式连接,荧光团作为信号转换器将识别行为转化为光信号,可以通过荧光的增强或淬灭乃至光谱位移的变化对分析物进行识别。

荧光探针分子具有非常大的可塑性和应用潜力,通过对有机分子结构进行巧妙设计和改造,就能够设计合成出满足各种需要的荧光探针。

有机荧光分子探针

有机荧光分子探针

有机荧光分子探针是一类能够在特定条件下(如pH、温度、电压、化学物质或生物大分子存在等)发出荧光的有机化合物。

这些探针广泛应用于生物检测、医学诊断、环境监测和材料科学等领域。

以下是有机荧光分子探针的一些基本特性与应用:
1. 结构多样性:有机荧光分子探针的结构多样,可以通过改变分子中的荧光团、辅助基团和功能团来调整其光学性质,以满足不同应用需求。

2. 选择性:探针的设计通常注重对目标物质的选择性识别。

通过引入特定的识别单元(如生物识别分子、化学传感器等),可以使探针针对特定的分子或反应产生特异性的荧光信号。

3. 灵敏度:荧光探针的灵敏度是指在低浓度下检测目标分子的能力。

高灵敏度的荧光探针可以检测到极低浓度的目标分子,这对于生物医学应用尤为重要。

4. 稳定性:探针在存储和使用过程中应保持稳定,不易分解或失活,以确保荧光信号的准确性和重复性。

5. 生物相容性:在生物医学应用中,荧光探针需要与生物组织相容,不对细胞结构和功能造成不利影响。

有机荧光分子探针的应用包括:
生物成像:在细胞和分子水平上进行成像,用于研究生物过程和疾病机制。

医学诊断:通过荧光信号检测疾病相关分子,如肿瘤标志物、细胞表面受体等。

环境监测:检测环境中的污染物和有害物质,如重金属离子、有机污染物等。

材料科学:用于检测和监控材料制备过程中的各种化学和物理变化。

随着材料科学和化学工程的发展,新型有机荧光分子探针不断被设计和合成,它们在多个领域展现出巨大的潜力和应用价值。

基于有机小分子传感器的生物分子检测方法研究

基于有机小分子传感器的生物分子检测方法研究

基于有机小分子传感器的生物分子检测方法研究一、引言生物分子检测方法的研究在科学领域中具有重要意义。

为了实现更为精确和快速的生物分析,科学家们不断探索新的技术和方法。

其中,基于有机小分子传感器的生物分子检测方法备受关注。

本文将主要讨论该方法的研究现状和前景。

二、有机小分子传感器的基本原理有机小分子传感器是一种将有机小分子作为感测元件,可与特定的生物分子相互作用并发生可测量的信号变化的探测器。

其基本原理是利用有机分子的特异性与生物分子结合,并通过适当的检测元件将结合事件转化为对应的信号输出。

三、常见的有机小分子传感器1. 荧光探针:荧光探针是利用有机荧光分子作为探测元件,通过荧光的增强或猝灭来检测生物分子。

这种传感器可以通过改变有机分子的结构或与生物分子相互作用后引起的荧光变化来实现对生物分子的高度敏感检测。

2. 导电聚合物传感器:导电聚合物传感器是利用导电聚合物与目标生物分子发生作用后其电导率的变化来进行检测的。

这种传感器可以通过导电聚合物与生物分子的结合来调控电子转移过程,进而实现对生物分子的定量测量。

3. 表面增强拉曼散射传感器:表面增强拉曼散射传感器利用有机小分子在金属表面的增强效应来实现对生物分子的检测。

通过与纳米颗粒包裹的有机小分子结合后,目标生物分子的拉曼散射信号得到大幅度增强,从而实现对其的高灵敏度检测。

四、研究现状与应用前景1. 研究现状:目前,在有机小分子传感器的研究领域,学术界和工业界都取得了一系列研究成果。

有机小分子传感器在医学生物分析、环境监测、食品安全等领域具有广泛应用前景。

例如,利用有机小分子传感器检测致病菌的存在,可以提供快速筛查和有效控制的手段,有助于提高食品安全水平。

2. 应用前景:随着科学技术不断进步,有机小分子传感器在生物分子检测领域的应用前景仍然广阔。

可以预见,未来有机小分子传感器将在医学、生物学和环境科学等领域中发挥更加重要的作用。

科学家们可以通过改进传感器结构和分子识别机制,提高其灵敏度、选择性和稳定性。

小分子荧光探针简介-肖康

小分子荧光探针简介-肖康
励 勤志 奋明 求德 实
小分子荧光探针简介(一)
肖康
1
目录
一、发光原理及发光类型 二、常见的几种荧光机制 三、小分子荧光探针案例
2
一、发光原理及发光类型
3
一、什么是荧光及发光原理
一、发光 (Luminescence)
荧光 (Fluorescence) 磷光 (Phosphorescence) 化学发光 (chemiluminescence)
Excited
2、双光子发光
吸收两个光子,发射一个光子; 激发光波长大于发射光波长; 反Stokes定律,蓝移。
Ground
单光子
3、上转换发光
掺杂稀土离子的化合物中; 稀土金属独特光学性质; 反Stokes定律,蓝移。
双光子
上转换
5
双光子荧光探针(Two-photon)
昂贵的飞秒脉冲激光器
1、荧光 一种光致发光的冷光现象。 经入射光照射,外层电子从基 态跃迁到激发态,当恢复到基 态时能量已光能形式释放,成 为荧光。荧光寿命≤10-8s。 2、磷光 一种缓慢的光致发光的冷光现象。 磷光寿命≥10-8s。
3、化学发光
4
一、什么是荧光及发光原理
1、单光子发光
最常见的发光方式; 吸收一个光子,发射一个光子; 符合Stokes位移定律,红移; 激发光波长小于发射光波长。
aa
双光子荧光团
双光子:λex = 750 nm, band at 540 nm
c
d b
λex = 405 nm, λem = 540 nm 体外分析数据采用单光子测试
10
上转换发光材料(UCNPs)
迄今为止,上转换发光都发生在掺杂稀土离子的化合物中

有机小分子荧光探针与材料

有机小分子荧光探针与材料

有机小分子荧光探针与材料
有机小分子荧光探针是一种能够产生荧光信号的有机分子,通常用于生物分子的检测和成像。

它们具有高灵敏度、高选择性、低毒性和易于合成等优点,因此在生物医学、环境监测和材料科学等领域得到了广泛的应用。

有机小分子荧光探针的设计和合成通常基于荧光团和识别基团的结合。

荧光团是产生荧光信号的部分,通常是含有共轭双键的芳香族化合物。

识别基团是能够与目标分子特异性结合的部分,可以是氨基酸、核苷酸、糖类、生物碱等。

有机小分子荧光探针的应用非常广泛。

在生物医学领域,它们可以用于检测蛋白质、核酸、细胞、细胞器等生物分子,以及监测生物体内的代谢过程和药物代谢等。

在环境监测领域,它们可以用于检测水中的重金属离子、有毒有害物质等。

在材料科学领域,它们可以用于检测材料的表面性质、分子结构等。

近年来,随着材料科学的发展,有机小分子荧光探针也被广泛应用于材料的研究中。

例如,利用荧光探针可以研究材料的光吸收、荧光发射、能量转移等性质,以及材料表面的化学反应等。

此外,荧光探针还可以用于制备荧光材料,如荧光染料、荧光纳米材料等。

总之,有机小分子荧光探针是一种非常有用的工具,在生物医学、环境监测和材料科学等领域都有广泛的应用前景。

随着材料科学的不断发展,荧光探针在材料研究中的应用也将不断拓展和深化。

荧光性有机小分子材料在生物医学中的应用研究

荧光性有机小分子材料在生物医学中的应用研究

荧光性有机小分子材料在生物医学中的应用研究荧光性有机小分子材料是指具有荧光性质的分子材料,它们在吸收特定波长的光后能够发射特定波长的荧光,因此被广泛应用于生物医学研究中。

