各种转染试剂中文说明
fugene 4k 转染试剂 中文说明书
2022版 CTM694原英文技术手册TM694中 文 说 明 书适用产品目录号：E5911和E5912FuGENE ®4K TransfectionReagent普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：400 810 8133技术支持邮箱：*************************CTM 6942022制作1所有技术文献的英文原版均可在/ protocols 获得。
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电子邮箱：*************************1. 描述 (2)2. 产品组分和储存条件 (2)3. 一般注意事项 (2)3. A. 转染试剂与DNA的比例 (3)3. B. DNA (3)3. C. 时间 (3)3. D. 血清 (3)3. E. 细胞培养条件 (3)3. F. 稳定转染 (3)4. 推荐操作步骤 (4)4. A. 细胞铺板 (5)4. B. FuGENE® 4K Transfection Reagent准备 (5)4. C. 一般转染操作步骤 (6)4. D. 稳定转染操作步骤 (8)4. E. 转染优化 (9)4. F. 报告基因活性和细胞健康的多重检测方案 (11)5. 疑难解答 (12)FuGENE® 4K Transfection Reagent普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：400 810 8133技术支持邮箱：*************************CTM 6942022制作21. 描述FuGENE® 4K Transfection Reagent是一个多组分，非脂质体试剂，用于将DNA高效、低毒地转染至多种哺乳动物细胞系中，无需在加入试剂-DNA复合物后更换培养基。
RNAi-Mate转染试剂操作手册说明书
目录号 C-01
产品说明 RNAi-Mate 转染试剂
规格 0.1mL
价格 ￥160
交货期限 2 个工作日
操作方法
一、体外转染方法 1. 细胞培养
可广泛应用于多种细胞系的DNA和siRNA转染。已成功地应用于多种代表各种来源的细胞类 型,包括 Hela(人宫颈癌细胞), MCF-7(人乳腺癌细胞), Hep3B(人肝细胞癌细胞), COS-7(猴肾细胞), Neuro-2a(鼠神经 母细胞瘤细胞),NIKS(人角质化细胞),C6(鼠神经胶质瘤细胞), DLD-1(人结肠癌细胞), NIH/3T3(鼠胚胎成纤维细 胞), HT-29(人结肠腺癌细胞), A549(人肺癌细胞), CHO-k1(仓鼠卵巢细胞)和293(腺病毒5 DNA转化的人胚胎 肾细胞), SVRbag4细胞。
3. 细胞出现明显死亡
问题 与细胞生存相关的关键基因被关闭
细胞状态欠佳
siRNA/RNAi-Mate(或DNA/RNAiMate) 复合物浓度过高
重新设计实验
建议
使用传代次数较低的细胞;细胞接种后在24小时内达 到70-90%,并在24小时内完成转染
siRNA/RNAi-Mate(或 DNA/RNAi-Mate)浓度过高 时,有时也会产生毒性
4.悬浮细胞转染程序 本程序适用于使用24孔板悬浮细胞的转染。选用生理状态良好的细胞对提高转染效率很重要。 siRNA(DNA)和DNA的用量和两者的比例可在推荐范围内适当调整。 4.1 转染的当天,收集细胞离心,重悬。 4.2 在50μl的DMEM(或Opti-MEM, 或其他无血清培养基)无血清培养基加入20pmol siRNA(或 0.8μg DNA), 柔和混匀。 4.3 混匀RNAi-Mate试剂,用50μl无血清的DMEM或Opti-MEM,或其他无血清培养基)稀释 1μl RNAi-Mate试剂(DNA转染时,则加入2μl RNAi-Mate试剂),轻轻混匀,室温放置5分钟。 4.4 将稀释好的siRNA和RNAi-Mate试剂混合;轻柔混匀,室温放置20分钟,以便形成siRNA/RNAiMate(或DNA/RNAi-Mate)复合物。 4.5 将100μl siRNA/RNAi-Mate(或DNA/RNAi-Mate)复合物加到含有细胞和培养基的培养板的孔 中,来回轻柔摇晃细胞培养板。 4.6 再加入400μL细胞悬浮液(细胞数量决定于细胞类型和转染后分析测试的时间)。 4.7 细胞在37℃温育24h-48h后进行转染后的其它步骤。如果细胞株比较敏感,孵育4-6小时后,除去 复合物,更换培养基。
各种转染试剂的中文转染方法
各种转染试剂的中文转染方法FuGENE6（Roche）转染步骤：转染前一天将细胞分至培养板，转染当天细胞应50-80％融合。
将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。
将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。
使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。
1. 在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6，直至总体积到100 ul。
2. 将3-6 ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液，轻弹管壁混合。
3. 加入1-2 ug的DNA溶液（0.02－2.0 ug/ul），轻弹管壁混合。
4. 室温孵育20分钟。
5. 将6孔板中的旧营养液吸出，加入约1 ml不含血清和双抗的营养液洗涤一次，再加入2 ml不含血清和双抗的营养液。
6. 将转染复合物加入细胞，混匀使之均匀分布。
7. 3-8小时后，加入血清或换成含血清的营养液。
Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染试剂转染步骤（6孔板）：1. 转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90-95％。
细胞铺板在2 ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
2. 对于每孔细胞，使用250 ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释4.0 ugDNA，轻轻混匀。
3. 使用前将Lipofectamine 2000转染试剂轻轻混匀，用250 ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释10 ul Lipofectamine 2000转染试剂，轻轻混匀。
Lipofectamine 2000稀释后，在5分钟内同稀释的DNA混合（<30分钟）。
NOTE：若使用DMEM培养基，则需在5分钟内同稀释的DNA混合。
4. 混合稀释的DNA（第二步）和稀释的Lipofectamine 2000（第三步）。
室温放置20分钟。
5. （optional）将6孔板中的旧营养液吸出，用无血清培养基清洗两次。
转染试剂使用说明书
210102
1ml
1. 2. 3. 4. 5. 6.
