四 目的基因的检测与表达产物的测定分析
目的基因的检测与鉴定的基本条件
目的基因的检测与鉴定是遗传学研究中的重要环节，其结果对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。
目的基因的检测与鉴定需要具备一定的基本条件，以下将从样本的获取、实验方法、数据分析等方面进行详细介绍。
一、样本的获取1. 标本的来源：目的基因检测与鉴定所需的样本可以来源于各种不同的组织或细胞，包括血液、唾液、组织活检等。
2. 样本的保存和处理：为了保证检测结果的准确性，样本的保存和处理至关重要。
必须采取适当的方法将样本保存在恒温条件下，避免样本受到损伤或者污染。
二、实验方法1. PCR扩增技术：PCR是目的基因检测的一种重要技术手段，通过PCR扩增可以获得目的基因的大量拷贝，为后续的检测和鉴定提供了充分的样本。
2. 测序技术：常用的测序技术包括Sanger测序和高通量测序技术，可以对PCR扩增得到的目的基因进行准确的测序分析。
3. 分子标记技术：分子标记技术如Southern blotting、Northern blotting等也是目的基因检测与鉴定中常用的手段。
三、数据分析1. 数据质控：对实验获得的数据进行质控，包括检查PCR产物的纯度和大小，测序结果的质量等，保证数据的准确性和可靠性。
2. 数据解读：对检测到的目的基因进行数据分析和解读，鉴定该基因的具体序列和功能，判断其与特定疾病的关联性。
四、设备和实验环境1. 实验设备：目的基因的检测与鉴定需要使用PCR仪、电泳仪、测序仪等一系列专业设备进行实验操作。
2. 实验室条件：实验室必须具备一定的洁净度和恒温条件，保证实验的稳定进行。
以上是目的基因检测与鉴定的基本条件，只有在具备了样本的获取、实验方法、数据分析和实验环境等方面的基本条件后，才能保证检测结果的准确性和可信度。
相信随着科学技术的不断进步和发展，目的基因检测与鉴定的方法会更加完善和高效，为疾病的诊断和治疗提供更为可靠的依据。
为了确保目的基因检测与鉴定的准确性和可靠性，除了基本条件外，还需要特别关注样本的质量控制、实验方法的优化和数据分析的精细化。
高中生物4章基因工程2节基因工程的操作程序2课时目的基因的导入和检测
第2课时目的基因的导入和检测[目标导读] 1.结合教材P77～81图文，阐明目的基因的导入的四种方法。
2.分析教材P81～83内容，掌握目的基因的检测与表达产物的测定。
[重难点击] 1.目的基因的导入方法。
2.目的基因的检测与表达产物测定的原理方法。
方式一通过前面的学习，我们了解了基因工程中目的基因的获取和基因表达载体的构建。
在目的基因与载体连接成重组DNA分子以后，下面的重要工作主要是将其导入受体细胞进行扩增和筛选，获得大量的重组DNA分子，这就是外源基因的无性繁殖，即克隆(cloning)。
方式二目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。
这是基因工程的第四步工作。
以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。
因此，必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。
检测的方法有很多种，例如，大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。
重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。
一、目的基因的导入1．花粉管通道法(如图)(1)概念：是指外源基因利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道进入受体细胞，借助天然的种胚系统形成含有目的基因的种胚。
常用的两种方法有柱头滴加法和花粉粒携带法。
(2)实验：利用花粉管通道法将目的基因导入棉花的实验操作程序①原理：授粉后使外源DNA能沿着花粉管通道渗入，经过珠心通道进入胚囊，转化尚不具备正常细胞壁的卵细胞、合子或早期胚胎细胞。
②操作过程a．提取含有目的基因的总DNA或者质粒DNA，配成质量分数为0.01%的溶液。
b．用棉线捆住将要在第二天开花的花朵，不让花朵自动开放。
c．第二天清晨给花朵进行人工授粉，授粉后套袋，作好标记。
第三章 基因工程 第2节 基因工程的基本操作程序
第2节基因工程的基本操作程序一、目的基因的筛选与获取1．培育转基因抗虫棉的四个步骤(1)目的基因的筛选与获取。
(2)基因表达载体的构建。
(3)将目的基因导入受体细胞。
(4)目的基因的检测与鉴定。
2．目的基因的筛选与获取目的基因：在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。
主要指编码蛋白质的基因，如与生物抗逆性、优良品质、生产药物、毒物降解和工业用酶等相关的基因。
(1)筛选合适的目的基因：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选。
(2)利用PCR获取和扩增目的基因①PCR的含义：PCR是聚合酶链式反应的缩写，它是一项根据DNA半保留复制的原理，在生物体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
②目的：快速扩增目的基因。
③原理：DNA半保留复制。
④基本条件：DNA模板、4种脱氧核苷酸、2种引物、耐高温的DNA聚合酶、缓冲液。
⑤过程a．变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链。
b．复性：温度下降至50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
c．延伸：温度升至72 ℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
⑥结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。
⑦鉴定：采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物。
⑧仪器：PCR扩增仪。
(3)在获得转基因产品的过程中，还可以通过构建基因文库来获取目的基因。
【强化记忆】图1、图2分别是PCR扩增技术相关过程，请思考回答：(1)图1所示利用PCR技术扩增目的基因，在第几轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段？提示第3轮。
(2)图2是某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理，请分别说明理由。
