动物细胞培养130913PPT课件
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《生物工艺学》动物细胞培养 ppt课件
• 虽然可以把目的基因插入原核细胞中表达，例如，人生长激素、胰 岛素和干扰素已经被基因工程化了，但是在细菌中转录及修饰方面 的缺陷(如糖基化)，使哺乳动物细胞表达系统成了一个更合适的工 具。
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4
动物细胞产品分为三类
①动物细胞可以自然合成或在外源基因指导下合成许多分泌产物。
干扰素和酶，单克隆抗体，基因工程细胞株合成的EPO/EPO（EPO是 促 红 细 胞 生 成 素 （ Erythropoietin ） 的 英 文 。 促 红 素 、 依 泊 汀 ） 、 tPA/ 溶栓药组织纤溶酶原激活剂）的贴壁依赖性生长
体外培养细胞：贴壁依赖型和悬浮型 A 贴壁依赖型
• 细胞需贴附在支持物上培养生长， 绝大多数细胞在培养时，皆呈贴 壁依赖型。出现类似“返祖”现 象： 1 成纤维细胞型 2 上皮细胞型 3 游走细胞型 4 多形性细胞型
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9
Fibroblasts
cells used in culture
Blood Cells
Epithelial Neuronal
Muscle
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B 悬浮型或非贴壁依赖型
• 有的细胞在培养时，不贴附于支持物，呈悬浮状态生长。 • 来源于血液、淋巴组织的细胞，许多肿瘤细胞(包括杂交瘤)和其它转化细胞是属于这一
类型的细胞，可采用类似微生物培养方法进行悬浮培养。 • 悬浮型细胞常呈圆形。
• 为了代替其中的不确定组份，还开发了复杂培养基，如NCTCl09、 NCTCl35、F10和F12等。
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15
10.1.2.4 肿瘤细胞
• 肿瘤细胞是来自于肿瘤组织的细胞或经肿瘤 细胞与其他细胞融合产生的细胞，如杂交瘤 细胞。基本上是非贴壁依赖性的。肿瘤细胞 有很好的增殖特性，生长速率高，对培养环 境的要求低。
《动物细胞培养》课件
用于生产疫苗、生物制药品、研发新型材料等。
结论
动物细胞培养的意义不仅限于学术研究，还在医学和工业领域有着广泛的应用。随着技术的不断进步，动物细 胞培养的未来将更加精确和高效。
《动物细胞培养》PPT课 件
动物细胞培养是一种在实验室中培养和繁殖动物细胞的技术。本课件将介绍 动物细胞培养的简介、工具和材料、细胞的来源、细胞培养的步骤、常见的 细胞培养技术等内容。
简介
动物细胞培养是一种在实验室中使用培养基和合适的条件培养和繁殖动物细 胞的技术。它可以为生物医学研究、药物开发和工业生产提供可靠的细胞模 型。
工具和材料
细胞培养箱
用于提供恒定的温度、湿度 和CO2浓度，以模拟生理环 境。
细胞培养板
用于培养和分离细胞的平底 容器，常用的有培养皿和培 养瓶。
培养基
提供细胞生长所需的营养物 质和生长因子。
无菌枪
用于无菌操作，将细胞和培养基转移到细胞培 养板中。
纯化水
用于制备无菌的培养基和洗涤细胞。
细胞的来源
人体细胞培养
使用人类组织或细胞来源的细胞，如肾细胞、肺细 胞、肝细胞等，用于研究人类疾病和药物筛选。
动物细胞培养
使用其他动物的组织或细胞，如小鼠细胞、猪细胞、 狗细胞等。
细胞培养的步骤
1
细胞的收集和分离
从组织样本中收集细胞，并将其分离为
将分离后的细胞接种在细胞培养
2
单个细胞，以便于培养和繁殖。
板中
将单个细胞或细胞悬液转移到含有培养
基的细胞培养板中。
3
加入培养基和营养物质
提供细胞所需的营养物Байду номын сангаас和生长因子，
以促进细胞的生长和增殖。
细胞的观察和检测
结论
动物细胞培养的意义不仅限于学术研究，还在医学和工业领域有着广泛的应用。随着技术的不断进步，动物细 胞培养的未来将更加精确和高效。
《动物细胞培养》PPT课 件
动物细胞培养是一种在实验室中培养和繁殖动物细胞的技术。本课件将介绍 动物细胞培养的简介、工具和材料、细胞的来源、细胞培养的步骤、常见的 细胞培养技术等内容。