适用范围及特点： 适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染 适用于瞬时转染和稳定转染 适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染 转染效率高且稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得高效率转染 细胞毒性低 转染程序简单，转染实验可以在半小时内完成
产品储存： GenFectinTM (1.0mg/ml) 在室温下运输，试剂到时请即存放于 4℃，在 4℃可存放
2. 3).
配制转染工作液： （ 6 孔板或 35 mm 平皿， 2 ml 培养液） 取 5~8μ g DNA （起始用量 5μ g） ，加入稀释液中至总体积为 100μ l，轻轻混匀，室 温放置。
4).
先将 GenFectin TM 涡旋振荡混匀。取 GenFectinTM 1~4μ0μl，轻轻混匀，室温放置 5 分钟。
8).
稳定转染时，于转染后 24~48 小时消化细胞分至 3~5 个培养皿中，加适当浓度的 相应抗生素（如 G418）筛选。
建议的起始转染条件 : 培养容器
96 孔板 24 孔板 6 孔板 35mm 培养皿 60mm 培养皿
转染前一天 接种细胞数
1-1.510 个 0.5-1 10 个 2-4 10 个 2-4 10 个 4-6 105 个
3.
GenFectinTM 在转染中不受血清影响，所以 GenFectinTM / DNA 复合物能直接加到 含血清的培养基中，但稀释 GenFectinTM 和 DNA 的缓冲液不能混有血清，因为 GenFectinTM 在制备 GenFectinTM / DNA 复合物之前可能会与血清中的蛋白质反 应，影响转染效率。
-5-
Xfect转染试剂操作中文手册(clontech)
Xfect 质粒DNA 转染试剂• 操作简便且兼容血清 • 转染效率高 • 细胞毒性极低 • 细胞类型广泛操作流程图：Xfect 质粒DNA 转染试剂操作步骤(6-孔板)：1. 转染前的准备贴壁细胞: 在转染的前1d ，接种1ml 合适密度的细胞于6-孔板的单孔中，使转染当天细胞融合度能够达到50–80%。
悬浮细胞: 在混匀Xfect Polymer 前，将细胞以5 x10e5–1.25 x10e6/1ml 接种于6-孔板中培养。
2. 漩涡混匀Xfect Polymer 。
3. 对于单孔转染，分别在2个离心管中混匀以下试剂： Tube 1 (质粒DNA)---μl (5 μg) 质粒DNA---μl Xfect 反应缓冲液 100 μl 总体积T ube 2 (Polymer) 1.5 μl Xfect Polymer (100μg /μl ) 98.5 μl Xfect 反应缓冲液 100 μl 总体积注意:• 上述为6-孔板单孔转染所需的量。
• 每1μg 质粒DNA 加0.3 μl Xfect Polymer 。
• 对于大多细胞来说，5 μg 的质粒DNA 是最佳使用量。
若您是首次使用Xfect 转染细胞，需要按照2.5 μg ，5 μg 和7.5 μg 的质粒DNA 的量进行梯度实验，确定质粒DNA 的最优使用量。
实验证明，质粒DNA 的量不能少于2.5 μg ，不然会造成转染效率低（经转染Hela 细胞实验验证）。
• Xfect Polymer 预混液室温放置不要超过30min 。
4. 漩涡混匀每管混合物。
5. 将Xfect Polymer 预混液和DNA 预混液混合，再将混合液以适中的速度漩涡10sec 。
6. 室温孵育10 min ，形成Xfect/DNA 复合物。
7. 将200μl 纳米复合物逐滴加入细胞培养基中，轻柔地前后摇晃混匀。
注意:无需去除培养基中的血清，当纳米复合物加入培养基后，培养基的颜色会有些改变，这是正常的。
英格恩entranster转染试剂说明书
英格恩entranster转染试剂说明书一、产品概述英格恩 Entanster 转染试剂是一种用于转染外源 DNA/RNA 到细胞内的试剂。
它是经过优化的化学试剂组合，可以将外源 DNA/RNA 高效地传递到各种细胞中，并促进其定向表达。
本试剂适用于体外转染实验和基因工程研究，具有高转染效率、低细胞毒性、简单易用等优点。
二、试剂成分英格恩 Entanster 转染试剂主要成分包括转染缓冲液和转染增强剂。
转染缓冲液中包含有机溶剂、非离子表面活性剂等，用于稳定 DNA/RNA与转染剂的结合。
转染增强剂含有具有阴离子表面活性剂、脂质、蛋白质等物质，可以提高细胞膜通透性和转染效率。
三、使用说明1.储存和稀释：试剂应储存于-20℃的冰箱中，保持干燥和避光。
使用前需要将试剂溶解在适当体积的转染缓冲液中，最佳稀释比例为1：9、溶液需充分混匀，离心并去除任何沉淀物。
2.样品准备：在转染前，将目标DNA/RNA溶解在适当的缓冲液中，浓度通常在0.1-1μg/μL最佳。
确保样品充分溶解并无明显沉淀。
3.转染操作：对于已经培养至适当倍数的细胞，将细胞用预先暖和的转染缓冲液洗涤一次，并去除缓冲液。
将转染缓冲液和溶解好的目标DNA/RNA混合，稍微搅拌均匀。
与此同时，将适量的转染增强剂加入到混合物中，充分混合。
然后将混合物直接滴加到细胞上，并轻轻摇晃培养板以确保混合物均匀分布。
4.培养和检测：将含有转染混合物的培养板放回恒温培养箱中，保持恒定的温度和CO2浓度。
培养时间和温度根据需要进行调整，通常在24-48小时后可以进行下一步实验或观察。
四、注意事项1.试剂需保存在干燥、阴凉、避光的环境中，避免结冰或暴露在高温环境中。
2.操作中需佩戴手套并遵循生物安全实验操作规范。
3.使用前需充分摇匀试剂瓶，确保所有试剂成分充分混合均匀。
4.转染缓冲液中的有机溶剂可能对一些细胞有毒性，因此在选择试剂时应参考相关文献或尝试不同的浓度和时间，以确定最佳条件。
jetPRIME 转染siRNA说明书
JetPRIME 转染试剂转染siRNA简易说明书
第0天：细胞接种
第一天：转染
在有血清存在的情况下转染，
使用JetPRIME缓冲液
以6孔板为例
●在1.5mL或0.5mL的EP管中加入200μL的JetPRIME 缓冲液，然后加入20μM(1.1μL)