提示第1组：引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效。
分离目的基因实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在通过分子生物学技术，学习并掌握目的基因的分离方法，包括基因组DNA提取、目的基因的克隆、扩增和鉴定等步骤。
通过实验，使学生熟悉实验原理、操作步骤和注意事项，提高学生的动手能力和实验技能。
二、实验原理目的基因分离是指从生物基因组中提取出特定的基因片段，并进行克隆、扩增和鉴定。
实验步骤主要包括以下几部分：1. 基因组DNA提取：利用各种方法从生物组织中提取出基因组DNA。
2. 目的基因的克隆：利用PCR技术扩增目的基因，并克隆到载体上。
3. 目的基因的鉴定：通过限制性内切酶酶切、DNA测序等方法对克隆的目的基因进行鉴定。
4. 目的基因的表达：将目的基因导入宿主细胞，进行表达和功能验证。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：大肠杆菌、质粒载体、目的基因DNA模板等。
2. 试剂：DNA提取试剂盒、PCR试剂、限制性内切酶、DNA连接酶、DNA测序试剂盒等。
四、实验步骤1. 基因组DNA提取（1）取适量生物组织，按照DNA提取试剂盒说明书进行操作。
（2）提取的基因组DNA用琼脂糖凝胶电泳检测，确保DNA提取质量。
2. 目的基因的克隆（1）设计特异性引物，用于PCR扩增目的基因。
（2）按照PCR试剂盒说明书进行PCR扩增，获得目的基因。
（3）将PCR产物与载体连接，转化大肠杆菌。
（4）通过蓝白斑筛选，获得阳性克隆。
3. 目的基因的鉴定（1）对阳性克隆进行酶切鉴定，验证目的基因是否成功克隆。
（2）对阳性克隆进行DNA测序，确定目的基因序列。
4. 目的基因的表达（1）将目的基因克隆到表达载体上，构建表达系统。
（2）将表达载体导入宿主细胞，进行目的基因的表达。
（3）检测目的基因的表达产物，验证目的基因的功能。
五、实验结果与分析1. 基因组DNA提取：提取的基因组DNA在琼脂糖凝胶电泳中呈现清晰的主带，说明DNA提取成功。
2. 目的基因的克隆：通过PCR扩增，获得目的基因片段，大小与预期相符。
目的基因的扩增及扩增产物鉴定分析报告
扩增条件优化
温度循环
根据所使用的DNA聚合酶特性，设 置合适的温度循环，包括变性、退火 、延伸等温度设置。
延伸时间
根据目的基因长度和DNA聚合酶活 性，设置合适的延伸时间。
循环数
根据目的基因浓度和扩增效率，确定 合适的循环数，避免非特异性扩增和 过度扩增。
产物检测
扩增后对产物进行电泳检测，确认目 的基因是否成功扩增。
关重要。
产物纯度评估
总结词
产物纯度评估是判断扩增产物质量的重要环节，有助于提高后续实验的准确性 和可靠性。
详细描述
通过电泳、质谱分析、光谱分析等方法评估产物纯度，可以了解扩增产物中杂 质成分的含量，从而判断产物的质量。产物纯度评估对于后续的实验操作和应 用研究具有重要意义。
04
目的基因的功能研究
产物鉴定
通过DNA测序，证实了目的基因 的准确性，与预期序列一致，进 一步验证了扩增产物的可靠性。
研究意义与价值
01
基础研究
本实验为深入了解目的基因的结 构和功能提供了基础数据，有助 于推动相关领域的研究进展。
02
生物技术应用
03
疾病诊断与治疗
成功扩增目的基因可为基因克隆 、基因表达、基因治疗等生物技 术应用提供关键材料。
目的基因的扩增及扩增 产物鉴定分析报告
目录 CONTENT
• 目的基因的扩增 • 扩增产物的鉴定 • 数据分析与解读 • 目的基因的功能研究 • 结论与展望
01
目的基因的扩增
引物设计
引物长度
根据目的基因序列，选择合适的引物长度，通常为18-24个核苷 酸。
引物特异性
确保引物与目的基因特异性结合，避免与基因组其他部分发生非特 异性结合。
基因工程的原理和技术
基因工程的基本原理：
让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细 胞中稳定和高效的表达。根据不同的实验目的，目 的基因可以有很多种，如抗虫基因、抗病基因、抗 除草剂基因、人胰岛素基因和人干扰素基因等。因 此表达的产物各不相同。通过基因工程的基本操作 ，就能实现目标。
二、基因操作的基本步骤
第三步：将目的基因导入受体细胞
选择的关键是分析基因工程的最终目的，按转基因的目的来选择：
基因工程的 最终目的
得到大量特 殊蛋白质
得到转基因动物 得到转基因植物
常用的受 体细胞
大肠杆菌 等微生物
受精卵 植物体细胞
导入的方法
Ca2＋处理法 显微注射法 农杆菌转化法
将目的基因导入微生物细胞
常选细菌 作受体细胞的原因：它 们繁殖力极强，生长速 度很快，短期内就会产 生大量后代，所以把目 的基因转入这些细菌， 就能在短时间内得到大 量的目的基因产物。
细菌的检测：
将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中 是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的 菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。
无表达产物
无表达产物
有表达产物
无表达产物
多细胞生物的检测： 将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体， 检测这些个体是否表现出相应的性状。
例：抗虫棉检测
用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不 出现中毒症状，说明未摄入目的基 因或摄入目的基因未表达。
例：下列有关基因表达载体的构建说法正确的是( C ) A．限制性核酸内切酶的功能是切割各种DNA分子 B．基因工程中经常用到的酶只有DNA连接酶和限制性 核酸内切酶 C．将目的基因与载体结合的过程，实际上就是不同来 源的DNA重新组合的过程 D．具有粘性末端的目的基因片段插入质粒的切口处， 先形成磷酸二酯键，再形成氢键
基因工程的基本操作程序主要包括四个基本步骤
巩固练习
1为了培育节水高产品种，科学家将大麦中与抗旱 节水有关的基因导入小麦，得到转基因小麦，其 水分利用率提高了20%。这项技术的遗传学原理 是 A．基因重组 B．基因突变 C．基因复制 D．基因分离点点生物学教学Fra bibliotek巩固练习
2利用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育的抗虫棉是 否成功，最好检测 A．是否有抗生素产生 B．是否有目的基因表达 C．是否有抗虫的性状出现 D．是否能分离到目的基因
