动物细胞培养130913PPT课件

3.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程属于原代培
养。
×
4.通常在细胞培养基中加入适量血清，其原因是补充合成 培养基中缺少的营养物质。
√
加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
细胞增殖
去掉组织
液
间蛋白
无限传代
细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成生物体
细胞株
4、应用
血清等，为了防止细胞培养过程中细菌的污染， 可向培养液中加入适量的 。 抗生素 c. 胰蛋白酶 .
③制备细胞培养液：取两个培养瓶，分别标号
为1、2，加入等量培养液，1号培养瓶中的培养液加
入0.99%三氯生，2号培养瓶中不加三氯生
⑥预期结果及结论：
a. 若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分数相当，
则说明
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增加。
失去接触抑制
50代以后
接触抑制
细胞株： 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培
养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有 发生变化。
细胞系： 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了
（1）大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体）
资料1：
干扰素是动物细胞分泌产生的蛋白质，具有抗病毒 等多种生物学活性。 β干扰素是人的成纤维细胞产 生的，一个成纤维细胞产生的β干扰素量非常低。 现要获得大量的β干扰素。如何解决？
（2）培养的动物细胞可以用于检测有毒物质， 判断某种物质的毒性
结束语
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
讲师：XXXXXX XX年XX月XX日
信息2：
2005年4月，美国一家非官方癌症研究中心发布信 息说，“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三 氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。如何 检验该药物的毒性？
①材料准备----液体试剂
a.浓度为0.99%的“三氯生”试剂；
b.细胞培养液：b细胞培养液：水、无机 盐、 葡萄糖 、微量元素、 氨基酸、促生长因子、
大面积皮肤烧 伤或烫伤？
（三）动物细胞培养
1、概念： 从动物机体中取出相关组织，将它分散成单 个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生 长和繁殖。
2、原理： 细胞增殖 （有丝分裂）
3、过程：
Q2 选什么组织？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器 官，它们的细胞分化程度低，增 殖能力强，分裂旺盛，容易培养。
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
（2）适宜的温度和PH值
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
保证细胞顺利的 生长增殖
（3）必要的气体条件
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
维持培养液的PH
CO2 培养箱-模拟人体内环境
• 维持二 氧化碳 水平（510％）
• 湿度
• 温度 （37℃）
Q3.为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞 分散成单个细胞？
分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物； 而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物 的排出都较困难。
Q4.如何分散细胞？
弹性蛋白 弹性蛋白
消化酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶
体液
最适pH 1.5--2.5
8 7 7.2--7.4
白色念珠菌感染
（4）无菌、无毒 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
贴壁生长：大多数组织细胞不适应悬浮生长， 必须在固定的表面生长和分裂。
源自文库
接触抑制
细胞在贴壁生长过程中, 当细胞间相互接触时,细 胞生长和分裂停止,最后 形成单层细胞。
辨析
1.培养中的人正常B细胞能够无限地增殖。 × 2.人的成熟红细胞经过培养能形成大量细胞。 ×
0.99%三氯生对人体无害 .
b. 若1号培养瓶中变异细胞的百分数大于2号瓶
则说明 0.99%三氯生对人体有害
.
c． 若1号培养瓶中变异细胞的百分数小于2号瓶
则说明 0.99%三氯生可能抑制人体细胞癌变.
4、应用
（3）用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据
动物细胞生长特性
胰蛋白酶
Q5胰蛋白酶会不会把细胞消化掉吗？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时 间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作 用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
2.过程
取动物器官 和组织
幼龄动物
剪碎组织
胰蛋白酶处理
单个细胞
原代培养
Q6培养细胞应该模拟内环境的哪些方面呢?
（1）全部的营养物质
变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限 制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be