简介
动物细胞培养是一种在实验室中使用培养基和合适的条件培养和繁殖动物细 胞的技术。它可以为生物医学研究、药物开发和工业生产提供可靠的细胞模 型。
工具和材料
细胞培养箱
用于提供恒定的温度、湿度 和CO2浓度，以模拟生理环 境。
细胞培养板
用于培养和分离细胞的平底 容器，常用的有培养皿和培 养瓶。
培养基
提供细胞生长所需的营养物 质和生长因子。
无菌枪
用于无菌操作，将细胞和培养基转移到细胞培 养板中。
纯化水
用于制备无菌的培养基和洗涤细胞。
细胞的来源
人体细胞培养
使用人类组织或细胞来源的细胞，如肾细胞、肺细 胞、肝细胞等，用于研究人类疾病和药物筛选。
动物细胞培养
使用其他动物的组织或细胞，如小鼠细胞、猪细胞、 狗细胞等。
细胞培养的步骤
1
细胞的收集和分离
从组织样本中收集细胞，并将其分离为
将分离后的细胞接种在细胞培养
2
单个细胞，以便于培养和繁殖。
板中
将单个细胞或细胞悬液转移到含有培养
基的细胞培养板中。
3
加入培养基和营养物质
提供细胞所需的营养物Байду номын сангаас和生长因子，
以促进细胞的生长和增殖。
细胞的观察和检测
《动物细胞培养HXY》课件
动物细胞培养HXY PPT课 件
动物细胞培养是一个重要的技术，它可以在无菌条件下，让多种细胞在基质 中生长、增殖并分化成各种细胞类型，被广泛应用于药物筛选、细胞学研究、 基因工程和疫苗生产领域。
什么是动物细胞培养？
定义
将动物组织的细胞单元分离，通过营养液、基质及一定环境条件的供给来生长、增殖并分化 成各种细胞类型。
培养箱
提供温度、湿度、气体、点式无菌操作空间等多项控制
培养皿
常用的有T25、T75等规格，可根据培养的细胞数目选择不同的规格
培养基
细胞体外生长所需的营养物质、激素、生长因子和抗生素等，市面上有多种不同配方的基质 可选
动物细胞培养的步骤培养箱准备、培养基配置等
2
细胞分离
取得原代细胞、细胞株或原代细胞的稳定细胞株，需要通过胰酶、蛋白酶等对细胞进行分离
3
细胞培养
将细胞接种到培养皿中，放到培养箱中进行培养，根据细胞类型和实验要求，需选择不同的 培养基；
4
细胞观察和实验
观察细胞形态、活力、增殖、分化等指标，开展实验，如药物筛选、克隆、基因转染等
常见问题及处理方法
1 污染
处理方法很多，如节制制 作培养基的污染、通过使 用无菌器具和无菌条件等 预防性方法、使用抗生素 等
原理
细胞的培养和生长需要营养物质、生长因子和一定的温度、湿度以及氧气浓度等物理条件， 其中培养基是一个关键环节。
为什么要进行动物细胞培养？
应用领域
药物研发、疫苗生产、细胞治疗、基因工程、细胞 学研究等
优势
体外培养条件可以模拟体内环境，对细胞及分子生 物学研究提供了突破性的手段
动物细胞培养的设备和培养基
广泛应用于药理学的研究和药物 筛选中，特别是高通量药物筛选
动物细胞培养是一个重要的技术，它可以在无菌条件下，让多种细胞在基质 中生长、增殖并分化成各种细胞类型，被广泛应用于药物筛选、细胞学研究、 基因工程和疫苗生产领域。
什么是动物细胞培养？
定义
将动物组织的细胞单元分离，通过营养液、基质及一定环境条件的供给来生长、增殖并分化 成各种细胞类型。
培养箱
提供温度、湿度、气体、点式无菌操作空间等多项控制
培养皿
常用的有T25、T75等规格，可根据培养的细胞数目选择不同的规格
培养基
细胞体外生长所需的营养物质、激素、生长因子和抗生素等，市面上有多种不同配方的基质 可选
动物细胞培养的步骤培养箱准备、培养基配置等
2
细胞分离
取得原代细胞、细胞株或原代细胞的稳定细胞株，需要通过胰酶、蛋白酶等对细胞进行分离
3
细胞培养
将细胞接种到培养皿中，放到培养箱中进行培养，根据细胞类型和实验要求，需选择不同的 培养基；
4
细胞观察和实验
观察细胞形态、活力、增殖、分化等指标，开展实验，如药物筛选、克隆、基因转染等
常见问题及处理方法
1 污染
处理方法很多，如节制制 作培养基的污染、通过使 用无菌器具和无菌条件等 预防性方法、使用抗生素 等
原理
细胞的培养和生长需要营养物质、生长因子和一定的温度、湿度以及氧气浓度等物理条件， 其中培养基是一个关键环节。
为什么要进行动物细胞培养？
应用领域
药物研发、疫苗生产、细胞治疗、基因工程、细胞 学研究等
优势
体外培养条件可以模拟体内环境，对细胞及分子生 物学研究提供了突破性的手段