在这篇文章中,我们将介绍荧光性有机小分子材料在生物医学领域中的应用与研究进展。

1. 生物成像荧光成像技术是目前生物医学领域研究的主要方法之一。

荧光性有机小分子材料具有较高的荧光量子产率和化学稳定性,其发射光谱可以通过调整分子结构进行调控。

因此,荧光性有机小分子材料成为了生物医学领域中广泛应用的荧光探针。

借助荧光性有机小分子材料,可以实现生物样品的高分辨率成像、无创活体成像、多模态成像等应用。

例如,研究人员可利用荧光性有机小分子材料对小鼠等动物进行生物成像,以研究动物的器官结构、生理功能及疾病状况等。

同时,荧光性有机小分子材料还可用于研究细胞内交互作用等生物过程。

2. 生物传感荧光性有机小分子材料还被广泛应用于生物传感领域。

在细胞生物学、分子医学以及药学中,往往需要检测特定的生物大分子,如蛋白质、酶、核酸等,荧光性有机小分子材料在这些生物大分子的检测中,展现出了优异的特性。

荧光性有机小分子材料可以作为分子传感器,根据不同分子的特异性作用,发生特定的结构、荧光信号变化,实现对特定生物分子的检测和定量分析。

这种传感技术可以用于快速筛选抗癌药物、检测RNA表达水平、生物代谢动力学等领域。

3. 刺激响应荧光性有机小分子材料还具有刺激响应能力,诸如光、电、热、酸碱等不同刺激可引起分子结构的变化,从而使分子的荧光性质发生变化。

这种特性使得荧光性有机小分子材料成为了先进的检测方法。

比如,利用荧光性有机小分子材料,可以研究细胞内的钙离子含量、PH值等参数的变化,有效地探究肿瘤细胞的诊断和治疗。

该类材料还可用于设计新型荧光分子交互材料、智能荧光传感器、高通量药物筛选器等高效诊断平台。

总之,荧光性有机小分子材料已被广泛应用于生物医学研究中,其丰富的特性探究和材料制备不断推动其在实际应用中的广泛推广。

小分子g-四链体荧光探针

小分子g-四链体荧光探针

小分子g-四链体荧光探针小分子g-四链体荧光探针是一种新型的荧光探针,以其高灵敏度、高特异性和易于修饰等优点在生物检测领域受到广泛关注。

本文将详细介绍小分子g-四链体荧光探针的原理、应用以及未来发展前景。

一、小分子g-四链体荧光探针的原理g-四链体是一种具有特殊结构的核酸分子,由两个相互作用的DNA双链组成,形成一个稳定的发夹状结构。

在特定条件下,g-四链体可以猝灭荧光团,从而实现对生物小分子的灵敏检测。

小分子g-四链体荧光探针利用这一原理,通过设计特定的核酸序列,使荧光团与g-四链体结合,从而实现对目标分子的检测。

二、小分子g-四链体荧光探针的应用1.生物传感器:小分子g-四链体荧光探针可作为一种高灵敏度的生物传感器,用于检测各种生物小分子,如金属离子、氨基酸、核苷酸等。

2.疾病诊断:利用小分子g-四链体荧光探针的高特异性,可以用于疾病相关生物标志物的检测,为临床诊断提供便捷、灵敏的方法。

3.环境监测:小分子g-四链体荧光探针可用于环境中有害物质的检测,如重金属、农药等,为环境保护提供技术支持。

4.生物成像:小分子g-四链体荧光探针可以用于活体生物成像,实现对细胞、组织内部结构的实时观察。

三、未来发展前景1.探针优化:通过进一步优化核酸序列设计和荧光团的选择,提高小分子g-四链体荧光探针的灵敏度和特异性,使其在更广泛的生物检测领域得到应用。

2.多功能探针:开发具有多种功能的小分子g-四链体荧光探针,如信号放大、光激活、温度敏感等,以满足不同应用场景的需求。

3.生物传感器的集成:将小分子g-四链体荧光探针与其他生物传感器集成,构建高性能的生物检测平台,实现对多种目标分子的快速、准确检测。

4.临床应用:随着小分子g-四链体荧光探针技术的不断发展,其在临床诊断、治疗监测等方面的应用前景广阔。

总之,小分子g-四链体荧光探针作为一种新型生物检测方法,具有巨大的应用潜力。

通过对探针原理的深入研究和对检测技术的不断创新,小分子g-四链体荧光探针将在生物科学、医学、环境监测等领域发挥重要作用。

新型有机小分子在生化荧光探针中的应用

新型有机小分子在生化荧光探针中的应用

新型有机小分子在生化荧光探针中的应用有机小分子是广泛应用于各种生物领域的一种化学物质,具有一定的生物活性和分子识别能力。

在生化荧光探针中,有机小分子可以作为荧光染料,与生物分子结合形成复合物,发挥荧光作用,从而完成生物分子的检测和定量分析。

新型有机小分子作为荧光探针在生物学、医学等领域的应用越来越广泛。

一、有机小分子在生化荧光探针中的优势1. 可控性好有机小分子的结构可以通过化学合成进行精细调控,具有较强的可控性。

通过调整有机小分子的化学结构和配位基团,可以使其与特定的生物分子发生选择性、高亲和力的相互作用。

2. 易于标记与蛋白质、核酸等大分子相比,有机小分子具有相对较小的分子量,因此易于标记。

将有机小分子与荧光基团结合后,可以通过荧光显微镜等手段直接观察其与生物分子的相互作用。

3. 光学性质优异有机小分子的光学性质在一定程度上决定了其作为荧光探针的使用效果。

一些新型有机小分子具有较高的荧光量子产率、良好的荧光稳定性和响应速度,可以用于高灵敏度、高选择性的生物分子检测。

二、新型有机小分子的应用前景1. 荧光探针新型有机小分子作为荧光探针,在生物分子的检测和定量分析上具有广泛的应用前景。

例如,近年来研究人员发现了一类新型的有机小分子,称为悠闲蓝(leisure blue),具有发射波长可调、荧光强度高、环境敏感等特点。

悠闲蓝可以用于活细胞荧光成像和标记蛋白质等生物分子,具有广泛的应用前景。

2. 生化传感器新型有机小分子还可以作为生化传感器应用于生物分子的检测等领域。

例如,近年来研究人员合成了一种新型的生化传感器,称为BTXB,可以检测细胞内钙离子浓度。

BTXB是一种由氮、硫、硒构成的有机小分子,具有高灵敏度、高选择性和长时间稳定性的特点,可以用于生物医学研究和药物开发。

三、新型有机小分子的合成方法要合成具有一定生物活性和分子识别能力的有机小分子,需要进行精细的化学合成。

近年来,研究人员提出了一系列新型有机小分子的合成方法,以满足生化荧光探针等需要。

荧光探针在水中重金属离子检测中的应用研究进展

荧光探针在水中重金属离子检测中的应用研究进展

第42卷第1期Vol.42No.12021青岛理工大学学报JournalofQingdaoUniversityofTechnology荧光探针在水中重金属离子检测中的应用研究进展纪雪峰,单 斌,王莎莎,马继平(青岛理工大学环境与市政工程学院,青岛266033)摘 要:重金属离子广泛存在于自然环境中,对环境质量和人体健康有显著影响.荧光探针在分析物检测方面具有灵敏度高、选择性好、操作简单等优点.因此,利用荧光探针法来检测重金属离子是一种有效的分析手段.综述了近年来可以应用于水溶液中汞、镉、铅、铬等重金属离子检测的有机小分子荧光探针和纳米荧光探针的研究现状,并展望了该领域的发展趋势和应用前景.关键词:重金属离子;荧光探针;纳米颗粒;水体中图分类号:X132 文献标志码:A 文章编号:1673 4602(2021)01 0109 10收稿日期:2020 08 29基金项目:国家自然科学基金资助项目(21808118);山东省自然科学基金资助项目(ZR2018BB065);青岛市博士后应用研究项目(2018102);青岛理工大学环境与市政工程学院开放课题(QUTSEME201908)作者简介:纪雪峰(1996 ),女,山东青岛人.硕士,研究方向为环境分析化学.E mail:jixuefeng2018@163.com. 通信作者:马继平(1972 ),女,河北南宫人.博士,教授,主要从事环境污染物分析测试新技术等方面的研究.E mail:majiping2012@163.com.