的siRNA，旋涡10s后离心（或者用移液器吹打5次混匀）；
●加入4μL的JetPRIME试剂，旋涡10s后离心（或者用移液器吹打5次混匀）；
●室温孵育10min;
●将转染复合物加入到要转染的含血清的培养基中；
●必要时，转染后4h更换细胞培养基；
●孵育24-48h，检测转染效率。
不同规格培养皿的使用量
注：
siRNA enhancer的应用：
在转染复合物加入到所需转染的细胞中后，加入培养基体积的1/1000体积的siRNA enhancer,其他步骤与以前一致；
在6h或4h更换培养基时，也需要加入相应体积的siRNA enhancer（培养基体积的1/1000）。
lipo293转染试剂说明书
Lipo293转染试剂是一种高效的转染试剂，特别适用于贴壁生长的HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT等293系列细胞的转染。
以下是Lipo293转染试剂的使用说明书：适用范围：Lipo293转染试剂适用于贴壁生长的HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT等293系列细胞的转染。
转染步骤：（1）准备转染试剂和DNA：按照推荐的DNA用量，将DNA溶解在无菌水中，然后与Lipo293转染试剂按照1:1的比例混合。
（2）细胞处理：将细胞按照推荐的培养条件在细胞培养箱中培养至适宜的密度。
（3）转染：将DNA-Lipo293复合物与细胞混合，并轻轻摇晃，使复合物均匀分布。
（4）培养：将转染后的细胞继续培养，期间注意观察细胞的生长状态。
注意事项：（1）使用高质量的DNA：为了获得最佳的转染效果，建议使用高质量的DNA。
（2）细胞密度和状态：转染前，细胞需要处于良好的生长状态，密度适宜。
（3）保存条件：Lipo293转染试剂应保存在4℃或-20℃的条件下，避免反复冻融。
（4）过敏反应：对于过敏体质的用户，建议在使用前进行皮肤过敏试验。
qiagen转染试剂说明书中文版
Effectene®Transfection Reagent转染试剂中文说明书●Notes:①细胞处于最佳生理状态，原代细胞以低代数较好；②DNA（质粒）的质量直接影响转染的效率，纯化后的DNA（质粒）转染效果更好；③DNA与Effectene Transfection Reagent的用量比例可能根据具体细胞稍有变动，但DNA与Enhancer 用量比例(1:8)最好别改变。
●protocol :1.对于24孔板，接种细胞密度为2-8X104个/孔，加500ul 无抗生素培养基；2.370C，5%/CO2培养，转染当日细胞密度达到40%－80%；3.稀释溶解在TE buffer里的0.2ug DNA（质粒），加Buffer EC直至体积为60ul,再加入1.6ul Enhancer涡旋混匀1s，低速离心甩净管壁上液滴；Table 14.室温（15–250C）孵育2–5 min ；5.吸5ul Effectene Transfection Reagent到DNA-Enhancer mixture中，小心吹打5次混匀（注：Effectene Transfection Reagent 用完后要及时放回冰上，10－15min室温不会影响）；6.室温静置5–10 min；7.当静置的同时，吸走原有培养液，用１ml PBS漂洗一次，再加入350ul 新鲜培养基；8.吸350ul培养液到转染混合液中，小心吹打两次混匀后，立即滴加到24孔板中，最后轻轻打旋混匀；9.培养箱中正常培养24小时，48小时后拍照，一般情况下可以不换液，若发现对细胞有毒性的，可在6－18小时后换液。
优化实验设计方案：a.6孔板Tableb.60mm板流程图。
imax转染说明书
imax转染说明书IMAX转染说明书一、产品介绍IMAX转染是一种高效、可靠的基因转染试剂，用于将外源基因导入靶细胞内。
IMAX转染试剂采用了先进的纳米技术，能够将基因材料快速而有效地送入细胞。
此试剂适用于多种细胞类型，包括哺乳动物细胞、鸟类细胞、昆虫细胞等。
二、使用方法1. 预处理细胞：将细胞均匀分散在培养皿中，培养至80%的密度。
2. 添加IMAX转染试剂：按照所需转染细胞数量的1:2比例，将IMAX转染试剂与培养基混合均匀，静置15分钟。
3. 转染：将转染混合液均匀滴加到预处理的细胞上，轻轻摇晃培养皿，使转染混合液均匀分布。
4. 培养：将含有转染细胞的培养皿放回培养箱中，继续培养细胞。
根据不同的实验目的，培养时间可在24小时至72小时之间。
5. 分析：根据实验需要，可以通过荧光显微镜观察转染效果，或使用其他方法进行验证。
三、注意事项1. IMAX转染试剂仅供科研使用，严禁用于人体或动物临床治疗。
2. 使用前请仔细阅读说明书，并按照规定操作，避免交叉污染和误操作。
3. 转染时，转染混合液应均匀滴加到细胞上，避免产生气泡或水珠，以确保转染效果。
4. 不同细胞类型对转染试剂的敏感性不同，建议进行细胞类型的优化实验，以获得最佳转染效果。
5. 转染后的细胞应及时进行培养，避免过度培养导致细胞死亡或转染效果下降。
6. 转染试剂应存放在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射或高温环境，保证试剂的稳定性和使用寿命。
四、优势和应用领域1. 高效转染：IMAX转染试剂采用纳米技术，能够高效地将基因材料导入细胞内，提高转染效率。
2. 适用广泛：IMAX转染试剂适用于多种细胞类型，可用于基因功能研究、基因治疗、细胞工程等领域。
3. 低细胞毒性：IMAX转染试剂具有低细胞毒性，不会对细胞的生长和代谢产生明显影响。
4. 稳定性好：IMAX转染试剂经过严格的质量控制，具有良好的稳定性和一致性。
IMAX转染试剂是一种优质的基因转染试剂，能够在科研领域为研究人员提供强有力的工具。
qBac-III Bacmid转染试剂说明书
