精子形态学异常与复发性流产的关系探讨

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·临床研究·

精子形态学异常与复发性流产的关系探讨

徐广立,张富青,孙宏跃

(郑州市妇幼保健院,河南

郑州450000)

摘要:目的探讨精子形态学异常与复发性早期流产的关系。方法回顾性分析发生复发性早期流产患

者丈夫精液,同时选取正常妊娠孕妇丈夫的精子作为对照组,精子检测方法采用第四版WHO 精液分析技术规范。结果

精液的常规动态分析与精子的总畸形率与流产无显著相关性,但精子畸形的空泡畸形与复发性流产有相关性。结论精子形态学检测对孕前检查有一定指导意义。关键词:复发性流产;精液质量分析;形态学分析中图分类号:R714.21

文献标识码:

B

近几年,复发性流产的发病率逐年上升,关于病因的研究也较深入。目前研究较明确的病因有解剖因素(女性生殖系统畸形)、内分泌因素、生殖系统感染、染色体异常、抗磷脂

抗体异常、免疫紊乱(封闭抗体缺乏)等几个方面[1]

。但是作为胚胎的另一半-男性精子质量,一直有较大的争议。有研究认为男性精液质量与流产有相关,也有文献分析未发现精液质量与不良妊娠有相关性[2,3]

。作为人类胚胎的另一半,其质量好坏一定与胚胎的发育有关系,只是可能用常规的动态分析或畸形率检测无法提供足够的信息来了解精子质量与流产的关系。因此,采用何种检测手段在受孕前提供精子的确切状况来指导受孕显得非常必要,尤其是在辅助生殖时,如何通过检测精子的状态来选择受精时机或在ICSI 时指导选择精子,是提高受精率关键的步骤。我们通过对复发性流产的妇女丈夫与正常妊娠的妇女丈夫精子的分析,来探讨精子形态学异常与复发性流产的关系。1资料与方法1.1

一般资料

回顾性选择2010年2月至2011年4月在

郑州市妇幼保健院就诊的复发性早期流产患者,排除受孕前有感染、内分泌、解剖、染色体、免疫抗体等因素的复发性流产患者的丈夫的精液检查记录96份(流产组),条件要求孕

前半年内有两次动态及形态分析且结果一直(活率波动在

10%内,畸形率波动在3%以内),同时选取在门诊围产保健

的受孕3个月以上的,未发现胎儿异常的孕妇丈夫的孕前精

液检查指标共141,条件要求如流产组,两组孕妇年龄均在20 35岁之间,男性在20 40岁之间,年龄无统计学差异。1.2方法按照《WHO 人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》标准进行。

精液采取的方法:禁欲3 7天,用手淫的方法取精到专用的取精杯内,置于37ħ培养箱内液化,每隔5min 观察液化情况并记录液化时间、精液pH 值。动态分析用清华紫光自动精子分析仪进行,形态学检测采用苏木素-伊红染色,按标准分为头部畸形(锥形、梨形、圆形、无定形、空泡、小顶体)、颈部和中段畸形(颈部弯曲、非对称插入、粗、细)、尾部畸形(短、弯曲、卷曲、胞浆小滴)。每例分析200个精子。1.3统计学方法用SPSS13.0软件对数据进行分析,先进行正态分析,对正态分布计量资料采用表示,两组间差异用t 检验,α=0.05。2结果

2.1

精液常规参数比较流产组、对照组的精液量、密度、

液化时间、pH 值、精活率、活力差异无统计学意义(P >0.

05)。流产组a 级精子比例低于对照组但无统计学意义,流

产组的c 级精子比例高于对照组的c 级精子,差异有统计学意义(P =0.001),

见表1。表1

两组常规动态分析比较(ʃs )

组别

密度(ˑ106)液化时间(min )总活率(%)a 级(%)b 级(%)c 级*(%)活力(%)流产组44.46ʃ5.3835ʃ5.5777.33ʃ11.2126.38ʃ2.1531.49ʃ6.5519.86ʃ3.6955.26ʃ6.33对照组

51.23ʃ7.11

30ʃ3.19

80.56ʃ9.88

29.46ʃ5.36

33.58ʃ4.13

12.11ʃ2.65

60.25ʃ7.99

*:P =0.001。

2.2

精子畸形率参数比较两组总的畸形率差异无统计学意义(P =0.069),但对分类对比发现,头部空泡畸形流产组

比对照组高,两组差异有统计学意义(P =0.001),其它各畸形类别间无明显差异(P >0.05)。

表2

头部畸形率分类(x ʃs )