犃狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狉犲狊犲犪狉犮犺狆狉狅犵狉犲狊狊狅犳犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀狋狆狉狅犫犲犻狀狋犺犲犱犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犺犲犪狏狔犿犲狋犪犾犻狅狀狊犻狀狑犪狋犲狉JIXuefeng,SHANBin,WANGShasha,MAJiping(SchoolofEnvironmentalandMunicipalEngineering,QingdaoUniversityofTechnology,Qingdao266033,China)犃犫狊狋狉犪犮狋:Heavymetalionswidelyexistinthenaturalenvironment,andhaveasignificanteffectonenvironmentalqualityandhumanhealth.Fluorescentprobeshavetheadvantagesofhighsensitivity,goodselectivityandsimpleoperationinanalytedetection.Therefore,theuseoffluorescentprobemethodtodetectheavymetalionsisaneffectiveanalyticalmethod.Inthispaper,theresearchstatusoforganicsmallmoleculefluorescentprobesandnanome terfluorescentprobesforthedetectionofheavymetalionssuchasmercury,cadmium,leadandchromiuminwaterisreviewed.Thedevelopmenttrendsandapplicationprospectoffluo rescentprobearealsodiscussed.犓犲狔狑狅狉犱狊:heavymetalion;fluorescentprobe;nanoparticle;waterbody随着经济的快速发展,工业生产中污染物的排放量不断增加,导致重金属污染问题越来越严重,不仅影响环境质量,还会对人体健康产生极大损害.尤其是生物毒性较大的汞、镉、铅、铬的污染,它们在水体中不能被分解,且微量就具有较高的毒性,会对人体的神经系统、消化系统、免疫系统及肾脏肝脏等造成较大危害[1 4].此外,铜、铁、锌等人体所必需的微量元素,过量的摄入同样会对机体产生严重的损害,引起阿尔茨海默病、帕金森病等一系列疾病[5 6].因此,对重金属离子的检测具有重要意义.常规检测重金属离子的方法有原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子青岛理工大学学报第42卷体质谱法等[7 8].虽然这些方法能较为准确地检测出金属离子的含量,但所需的仪器设备昂贵,操作复杂,且需要繁杂的样品前处理过程.可见紫外分光光度法和电化学分析法仪器设备简单,也可以用于金属的分析,但是可见紫外分光光度法测定金属选择性不好、灵敏度不高;电化学分析法存在电极衰减引起的重现性差等局限性.分子荧光法具有检测速度快、灵敏度高、选择性好、操作简单、成本低廉等特点,利用荧光探针检测重金属离子是一种便捷有效的方法.目前荧光探针主要应用于生物和环境领域,因此能够在水溶液中进行识别才具有更高价值.关于金属离子荧光探针的综述已有一些报道[9 10],但多是基于其中一种类型的荧光探针做的总结.本文从有机小分子荧光探针及纳米材料荧光探针两方面综述近几年来两种探针在水溶液中重金属离子检测中的研究现状.1 有机小分子荧光探针的应用研究图1 荧光探针的结构 典型的有机小分子荧光探针一般由识别基团、荧光基团和连接基团三部分组成(图1).由于荧光基团与识别基团的连接方式不同,使得荧光探针的识别机理也不尽相同.常见的重金属离子荧光探针识别机理主要包括:光诱导电子转移(PET)、分子内电荷转移(ICT)、荧光共振能量转移(FRET)以及激基缔合物(Excimer)等[11 12].目前对于可以选择性检测某种离子的有机荧光探针的研究已有很多的文献报道,主要包括罗丹明类、喹啉类、香豆素类、荧光素类、萘酰亚胺类等,不同类型的荧光探针在重金属离子检测领域得到应用.1.1 罗丹明类罗丹明类因具有良好的荧光性能和光稳定性,较高的荧光量子产率和水溶性,以及独特的螺内酰胺开环荧光增强响应,是制备荧光增强型探针的良好选择,也是目前为止研究最多的一类荧光探针.SUNNAPU等[13]以罗丹明6G肼和3,4二甲氧基苯甲醛为原料合成了一种新型荧光比色探针1(图2).在乙腈/水(体积比2∶8)溶液中,探针1对Cr3+表现出高选择性和灵敏度识别,加入Cr3+后,在554nm处出现一个新的发射带,荧光强度增加100倍以上,而EDTA的加入可使荧光猝灭,说明识别过程是可逆的.该探针的检出限达到1.78×10-8mol/L.图2 荧光探针1的结构图3 荧光探针2的结构曾竟等[14]则合成一种可以在双波长下检测Fe3+的罗丹明类荧光探针(图3).在乙醇/水(体积比1∶1)溶液中,加入Fe3+后溶液由无色变为红色,而荧光强度则出现两种相反的变化.当激发波长为350nm时,在508nm处发生了荧光猝灭现象,而当激发波长为530nm时,则在582nm处出现明显的荧光增强现象,且两种荧光强度的变化均与Fe3+的浓度在一定范围内具有良好的线性关系,检出限分别为4.56×10-6,7.4×10-7mol/L.011第1期 纪雪峰,等:荧光探针在水中重金属离子检测中的应用研究进展比率型荧光探针,是通过两处荧光强度变化的比值来对金属离子的浓度进行检测,在实际应用中可减弱其他环境因素的干扰.陈家逸等[15]设计了一种萘酰亚胺 罗丹明B荧光探针3可对Hg2+实现比率荧光检测(图4).在甲醇/乙腈/HEPES缓冲液(体积比8∶1∶1)中,基于荧光共振能量转移机理,Hg2+浓度的增加使探针在540nm处的荧光强度减弱,在580nm处出现新的发射峰且荧光强度逐渐增加,两处荧光强度的比值(犉580/犉540)与Hg2+浓度呈良好的线性关系,检出限为1.05×10-8mol/L.由于Hg2+还能引起探针荧光颜色从绿色到橙色的变化,作者还用含有该探针的滤纸检测了湖水水样中Hg2+浓度引起的比色响应,结果可靠.具有检测多种离子功能的荧光探针在应用中更具优势.LI等[16]设计合成了一种基于罗丹明衍生物的双功能探针(图5),对Pb2+具有荧光增强响应,还可通过颜色的变化检测Cu2+.在含1%乙腈的HEPES缓冲液中,Pb2+的加入可以引起荧光强度显著增加,但Cr3+,Hg2+和Cu2+的共存会使荧光强度降低30%~50%;而Cu2+浓度的增加会引起567nm处吸光度的增加以及颜色从无色到淡紫色的变化.探针4对Pb2+和Cu2+的检出限分别为2.5×10-7,5.8×10-7mol/L.图4 荧光探针3的结构图5 荧光探针4的结构1.2 香豆素类香豆素的母体本身不具荧光,但通过引入吸电子基团、供电子基团可形成含有推拉电子体系的荧光团,因其容易修饰且具有高量子产率、大斯托克斯位移及光稳定性好等优势,被用于荧光探针的合成研究.SHAIL等[17]合成了一种香豆素类荧光猝灭型分子探针5(图6),用于Pb2+的检测.在磷酸缓冲液中,只有Pb2+的加入可以使荧光发生猝灭,同时产生颜色的变化.实验表明,Pb2+与探针5形成1∶1的络合物,检出限达到1.9×10-9mol/L.另外,作者还将该探针溶液涂在测试带上用于金属离子的检测,发现Pb2+使测试带变为亮黄色且在紫外灯照射下无荧光.图6 荧光探针5的结构图7 荧光探针6的结构111青岛理工大学学报第42卷王海娜等[18]以香豆素为荧光基团、以酰腙为识别基团合成了2种检测Cu2+的荧光探针6a,6b(图7).在DMSO/H2O(体积比9∶1)溶液中,基于光诱导电子转移机理,随着Cu2+浓度的增加,两种探针在529nm处的荧光强度呈下降趋势,且当加入1倍量的Cu2+时荧光完全猝灭.其中探针6a的荧光强度可以在加入ED TA后恢复,表明探针与Cu2+的结合是可逆的.两种探针对Cu2+的检出限达到1.0×10-9mol/L.图8 荧光探针7的结构刘琪梦等[19]则通过引入三羟基作为识别基团合成了可用于纯水中检测Fe3+的香豆素类荧光探针7(图8).探针7对Fe3+具有高选择性,且响应迅速,加入Fe3+后荧光在2min内被猝灭,猝灭机理与Fe3+的顺磁性有关,其他金属离子的存在无干扰.