等⑤mRNA⑥核糖体
A、①②③④
B、②③④⑤
C、①③
④⑤ D、①②③⑥
点点生物学教学
巩固练习
6 获取目的基因的方法有多种，下列不属于含目的基因生物细胞中获取 D、利用PCR技术获取
点点生物学教学
巩固练习
7 下列高科技成果中，根据基因重组原理进行的 是（ ）
白基因等。
点点生物学教学
3.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理,你能分 析出不能导入单子叶植物的原因吗?若将一个抗病基因导 入小麦中,理论上讲你应该怎样做? ①要选择合适的农杆菌菌株，因为不是所有的农杆菌菌株都 可以侵染单子叶植物； ②要加趋化和诱导的物质，一般为乙酰丁香酮等，目的是使 农杆菌向植物组织的受伤部位靠拢（趋化性）和激活农杆菌 的Vir区（诱导）的基因，使T-DNA转移并插入到染色体DNA 上。
点点生物学教学
寻根问底：将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如
果这么做，结果会怎样？ 提示：有人采用总DNA注射法进行遗传转化，即将一个生物中 的总DNA提取出来，通过注射或花粉管通道法导入受体植物， 没有进行表达载体的构建，这种方法针对性差，完全靠运气， 也无法确定什么基因导入了受体植物。此法目前争议颇多，严 格来讲不算基因工程。
基因工程必备知识点
第四步：
1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上 是否插入了目的基因，方法是采用 。
2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质， 方法是从转基因生物中提取 ，用相 应的 进行 。 4.有时还需进行 的鉴定，如 。
。
（四）蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以 作为基础，通过 ，对现有蛋白质进 行 ，制造一种 ，以满足人类的生产和生活的需求。（基因 工程在原则上只能生产 的蛋白质）
三.“分子运输车”——运载体(质粒) (1)载体具备的条件： ①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是-质粒,它是一种裸露 的、结构简单的、独立于细菌DNA之外， 并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 (3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物 病毒。
如果前面的知识点你都记住的话，不妨把答案填在这些空格里面，牢牢 地掌握这些知识点吧！ 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过 和 ，赋予 生物以 ，创造出 。基因工程是在 水平上进行设计和施工的，又 叫做 。
1.“分子手术刀”—— （1）来源：主要是从
中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种 的核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断 开，因此具有 性。 （3）经限制酶切割产生的DNA片段末端通 常有两种形式： 和 。 2.“分子缝合针”—— (1)E· DNA连接酶和T4-DNA连接酶的比较： coli ①相同点：都缝合 。 ②不同点：E· DNA连接酶只能将双链 coli DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键 连接起来；而T4-DNA连接酶能缝合 ， 但连接平末端的效率较 。 (2) DNA连接酶与DNA聚合酶的比较: ----------- DNA聚合酶只能将 加到已有的 ----------核苷酸片段的末端，形成 。 DNA连接酶是连接 的末端，形成 。
目的基因的检测与鉴定步骤
目的基因的检测与鉴定步骤目的基因的检测与鉴定是一项重要的生物技术，它可以帮助科学家们了解生物体内的特定基因，以及这些基因在生物体中的功能和表达方式。
下面将介绍目的基因的检测与鉴定的步骤。
第一步：提取DNA样本目的基因的检测与鉴定首先需要从生物体中提取DNA样本。
这可以通过不同的方法来实现，比如采用化学试剂的方法或者利用机械方法破碎细胞膜来释放DNA。
第二步：PCR扩增在获得DNA样本后，科学家们需要进行PCR扩增，以增加目的基因的数量。
PCR是一种基于DNA聚合酶的体外DNA复制技术。
它可以在短时间内扩增目的基因的特定区域，从而使其数量增加。
第三步：凝胶电泳分离PCR扩增后，科学家们需要进行凝胶电泳分离，以检测目的基因的扩增效果。
凝胶电泳是一种分离DNA片段的常用方法，它可以根据DNA片段的大小将其分离出来，并通过染料来可视化目的基因的扩增结果。
第四步：测序分析凝胶电泳分离后，科学家们需要进行测序分析，以确定目的基因的具体序列。
测序分析可以通过不同的方法来实现，如Sanger测序或者新一代测序技术。
通过测序分析，科学家们可以获得目的基因的完整序列信息。
第五步：功能鉴定在得到目的基因的序列后，科学家们可以进行功能鉴定，以了解目的基因在生物体中的功能和表达方式。
功能鉴定可以通过不同的方法来实现，如基因敲除、基因过表达或基因沉默等技术。
通过功能鉴定，科学家们可以深入研究目的基因的生物学功能。
目的基因的检测与鉴定包括提取DNA样本、PCR扩增、凝胶电泳分离、测序分析和功能鉴定等步骤。
这些步骤的顺序和操作方法可以根据具体的实验目的和要求进行调整和优化。
通过目的基因的检测与鉴定，科学家们可以更好地了解生物体内的基因信息，为生命科学研究和应用提供基础支持。
基因工程基本操作的四个步骤
利用PCR技术扩增
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端 互补的寡核苷酸引物。
在PCR反应中，模板DNA、引物、四种脱氧核糖核苷酸、DNA聚合酶以及适宜 的缓冲液系统被置于“热循环”的反应环境中，通过精确控制温度，在DNA聚合 酶作用下高特异性、高灵敏度地扩增目的基因。
受体细胞的选择
01
02
03
原核细胞
适用于细菌等原核生物作 为受体细胞，如大肠杆菌。
真核细胞
适用于动物和植物细胞作 为受体细胞，如CHO细胞、 动物胚胎细胞、植物愈伤 组织等。
受精卵
适用于动物基因工程，直 接将目的基因导入受精卵， 实现基因的长期稳定表达。
转化或转染方法
01
02
03
04
化学转化法
