结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义
结核病人血清TB-IgG水平检测与PPD阳性者分析
结核病人血清TB-IgG水平检测与PPD阳性者分析结核病，是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，全球范围内都存在着一定的感染率。
根据世界卫生组织的数据显示，每年有数百万人感染结核分枝杆菌，其中约有数十万人死亡。
结核病对人类健康和社会经济都造成了严重的影响，因此对结核病的早期诊断和有效管理具有重要意义。
在结核病的诊断中，血清TB-IgG水平检测是一种常用的方法之一。
血清TB-IgG表示结核分枝杆菌特异性抗体IgG，在结核病的过程中，人体免疫系统会产生这种特异性抗体。
通过检测血清中TB-IgG的水平可以辅助结核病的诊断和治疗。
另一种常用的检测方法是PPD皮试，即结核菌素皮内试验。
PPD阳性者表示对结核菌素具有过敏反应，也可提示存在结核病感染。
1. 结核病人血清TB-IgG水平检测血清TB-IgG水平检测是通过检测患者血清中的结核分枝杆菌特异性抗体IgG水平来判断是否感染结核分枝杆菌。
这种方法可以快速、准确地得出初步诊断，有助于及早采取治疗措施。
根据一些研究表明，血清TB-IgG水平检测在结核病的早期诊断和敏感性上有一定的优势，能够提供辅助诊断的信息。
也存在一些局限性，比如在结核病的活动性和非活动性阶段的判断上并不十分准确，也容易受到某些其他因素的干扰而产生假阳性或假阴性结果。
2. PPD阳性者分析PPD（结核菌素）皮试是一种通过皮下注射结核菌素来检测患者对结核菌素的过敏反应的方法。
如果在注射后48-72小时出现硬结和红斑，即为PPD阳性反应。
PPD阳性者表示对结核菌素具有过敏反应，这通常意味着存在结核病的感染或曾经接触过结核病菌。
PPD皮试是一种简单、快速且经济的检测方法，被广泛应用于结核病的筛查和早期诊断中。
3. 血清TB-IgG水平检测与PPD阳性者关系分析研究表明，结核病人血清TB-IgG水平检测与PPD阳性者之间存在一定的相关性。
在一些研究中发现，结核病人的血清TB-IgG水平与PPD皮试的结果呈正相关关系，即TB-IgG水平高的患者更容易出现PPD阳性反应。
结核感染T细胞检测T-SPOT简介与临床应用
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介与临床应用汇报人：XXX 单位：XXX结核病T-SPOT 临床应用A B C 目录A 结核病1结核-定义◆肺结核（pulmonary tuberculosis）是结核分枝杆菌复合群（mycobacterium tubercuolsis complex,简称结核分枝杆菌或结核菌）引起的慢性肺部感染性疾病，占各器官结核病总数的80%-90%，其中痰中排菌者称为传染性肺结核病。
1结核-流行病学◆结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，WHO已将其列为重点控制的传染病之一。
据WHO估计全球有1/3人口已感染了结核杆菌，每年约有800万感染者发展为活动性结核病。
◆中国是世界上22个结核病高疫情国家之一，患者总数仅低于印度而居世界第二位。
2000年全国第四次结核病流行病学抽样调查结果为：活动性肺结核患病率为367/10万，菌阳及涂阳肺结核患病率各为160/10万及122/10万。
◆结核病可侵及全身各器官，其中肺结核为最常见类型，约占85%，菌阳，尤其涂阳肺结核患者是主要传染源，是防治的主要对象。
在肺外结核病中，淋巴结结核、结核性胸膜炎、骨关节结核、泌尿生殖系结核病较多见，此外，还有结核性脑膜炎、结核性心包炎、肝、脾结核、脑结核等。
◆结核病常因各种不同的相关症状而首诊于综合医院临床各科，据统计，80%以上肺结核患者首诊于综合医院。
在内科日常诊疗工作中，无论是长期发热、慢性咳嗽、咳痰、咯血、胸腹腔、心包腔积液及肺部异常阴影等的病因学诊断，结核病是常需注意鉴別的重要病种之一。
2001年7月我国卫生部公布了新的【结核病分类】(WS196-2001)，将结核病分为：◆原发性肺结核；◆血行播散性肺结核；◆继发性肺结核；◆结核性胸膜炎；◆其他肺外结核。
◆原发性肺结核乃是指初次感染结核分枝杆菌而发病者，包括原发综合征及胸内淋巴结结核。
血行播散性肺结核乃是由于机体免疫功能低下，变态反应性增高，肺内原发灶、胸内淋巴结或其他脏器病变内的大量结核分枝杆菌于短期内进入血液循环而引起肺部乃至全身播散性结核病，共包括急性、亚急性及慢性血行播散性肺结核。
带你了解结核感染T细胞检测
带你了解结核感染T细胞检测
该检测通过检测受结核分枝杆菌抗原刺激而活化的效应T细胞来诊断结核感染。
该检测适用于所有具有结核潜伏感染风险或怀疑是结核病的人群，无论年龄、性别、种族、治疗还是免疫状况，其诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。