组别头部畸形(%)

锥形梨形圆形无定形空泡**小顶体流产组

11.23ʃ1.256.22ʃ0.153.21ʃ0.0044.38ʃ8.9210.51ʃ1.293.25ʃ0.00对照组

13.21ʃ2.10

7.82ʃ0.26

4.18ʃ0.00

41.26ʃ6.99

4.21ʃ0.15

4.11ʃ0.01

**:P =0.001。

收稿日期:2012-01-15

3讨论

3.1

精子形态学检测的现状

目前的精子动态分析大多数

采用计算机辅助精子分析系统(CASA ),

结果比较稳定可靠,室内、室间差异不大。但是形态学检测的应用情况一直不尽人意。有不少实验室尚未进行形态分析,或者应用计算机随机携带的软件而非染色分析法,其准确性较差。王一飞教授

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关于中国目前男科实验室精子检测的评述认为,目前国内大多数男科实验室精子的动态和形态分析室间质控和室内质控有严重缺陷[4],这种情况在国外的实验室也一样存在。虽然精子染色畸形检测方法应用于临床已有几十年历史,我们生殖科实验室也是近几年才开展精子染色形态学检测,其原因主要有两个,首先检测主要靠工作人员肉眼分析,因此主观性比较强,第二是形态学分析对临床参考价值有多大一直有争议。从近几十年来WHO对其检测的标准的不断变化也能看到此项技术的争端。虽然在2010年第五版《WHO人类精液分析实验室技术手册》已发布,但大家对新标准的疑虑更多[5]。首先是新标准取消了a、b、c、d的精子分类方法,而采用前向运动、原地运动、不运动精子三个标准,似乎不能反映实际中精子的状态,第二,第五版的精子标准完全没有采用亚洲男性精子的信息,这种缺陷不得不让人怀疑其代表性和科学性。因此我们在决定检测标准时仍然采用第四版标准。

3.2精子动态与形态学异常与流产的关系:复发性流产的病因十分复杂,目前关于精子异常与流产的关系研究较多,大多数文献报道认为精液常规分析和形态学检测与流产无明显相关,但也有少数报道认为精子畸形率过高与流产有相关性。精子是形成胚胎的基本物质,精子的质量好坏理论上应与胚胎质量有关,但是造成目前研究结果的可能有以下几点,一是简单的动态分析信息量不够,不能深入评估精子质量,二是形态学分析主观作用太强,结果差异太大,纵然近几年有计算机软件协助判断,但是过于苛刻的标准使男性精子畸形率标准过高而失去实用意义;三是不同实验室采用不同的检测方法均有一定的缺陷[6]。因此,能否以精子的常规检测作为优生优育的准备工作指标,还有待于探讨。

我们的研究结果认为精子总畸形率高低与复发性流产无明显相关性。但是经不同类别的精子畸形分类比较后发现,精子头部空泡畸形率与流产率有正相关性。分析其原因,可能是头部空泡畸形伴随的精子DNA损伤较重。因此,精子形态学检测对预防复发性流产有一定的临床指导及预防意义。为了进一步弄清原因,我们将在后续的研究中采用显微操作技术,将头部缺陷的精子分离后采用单细胞凝胶电泳的方法进一步分析,有可能解开其中原因。

参考文献:

[1]林其德.原因不明复发性流产的基础与临床研究进展[J].中华妇产科杂志,2003,38(8):481-483.

[2]岳焕勋,李福平,蒋敏,等.复发性流产及胎儿发育异常与男性畸形精子的相关性探讨[J].实用妇产科杂志,2008,24(10):

624-626.

[3]Gopalkrishnan K,PadwalV,MeherjiPK,et al.Poor quality of sperm as it affects repeated early pregnancy loss[J].ArchAndrol,

2000,45(2):111-117.

[4]王一飞.21世纪的精液分析技术:现状·争议·展望[J].国际生殖健康/计划生育杂志,2010,29(3):131-132.

[5]Lu JC,ZhangHY,Hu YA,et al.A survey on the status of semen analysis in118laboratories in China[J].Asian J Androl,2010,12(1):104-110.

[6]KeelBA.Quality control quality assurance,and proficiency testing in the andrology laboratory[J].Arch Androl,2002,48(6):417

-431.

(王东颖编辑)

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