动物细胞培养的设备和培养基
广泛应用于药理学的研究和药物 筛选中，特别是高通量药物筛选
高中生物选修三 动物细胞培养 PPT课件 图文
1、动物细胞培养过程涉及的概念
细胞贴壁、细胞的接触抑制、原代培养、 传代培养、细胞株、细胞系
2、动物细胞培养条件
3、植物细胞和动物细胞培养的比较
4、动物细胞培养技术的应用
练一练
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培 培养基有何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
（5）作为基因工程的受体细胞
6、植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分 培养结果
蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清 促生长因子
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
获得细胞 或细胞分泌蛋白
本节内容小结
型可能变 酶(7.2-8.4)的活
化
性较高。
3、动物细胞培养过程中几个重要的概念
（1）. 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上
（单层）。要求：培养瓶或培养皿的内表面 光滑、无毒、易于贴附。
（2）接触抑制
细胞从接种到长满 底物表面后，由于 细胞繁殖数量增多 相互接触后，不再 增加。
• （3）原代培养：从机体取出后立即培养的 细胞为原代细胞。一般把培养的第1代细胞 与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培
养成植株。
二4.、动动物细物胞体培细养胞的核正移确植过程技是术（和克A隆动）物
A. 原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株 C. 传代培养→细胞系→原代培养→细胞株 D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株
细胞贴壁、细胞的接触抑制、原代培养、 传代培养、细胞株、细胞系
2、动物细胞培养条件
3、植物细胞和动物细胞培养的比较
4、动物细胞培养技术的应用
练一练
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培 培养基有何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
（5）作为基因工程的受体细胞
6、植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分 培养结果
蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清 促生长因子
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
获得细胞 或细胞分泌蛋白
本节内容小结
型可能变 酶(7.2-8.4)的活
化
性较高。
3、动物细胞培养过程中几个重要的概念
（1）. 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上
（单层）。要求：培养瓶或培养皿的内表面 光滑、无毒、易于贴附。
（2）接触抑制
细胞从接种到长满 底物表面后，由于 细胞繁殖数量增多 相互接触后，不再 增加。
• （3）原代培养：从机体取出后立即培养的 细胞为原代细胞。一般把培养的第1代细胞 与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培
养成植株。
二4.、动动物细物胞体培细养胞的核正移确植过程技是术（和克A隆动）物
A. 原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株 C. 传代培养→细胞系→原代培养→细胞株 D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株
《动物细胞培养技术》课件
动物细胞培养技术可以用于组织工程和再 生医学领域，为损伤或病变的组织和器官 提供替代疗法。