对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。
结果判定:
其中N为本底对照培养管(N)含量值，P为阳性对照培养管(P)含量值，T为测试培养管(T)含量值。
本实验通过测定N.T.P三种培养管培养后血量标本的吸光度并代入相关线性回归方程的出N.T.P的含量值。
如何来看实验结果？
1、患者要想确定自己有没有患有结核感染，要去医院检查身体的T-SPOT.TB的值，要知道结核感染不能只看T细胞来判定，患者也要全面检查，结果如果提示患者体内有结核菌感染，或者是T检查的斑点数高，那就代表患有结核病的几率很高了，当然也不排除只是结核菌潜伏感染的病症。
2、患者检查结果是阳性，要就是小心了，这代表着身体提示着，身体已经出现了结合杆菌感染了，所以才会出现这样的检查结果，不过这个只是检查结果并不全面，结果的准确性有限的。
3、患者医院如果是结核感染T细胞斑点试验，当这个结果呈现结果为阳性的，这就是提示患者可能已经感染了结核感染，但是也不排除肺外结核。
4、必要时患者要进行预防性治疗，也要结合临床症状和其它辅助检查来确定自己的病情，例如x光、结核菌素试验等检测。
发布于 2019-06-28。
TB-IGRA结核感染T细胞检测ppt课件
昆明三院
TB-IGRA 90.0% 90.7% 80.0%
QFT-GIT 86.8% 87.3% 80.0%
总标本数 342
322
20
老年医院
TB-IGRA 76.6% 76.5% 78.6%
QFT-GIT 67.3% 66.2% 85.7%
总标本数 248
234
14
厦门CDC
TB-IGRA 70.9% 70.6% 100.0%
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6
特异性T细胞体外释放酶联免疫法检 测
TB-IGRA
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7
TB-IGRA原理、方法
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8
特异性T细胞体外检测在发达国家已广泛应用
• IGRA技术目前已获得美国FDA批准，在欧洲获得了CE标志认证，在日 本已经被MHLW批准
• “特异性T细胞体外检测”方法在国际上被越来越多地应用于TB感染 的辅助诊断，已成为欧美国家结核常规检测方法之一。
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18
消化科/心内科/肾内科/骨科
肺外结核免疫学辅助诊断
40％的结核感染者存在肺外病灶，1/4的结核患者为肺 外结核。而对肺外结核取样难度大，用IGRA检测为阳性时，高 度怀疑结核。单肺外结核不具有传染性，可分布在综合医院的 呼吸科外的其他科室。
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19
儿科
可判断传染 可进行定性
优点 性高低
及半 定量分 析
分子诊断
核酸检测
特异性高， 涂阳标本检 出率高
检出率20-
30%，不能
区分非结核
缺点
分枝杆菌； 取样难
检出率59% ，耗时长（ 2-6周）；缺 陷的活菌无 法培养；肺 外结核病人 取样困难
结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义
88.6%(39/44)
国外mparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and TSPOT.TB in Children
Latent TB检出高
Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosis
临床应用案例
肺外结核辅助诊断：
➢某院感染科，女，75岁 ➢临床症状：发热数日，胸痛，干咳 ➢检测结果：X射线胸腔积液影像，积液涂片（-）、积液培养
（-）、TB-IGRA T-N 350pg/ml，积液单核细胞增多，血沉 快 ➢结果分析：对于肺外结核的诊断，涂片与培养的阳性率极低， TB-IGRA（+），结合其他非特异辅助指标可明确诊断肺外结 核。
A
25
NTM（非结核分枝杆菌）比例增高
2000 年全国流调分离的抗酸杆菌菌株中，NTM 菌株占11. 1% ， 其中90% 为非结核分枝杆菌肺病。
NTM 肺病的临床表现与结核病相似， 既可有全身中毒症状， 亦有局部损害表现。但症状和体征缺乏特异性，20%-50% 的病 人无明显症状，除非做菌型鉴定，凭临床表现难与肺结核病相 鉴别。
A
16
TB-IGRA 产品特性
➢高灵敏度，检出率85%以上
➢高特异性
RD1区编码的ESAT-6和CFP-10两个特异性抗原
该抗原具 有较强的Thl细胞免疫原性，且在所有制备卡介 苗的菌株及环 境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原，不受卡介苗和非分