Bacmid qBac-III 简要手册V1.4.32021.05本产品包含qBac-III（Bacmid DNA，每次转染使用40ng [5µL]，浓度8ng/µL）Control plasmid*（阳性对照转移载体质粒DNA，每次转染使用300ng [3µL]，浓度100ng/µL）使用者需要准备1.转染试剂2.昆虫细胞培养基（加100UI/ml 氨苄青霉素和100UI/ml 链霉素）3.六孔板或35mm 细胞培养皿，每孔（皿）铺1x106个Sf9细胞（2mL）4.带有目的基因片段的转移载体质粒**（每次转染需要300ng）程序***（以Promega FuGENE HD Transfection Reagent 转染试剂为例，其他转染试剂请参照具体使用说明）A)准备转染DNA 混合物1.向无菌的1.5mL 离心管中加入95µL ddH 2O（或无血清培养基），再向离心管中加入5µL Promega FuGENE HD Transfection Reagent 转染试剂，充分混匀。
2.向无菌的1.5mL 离心管中加入92µL ddH 2O（或无血清培养基），再向离心管中加入5µL Bacmid DNA，再向离心管中加入3µL 转移载体质粒DNA，充分混匀。
3.将（1）中溶液加入（2）中，充分混匀，室温静置20-30min。
B)将DNA 混合物加到细胞中1.将DNA 混合物逐滴均匀加入细胞培养皿中。
2.放置28℃培养箱中静置培养4-6天。
C)收获P0代病毒1.收集培养皿中的培养基（上清），4℃避光保存。
此即为P0代病毒。
D)表达蛋白1.用20-200µL P0代病毒加到铺好细胞的六孔板的一个孔中，28℃静置培养4天，收集培养皿中的培养基（上清），300X g 离心5min 移除细胞碎片，获得P1代病毒，测定滴度（方法自选）。
各种转染试剂中文说明
FuGENE6（Roche）转染步骤:转染前一天将细胞分至培养板，转染当天细胞应50-80％融合。
将细胞以1-3×105/2ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。
将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。
使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。
1.在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6，直至总体积到100ul。
2.将3-6ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液，轻弹管壁混合。
3.加入1-2ug的DNA溶液（0.02－2.0ug/ul），轻弹管壁混合。
4.室温孵育20分钟。
5.将6孔板中的旧营养液吸出，加入约1ml不含血清和双抗的营养液洗涤一次，再加入2ml不含血清和双抗的营养液。
6.将转染复合物加入细胞，混匀使之均匀分布。
7.3-8小时后，加入血清或换成含血清的营养液。
Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染试剂转染步骤（6孔板）：1.转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90-95％。
细胞铺板在2ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
2.对于每孔细胞，使用250ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释4.0ugDNA，轻轻混匀。
3.使用前将Lipofectamine 2000转染试剂轻轻混匀，用250ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释10ul Lipofectamine 2000转染试剂，轻轻混匀。
Lipofectamine 2000稀释后，在5分钟内同稀释的DNA混合（<30分钟）。
NOTE：若使用DMEM培养基，则需在5分钟内同稀释的DNA混合。
4.混合稀释的DNA（第二步）和稀释的Lipofectamine 2000（第三步）。
室温放置20分钟。
5.（optional）将6孔板中的旧营养液吸出，用无血清培养基清洗两次。
加入2ml无血清配养基。
sirna转染试剂说明书
3
1
24-well
2
500
2 x 50
6
2
12-well
4
1000
2 x 100
12
4
6-well
10
2500
2 x 250
30
10
转染实验优化: 为了提高转染效率，最好对转染条件进行优化，特别是首次使用。例如：24 孔培养板，调整 siRNA 与 RFect 试剂的用量。
siRNA 用量在 0.6-30 pmol(final concentration 1- 50 nM)之间调整，RFect 试剂用量在 1.0 - 3.0μl 之间调整。客户可按照习惯用量进行预实验，
所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。
转染实验要点： 转染过程不可添加抗生素，否则会导致细胞死亡； 首次实验 siRNA 的用量可稍大（一般 10 nM） ，后续实验根据实验结果修改。
RFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels
传真: 0519-83382790
◎转染细胞范围广，绝大多数贴壁细胞株都能获得比较理想的转染结果
储存条件：-20℃
应用 ◎siRNA 转染 ◎antisense RNA 转染 ◎200bp 内的小分子 DNA 转染
产品介绍