02
动物细胞培养的基本原理
细胞周期与细胞分裂
细胞周期
描述细胞生长和分裂的阶段，包 括间期和分裂期。
细胞分裂
细胞繁殖的方式，包括有丝分裂和 减数分裂。
细胞分裂调控
介绍细胞分裂的调控机制，如周期 蛋白、激酶等。
调整细胞浓度
将分离出的单个细胞调整到合适的浓度。
接种
将调整好的细胞悬液接种到培养容器中，轻轻晃 动容器使细胞均匀分布。
培养
将接种好的容器放置在恒温、恒湿、恒光的培养 箱中培养，定期观察记录细胞的生长情况。
细胞观察与检测
01
02
03
04
形态观察
定期观察细胞的形态变化，如 细胞大小、形态、染色深浅等
。
• 干细胞治疗是一种新兴的治疗方法，利用干细胞的再生和分化能力来修复或替换受损的组织和器官。动物细胞培养技术在 干细胞治疗领域的应用，为干细胞分离、培养和扩增提供了重要的技术支持，有助于推动干细胞治疗的发展。
动物细胞培养技术的发展前景 干细胞治疗领域的应用
药物筛选与毒性测试
药物研发过程中，需要进行大量的药物筛选和毒性测试。动物细胞培养技术可以 模拟人体细胞对药物的反应，为药物筛选和毒性测试提供更为准确和可靠的数据 支持，有助于加速新药的研发进程。
动物细胞培养技术广泛应用于生物医 学、药物研发、食品安全等领域。
培养基是动物细胞培养的关键因素， 它为细胞提供营养、生长因子和适宜 的生存环境。
动物细胞培养技术的外培养动物细胞。
20世纪初，随着组织培养技术 的不断发展，动物细胞培养技术
逐渐成熟。
21世纪初，随着基因编辑技术 的发展，动物细胞培养技术在疾 病治疗、药物研发等领域的应用
《动物细胞组织培养》课件
低温保存
将细胞置于-196℃的液氮中长时间保存。
细胞复苏
从液氮中取出细胞，快速解冻后用培养基培养细胞，使细胞重新生长繁殖。
04
动物细胞组织培养的实验操作
实验准备
培养基制备
准备适宜的动物细胞生 长的培养基，确保培养 基的营养成分、pH值和
渗透压适宜。
细胞来源
确保细胞来源可靠，并 经过必要的消毒和检测
异质性的原因
培养细胞异质性主要与细胞在生长和分化过程中 受到的微环境因素、基因突变等因素有关。
解决异质性的措施
采用标准化操作流程、优化培养条件、选用同质 化细胞系等方法，降低培养细胞的异质性。
动物细胞组织培养的前景展望
动物细胞组织培养在科学研究 、生物工程、医学等领域具有 广泛的应用前景。
随着技术的不断进步和应用领 域的拓展，动物细胞组织培养 将迎来更多的发展机遇和挑战 。
细胞鉴定
通过形态学观察、免疫荧光等技术对细胞进行鉴定，确保细胞的种类 和来源。注意事项：选择适当的鉴定方法，确保准确性。
细胞观察与记录
定期观察细胞的生长状态、形态变化等，并记录数据。注意事项：保 持观察的连续性和准确性。
实验结果分析
细胞生长曲线绘制
根据观察数据绘制细胞生长曲 线，分析细胞的生长特性和规
律。
细胞形态学分析
观察细胞的形态变化，分析细 胞的分化、凋亡等情况。
基因表达分析
通过PCR、Western blot等技 术分析细胞中特定基因的表达 情况。
细胞功能检测
根据实验目的，对细胞进行特 定的功能检测，如药物筛选、
毒性测试等。
05
动物细胞组织培养的挑战与前景
培养细胞的污染问题
污染来源
将细胞置于-196℃的液氮中长时间保存。
细胞复苏
从液氮中取出细胞，快速解冻后用培养基培养细胞，使细胞重新生长繁殖。
04
动物细胞组织培养的实验操作
实验准备
培养基制备
准备适宜的动物细胞生 长的培养基，确保培养 基的营养成分、pH值和
渗透压适宜。
细胞来源
确保细胞来源可靠，并 经过必要的消毒和检测
异质性的原因
培养细胞异质性主要与细胞在生长和分化过程中 受到的微环境因素、基因突变等因素有关。
解决异质性的措施
采用标准化操作流程、优化培养条件、选用同质 化细胞系等方法，降低培养细胞的异质性。
动物细胞组织培养的前景展望
动物细胞组织培养在科学研究 、生物工程、医学等领域具有 广泛的应用前景。
随着技术的不断进步和应用领 域的拓展，动物细胞组织培养 将迎来更多的发展机遇和挑战 。
细胞鉴定
通过形态学观察、免疫荧光等技术对细胞进行鉴定，确保细胞的种类 和来源。注意事项：选择适当的鉴定方法，确保准确性。
细胞观察与记录
定期观察细胞的生长状态、形态变化等，并记录数据。注意事项：保 持观察的连续性和准确性。
实验结果分析
细胞生长曲线绘制
根据观察数据绘制细胞生长曲 线，分析细胞的生长特性和规