该探针对Fe3+的检出限为1.16×10-6mol/L.1.3 喹啉类喹啉及其衍生物是一种良好的金属离子螯合剂,且喹啉本身具有刚性结构、大共轭体系和较好的水溶性,因此容易与金属离子络合,适合作为荧光增强型分子探针用于金属离子的检测.XU等[20]通过5 羟甲基 8 羟基喹啉和2,6 二氯甲基吡啶反应合成了荧光探针8(图9).探针8在不同缓冲液(Tris HCl,HEPES,PBS)及纯水中均能对Cd2+表现出良好的选择性荧光增强响应,检测的灵敏度也较高,检出限分别为2.301×10-7,2.389×10-7,3.261×10-7和2.165×10-7mol/L.VELMURU GAN等[21]以3 甲酰基 2 羟基喹啉和邻苯二胺为原料通过一步反应合成了荧光探针9(图10).该探针对Zn2+具有专一的选择性和灵敏度,在乙腈/水(体积比1∶1)溶液中加入Zn2+后,溶液表现出明显的颜色变化和荧光增强现象.图9 荧光探针8的结构图10 荧光探针9的结构图11 荧光探针10的结构SHI等[22]则合成了一种基于喹啉的双光子荧光探针10(图11),对Cd2+表现出优良的选择性和高灵敏度的荧光增强反应.在乙醇/水(体积比2∶8)溶液中随着Cd2+浓度的增加,原本在407nm处的发射带逐渐消失,在500nm处出现一个新的显著增强的发射带,且在439nm处形成了一个清晰的等发射点,这是由于探针与Cd2+形成的络合物发生了分子内电荷转移.该探针的检出限为2.363×10-8mol/L.过去几十年有关有机小分子荧光探针的研究已经有很多报道,除上述几种类型外,还有荧光素、萘酰亚胺、卟啉、氟硼二吡咯等其他类型的有机荧光探针也在重金属检测中被应用.表1总结了用于水体及细胞成像中重金属检测的小分子荧光探针的文献报道.211第1期 纪雪峰,等:荧光探针在水中重金属离子检测中的应用研究进展表1 用于水体及细胞中重金属离子检测的有机小分子荧光探针类型检测离子λex,em/nm荧光响应LOD/(mol·L-1)检测体系实际应用参考文献Hg2+440,580比率1.1×10-8甲醇/乙腈/HEPES制备成试纸[15]Cr3+490,554增强1.8×10-8乙腈/水细胞成像[13]罗丹明类Cr3+525,590增强2.3×10-8Tris HCl细胞成像、河水、自来水[23]Fe3+500,560增强1.9×10-8蒸馏水细胞成像[24]Pb2+483,576增强2.5×10-7含1%乙腈的HEPES细胞成像[16]Cu2+515,585增强1.1×10-7乙腈/水细胞成像、饮用水[25]Pb2+390,462猝灭1.9×10-9磷酸缓冲液涂在TCL板上用于检测[17]Cu2+445,529猝灭1.0×10-9DMSO/水—[18]香豆素类Fe3+400,471猝灭2.2×10-8水细胞成像[26]Hg2+508,578增强5.5×10-9乙腈/水细胞成像[27]Zn2+397,444增强9.4×10-8HEPES细胞成像[28]400,450增强9.1×10-8HEPES细胞成像[28]Zn2+380,425增强—乙腈/水自来水、石榴汁、市售药片[21]Cu2+352,623增强8.1×10-9DMSO/水细胞成像[29]喹啉类Hg2+243,415猝灭9.8×10-7去离子水细胞成像[30]Cd2+243,415增强3.9×10-8去离子水细胞成像[30]Cd2+325,500增强2.4×10-8乙醇/水细胞成像[22]Cd2+302,428增强2.2×10-7水—[20]2 纳米荧光探针的应用研究随着纳米技术的快速发展,将纳米材料用于荧光探针的构建受到了越来越多的关注.与传统的荧光染料相比,荧光纳米材料不仅有较高的荧光强度和良好的光稳定性,同时还具有纳米材料所特有的小尺寸效应、量子效应和表面效应等特性,可以弥补传统荧光染料的不足.目前,研究比较多的荧光纳米材料主要包括金属纳米材料、半导体量子点、碳点及金属 有机骨架材料等,在重金属离子检测方面有应用研究报道.2.1 金属纳米材料金属纳米材料包括金属纳米粒子和由10~100个金属原子组成的金属纳米簇,其常用的金属主要有金、银、铜等.其中金属纳米粒子主要通过与荧光物质间的荧光共振能量转移作用使荧光物质发生荧光猝灭来实现荧光检测.而金属纳米簇是自身具有荧光发射,其与待测物的相互作用可使荧光性质发生改变,从而可用于荧光探针的构建.本课题组制备了一种水溶性的金纳米粒子可以用于水中Cu2+的荧光检测[31].通过将异硫氰酸荧光素(FITC)加入到柠檬酸盐改性的AuNPs中,合成了FITC AuNPs,由于两者间形成了FRET系统使得FITC的荧光被极大地猝灭,而半胱氨酸的加入可以取代FITC与AuNPs形成比Au SCN亲和力更强的311青岛理工大学学报第42卷Au S键从而将FITC释放出来使其荧光恢复.但当Cu2+存在时,Cu2+可以催化半胱氨酸被氧气氧化生成二硫胱氨酸,而二硫胱氨酸不能置换出FITC.因此,在半胱氨酸存在的条件下随着Cu2+浓度的增加,FITC AuNPs在溶液中的荧光强度会降低,且存在良好的线性关系,可以实现Cu2+的定量检测,检出限达到3.7×10-10mol/L.在桶装矿泉水中加入Cu2+进行检测,检出限为6.4×10-10mol/L.与金属纳米粒子相比,金属钠米簇因具有粒径小、荧光强、稳定性好以及核壳结构等特性在荧光探针方面的应用更多.ZHANG等[32]以胞嘧啶为稳定剂制备了金纳米簇作为检测Ag+和Hg2+的双功能荧光探针.在AuNCs溶液中加入Ag+会形成AuAgNCs使荧光增强,而在AuAgNCs溶液中再加入Hg2+则会引起荧光猝灭,响应速度快且稳定,推测其机理与Ag Au金属键和Hg2+ Ag+高亲和金属键的相互作用有关.该探针对Ag+和Hg2+的检出限分别为1.0×10-8和3.0×10-8mol/L,将其用于湖水样品的检测结果显示,对Ag+的测定结果与给定浓度之间的相对误差小于5%,对Hg2+的检测回收率为97.7%~99.3%.PENG等[33]则以甲硫氨酸做稳定剂制备了一种金纳米簇作为荧光增强型探针检测Cd2+.实验表明只有Cd2+的加入会使溶液荧光增强,推测是由于Cd2+与配体上的氨基或羧基螯合使AuNCs聚集所致,其他金属阳离子和阴离子均无响应.该方法的检出限为1.225×10-8mol/L,对自来水、湖水和奶粉样品的分析发现平均回收率在95.33%~106.21%.与金银纳米簇相比制备铜纳米簇所需的前驱体更丰富且成本更低.HU等[34]以谷胱甘肽(GSH)作为还原剂和稳定剂制备了铜纳米簇(GSH CuNCs)检测Hg2+.Hg2+的加入与配体表面的羧基和巯基发生反应诱导了CuNCs的聚集从而使荧光猝灭,检出限为3.3×10-9mol/L.该方法对自来水、嘉陵江水及大米中Hg2+的测定结果与氢化物发生原子荧光光谱法测定结果吻合度较好.2.2 半导体量子点半导体量子点一般由II VI族或III V族的元素组成,是粒径在1~10nm的零维纳米材料,由于其粒径小于或者接近激子半径,因此表现出量子限制效应使连续的能带结构变成分立状态,在被激发后可发射荧光.其独特的量子尺寸效应,使其光谱具有可控性,同时存在激发波长范围宽、发射光谱窄且对称的特性.目前报道的该类荧光探针多为CdX(X=Te,Se,S)量子点,通过不同的物质对量子点表面进行修饰来增加其水溶性及对金属离子的选择性.高雪等[35]用巯基乙酸作稳定剂合成了CdTe量子点,然后通过乙二胺四乙酸钠(EDTA)与Cd2+的络合作用对量子点的表面进行了化学蚀刻,形成Cd2+空腔使荧光猝灭,以此作为一种Cd2+增强型荧光探针,检出限为1.0×10-9mol/L.用于自来水和海水水样中Cd2+的检测,回收率为97%~108%.将有机荧光团连接到量子点上是制备比率型纳米探针的一种简单有效的方法.MA等[36]将具有绿光发射的咪唑荧光团(PIPT)螯合到有红光发射的CdTe@SiO2量子点表面,作为一种比率型纳米探针PIPT CdTe@SiO2QDs用来检测Hg2+.由于PIPT与Hg2+存在强螯合作用,加入Hg2+后PIPT的荧光被猝灭,但CdTe量子点对Hg2+不敏感荧光不变,因此出现荧光比值的变化,该方法对Hg2+的检出限为6.5×10-9mol/L,用于自来水和湖水水样回收率为96.3%~107.0%.2.3 碳点碳点是以碳为基础的粒径小于10nm的零维碳纳米材料,具有荧光性质,因具有水溶性好、光稳定性高、原料成本低、制备过程简单、易功能化、毒性低及发射光谱可调等优点,可用于催化、荧光检测、生物成像等领域,是一种较为理想的构建荧光纳米探针的材料.ZHANG等[37]以天冬氨酸和碳酸氢铵为原料通过微波辅助热解法一步合成了石墨烯量子点(GQDs),可用于检测水中的Fe3+.