RFect 小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。RFect 可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞，如一般细胞 株、肿瘤细胞株等。目前，无论国外还是国内，转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI)，这两种成分都具有很 大的细胞毒性，并且转染效果不好。RFect 采用新型的动物源性的纳米材料，毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。与其它品牌的小核酸 转染试剂相比，RFect 的细胞转染阳性率一般在 90%以上，Lamin A/C 基因抑制效率在 95%以上，而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一 般不超过 70%，Lamin A/C 基因抑制效率不超过 75%。RFect 细胞毒性很低，转染细胞死亡率不到 10%，而其它品牌试剂的转染细胞死亡率 一般在 30%以上。血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。有关 RFect 小核酸转染试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了 国际专利，并通过 PCT 覆盖国际上多个国家和地区。
FuGENE6转染试剂中文操作说明
FuGENE6转染试剂中文操作说明FuGENE®6原是Roche公司的旗舰转染产品，如今已归为Promega公司旗下。
它是一种非脂质体转染试剂，广泛适用于高效转染各种细胞系，且细胞毒性非常低。
由于使用该转染试剂转染时不要求去除血清或培养液，并且转染后也不要求换液去除，因而使用起来非常方便。
配方和包装：FuGENE® 6是由脂质与其他组分按照合适比例混合，溶于80%乙醇而成。
试剂通过0.1μm的滤器过滤并分装至小玻璃瓶。
注意事项：转染前须保证FuGENE® 6温度已经达到室温，使用前须上下颠倒数次进行简单混匀。
建议使用标准的24孔板作为FuGENE®6转染试剂的支架。
请不要将原瓶中的FuGENE®6进行分装。
尽可能减少FuGENE®6原液与塑料制品的表面接触。
不要使用硅化的枪头或离心管。
在稀释FuGENE® 6时，请务必保证将FuGENE® 6直接混入培养基，而不要接触到离心管。
（研小弟注：还要防挥发，毕竟溶于80%乙醇，所以也不宜分装）抗生素的使用：在细胞系的常规培养时可以使用抗生素。
但在转染时抗生素的存在可能会影响转染的效率以及转染细胞的整体健康。
除非之前已经在转染细胞中测试过，否则我们不推荐在转染培养液中添加抗生素。
转染步骤：以下是一个简易的中文转染步骤示意图具体的转染步骤包括：•细胞的接种在转染前一天接种细胞，保证在转染时细胞的汇合度在50-80%，悬浮细胞可以在转染当天接种。
通常96孔板中每个孔适宜接种100μl 含1-2×104的贴壁细胞或2×104到1×105的悬浮细胞。
对于其他规格的培养板的推荐细胞数，可参考下表（数据针对Corning公司生产的培养板）。
96-well 0.32 1×24-well 1.88 5×12-well 3.83 10×6-well 9.4 30×35mm 8 25×60mm 21 65×100mm 55 170וFuGENE® 6转染试剂的准备1.转染前保证FuGENE® 6温度已经达到室温2.使用前上下颠倒数次进行简单混匀。
LipoFiter转染试剂中文说明书
类型 （培养皿/培养板）
96-well 48-well 24-well 12-well 6-well 60mm 100mm
表面积 /cm2
0.3cm2 0.8cm2 2cm2 4cm2 10cm2 20cm2 60cm2
对应细胞培养 液体积 100µl 350µl 500µl 1ml 2ml 4ml 12ml
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LipoFiterTM 脂质体转染试剂
注意事项 1. 使用高纯度的 DNA（A260/A280 比值越近 1.8 越好）有助于获得 较高的转染效率。对于质粒，推荐使用 Qiagen 公司生产的质粒大量 抽提试剂盒进行高质量无内毒素抽提。 2. 转染前细胞必须处于良好的生长状态。 3. 需自备 DMEM 培养基，其他培养基如 1640、MEM、alpha-MEM， F12，DMEM/F12、M199 也均可以用于转染实验。 4. LipoFiterTM 不能 vortex 或离心，宜缓慢晃动混匀。 5. LipoFiterTM 使用后请立即盖好盖子，避免长时间暴露在空气中，影 响转染效率。 6. 经测试，LipoFiterTM 细胞毒性不明显，非常适用于病毒包装（腺 病毒，慢病毒，逆转录病毒等）；请在进行病毒包装时严格按照病毒 安全操作进行。
关于病毒安全操作可参考《汉恒生物-病毒载体操作安全手册》或来电来信和我 们的病毒技术工程师沟通，您还可以扫描 加微信和我们技术工程师就技术上进 一步沟通。
7. 为了您的安全和健康，请在符合洁净度要求的细胞培养室中进行 转染操作，操作时请穿实验服并戴一次性手套、口罩和无菌帽。
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LipoFiterTM 脂质体转染试剂 汉恒生物 进入汉恒官网观看 LipoFiterTM 转染实验操作视频
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LipoFiterTM 脂质体转染试剂
转染试剂的中文详解
各种转染试剂的中文转染方法2014-05-06丁香园FuGENE6（Roche）转染步骤：转染前一天将细胞分至培养板，转染当天细胞应50-80％融合。
将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。
将FuGENE6 Reagent在室温静置10-15分钟以平衡到室温。
使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。
1.在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6，直至总体积到100 ul。
2.将3-6 ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液，轻弹管壁混合。
3.加入1-2 ug的DNA溶液（0.02－2.0 ug/ul），轻弹管壁混合。
4.室温孵育20分钟。