律。
细胞形态学分析
观察细胞的形态变化，分析细 胞的分化、凋亡等情况。
基因表达分析
通过PCR、Western blot等技 术分析细胞中特定基因的表达 情况。
细胞功能检测
根据实验目的，对细胞进行特 定的功能检测，如药物筛选、
毒性测试等。
05
动物细胞组织培养的挑战与前景
培养细胞的污染问题
污染来源
《动物体细胞培养》课件
基因编辑与转基因技术
动物体细胞培养可用于基因编辑和转 基因技术的操作，实现基因的敲除、 敲入和转录调控等。
干细胞研究
动物体细胞培养可用于干细胞的研究 ，包括胚胎干细胞和成体干细胞的分 离、扩增和诱导分化等。
动物体细胞培养的历史与发展
历史回顾
动物体细胞培养技术自20世纪50年代发展至今，经历了从简 单培养到复杂培养的过程，技术手段不断改进和完善。
特点
可以获得具有高度相似性和稳定性的 细胞系，用于药物筛选和疾病模型建 立等。
04
动物体细胞培养的挑战与解
决方案
细胞污染问题
总结词
细胞污染是动物体细胞培养中常见的问 题，它会影响实验结果和细胞的健康状 况。
VS
详细描述
细胞污染通常由微生物、支原体、其他细 胞等引起。为了解决这一问题，需要在实 验过程中严格控制环境卫生，定期进行消 毒和检查，以及使用高质量的试剂和耗材 。
动物体细胞培养在生物工程领域的应用前景
总结词
动物体细胞培养在生物工程领域的应用前景 广阔，有助于推动畜牧业、生物制药和生物 材料等领域的发展。
详细描述
通过动物体细胞培养技术，可以生产出具有 特定功能的生物材料和药物，如生长因子、 抗体等。同时，在畜牧业中，动物体细胞培 养技术的应用将有助于提高动物产量和品质 ，降低生产成本。此外，动物体细胞培养还 可以用于基因编辑和基因治疗等领域的研究
发展趋势
随着生物技术的不断发展，动物体细胞培养将朝着更加高效 、安全和可控的方向发展，同时与其他技术的结合将为科学 研究提供更多可能性。
02
动物体细胞培养的基本原理
细胞周期与细胞分裂
细胞周期
描述细胞从一次分裂完成开始， 到下一次分裂完成所经历的全过 程。
动物细胞培养(31张PPT)高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3
干细胞
在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。 干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中， 包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
早期胚胎
骨髓
脐带血
干细胞的种类
来源或存在
功能及应用
胚胎干细胞 (ES细胞)
早期胚胎
分化成动物体内的任何一种 类型的细胞，并进一步形成 组织、器官甚至个体
成体干细胞
培养过程
原代培养
分瓶之前的细胞培养， 即动物组织经处理后 的初次培养。
传代培养
分瓶后的细胞培养
培养过程
原代培养和传代培养在处理方式上有何不同？
原代培养 用 胰蛋白 酶对剪碎的动物组织进行处理，使
其分散成单个细胞后进行培养，为原代培养。
传代培养
① 悬浮培养的细胞直接用 离心 法收集。 ② 贴壁细胞需要重新用 胰蛋白 酶等处理，使 之分散成单个细胞，然后再用 离心 法收集。
成体组织或器官内的干细 胞（骨髓中的造血干细胞、 神经系统中的神经干细胞 和睾丸中的精原干细胞）
具有组织特异性。只能分化 成特定的细胞或组织，不具 有发育成完整个体的潜能
诱导多能干 细胞(iPS细 体外诱导体细胞产生
胞)
能分化成为具有特定功能 的细胞，用于治疗疾病。 避免免疫排斥反应。
造血干细胞
造血干细胞是发现最早、研究最多、应用也最为成熟的一类成体干细胞， 主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中。
幼龄动物组织 胰蛋白酶、
胶原蛋白酶等
单个 细胞
加培养液
细胞 悬液
大多数细胞采用“贴壁生长”。 这两种方式有何区别呢？
悬液生长
分裂 受阻
贴壁生长
接触 抑制
分培养瓶
中图版选修三动物细胞培养课件17张
因为多数动物细胞有接触抑制的特征。
(5) 在C瓶中培养的细胞称为 传代培正养常培养了一段时间后，
发现细胞全部死亡。原因是_细__胞_没__有__发_生__癌__变________ 。