选择性实验显示在Fe3+,Fe2+,Hg2+,Ca2+,Ba2+,Cu2+,Mn2+,Mg2+,Ni2+,Ag+中只有Fe3+会使荧光明显猝灭,因为Fe3+会与GQDs表面的酚羟基络合导致电子跃迁到Fe3+的d轨道,从而引起荧光猝灭.该探针的检出限为2.6×10-7mol/L.GEDDA等[38]则以虾壳为原料制备了一种低成本、响应速度快、选择性和灵敏度高的绿色荧光碳点(CD),基于Cu2+与CD表面氨基的配位作用形成铜胺络合物及内过滤效应使荧光发生猝灭,可对水中Cu2+进行检测,检出限为5.0×10-9mol/L.411第1期 纪雪峰,等:荧光探针在水中重金属离子检测中的应用研究进展碳点荧光探针对金属离子的选择性识别除上述通过CD表面官能团直接识别外,还可通过配体对CD的修饰提高选择性以及CD与其他物质结合形成复合物来提高识别能力.XU等[39]合成了一种经胸腺嘧啶(T)修饰的CD,用于检测Hg2+.通过形成T Hg2+ T结构使CDs T聚集,导致荧光强度降低.荧光探针CDs T对Hg2+的检出限为9.3×10-10mol/L,用于自来水与池塘水水样的检测,回收率为97.2%~103.7%.2.4 金属 有机骨架材料金属 有机骨架材料(MOFs)是由金属离子和有机配体自组装形成的多孔材料,具有尺寸、结构可调性,在催化、吸附、气体储存与分离等方面具有良好的应用前景.本课题组制备了磁性MOFs及MOF混合基质膜等复合MOFs材料,作为吸附剂去除环境中的污染物或作为色谱分析样品前处理的富集吸附材料[40 43].MOFs材料也具有优异的发光特性,可作为新型纳米荧光材料用于重金属离子的检测.RUDD等[44]通过引入荧光团和功能化的二羧酸酯连接体合成了一系列MOFs材料(LMOF 261,262,263),用于检测和去除水中重金属离子.研究发现LMOF 263可在很低的浓度下(3.3×10-9,1.97×10-8mol/L)检测Hg+和Pb2+.另外,LMOF 263还可以对Hg+进行吸附,在30min内去除率达到99.1%.目前报道的MOFs荧光探针多为荧光猝灭型,易受周围环境因素影响,相比之下荧光增强型及比率型探针能更好地应用于水中重金属离子的检测.CHEN等[45]制备了含卟啉基团的金属 有机骨架材料PCN 222 Pd(Ⅱ)对水溶液中的Cu2+表现出荧光增强响应.Cu2+的加入取代了与卟啉中氮原子螯合的钯离子,将钯离子置换出来并还原成钯纳米粒子从而催化了Heck反应,使苯胺转化为具有荧光的吲哚产物,产生荧光增强响应.检出限为5.0×10-8mol/L.WANG等[46]则合成了一种具有双发射峰的MOFs作为比率型荧光探针检测Cu2+.加入Cu2+后,Eu(III)复合物的中心Eu3+被Cu2+取代导致荧光发生猝灭,而荧光素异硫氰酸酯(FITC)的荧光信号不变可作为参考,呈现出比值荧光响应.该探针对Cu2+的检测灵敏度很高,检出限达到1.0×10-10mol/L,且在人血清样本、黄河水及自来水样品中1.0×10-10mol/L的Cu2+也可以被检测到,证明了这种探针的可行性.稀土 有机骨架荧光探针由于稀土离子自身的特性和配体向稀土离子的能量转移而呈现的发光现象,使其在荧光分析检测方面得到应用.XIA等[47]采用溶剂热法合成了以稀土离子为中心的MOFs可用于水溶液中Hg2+的检测.向溶液中加入Hg2+后,由于Hg2+与配体的相互作用显著影响了配体向中心Tb3+的能量转移从而发生荧光猝灭,检出限为4.4×10-9mol/L.将该方法用于河水、饮用水和自来水水样的检测,相对标准偏差小于4.80%.除上述几类纳米荧光探针外,还有磁性纳米粒子、硅纳米材料以及纳米纤维素等也被用于重金属离子荧光探针的构建.表2总结了用于水中重金属离子检测的纳米荧光探针的文献报道.表2 用于水中重金属离子检测的纳米荧光探针类型材料检测离子λex,em/nm荧光响应LOD/(mol·L 1)实际应用参考文献FITC AuNPsCu2+490,514猝灭6.4×10 10桶装矿泉水[31]金属纳米材料AuAgNCsHg2+370,560猝灭3.0×10 8湖水[32]GSH CuNCsHg2+360,445猝灭3.3×10 9自来水、江水、珍珠米、糯米[34]Methionine CappedAuNCsCd2+420,565增强1.2×10 8自来水、湖水、奶粉、骆驼奶粉[33]BSA Ag/AualloyNCsPb2+500,620猝灭2.0×10 9饮用水、湖水[48]511青岛理工大学学报第42卷续表2类型材料检测离子λex,em/nm荧光响应LOD/(mol·L 1)实际应用参考文献PIPT CdTe@SiO2QDsHg2+300,500/657比率6.5×10 9自来水、湖水[36]半导体量子点Ag+@Cys CdSQDsHg2+372,545猝灭9.0×10 8饮用水[49]EDTA蚀刻的MPA CdTeQDsCd2+400,—增强1.0×10 9自来水、海水[35]CDs THg2+360,450猝灭9.3×10 10自来水、池塘水[39]碳点Aptamer rGQDsPb2+300,435增强6.0×10 10—[50]CDsCu2+330,405猝灭5.0×10 9海水[38]ILCDsCr(Ⅵ)380,458猝灭1.5×10 8自来水[51]PCN 222 Pd(Ⅱ)Cu2+275,351增强5.0×10 8—[45]TbTATABHg2+350,—猝灭4.4×10 9河水、饮用水、自来水[47]金属有机骨架材料MOF 525Cu2+512,651猝灭6.7×10 8矿泉水、自来水[52]MOF 525NPsCu2+414,646猝灭2.2×1010饮用水、细胞成像[53]ZIF 8Cu2+330,515/616比率1.0×1010人血清样本、黄河水、自来水[46]3 结论与展望随着重金属污染问题日益加剧,重金属离子的检测受到越来越多的关注.近年来,荧光探针在重金属离子检测方面取得了较好的进展.然而,仍然存在一些问题亟待解决.例如:一些荧光探针特异性不高,容易受其他金属离子的干扰,或灵敏度不够,达不到检测的要求;部分荧光探针结构复杂,合成较为困难,多数有机荧光探针是在有机溶剂跟水的混合体系中进行的,很难广泛应用.因此,要优化已有荧光探针的性能,进一步提高检测的灵敏度和选择性以及探针的实用性.另一方面,对于性能优良、合成简单、成本低、水溶性好且能够实时检测的新型荧光探针的设计还需要进一步的探究.此外,还可以对荧光探针的检测机理进行深入研究,将多种检测手段联用,设计出抗干扰能力更强,更具实际应用价值的荧光探针.总之,随着荧光探针技术的进一步发展,新型、高效、适用范围广的荧光探针将被不断开发,使其在化学、环境科学、生物科学等领域具有更加广泛的应用前景.参考文献(犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊):[1] NOLANEM,LIPPARDSJ.Toolsandtacticsfortheopticaldetectionofmercuricion[J].ChemicalReviews,2008,108(9):3443 3480.[2] JARUPL,AKESSONA,JARUPL.Akessonacurrentstatusofcadmiumasanenvironmentalhealthproblem[J].ToxicolApplPhar macol,2009,238(3):201 208.[3] SUNGTW,LOY,CHANGI,etal.HighlysensitiveandselectivefluorescenceprobeforCr3+iondetectionusingwater solubleCdSeQDs[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2014,202:1349 1356.[4] 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酸响应的近红外溶酶体有机小分子荧光探针及其制备方法和应用[发明专利]