5.将6孔板中的旧营养液吸出，加入约1 ml不含血清和双抗的营养液洗涤一次，再加入2 ml不含血清和双抗的营养液。
6.将转染复合物加入细胞，混匀使之均匀分布。
7.3-8小时后，加入血清或换成含血清的营养液。
Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染试剂转染步骤（6孔板）：1.转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90-95％。
细胞铺板在2 ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
2.对于每孔细胞，使用250 ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释4.0 ugDNA，轻轻混匀。
3.使用前将Lipofectamine 2000转染试剂轻轻混匀，用250 ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释10 ul Lipofectamine 2000转染试剂，轻轻混匀。
Lipofectamine 2000稀释后，在5分钟内同稀释的DNA混合（<30分钟）。
NOTE：若使用DMEM培养基，则需在5分钟内同稀释的DNA混合。
4.混合稀释的DNA（第二步）和稀释的Lipofectamine 2000（第三步）。
室温放置20分钟。
5.（optional）将6孔板中的旧营养液吸出，用无血清培养基清洗两次。
neofect转染试剂说明书中文
NeoFect是一种用于将DNA或RNA转染到真核细胞中的转染试剂。
以下是一个简化的、假设性的NeoFect转染试剂说明书的中文翻译，请注意，这不是官方翻译，仅供参考。
实际使用时，请参考随产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）。
---NeoFect转染试剂说明书【产品名称】通用名：转染试剂商品名：NeoFect【成分】主要成分为阳离子脂质体，用于促进核酸分子与细胞膜的融合。
【性状】本品为透明至微浑浊的液体，通常以小瓶或多孔板包装。
【适应症】用于科研实验中，将DNA或RNA高效转染到哺乳动物细胞中，以进行基因表达、基因沉默、基因编辑等研究。
【使用方法】1. 准备待转染的细胞和核酸溶液（DNA或RNA）。
2. 根据实验设计，将适量的NeoFect转染试剂加入无血清培养基中，轻轻混匀。
3. 将核酸溶液加入含有NeoFect的培养基中，轻轻混匀，室温孵育15-30分钟。
4. 将混合物加入到细胞培养皿中，轻轻摇晃使混合均匀。
5. 根据细胞类型和实验目的，孵育一定时间后更换为完全培养基继续培养。
【不良反应】本品仅供实验室使用，不适用于临床治疗。
【禁忌】对本品成分过敏者禁用。
【注意事项】1. 使用前请检查试剂是否清澈，如有沉淀或颜色变化请勿使用。
2. 避免反复冻融，分装后请立即使用。
3. 使用过程中请遵守实验室安全操作规程，佩戴适当的个人防护装备。
4. 请在无RNA酶和DNA酶的环境中操作RNA转染实验。
5. 转染效率受多种因素影响，如细胞状态、核酸浓度、孵育时间等，建议优化实验条件。
【贮藏】存放于4°C冰箱中，避免冷冻。
【有效期】请参考包装标签上的说明。
【生产批号】见包装标签。
【生产企业】（请填写生产企业名称和联系方式）---以上信息仅供参考，实际使用时请遵循产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）的内容。
在操作前，务必了解所有相关的安全和健康信息。
上海常用转染试剂配方
上海常用转染试剂配方
转染试剂是在细胞培养研究中必不可少的试剂。
它将核酸或蛋白质带入目标细胞中，以达到研究目的。
本文将介绍上海常用的几种转染试剂配方。
1. Lipofectamine 2000转染试剂
Lipofectamine 2000是一种常用的脂质体转染试剂，其用途广泛且转染效率高。
其配方如下：
无血清培养基：500μL
要转染的DNA：2μg（根据实验需要调整）
将Lipofectamine 2000试剂与无血清培养基混合，放置5分钟，再加入要转染的DNA 液体，混合后放置15分钟，滴加在细胞上。
2. PEI转染试剂
聚乙烯亚胺（PEI）是一种阳离子高分子，由于其能够形成与DNA负电荷的缔合物，使其成为一种有效的转染试剂。
PEI转染试剂可用于转染细胞以获得较高的转染效率。
其配方如下：
PEI试剂：4μg/μL，将其与等体积的无血清培养基混合。
3. PolyJet转染试剂
PolyJet是一种高效、无毒、具有低细胞损伤的DNA转染试剂。
其配方如下：
4. FuGENE HD转染试剂
细胞的转染操作应该注意以下几点：
1. 转染时间应该控制在半小时至1小时内，过长或过短都会对转染效率造成影响。
2. 转染的DNA浓度应该适当，过高的DNA浓度会对细胞产生毒性。
3. 转染试剂与DNA的混合比例也应该适当，过多或过少都会导致转染效率降低。
总之，合理选择转染试剂和配方，并严格按照操作步骤进行转染可以提高实验的可靠性和成功率。
X-tremeGENE siRNATransfection Reagent中文说明书
仅供生命科学研究使用。
不可用于诊断程序。
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于动物细胞的siRNA转染货号：04 476 093 0011ml货号：04 476 115 0015×1ml （2000次转染反应）保存温度：+2至+8℃1.产品用途实验次数按照标准程序，1 ml X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于HeLa, NIH 3T3,HEK-293等细胞的转染，在24孔板中的转染反应可至少进行400次；96孔板的转染反应，可至少进行1600次。
试剂成分X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent是一种脂质与其他组份构成的混合液，经0.2μm膜过滤，装载于聚丙烯材质的管中。
不含任何人源或动物来源组份。