细胞悬浮液
②胰蛋白酶的作用是？
分解组织间的纤维蛋白
③可否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？
胃蛋白酶的最适PH值是1.9, 不符合动物细胞培养条件
第一节 动物细胞培养
二、细胞培养的过程：
动物胚胎或幼龄组织、器官 剪碎 胰蛋白酶
细胞悬浮液
原
代
10代
培 养
贴 壁 生 长
接 触 抑 制 现 象
原代培养 传代培养
细胞株
第50 代细胞 传代培养
细胞系
无限传代细胞
细胞系养
一、细胞培养的基本条件： 二、细胞培养的过程： 1、流程： 2、保存：
冻存： 1. 低温： 短期保存 2. 超低温： 长期保存（ -196℃液氮）
复苏： 37摄氏度
第一节 动物细胞培养
一、细胞培养的基本条件： 二、细胞培养的过程： 三、动物细胞培养的应用：
A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞
2、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ B ）
A．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株
3、动物细胞培养的正确过程是（ A ）
选修三 现代生物科技专题
第二章 细胞工程 第一节 动物细胞培养
人耳鼠 人造皮肤
人 工 种 子
组织培养的兰花
人造皮肤 脱毒土豆
动物细胞培养
细 细胞融合技术
(5) 在C瓶中培养的细胞称为 传代培正养常培养了一段时间后，
发现细胞全部死亡。原因是_细__胞_没__有__发_生__癌__变________ 。
细胞悬浮液
②胰蛋白酶的作用是？
分解组织间的纤维蛋白
③可否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？
胃蛋白酶的最适PH值是1.9, 不符合动物细胞培养条件
第一节 动物细胞培养
二、细胞培养的过程：
动物胚胎或幼龄组织、器官 剪碎 胰蛋白酶
细胞悬浮液
原
代
10代
培 养
贴 壁 生 长
接 触 抑 制 现 象
原代培养 传代培养
细胞株
第50 代细胞 传代培养
细胞系
无限传代细胞
细胞系养
一、细胞培养的基本条件： 二、细胞培养的过程： 1、流程： 2、保存：
冻存： 1. 低温： 短期保存 2. 超低温： 长期保存（ -196℃液氮）
复苏： 37摄氏度
第一节 动物细胞培养
一、细胞培养的基本条件： 二、细胞培养的过程： 三、动物细胞培养的应用：
A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞
2、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ B ）
A．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株
3、动物细胞培养的正确过程是（ A ）
选修三 现代生物科技专题
第二章 细胞工程 第一节 动物细胞培养
人耳鼠 人造皮肤
人 工 种 子
组织培养的兰花
人造皮肤 脱毒土豆
动物细胞培养
细 细胞融合技术
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（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
（2）适宜的温度和PH值
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
保证细胞顺利的 生长增殖
（3）必要的气体条件
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
维持培养液的PH
CO2 培养箱-模拟人体环境
• 维持二 氧化碳 水平（510％）
• 湿度
• 温度 （37℃）
大面积皮肤烧 伤或烫伤？
（三）动物细胞培养
1、概念： 从动物机体中取出相关组织，将它分散成单 个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生 长和繁殖。
2、原理： 细胞增殖 （有丝分裂）
3、过程：