酸响应的近红外溶酶体有机小分子荧光探针及其制备方法和应用[发明专利]

专利名称:酸响应的近红外溶酶体有机小分子荧光探针及其制备方法和应用
专利类型:发明专利
发明人:张凡,王尚风,何月
申请号:CN202011135459.4
申请日:20201021
公开号:CN112225721A
公开日:
20210115
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明属于生物材料技术领域,具体为一种酸响应的近红外溶酶体有机小分子荧光探针及其制备方法和应用。

本发明的小分子荧光探针,其核心结构是在前人研究的基础上扩展创新设计出的一类新的荧光探针结构,完成了合成路线的研究,且修饰了取代的哌嗪基团N(CH(CH)NR。

该有机染料小分子荧光探针具备溶酶体靶向特性和酸激活荧光增强特性;可作为近红外溶酶体探针用于生物成像。

申请人:复旦大学
地址:200433 上海市杨浦区邯郸路220号
国籍:CN
代理机构:上海正旦专利代理有限公司
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化学生物学中的小分子探针研究

化学生物学中的小分子探针研究

化学生物学中的小分子探针研究引言化学生物学的发展为探究生物分子和生物体之间相互作用提供了有力工具,其中小分子探针的研究也日益成为话题。

小分子探针在生物内外环境中的应用不断拓展,其结合生物学、化学和物理学等多学科交叉,为实现对生命过程的深入理解提供了有益手段。

本文将就小分子探针在化学生物学中的研究作一探讨。

一、小分子探针的定义小分子探针指的是小分子化合物,其在生物体系中表现出一定的物理、化学特性,并在分子水平上与生物大分子(如蛋白质、核酸等)相互作用,以便了解其生物学特性及生命活动的机制。

小分子探针有着较小的分子体积和相对简单的化学结构,便于对其进行合成、修饰和修饰。

利用小分子探针可以对于生命过程中的分子相互作用机制进行研究,其在高通量筛选、药物发现、生物成像等领域有广泛的应用。

二、小分子探针的分类小分子探针的一般分类有化学荧光探针、融合蛋白探针、放射性同位素标记探针及药物分子等。

1. 化学荧光探针化学荧光探针是以具有荧光性质的小分子为核心结构,以其对生物分子的特异性结合,实现对生物分子的探测和成像。

荧光探针可以通过不同的光谱性质对生物分子进行特异性标记和便于可视化。

例如,用荧光探针的荧光标记特异蛋白质,可以实现对于生命过程中蛋白质相互作用关系等信息的捕捉。

2. 融合蛋白探针融合蛋白探针是将荧光蛋白等标记单元融合到感兴趣的生物分子上进行研究的方法。

利用蛋白质工程技术构建可以识别具体生物分子的融合蛋白探针,在定量和实时监测细胞内分子过程中,有着广泛的应用。

3. 放射性同位素标记探针放射性同位素标记探针利用放射性同位素来标记小分子,利用放射性检测技术来探测这些生物分子的含量和位置,并实现药物代谢研究。

目前市场上大多数新药被标记为放射性药物,这在新药研发中应用广泛。

4. 药物分子药物分子是一种广泛应用的小分子探针,通过对药物分子与靶分子的交互作用,了解药物分子对生物过程的影响,可用于药物筛选及药物研究等方面。

有机小分子的荧光探针设计与应用论文素材

有机小分子的荧光探针设计与应用论文素材

有机小分子的荧光探针设计与应用论文素材一、引言有机小分子作为一类重要的化学物质,在荧光探针设计与应用领域具有广泛的应用潜力。

本论文旨在探讨有机小分子荧光探针的设计原理与应用案例。

二、有机小分子荧光探针设计原理1. 荧光基团选择有机小分子荧光探针的设计首先需要选择适合的荧光基团。

荧光基团应具备强荧光信号和良好的荧光性能,如荧光寿命长、荧光发射波长可调等。

2. 结构优化为了提高荧光探针的性能,可以通过在荧光基团上引入特定的官能团,进一步调控其荧光性质。

例如,引入供体-受体结构,增强荧光基团的电子转移效率,从而提高荧光强度和稳定性。

3. 溶剂效应考虑溶剂对荧光探针的荧光性能有明显影响。

因此,在设计荧光探针时需要考虑溶剂效应,选择适合的溶剂或构造具有溶剂敏感性的探针,以实现对目标物的响应。

三、有机小分子荧光探针的应用案例1. 生物医学应用有机小分子荧光探针在生物医学领域具有广泛的应用前景。

例如,利用有机小分子荧光探针可以实现对特定生物标志物的高灵敏度检测,用于疾病诊断和治疗过程的监测。

2. 环境监测有机小分子荧光探针也可以应用于环境监测中,对水质、空气等污染物进行快速、准确的检测。

通过设计合理的有机小分子荧光探针,可以实现对特定污染物的高选择性和灵敏度检测。

3. 安全防范有机小分子荧光探针还可用于安全防范领域,如炸药检测、毒物检测等。

通过设计灵敏度高、快速响应的有机小分子荧光探针,可以实现对危险物质的及时检测和预警。

四、结论有机小分子荧光探针的设计与应用在各个领域具有重要的价值和意义。

通过设计合理的荧光基团和优化分子结构,可以实现对目标物的高灵敏度、高选择性的检测。

未来,有机小分子荧光探针在生物医学、环境监测和安全防范等领域仍然有很大的发展潜力。

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有机化学在新型荧光探针合成中的应用研究

有机化学在新型荧光探针合成中的应用研究

有机化学在新型荧光探针合成中的应用研究随着化学技术的不断发展,荧光探针作为一种重要的分析工具,被广泛应用于生物、医学和环境等领域。

有机化学作为荧光探针合成的重要手段,为荧光探针的设计和开发提供了丰富的原料和反应方法。

本文将探讨有机化学在新型荧光探针合成中的应用研究。

第一部分:有机合成方法在荧光探针合成中的应用有机合成方法是合成荧光探针的关键步骤之一。

常用的有机合成方法包括取代反应、缩合反应和环化反应等。

这些方法通过改变分子结构,引入荧光基团或调控电子结构,从而实现荧光探针的合成。

1. 取代反应取代反应是合成荧光探针的重要手段之一。

通过在分子中引入不同的取代基团,可以调控分子的荧光性质。

例如,引入电子给体基团可以增强分子的荧光强度,而引入电子受体基团可以改变分子的发射波长。

此外,还可以通过在分子中引入功能性基团,如氨基、羟基等,实现对分子的可控修饰。

2. 缩合反应缩合反应是合成染料类荧光探针的常用方法。

通过在分子中引入具有共轭结构的芳香环或杂环,可以实现分子的荧光共振能量转移,从而改变分子的发射波长和荧光强度。

此外,还可以通过缩合反应将分子与不同的功能基团连接起来,实现对分子的自组装和多余空间效应的调控。

3. 环化反应环化反应在荧光探针合成中起着重要作用。

通过环化反应,可以将线性分子转变为具有刚性结构的环状分子,从而提高分子的稳定性和荧光性能。

此外,环化反应还可以引入空间位阻基团,增强分子的荧光效率。

第二部分:荧光基团在有机合成中的应用荧光基团是合成荧光探针的重要组成部分。

通过选择合适的荧光基团,可以调控荧光探针的发射波长、荧光强度和荧光寿命。

常用的荧光基团包括吲哚、苯并噻吩、硝基苯等。

这些荧光基团具有不同的电子结构和荧光性能,可以根据需要进行选择和设计。

1. 吲哚基团吲哚是一种常用的荧光基团,具有较高的荧光量子产率和荧光寿命。

吲哚基团具有宽波长的发射光谱,适合用于荧光探针的设计和开发。

通过在吲哚基团上引入不同的取代基团,可以改变分子的荧光性能,实现对荧光探针的调控。

荧光探针的合成与生物应用研究

荧光探针的合成与生物应用研究

荧光探针的合成与生物应用研究荧光探针作为一种在生物学和化学领域中得到广泛应用的工具,被用于生物分析、药物研发、生命科学研究等方面。

本文将探讨荧光探针的合成方法以及在生物学中的应用。

一、荧光探针的合成方法荧光探针的合成方法多种多样,以下将介绍几种常见的方法:(1)分子内荧光探针合成:这种方法通过在分子结构中引入特定的荧光基团,实现了分子的内部发光效应。