利用CaCl2、MgCl2等化 学试剂诱导细菌感受态 细胞的产生，吸收外源 DNA。
载体的构建过程
目的基因的获取和修饰
从供体细胞中获取目的基因，并进行 必要的修饰，如限制性酶切、连接等。
载体的获取和修饰
从宿主细胞中获取载体，并进行必要 的修饰，如限制性酶切、连接等。
目的基因与载体的连接
将目的基因与载体进行连接，形成重 组DNA分子。
重组DNA分子的转化
将重组DNA分子导入到宿主细胞中， 并使其在宿主细胞中复制和表达。
03 目的基因与载体的连接
限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶是一类能识别并附着特定的核苷酸 序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸
之间的磷酸二酯键进行切割的酶。
限制性核酸内切酶的识别位点通常是DNA双链上的特 异序列，这种序列通常由4-6个核苷酸组成。
鉴定目的基因的方法
鉴定目的基因的方法一、序列比对和分析序列比对和分析是鉴定目的基因的首要步骤。
通过将目的基因的序列与已知序列进行比对，可以确定目的基因的种类、来源和可能的相似性。
常用的序列比对和分析方法包括BLAST、Smith-Waterman算法、FASTA等。
这些方法可以确定目的基因与已知基因或蛋白质序列的相似性，从而初步鉴定目的基因。
二、功能验证功能验证是鉴定目的基因的重要手段。
通过将目的基因在细胞或生物体中进行表达，观察其表达产物是否具有预期的功能，可以进一步确定目的基因的功能。
常用的功能验证方法包括基因敲除、基因过表达、基因编辑等。
这些方法可以改变目的基因的表达水平或表达产物，从而观察其对细胞或生物体的影响。
三、表达水平检测表达水平检测可以反映目的基因在特定条件下的表达情况。
通过检测目的基因在不同条件下的表达水平，可以了解目的基因的表达调控机制，以及其在生物体中的重要作用。
常用的表达水平检测方法包括qPCR、Western blot、RNA-seq等。
四、进化树构建进化树构建可以反映目的基因在物种间的进化关系。
通过比较不同物种间的目的基因序列，可以构建进化树，从而了解目的基因的进化历程和可能的起源。
五、分子标记辅助鉴定分子标记辅助鉴定可以利用特定的分子标记来辅助鉴定目的基因。
这些分子标记可以是限制性片段长度多态性（RFLP）、可变数目串联重复（VNTR）等。
通过检测目的基因是否存在这些分子标记，可以进一步确定目的基因的种类和来源。
六、基因敲除或过表达基因敲除或过表达是鉴定目的基因功能的重要手段。
通过构建突变体或转基因植株，使目的基因不能正常表达或过量表达，可以观察其对生物体表型的影响，从而了解目的基因的功能。
常用的敲除或过表达方法包括CRISPR-Cas9技术、转录因子诱捕等。
七、蛋白质功能鉴定蛋白质功能鉴定可以通过分析目的基因表达产物的生化性质和功能，进一步确定目的基因的功能。
常用的蛋白质功能鉴定方法包括亲和层析、质谱分析、结晶学分析等。
【高考冲刺】2020届山东省潍坊市高三第三次模拟生物试题(解析版)
B、正常情况下，发生凋亡的细胞内EGL-1解除了CED-9对CED-4的抑制，使CED-4、CED-3大量表达从而启动凋亡，因此细胞内EGL-1、CED-3的含量增加，B正确；
C.“嵌合体”产生配子过程中，部分细胞染色体联会紊乱
D.“嵌合体”个体自交也可产生二倍体、三倍体的子代
【答案】C
【解析】
【分析】
秋水仙素作用的机理：人工诱导多倍体的方法很多，如低温处理，目前最常用且最有效的方法是用秋水仙素来处理萌发的种子或幼苗，当秋水仙素作用于正在分裂的细胞时，能够抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向细胞两极，从而引起细胞内染色体数目加倍，染色体数目加倍的细胞继续进行有丝分裂，将来可能发育成多倍体植株。
B、磷酸丙糖是三碳化合物，B错误；
C、磷酸丙糖合成淀粉的过程是在叶绿体基质中进行，C错误；
D、磷酸转运器活性受抑制，不能将磷酸丙糖运出叶绿体和将磷酸运入叶绿体，造成叶绿体中光合作用产生积累和缺少磷酸，导致光合作用速率降低，D正确。
故选D。
3.研究发现，与生活在适宜温度条件下相比，较长时间生活在低温条件下的某植物根系干重下降、对磷的吸收减慢。下列有关这一现象原因的说法，错误的是（）
【详解】A、由于低温条件导致酶活性降低，因此根系在低温条件下生长缓慢且生根数目少，进而导致根毛区的有效吸收面积较常温下生长的根系小，A正确；
B、低温条件下不会破坏蛋白质的空间结构，载体的化学本质是蛋白质，因此，低温不会导致运输PO43-等相关离子的载体空间结构被破坏，B错误；
C、低温会导致分子运动的速率下降，因此组成根细胞膜的磷脂分子和蛋白质分子在低温下流动性降低，C正确；
基因工程知识点总结
基因工程知识点总结一、基因工程的概念基因工程，又称基因拼接技术或 DNA 重组技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
简单来说，基因工程就是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。
二、基因工程的工具（一）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）1、来源：主要从原核生物中分离纯化出来。
2、特点：能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
3、作用结果：产生黏性末端或平末端。
（二）“分子缝合针”——DNA 连接酶1、分类：E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶。
2、作用：将两个具有相同末端的 DNA 片段连接起来。
（三）“分子运输车”——载体1、作用：将目的基因送入受体细胞。
2、具备条件：能在受体细胞中复制并稳定保存。
具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。
具有标记基因，便于筛选。
3、种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
其中质粒是基因工程中最常用的载体。
三、基因工程的基本操作程序（一）目的基因的获取1、从基因文库中获取基因文库包括基因组文库和部分基因文库（如 cDNA 文库）。
基因组文库包含了一种生物的全部基因；cDNA 文库只包含了一种生物的部分基因，是由 mRNA 反转录得到的 DNA 组成。
2、利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。
原理：DNA 双链复制。