Q2 选什么组织？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器 官，它们的细胞分化程度低，增 殖能力强，分裂旺盛，容易培养。
变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限 制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
（1）大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体）
资料1：
干扰素是动物细胞分泌产生的蛋白质，具有抗病毒 等多种生物学活性。 β干扰素是人的成纤维细胞产 生的，一个成纤维细胞产生的β干扰素量非常低。 现要获得大量的β干扰素。如何解决？
（2）培养的动物细胞可以用于检测有毒物质， 判断某种物质的毒性
信息2：
2005年4月，美国一家非官方癌症研究中心发布信 息说，“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三 氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。如何 检验该药物的毒性？
①材料准备----液体试剂
a.浓度为0.99%的“三氯生”试剂；
b.细胞培养液：b细胞培养液：水、无机 盐、 葡萄糖 、微量元素、 氨基酸、促生长因子、
结束语
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
讲师：XXXXXX XX年XX月XX日
血清等，为了防止细胞培养过程中细菌的污染， 可向培养液中加入适量的 。 抗生素 c. 胰蛋白酶 .
③制备细胞培养液：取两个培养瓶，分别标号
为1、2，加入等量培养液，1号培养瓶中的培养液加
入0.99%三氯生，2号培养瓶中不加三氯生
⑥预期结果及结论：
a. 若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分数相当，
则说明
白色念珠菌感染
（4）无菌、无毒 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
贴壁生长：大多数组织细胞不适应悬浮生长， 必须在固定的表面生长和分裂。
接触抑制
细胞在贴壁生长过程中, 当细胞间相互接触时,细 胞生长和分裂停止,最后 形成单层细胞。
辨析
1.培养中的人正常B细胞能够无限地增殖。 × 2.人的成熟红细胞经过培养能形成大量细胞。 ×
Q3.为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞 分散成单个细胞？
分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物； 而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物 的排出都较困难。
Q4.如何分散细胞？
弹性蛋白 弹性蛋白
消化酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶
体液
最适pH 1.5--2.5
8 7 7.2--7.4
3.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程属于原代培
养。
×
4.通常在细胞培养基中加入适量血清，其原因是补充合成 培养基中缺少的营养物质。
√
加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
细胞增殖
去掉组织
液
间蛋白
无限传代
细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成生物体
细胞株
4、应用
胰蛋白酶
Q5胰蛋白酶会不会把细胞消化掉吗？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时 间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作 用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
2.过程
取动物器官 和组织
幼龄动物
剪碎组织
胰蛋白酶处理
单个细胞
原代培养
Q6培养细胞应该模拟内环境的哪些方面呢?