例如,在分子内部引入苯基、萘基等芳香基团,通过化学反应将这些基团与荧光物质结合,就可以合成出具有荧光性质的分子。

(2)共轭聚合物合成:共轭聚合物是指具有共轭电子结构的高分子化合物,其具有较强的吸收和发射荧光的能力。

将共轭聚合物与特定的功能基团结合,可以合成出荧光探针。

例如,将共轭聚合物与羧基、氨基等官能团反应,可以获得荧光探针。

(3)量子点合成:量子点是一种纳米级的半导体晶体,具有优异的荧光特性。

通过合成技术,可以调控量子点的尺寸和表面官能团,从而实现对荧光探针吸收和发射波长的调节。

量子点的合成方法包括热分解法、溶剂热法等。

二、荧光探针在生物学中的应用荧光探针在生物学研究中具有广泛的应用价值,以下将介绍几个常见的应用领域:(1)生物分析:荧光探针可以用于生物分析领域,例如DNA测序、蛋白质检测等。

通过合成特定的荧光标记物,可以实现对生物分子的检测和定量分析。

(2)细胞成像:荧光探针在细胞成像中起到关键的作用,可以实现对细胞内结构和功能的可视化。

例如,通过合成带有特定荧光基团的分子,可以实现对细胞内亚细胞结构的显微观察。

(3)药物研发:荧光探针在药物研发中用于药物靶点的筛选和药效评估。

合成具有高选择性和敏感性的荧光探针,可以用来研究药物在生物体内的分布和代谢过程。

三、结论荧光探针的合成方法多样,并且在生物学中具有广泛的应用。

通过对荧光探针的合成与生物应用研究,可以进一步推动生物学和药物研发领域的发展,为人类健康做出更多贡献。

小分子探针的研究及其在化学中的应用

小分子探针的研究及其在化学中的应用

小分子探针的研究及其在化学中的应用小分子探针是指那些用作识别和检测化学物质的分子,通常具有高度选择性和敏感性。

由于其具有广泛的应用性和特殊的研究价值,小分子探针在各种领域如化学、生物医学和环境监测中得到了广泛的研究和应用。

一、小分子探针的种类及其特点小分子探针的种类包括有机分子、纳米颗粒和聚合物等,它们的特点各有不同。

有机小分子非常适合于对生物大分子如核酸、蛋白质和细胞进行标记和检测。

纳米颗粒因其特殊的光学和磁性性质被广泛应用于生物医学和材料科学中。

聚合物对化学物质的识别和检测具有较高的选择性和灵敏度,因此在环境监测和安全检测方面应用广泛。

二、小分子探针在化学领域中的应用小分子探针在化学领域中的应用十分广泛。

例如,用作化学传感器的小分子探针可以对化学物质进行快速、高效的检测,可以在制药、化妆品和食品等行业中得到广泛应用。

另外,小分子探针也被用作荧光标记剂、反应催化剂和气体分析剂等,为化学领域带来了许多重大的突破和进步。

三、小分子探针在生物医学领域中的应用小分子探针在生物医学研究和临床诊断中也发挥着重要作用。

例如,使用荧光小分子探针可以对生物大分子如核酸和蛋白质进行标记和检测;使用磁性小分子探针可以进行磁共振成像;使用放射性小分子探针可以进行正电子发射断层扫描等,这些方法已成为生物医学领域的重要研究工具和诊断手段。

四、小分子探针在环境监测领域中的应用小分子探针在环境监测和安全检测中也得到了广泛应用。

例如,使用有机小分子探针可以对水中的污染物进行检测和分析;使用纳米颗粒可以对空气中的有害气体进行检测和监测;使用聚合物可以对土壤中的重金属进行检测和分析等,小分子探针为环境保护和安全生产提供了重要的技术支持。

综上所述,小分子探针作为一种新型的化学研究工具和技术手段,在各个领域都发挥了重要作用。

随着科学技术的不断进步和研究的不断深入,小分子探针在各个领域的研究和应用将会变得越来越广泛和重要。

席夫碱型有机小分子荧光探针的制备与表征——推荐一个综合化学实验

席夫碱型有机小分子荧光探针的制备与表征——推荐一个综合化学实验

No. 2
doi: 10.3866/PKU.DXHX201906008
71
可以促进学生对化学知识体系的融会贯通,更能激发学生学习化学的积极性。这些知识的掌握和实 践,也为本科毕业生在相关领域的深造和就业打下良好的基础。
本实验包括席夫碱有机配体的设计合成,红外光谱、核磁共振波谱和质谱等常用表征手段的应 用,以及荧光性质的研究等内容。
Department of Chemistry, School of Chemistry and Biological Engineering, University of Science and Technology Beijing, Beijing 100083, P. R. China.
Abstract: In this paper, a new experiment named “synthesis and characterization of a fluorescent molecule based on Schiff-base” is introduced. It contains the synthesis and characterization of organic compounds, the determination of fluorescence, and the detection of metal ions. This experiment is helpful for students to better understand inorganic chemistry, organic chemistry and analytical chemistry. Moreover, it gives students an opportunity to know the study of organic fluorescent probes. This will stimulate students’ interest in scientific research and cultivate their research ability. Thus, this experiment can be introduced to senior undergraduates.
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PET识别分析物理论示意图
PET过程可以用前线轨道理论具体解释:当识别基 团不存在时,荧光团被光激发后,其最高占据轨道 (HOMO)的一个电子跃迁到最低空轨道(LUMO),能 够产生荧光; 若外来识别基团的HOMO或LOMO轨道介于荧光团 两轨道能量之间,此时就可以发生识别基团与荧光团之间 的电子转移而导致荧光的猝灭。即PET过程阻止了荧光团 的一个电子从激发态到基态的非辐射跃迁途径,降低了荧 光团的量子产率,表现为荧光强度的减弱或淬灭。
4 激基缔合物/复合物( excimer / exciplex )

激基缔合物指一些荧光团在激发态与另一相同或不同的基态荧光 团接近时往往能生产激基缔合物(通过π-π堆积作用形成激基缔合物) 可观察到双重荧光。它的发射光谱不同于单体的荧光,新的荧光会产 生一定的红移,且出现强而宽的,无精细结构发射峰。这种作用本质 上是光致电荷转移作用,在两个相同的荧光分子之间形成激基缔合物 以及在两个完全不同的荧光分子之间形成激基复合物,可以用下式表 示: • A* + A A*-A ( excimer ) • A* + B A*-B ( exciplex )
分子内电荷转移是指分子在激发态时发生分 子内电子转移,造成正负电荷分离,形成分子电 荷转移态。分子内电荷转移荧光探针分子通常是 荧光团上同时连有推电子基团(电子给体,Donor) 和吸电子基团(电子受体,Acceptor),通过π键提 供电子转移的通道,形成强的推-拉作用的共轭体 系,其吸电子基团或推电子基团本身充当识别基 团的一部分。当识别基团和被分析物结合后,作 为识别基团的供电子部分或拉电子部分的推拉电 能力发生的改变,整个体系的的π电子结构重新 分布,从而导致吸收光谱,发射光谱发生变化, 主要是光谱红移或蓝移 。
有机小分子荧光探针的研究
什么是荧光探针?
荧光探针是建立在光谱化学和光学波 导与测量技术基础上,选择性的将分析对 象的化学信息连续转变为分析仪器易测量 的荧光信号的分子测量装置。 荧光探针受到周围环境的影响,使其 发生荧光发射发生变化,从而使人们获知 周围环境的特征或者环境中存在的某种特 定信息
荧光分子探针ห้องสมุดไป่ตู้优点
染料 ,由于苯环间氧桥的存在,从而分子具有刚 性共平面结构,使其分子结构稳定性增强,开环 状态下,在激发光的作用下能产生强烈的吸收和 荧光,其最大发射波长位于500-700 nm之间,为 红色可见光区,可有效的避开生物体系背景荧光, 从而能提高探针的灵敏度,因此是生物分析中经 常用到的荧光探针,具有很高的研究和应用价值。
3 荧光共振能量转移(FRET, fluorescence resonace
energy transfer)