条件：模板 DNA、引物、四种脱氧核苷酸、热稳定 DNA 聚合酶（Taq 酶）等。
3、人工合成如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过 DNA 合成仪用化学方法直接人工合成。
（二）基因表达载体的构建（核心步骤）1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
提取目的基因实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握从细胞中提取目的基因的方法。
2. 了解目的基因提取过程中的原理和操作步骤。
3. 通过电泳检测目的基因的提取效果。
二、实验原理目的基因提取实验主要利用DNA的碱基互补配对特性和分子生物学技术，通过以下步骤实现目的基因的提取：1. 细胞裂解：利用去垢剂（如SDS）和蛋白酶K等试剂，破坏细胞膜，使细胞内的DNA释放出来。
2. 去除蛋白质：通过酚/氯仿抽提法，去除细胞裂解液中蛋白质等杂质。
3. DNA沉淀：通过乙醇或异丙醇等试剂，使DNA沉淀，从而纯化DNA。
4. DNA溶解：将沉淀的DNA溶解于适量的水中，以便后续实验使用。
三、实验材料1. 细胞样本：大肠杆菌或其他细胞株。
2. 试剂：SDS、蛋白酶K、酚/氯仿、乙醇、异丙醇、NaCl、Tris-HCl、EDTA等。
3. 仪器：离心机、电泳仪、紫外分光光度计等。
四、实验步骤1. 细胞裂解：- 将细胞样本加入含有SDS和蛋白酶K的裂解液中，混匀，室温放置30分钟。
- 12,000 rpm离心10分钟，收集上清液。
2. 去除蛋白质：- 将上清液与等体积的酚/氯仿混合，混匀，12,000 rpm离心10分钟。
- 取上清液（即酚/氯仿相）转移至新管中。
3. DNA沉淀：- 向酚/氯仿相中加入1/10体积的3M NaCl和2.5倍体积的乙醇，混匀。
- -20℃放置1小时或过夜。
- 12,000 rpm离心10分钟，收集沉淀。
4. DNA溶解：- 将沉淀溶于适量的Tris-HCl（pH 8.0）缓冲液中，即为提取的目的基因。
5. DNA浓度测定：- 利用紫外分光光度计测定DNA的浓度。
6. 电泳检测：- 将提取的目的基因进行琼脂糖凝胶电泳，观察DNA条带。
五、实验结果1. DNA浓度测定：利用紫外分光光度计测定DNA的浓度为50 ng/μl。
2. 电泳检测：在琼脂糖凝胶电泳中，观察到一条清晰的DNA条带，与目的基因大小相符。
六、实验讨论1. 本实验成功提取了目的基因，说明实验操作步骤正确。
-目的基因的检测与表达产物的测定分析页课件 (二)
-目的基因的检测与表达产物的测定分析页课件 (二)- 目的基因的检测目的基因的检测是一项非常重要的技术，它可以帮助我们了解基因在生物体内的表达情况。
这项技术可以通过PCR、Western Blotting等方法来实现。
- PCR技术PCR技术是一种可以扩增DNA片段的技术，它可以帮助我们快速检测目的基因。
这项技术需要特异性引物和DNA模板，通过PCR反应可以扩增出目的基因的特定片段。
- Western Blotting技术Western Blotting技术是一种可以检测蛋白质的技术，它可以帮助我们了解目的基因在生物体内的表达情况。
这项技术需要特异性抗体和蛋白质样品，通过Western Blotting反应可以检测出目的基因的表达产物。
- 表达产物的测定分析表达产物的测定分析是一项可以帮助我们了解基因在生物体内的功能的技术。
这项技术可以通过RNA测序、质谱分析等方法来实现。
- RNA测序技术RNA测序技术是一种可以检测RNA的技术，它可以帮助我们了解目的基因在生物体内的表达情况和功能。
这项技术需要RNA样品和高通量测序仪器，通过RNA测序反应可以获得RNA序列信息。
- 质谱分析技术质谱分析技术是一种可以检测蛋白质和代谢产物的技术，它可以帮助我们了解目的基因在生物体内的功能。
这项技术需要蛋白质或代谢产物样品和质谱仪器，通过质谱分析反应可以获得蛋白质或代谢产物的信息。
- 总结目的基因的检测与表达产物的测定分析是一项非常重要的技术，它可以帮助我们了解基因在生物体内的表达情况和功能。
这项技术可以通过PCR、Western Blotting、RNA测序和质谱分析等方法来实现。
人教版高中生物选择性必修第3册 精品讲义 3.2 基因工程的基本操作程序(教师版)
3.2 基因工程的基本操作程序 教学目标教学重点1.基因工程基本操作程序的四个步骤。
2.DNA 片段的扩增及电泳鉴定。
教学难点1. 利用PCR 获取和扩增目的基因。
2. DNA 片段的扩增及电泳鉴定。
知识点01 第一步：目的基因的筛选与获取1.目的基因：在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。
也指能够编码特定蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用课程标准目标解读 基因工程是一种重组DNA 技术。
1. 阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤。
1. 阐明基因工程的原理和基本操作程序。
2. 针对人类生产或生活中的某一需求，选取适当的基因工程的技术和方法，尝试设计获得某一转基因产品的方案。
3. 尝试进行PCR 的基本操作并用电泳鉴定PCR 的产物。
知识精讲目标导航的因子。
2.筛选目的基因：从相关的已知结构和功能清晰的基因中筛选，是较为有效的方法之一3.获取目的基因：（1）人工合成（2）基因文库中获取目的基因（3）利用PCR获取和扩增①PCR：PCR全称为聚合酶链式反应，又叫做体外DNA扩增技术。
根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
通过这项技术可在短时间内大量扩增目的基因。
②PCR利用的原理：DNA半保留复制③DNA复制的基本条件：④PCR的前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
⑤PCR的条件：DNA模板（需含有目的基因）。
分别与模板DNA相结合的2种引物。
四种脱氧核苷酸（或四种dNTP：dATP、dTTP、dGTP、dCTP）。
耐高温的DNA聚合酶(Taq酶）。
稳定的缓冲溶液（一般添加Mg2+）。
能严格控制温度的温控设备。
⑥PCR的过程：⑦PCR的结果：以指数方式扩增，即2n（n为扩增循环的次数）⑧鉴定PCR的产物：常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定产物知识点02 第二步：基因表达载体的构建基因表达载体的组成：目的基因、标记基因、启动子、终止子基因表达载体构建过程：一般用同一种限制酶分别切割载体和含有目的基因的DNA片段，再用DNA连接酶将两者连接。