（1）全部的营养物质
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增加。
失去接触抑制
50代以后
接触抑制
细胞株： 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培
养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有 发生变化。
细胞系： 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了
0.99%三氯生对人体无害 .
b. 若1号培养瓶中变异细胞的百分数大于2号瓶
则说明 0.99%三氯生对人体有害
.
c． 若1号培养瓶中变异细胞的百分数小于2号瓶
则说明 0.99%三氯生可能抑制人体细胞癌变.
4、应用
（3）用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据
动物细胞生长特性
（2）适宜的温度和PH值
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
保证细胞顺利的 生长增殖
（3）必要的气体条件
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
维持培养液的PH
CO2 培养箱-模拟人体环境
• 维持二 氧化碳 水平（510％）
• 湿度
• 温度 （37℃）
大面积皮肤烧 伤或烫伤？
（三）动物细胞培养
1、概念： 从动物机体中取出相关组织，将它分散成单 个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生 长和繁殖。
2、原理： 细胞增殖 （有丝分裂）
3、过程：
Q2 选什么组织？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器 官，它们的细胞分化程度低，增 殖能力强，分裂旺盛，容易培养。
变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限 制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
（1）大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体）
资料1：
干扰素是动物细胞分泌产生的蛋白质，具有抗病毒 等多种生物学活性。 β干扰素是人的成纤维细胞产 生的，一个成纤维细胞产生的β干扰素量非常低。 现要获得大量的β干扰素。如何解决？
（2）培养的动物细胞可以用于检测有毒物质， 判断某种物质的毒性
信息2：
2005年4月，美国一家非官方癌症研究中心发布信 息说，“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三 氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。如何 检验该药物的毒性？
①材料准备----液体试剂
a.浓度为0.99%的“三氯生”试剂；
b.细胞培养液：b细胞培养液：水、无机 盐、 葡萄糖 、微量元素、 氨基酸、促生长因子、
结束语
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
讲师：XXXXXX XX年XX月XX日
血清等，为了防止细胞培养过程中细菌的污染， 可向培养液中加入适量的 。 抗生素 c. 胰蛋白酶 .
③制备细胞培养液：取两个培养瓶，分别标号
为1、2，加入等量培养液，1号培养瓶中的培养液加
入0.99%三氯生，2号培养瓶中不加三氯生
⑥预期结果及结论：
a. 若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分数相当，
则说明
白色念珠菌感染
（4）无菌、无毒 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
贴壁生长：大多数组织细胞不适应悬浮生长， 必须在固定的表面生长和分裂。
接触抑制
细胞在贴壁生长过程中, 当细胞间相互接触时,细 胞生长和分裂停止,最后 形成单层细胞。
辨析
1.培养中的人正常B细胞能够无限地增殖。 × 2.人的成熟红细胞经过培养能形成大量细胞。 ×
Q3.为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞 分散成单个细胞？
分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物； 而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物 的排出都较困难。
Q4.如何分散细胞？
弹性蛋白 弹性蛋白
消化酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶
体液
最适pH 1.5--2.5
8 7 7.2--7.4
3.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程属于原代培
养。
×
4.通常在细胞培养基中加入适量血清，其原因是补充合成 培养基中缺少的营养物质。
√
加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
细胞增殖
去掉组织
液
间蛋白
无限传代
细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成生物体
细胞株
4、应用
胰蛋白酶
Q5胰蛋白酶会不会把细胞消化掉吗？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时 间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作 用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
2.过程
取动物器官 和组织
幼龄动物
剪碎组织
胰蛋白酶处理
单个细胞
原代培养
Q6培养细胞应该模拟内环境的哪些方面呢?
（1）全部的营养物质
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增加。
失去接触抑制
50代以后
接触抑制
细胞株： 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培
养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有 发生变化。
细胞系： 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了
0.99%三氯生对人体无害 .
b. 若1号培养瓶中变异细胞的百分数大于2号瓶
则说明 0.99%三氯生对人体有害
.
c． 若1号培养瓶中变异细胞的百分数小于2号瓶
则说明 0.99%三氯生可能抑制人体细胞癌变.
4、应用
（3）用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据
动物细胞生长特性