第二十章 比色和分光光度法
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本章只讨论物质分子对可见光的吸收:目视比色法与分光光度法
•不同浓度的同一物质吸收曲线形状相似,最大吸收波长相同,但吸光度值不同。在任一波长处,溶液的吸光度随浓度的增加而增大,这是分光光度法定量分析的依据。
•在物质对光的吸收曲线上,吸光度最大处所对应的波长称为该物质的最大吸收波长(用λmax 表示)
•在最大吸收波长附近吸光度的变化最为明显,所以定量分析中常选择最大吸收波长来测定吸光度,以获得较高的灵敏度。
•不同物质的吸收曲线的形状和
最大吸收波长不同,说明光的
吸收与溶液中物质的结构有
关,根据这一特性可用作物质
的初步定性分析。
结论:相同条件下,颜色越深,则浓度越大。吸光度与浓度是相互关
1.基本组成
光源单色器样品室检测器
显示
光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。
可见光区:钨灯作为光源,其辐射波长范围在320~2500 nm,其中最适宜的使用范围为320-1000nm。
卤钨灯:寿命长,发光效率高(7230型、754型)
紫外区:气体放电光源:氢、氘、氙灯。发射185~400 nm的连续光谱;激光光源:氩离子激光器,可调谐染料激光器
注意:1.其底及两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面。
用的型号:751G、752、754、756、756MC、721、722、723、724
高。常用型号:710、730、760MC、760CRT、日本岛津UV-210型。
1.波长调节器(λ);
2.电位器(O);
3. 0%T电位器(100);
4.吸收
池拉杆;5.灵敏度选择钮;6.电源开关;7.吸收池暗箱盖;8.显示仪
显色剂加入量对吸光度A的影响
(1)影响显色剂的平衡浓度和颜色
(2)影响金属离子的存在状态
影响显色的同时降低
(3)影响络合物的组成
显色反应最适宜的酸度需要通过实验进行选择。方法是:固定被测离子及显色剂浓度,改变溶液pH值,测其吸光度,然后绘制吸光度对pH 值的关系曲线。实际测定时,可选择曲线平坦区域的某一pH值作为测
光度计主要仪器测量误差是表头透射比的读数误差。光度计的读
一定,而被测组分分别处于低浓度范围(T大)和高低浓
均较大,而且曲线有一最低点。
图工作曲线
,从工作曲线上查出待测液的浓度。吸收光谱不重叠吸收光谱重叠