生物学案：基因工程的基本操作程序
1．2 基因工程的基本操作程序1．简述基因工程的原理及基本操作程序。
2．尝试设计某一转基因生物的研制过程。
一、目的基因的获取1．从基因文库中获取目的基因将含有某种生物不同______的DNA片段导入________的群体中储存，各个________分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。
基因文库包括两种：________文库，即包含一种生物所有基因的文库；________文库，即只包含一种生物的一部分基因的文库，如______文库。
2．利用PCR（1）PCR的含义:是一项在生物______复制特定DNA片段的核酸合成技术。
（2）目的：短时间内大量扩增目的基因。
(3）原理：__________。
（4）过程：第一步,加热至90～95 ℃，________________。
第二步，冷却至55～60 ℃，________________________________________________。
第三步，加热至70～75 ℃，________________________________________________。
如此重复循环多次.（5）特点：指数形式扩增。
3．用化学方法人工合成如果基因比较____，核苷酸序列又已知，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建基因表达载体的组成：必须有启动子、________、终止子以及________等。
1．启动子启动子是一段有特殊结构的______片段,位于基因的首端，是____________________的部位,可驱动基因______。
2．终止子终止子也是一段______短片段，位于基因尾端,使______在需要的地方停止。
3．标记基因标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有________，从而将含有________的细胞筛选出来。
三、将目的基因导入受体细胞1．转化________进入受体细胞内,并且在受体细胞内________和______的过程,称为转化。
【高中生物】基因工程的基本操作程序课件+高二下学期生物人教版选择性必修3
新课讲解
二、基因表达载体的构建 重组载体的构建是基因工程的核心，其目的是把目的基因和载体组合
成一个新的DNA分子，以便将目的基因送进受体细胞。
(一)基因表达载体的作用： 1.使目的基因在受体细胞中稳定存在，并能(通过复制)遗传给下一代。 2.使目的基因能够受体细胞中表达和发挥作用。
(二)基因表达载体的组成：
苏云金杆 菌内获得 Bt抗虫蛋
白基因
与载体 结合
转入棉花细 胞内
检查转基因抗虫棉 是否培育成功
将转化成功的细胞 进行组织培养，获得
转基因抗虫植株
新课讲解
基因工程的基本操作主要包括四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表 达载体的构建、将目的基因导入受体细胞(转化)、目的基因的检测与鉴定。
新课讲解
一、目的基因的筛选与获取
②需要四种脱氧核苷酸作原料；
③子链延伸的方向都是从5′端向3′端 ④都遵循碱基互补配对。
观察思考
1、n代后，DNA分子有__2_n__个。 2、n代后，DNA链有__2_n+_1_条。 3、第__3__代开始符合要求的目的基因。 4、n代后，含引物的DNA分子有__2_n__个。 5、n代后，共消耗_____2_n+_1_-2__个引物。 6、第n代复制，消耗了___2_n__个引物。 7、n代后，完整的目的基因有___2_n-_2_n__个。
新课讲解
▼相关信息：
1.Bt抗虫蛋白的抗虫原理：
当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的特异性受 体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡。
2.抗虫棉中的Bt抗虫蛋白会不会对人畜产生危害？
Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而 人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体，因此，Bt抗虫 蛋白不会对人畜产生上述影响。
试述基因工程基本流程
试述基因工程基本流程基因工程听起来就超级酷，那我来给你唠唠它的基本流程哈。
一、目的基因的获取。
这就像是一场寻宝之旅呢。
有时候，科学家们会从生物的基因组里直接找，比如说从细胞的DNA中把想要的那段基因给分离出来。
这就好比在一个大仓库里，要精准地找到那个特定的小物件一样。
还有的时候，是通过人工合成的办法，如果知道这个基因的序列，就像照着菜谱做菜一样，按照序列把一个个核苷酸组合起来，这样就得到目的基因啦。
另外，还有一种办法是从基因文库里找，基因文库就像是一个超级大的基因超市，各种基因都在里面，在里面筛选出自己想要的目的基因。
二、基因表达载体的构建。
这个步骤就像是给基因盖房子。
首先得有个载体，常见的载体有质粒、噬菌体这些小家伙。
然后把目的基因放到这个载体里面去。
这里面还得加上一些其他的东西呢，像启动子，它就像是发动机，启动基因的表达；还有终止子，就像刹车，告诉基因什么时候停止表达。
标记基因也不能少，这就像是给这个基因组合体做个记号，方便之后看看哪些细胞是成功被转进去这个基因组合体的。
这个过程就像是精心布置一个小房间，每个东西都得放在合适的位置，这样才能让基因在这个“小房子”里舒服地工作。
三、将目的基因导入受体细胞。
这一步就像是把我们精心准备的东西送到目的地。
受体细胞有很多种选择，像大肠杆菌这种细菌就经常被用作受体细胞，因为它们很好养活，繁殖也快。
把构建好的基因表达载体送进受体细胞的方法也是五花八门的。
如果是细菌这样的细胞，有时候可以用氯化钙来处理，让细胞的细胞膜变得疏松，这样基因表达载体就更容易进去了。
还有像显微注射法，这就比较高端啦，用很细的针把基因直接注射到动物细胞里面去。
就像给细胞打针一样，是不是很有趣呢。
四、目的基因的检测与鉴定。
当把目的基因送到受体细胞里之后，就得看看这个基因是不是在里面好好工作啦。
检测的时候呢，先看看这个基因有没有成功进去受体细胞，可以用DNA分子杂交技术，就像是两个小拼图一样，如果能够拼在一起，就说明目的基因在里面啦。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