保存与稳定性X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent于+2至+8°C条件下密闭保存，试剂可保持稳定性达标签注明的失效日期。
请勿冻存X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent，每次使用试剂前漩涡1s或倒置混合均匀。
所需的其他设备与试剂使用X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent进行转染所需的其他试剂与设备包括：●将灭菌的无血清培养基（SFM）预热，培养基中勿添加其他附加成分和补充因子。
建议使用Opti-MEM I培养基稀释siRNA和X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent.●预转染的哺乳动物细胞系。
●siRNA溶液，浓度在0.2μg/μl（15pmoles/μl,[15μM]）至2μg/μl（150pmoles/μl,[150μM]）之间。
应用X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent是一种多组分的高性能转染试剂，可以与siRNA形成复合物并高效输送至动物细胞。
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FuGENE6（Roche）转染步骤:转染前一天将细胞分至培养板，转染当天细胞应50-80％融合。
将细胞以1-3×105/2ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。
将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。
使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。
1.在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6，直至总体积到100ul。
2.将3-6ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液，轻弹管壁混合。
3.加入1-2ug的DNA溶液（0.02－2.0ug/ul），轻弹管壁混合。
4.室温孵育20分钟。
5.将6孔板中的旧营养液吸出，加入约1ml不含血清和双抗的营养液洗涤一次，再加入2ml不含血清和双抗的营养液。
6.将转染复合物加入细胞，混匀使之均匀分布。
7.3-8小时后，加入血清或换成含血清的营养液。
Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染试剂转染步骤（6孔板）：1.转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90-95％。
细胞铺板在2ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
2.对于每孔细胞，使用250ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释4.0ugDNA，轻轻混匀。
3.使用前将Lipofectamine 2000转染试剂轻轻混匀，用250ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释10ul Lipofectamine 2000转染试剂，轻轻混匀。
Lipofectamine 2000稀释后，在5分钟内同稀释的DNA混合（<30分钟）。
NOTE：若使用DMEM培养基，则需在5分钟内同稀释的DNA混合。
4.混合稀释的DNA（第二步）和稀释的Lipofectamine 2000（第三步）。
室温放置20分钟。
5.（optional）将6孔板中的旧营养液吸出，用无血清培养基清洗两次。
加入2ml无血清配养基。
6.直接将复合物加入到每孔中，摇动培养板，轻轻混匀。
7.在37℃，5％CO中保温24-48小时。
无需去掉复合物或更换培养基。
2或者在4-5小时后更换培养生长基也不会降低转染活性。
8.在细胞中加入复合物24-72小时后，分析细胞抽提物或进行原位细胞染色，检测报告基因活性。
这依赖于细胞类型和启动子活性。
对稳定表达，在开始转染一天后将细胞传代至新鲜培养基中，两天后加入筛选抗生素。
进行稳定表达需要数天或数周。
贴壁细胞的稳定转染：转染后24小时，将细胞以≥1:10的比例传代至新鲜培养基中，次日加入选择性培养基。
Lipofectamine 2000转染试剂转染步骤（24孔板）：1.转染前一天，胰酶消化细胞并计数（0.5-2×105），细胞铺板，使其在转染日密度为90-95％。
细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
2.对于每孔细胞，使用50ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释0.8-1.0ugDNA，轻轻混匀。
3.使用前将Lipofectamine 2000转染试剂轻轻混匀，用50ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释1-3ul Lipofectamine 2000转染试剂，轻轻混匀。
Lipofectamine 2000稀释后，在5分钟内同稀释的DNA混合（<30分钟）。
NOTE：若使用DMEM培养基，则需在5分钟内同稀释的DNA混合。
4.混合稀释的DNA（第二步）和稀释的Lipofectamine 2000（第三步）。
室温放置20分钟。
5.（optional）将24孔板中的旧营养液吸出，用无血清培养基清洗两次。
加入0.5ml无血清配养基。
6.直接将复合物加入到每孔中，摇动培养板，轻轻混匀。
中保温24-48小时。
无需去掉复合物或更换培养基。
7.在37℃，5％CO2或者在4-5小时后更换培养生长基也不会降低转染活性。
8.在细胞中加入复合物24-72小时后，分析细胞抽提物或进行原位细胞染色，检测报告基因活性。