荧光共振能量转移指一个荧光体系含有两个 荧光团,一个充当能量供体D,另一个为能量受体 A,当用供体D的激发去激发荧光体系时,可以发 生从D到A的非辐射能量转移,从而发射出受体荧 光团的荧光。荧光共振能量转移发生必须具备以 下几个条件:
荧光探针的响应机理
荧光分子探针主要有如下几种响应机理:
1、光诱导电子转移(PET, photo-induced electron transfer) 2、分子内电荷转移(ICT, intramolecular charge transfer) 3、荧光共振能量转移(FRET, fluorescence resonance energy transfer) 4、激基缔合物(excimer/exciplex)
识别基团分别为电子供体和电子受体的ICT过程光谱移动示意图 (其中D、A分别表示电子给体和电子受体)
在ICT机理中,有一种情况被称为扭曲的分子内电 荷转移(TICT,twisted intramolecular charge transfer),在具有 推-拉电子共振体系的荧光分子中,如果推电子基(如二 甲氨基)是通过单键与荧光基团相连的,当荧光团被光 激发后,由于强烈的分子内光诱导电荷转移,导致原 来与芳环共平面的电子给体绕单键旋转,而与芳环平 面处于正交状态,原来的共振系统被破坏,使部分电 荷转移变为完全的电子转移,形成TICT激发。 当形成TICT激发时,原有的ICT荧光则被淬灭。 TICT态通常不发射或发射较弱的长波荧光,在少数情 况下可出现ICT与TICT双重荧光现象。
1 光诱导电子转移(PET, photo-induced electron transfer)
光诱导电子转移是指电子给体或电子受 体受光激发后,激发态的电子给体与电子 受体之间发生电子转移的过程。 识别基团与被分析物结合之前,荧光基 团受激发,最终被光激发到激发态的电子 不能跃迁到基态,使得荧光基团的荧光淬 灭。而识别基团与被分析物结合后,PET过 程受阻,荧光基团的荧光得以恢复。
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化合物12基于激基缔合物的荧光探针,加 入汞离子之前两个芘分子相距很远,因此发射 的是芘单体荧光,当汞离子存在时,O、N原 子与其配位形成化合物13,从而拉近了两个芘 分子之间的距离,且让其平行排列,最后产生 二聚体荧光。
5、 有机载体在荧光分子探针中的应用 • 罗丹明罗丹明及其衍生物是一种氧杂蒽类荧光
荧光基团
该原理是利用识别基团分别与荧光基团和被分析物结合能 力的不同来实现对被分析物的检测。
识别基团和荧光基团形成络合物,当被分析物加入到该体系中时,由 于识别基团与被分析物的结合能力要强于识别基团与荧光基团的结合能力, 因此被测物将荧光基团置换出来,从而引起了整个体系荧光等化学参数的 变化,进而为仪器或者裸眼识别,该原理常用于设计阴离子荧光探针。
PET1 识别基团对荧光团的PET过程发生和受阻的前线轨道理论解释
第一种是识别基团对荧光基团的电子转移(PET1),如图1.9所示, 即识别基团的HOMO轨道介于荧光基团的HUMO和LUMO轨道之间,当被 分析物不存在时,荧光基团被激发后,识别基团的HOMO轨道的电子转移 到荧光基团的HOMO轨道,致使荧光基团被激发到LUMO轨道上的电子无 法回到基态而难以产生荧光,导致荧光淬灭,即PET1过程发生。 当识别基团与被分析物结合后,识别基团HOMO轨道能量降低,使 PET过程受阻,这样荧光基团的激发态电子可以返回基态,荧光恢复 。
• • • • • • • 灵敏度高 选择性好 使用方便 成本低 不需预处理 不受外界电磁场影响 远距离发光
荧光分子探针的结构
荧光分子探针通常由 三部分组成:
• 识别基团(receptor) • 荧光基团(fluorophore) • 连接体部分(spacer)
Fluorephore Spacer hv F S R Analyte Receptor
3、化学计量计法
探针分子
被分析物
新物质A
探针分子
被分析物
中间体
新物质B
新物质C
基于化学计量计设计的荧光探针 (I)被分析物和探针分子反应形成了共价化合物; (II)被分析物催化探针分子反应生成两种新物质
化学计量计法是利用探针分子和被分析物 之间发生的特定化学反应(一般是不可逆反应) 来改变探针所处的化学环境,从而对被分析物 进行识别的一种方法。根据化学计量计法设计 的探针可以称为化学计量计,主要包括两种类 型:
PET2 荧光团对识别基团的PET过程发生和受阻的前线轨道理论解释 第二种是荧光基团对识别基团的电子转移(PET2),如上图所示, 即识别基团的LUMO轨道介于荧光团的HUMO和LUMO轨道之间,当 被分析物不存在时,荧光基团被激发后,荧光基团LUMO轨道上的电 子转移到就近的识别基团的LUMO轨道上,无法回到其基态而难以产 生荧光,导致荧光淬灭,即PET2过程发生。 当被分析物与识别基团结合后,识别基团的LUMO的能量升高, PET过程受阻,荧光基团的激发态电子可以返回基态,荧光恢复。
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化合物10是以氟硼荧和罗丹明为荧光团设计的FRET 荧光探针,由于氟硼荧的荧光发射光谱与罗丹明的吸收光 谱有较大范围重叠,通过连接臂连接,氟硼荧作为能量供 体,罗丹明作为能量受体,加入被分析物后,荧光共振能 量转移过程便能实现。加入汞离子之前,表现为氟硼荧的 绿色荧光,汞离子的存在能促使氨基硫脲形成噁二唑酮类 化合物而致使罗丹明内酰胺结构开环,此时氟硼荧的能量 传递给罗丹明,最终使得共振能量转移发生,氟硼荧的发 射峰减弱,从而发射出罗丹明的红色荧光,从而实现了对 汞离子的比率型检测。
总的来说,识别基团对荧光基团的电子 转移,即识别基团的HUMO轨道上的电子 占据了荧光基团的HOMO轨道;荧光基团 对识别基团的电子转移(PET2),即识别基团 LUMO消耗掉了荧光基团被激发的电子,两 者最终导致荧光基团被激发的电子不能回 到基态,使荧光被淬灭。
2 、分子内电荷转移
(ICT,intramolecular charge transfer)
Cu2+
CNCu(CN)2
3
4
化合物3以氟硼荧为荧光团修饰了DPA为识别基团,探 针本身荧光很强,但与铜离子络合后可形成结构3,从而淬 3 灭了氟硼荧的荧光,加入氰根离子后,由于铜离子与氰根离 子的结合常数更大,从而把作为荧光基团的氟硼荧衍生物从 络合状态中置换出来得到结构4,使之进入溶液,荧光恢复, 而其它的阴离子没有这样的现象,因此可以实现对氰根离子 的检测。
被分析物
信号输出
键合-信号输出法是指将探针中的识别基团和荧光基团 通过共价键连接起来设计荧光探针的方法。
当识别基团与被分析物结合时会引起荧 光基团的化学环境发生变化,通过颜色的 改变、光谱的移动、荧光强度的增减等现 象来表现,这些变化可被裸眼或者仪器识 别。这是目前为止在设计荧光探针中应用 最广泛的方法 。
strongly fluorescent
识别基团决定了探针分子的选择性和特异性,报告基 团则决定了识别的灵敏度,而连接体部分则可起到分 子识别枢纽的作用。
荧光分子探针的设计原理
荧光分子探针的设计原理主要有以下几种: 键合-信号输出法、置换法和化学计量计法。 1、键合-信号输出法
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