“汉水丑生 的生物 同行” 超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制 作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递 符合孟德尔遗传规律。 ②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡 那霉素敏感型的数量比为___3_:_1__。
4、目的基因的检测与鉴定
为什么非要有载体和目的基因一同进入受体细胞呢？
研究发现，单个基因或DNA片段导入另一生 物体的细胞后，往往会被细胞内的防御系统消 灭掉，这样就大大降低了目的基因的表达效率； 如果把目的基因包装一下，就很容易逃过受体 细胞的防御系统，免遭“灭顶之灾”。
基因工程：把一种生物的某种基因提取出来，加以 修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生 物的遗传性状。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素
外，还必须加入_卡__那__霉__素__。 （4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D
过程应该用 放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因作为
探针。
“汉水丑生 的生物 同行”
超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制
作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
课件为公益作品，版权所有，不得以 任何形式用于商业目的。2012年1月15 日，汉水丑生标记。
（２）进行过程②时，需用 胰蛋白 酶处理贴附在培养 皿壁上的细胞，以利于传代培养。
“汉水丑生的生物同行”超级群大型公 益活动：历年高考题PPT版制作。本
课件为公益作品，版权所有，不得以 任何形式用于商业目的。2012年1月15 日，汉水丑生标记。
四 目的基因的检测与表达产物的测定
基因工程的概念
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗 的说就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取 出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里， 定向的改造生物的遗传性状。
供体 细胞
目的 基因
受体 获得新 细胞 性状
基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将表达载体导入受体细胞
（1）A过程需要的酶有_限__制__性__内__切__酶__和__D_N_A_连__接__酶____。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的
两个条件是具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保。存
“汉水丑生 的生物 同行”
超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制
作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
若要在体外获得大量反转录产物，常采用 PCR 技术。 （5）基因工程中除质粒外， 噬菌体 和 动植物病毒等 也可 作为运载体。
（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用 未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是
未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱
（1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。 （2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上
两种生物的互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链。 即能够进行杂交。这种结合是特异的，即严格按照碱基互补 配对进行。因此，当用探针与转基因生物的目的基因杂交时， 如果出现杂交带（用特殊的显影装置能看到），则说明目的 基因已经插入受体细胞的染色体DNA中。
基因探针：
是一小段单链的DNA或RNA,带有放射性同位素标记， 并能与目的基因的一条链碱基互补配对
又如：有的基因工程产品需要与天然产品的功能 进行活性比较，以确定转基因产品的功能中否与天然 产品相同，甚至超过天然产品。
目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功
①检测转基因生物染色体的DNA上是否插 入了目的基因 ——DNA分子杂交
1.分子检测 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ——分子杂交
③检测目的基因是否翻译成蛋白质 ——抗原-抗体杂交
2.基因表达载体的组成
启动子 终止子
目的基因 标记基因
复制原点
基因工程的概念
把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放 到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的遗传性状。
供体 细胞
目的 基因 的获 得ຫໍສະໝຸດ 基因 表达 载体 的构 建
将目 的基 因导 入受 体细 胞
筛选 含有 目的 基因 的受 体细 胞
归纳: 基因工程的基本操作程序构建基因表达载体
目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点
3. 将目的基因导入受体细胞
农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法；显微注 射法；氯化钙法
4. 目的基因的检测与鉴定
检测：是否插入、转录、翻译、个体水平的检测
抗四环素的基因，构建成一个表达载体。 （3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有