这依赖于细胞类型和启动子活性。
对稳定表达，在开始转染一天后将细胞传代至新鲜培养基中，两天后加入筛选抗生素。
进行稳定表达需要数天或数周。
贴壁细胞的稳定转染：转染后24小时，将细胞以≥1:10的比例传代至新鲜培养基中，次日加入选择性培养基。
Effectene Transfection Reagent(Qiagen) 转染步骤：以下步骤适用于在6孔培养板中转染贴壁细胞。
开始时，每6孔培养板使用0.4ug DNA。
尽管DNA的量看起来很少，但已足够用于转染。
如果想获得最高的转染效率，对每种细胞系的转染条件都要进行优化。
1.转染前一天，用5ml含血清和抗生素的培养基分装使每6孔培养板含2-8×105的细胞（根据细胞类型而定）。
2.在细胞的正常培养条件下培养（通常37℃和5％CO2）。
转染当天细胞应40-80％融合。
3.转染时，用DNA浓缩缓冲液（EC Buffer）稀释1ug DNA至100ul总体积（DNA用pH 7-8的TE Buffer溶解，DNA最低浓度：0.1ug/ul）。
加入3.2ul Enhancer，涡旋1s以混合溶液。
重要：请保持DNA与Enhancer比例恒定。
注意：质粒DNA的质量会显著影响几个转染参数如转染效率、细胞增殖和细胞毒性、以及对于结果的解释。
因此，只应该使用最高纯度的DNA。
使用HiSpeed，QIAfilter和QIAGEN Plasmid Kits抽提纯化的质粒适合于大多数细胞系的转染。
要获得最好的重复性和最好的结果，我们推荐使用Endofree Plasmid Kit，该试剂盒可以快速有效地在质粒纯化过程中去除细菌内毒素，从而获得最佳的转染结果。
4.室温（15-25℃）孵育2-5分钟，离心（spin down）几秒钟以从管顶去除液5滴。
5.向DNA-Enhance混合液中加入10ul Effectene Transfection Reagent，反复吸取5次或涡旋10秒钟以混合。
注意：没必要一直把Effectene Reagent置于冰上。
在室温中放置10-15分钟不会改变它的稳定性。
6.室温下（15-25℃）孵育5-10分钟以形成转染复合物。
7.孵育过程中，从培养板上轻柔地吸出培养液，用4ml PBS洗涤一次细胞。
加入1.6ml新鲜培养液（可以包含血清和抗生素）到细胞中。
8.加入0.6ml培养液（可以包含血清和抗生素）至包含转染转染复合物的EP管中。
吸取两次以混合，立即将转染复合物drop-wise加入6孔培养板的细胞中。
轻摇培养板使转染复合物分布均匀。
9.将细胞与转染复合物在它们的正常培养条件下孵育适当的时间直至转染基因表达。
孵育时间和由所采用的实验和所使用的基因决定。
Optional:大多数情况下，不需去除转染复合物。
然而，如果观察到细胞毒性，则需在转染后6-18小时移除Effectene-DNA混合物，用PBS洗涤一次细胞，然后加入5ml新鲜细胞培养液。
10.瞬时转染时，进一步试验分析转染基因的表达。
转染β-gal 或cat 报告基因的重组子常在转染后孵育24-48小时以使转染基因的表达最大化。
稳定转染时，在转染后24-48小时，将细胞以1:5~1:10传代至合适的选择性培养基中。
保持细胞在选择性培养基中直至克隆出现。
注意：我们推荐对每一细胞系和使用的抗生素建立一个致死曲线（剂量-反应曲线）。
但是一定要记住致死曲线受细胞密度的影响。
以下步骤有时是必须的：将转染的细胞置于它们正常的培养液（如：不含选择性抗生素的培养液），然后孵育1-2天，然后再加入选择性培养液。
Superfect Transfection Reagent(Qiagen) 转染步骤：以下步骤适用于在6孔培养板中转染贴壁细胞。
如果想获得最高的转染效率，对每种细胞系的转染条件都要进行优化。
1.转染前一天，用含血清和抗生素的培养基分装使每6孔培养板含2-8×105的细胞（根据细胞类型而定）。
2.在细胞的正常培养条件下培养（通常37℃和5％CO2）。
转染当天细胞应40-80％融合。
3.转染时，用无血清培养基稀释2ug DNA至100ul总体积（DNA用pH 7-8的TEBuffer溶解，DNA最低浓度：0.1ug/ul）。
混合，离心几秒钟以从管顶去除液滴。
注意：质粒DNA的质量会显著影响几个转染参数如转染效率、细胞增殖和细胞毒性、以及对于结果的解释。
因此，只应该使用最高纯度的DNA。
使用HiSpeed，QIAfilter和QIAGEN Plasmid Kits抽提纯化的质粒适合于大多数细胞系的转染。
要获得最好的重复性和最好的结果，我们推荐使用Endofree Plasmid Kit，该试剂盒可以快速有效地在质粒纯化过程中去除细菌内毒素，从而获得最佳的转染结果。
4.向DNA稀释液中加入10ul Superfect Transfection Reagent，反复吸取5次或涡旋10秒钟以混合。
注意：没必要一直把Superfect Reagent置于冰上。
在室温中放置10-15分钟不会改变它的稳定性。
5.室温下（15-25℃）孵育5-10分钟以形成转染复合物。
6.孵育过程中，从培养板上轻柔地吸出培养液，用2ml PBS洗涤一次细胞。
7.加入600ul培养液（包含血清和抗生素）至包含转染转染复合物的EP管中。
吹打两次以混合，立即将转染复合物加入6孔培养板的细胞中。
轻摇培养板使转染复合物分布均匀。
8.将细胞与转染复合物在它们的正常培养条件下孵育2-3小时。
9.小心移除Superfect-DNA混合物，用2mlPBS洗涤3-4次细胞10.加入新鲜的正常培养基，孵育24-48小时。
11.瞬时转染时，进一步试验分析转染基因的表达。
转染β-gal 或cat 报告基因的重组子常在转染后孵育24-48小时以使转染5基因的表达最大化。
稳定转染时，在转染后24-48小时，将细胞以1:10~1:15传代至合适的选择性培养基中。
保持细胞在选择性培养基中直至克隆出现。
注意：我们推荐对每一细胞系和使用的抗生素建立一个致死曲线（剂量-反应曲线）。
但是一定要记住致死曲线受细胞密度的影响。
以下步骤有时是必须的：将转染的细胞置于它们正常的培养液（如：不含选择性抗生素的培养液），然后孵育1-2天，然后再加入选择性培养液。