四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大 肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如 果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已 进入其中。 （4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎 后从中提取β-珠蛋白。
“汉水丑生 的生物 同行” 超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制 作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
请据图回答： “汉水丑生的生物同行” 超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制 作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
2.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异 常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如 让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白， 想一想，应如何进行设计？
（2012福建）32．现代生物科技专题 肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引 发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细 胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技 术基本流程如图１。
“汉水丑生的生物同行”超级群大型公 益活动：历年高考题PPT版制作。本 课件为公益作品，版权所有，不得以 任何形式用于商业目的。2012年1月15 日，汉水丑生标记。
（１）进行过程①时，需用 限制性核酸内切酶（_或__限__制__）___ 酶切开载体以插入let-7基因_。载体应有RNA聚合酶识别和结合 的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 启动子 。
从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体（对抗进 行同位素标记）进行抗原——抗体杂交；如果出现杂 交带，表明目的基因已形成蛋白质产品。
2.形态检测:检测转基因生物是否表达出相应的性状 ——目标性状或标记基因的性状
如：一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后， 是否具有了抗虫或抗病特性，需要做抗虫或抗病的 接种实验，观察害虫的存活情况或植物的患病情况 以确定是否具有抗性及抗性的程度。
“汉水丑生 的生物 同行” 超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制 作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递 符合孟德尔遗传规律。 ①将转基因植株与___非__转__基__因__植__株_____杂交，其后代中 抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
（2012福建） 32．现代生物科技专题
肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发
肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验
表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如
图１。
“汉水丑生的生物同行”超级群大型公 益活动：历年高考题PPT版制作。本
（３）研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响
机理如图２。据图分析，可从细胞中提取 RNA 进行分子杂交，
以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可
能是由于细胞
RAS（蛋R白ASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起
的。
（4）反转录作用的模板是 mRNA（或RNA），产物是cDNA （。或 DNA）
的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗
虫棉的技术流程。
“汉水丑生 的生物 同行” 超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制 作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
“汉水丑生 的生物 同行” 超级群大 型公益 活动： 历年高考题PPT版制 作。本课件为公益作 品，版权所有，未经 允许不得擅自修改或 用于任何形式的商业 用途。2012年1月 15日， 汉水丑生标记。
体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了
目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必
须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过
程。
标记基因的作用在于便于检测目的基因的情况。 因为标记基因和目的基因同位于运载体上，要导入都 导入，要表达则都会表达。一般标记基因的DNA序列是 已知的，若选用抗氨苄青霉素基因，则可在目的基因 导入后用氨苄青霉素来处理受体细胞，若无异常，则 抗氨苄青霉素已合成，说明基因已得到表达。
前面三个步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够 摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。因此，必须通 过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检 测。
检测的方法有很多种，例如，大肠杆菌的某种质粒
具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一