支杆菌影响
IFNg
结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)简介与临床应用
结核菌的特性和临床检测的现状 又是如何？
1、结核病疫情严重
全球 • 20亿人口感染结核 • 现有活动性结核病患者2000万 • 新增活动性结核病人约900万/年 • 每年200-300万患者死亡
我国
结核病高负担国家之一，患者人数仅次于印 度，居全球第二位
• 约5.5亿人口感染过结核菌 • 现有活动性肺结核患者450万 • 新发患者145万/年 • 死亡人数13万/年
- 胸部的 X-光或 CT 扫 描显示异常
- 肺外结核难以诊断 (特别是儿童)
活动性结核
• 新发TB病例来自潜伏性结核感 染人群
• 潜伏性结核感染（latent TB Infection, LTBI）人群数量巨 大——“定时炸弹”
全面性
目前检测方法是否满足临床需求？
• 细菌学 • 免疫学
灵敏度 性能不稳定
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介 与临床应用
什么是结核病
• 结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染 病。结核菌能侵入全身各个器官，但80% 发生在肺部，常称肺结核。
• 结核病又称为“痨病”和“白色瘟疫”， 是一种古老的传染病。
• 人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要 方式。传染源是接触排菌的肺结核患者， 而肺外结核病则不具有传染性。
暴露程度不足，结核杆菌被机体免疫力清除
- 没有症状,结核杆菌仍旧 存在而不能被侦测
- X-光/ CT 扫描显示正常
- 没有抗体应答
- 诊断困难
- 传统的结核感染检测只有 TST（PPD）
机体被感染
受机体免疫力抑制 没有临床症状
终身处于感染状态
潜伏感染
5%
5%
再次激活
有临床症状 具有传染性
结核感染T细胞检测
结核感染T细胞检测(T-S P O T.T B) 一.临床意义：
结核病临床表现复杂多样，可累及全身各个系统，给临床诊断带来很大困难。
本项目检测通过将分离标本中的单个核细胞加入结核分枝杆菌特异性抗原A、B分别进行细胞培养后，分别检测分泌γ干扰素的特异性淋巴细胞的数量诊断结核感染。
本检测诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。
对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。
二.标本类型、采集及运送要求：
1.采集要求：标本采集后4小时内必须送到实验室，标本采集后如果超过4小时未送检将严重影响检测结果。
2.静脉血：肝素钠（绿头管）抗凝管采集静脉血4ml，立即颠倒数次，充分混匀，以免血液凝固。
采血后向试管中注入血液时请缓慢进行，避免用力过猛造成细胞破坏影响检测结果。
三．标本采集时间、结果发放时间及检测频率
1.标本采集时间：每周一上午12点之前采血；并于4小时之内送到临床微生物实验室。
（必要时可与临床微生物实验室联系）
2.结果发放时间：周二下午4点半检验报告发出。
3.检测频率：暂定每周检测一次。
结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义
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与免疫学指标关联
分析TB-IGRA检测与免疫学指标（如CD4+T细胞计数、干扰素-γ释放等）的关系，发现这些 指标在结核病患者中异常表达，且与TB-IGRA检测结果相互印证。
与临床表现及预后关联
探讨TB-IGRA检测结果与结核病患者临床表现及预后的关系，发现阳性结果与患者病情严 重程度、治疗反应及预后密切相关。
完善相关法规和政策支持
01
制定行业标准
建立TB-IGRA检测技术的行业标 准和质量管理体系，确保检测结 果的准确性和可靠性。
02
加强政策扶持
03
完善医保报销政策
政府应加大对TB-IGRA检测技术 的投入和支持力度，推动相关产 业的发展和创新。
将TB-IGRA检测技术纳入医保报 销范围，减轻患者的经济负担， 提高检测的可及性。
05
临床案例分析与解
读
不同类型结核病患者案例分析
活动性结核病案例
通过对比活动性结核病患者的TB-IGRA检测结果，发现其 阳性率较高，表明该检测对于活动性结核病的诊断具有较 高敏感性。
潜伏性结核病案例
分析潜伏性结核病患者的TB-IGRA检测结果，可见部分患 者呈现阳性反应，提示存在结核分枝杆菌感染，但无明显 临床症状。
加强国际间合作与交流
分享经验与技术
加强与其他国家和地区的交流与合作，分享TB-IGRA检测技术的研 发和应用经验，共同推动技术的进步和发展。
参与国际标准制定
积极参与国际标准的制定和修订工作，推动TB-IGRA检测技术的国 际化和标准化进程。
加强科研合作
鼓励科研机构和企业加强合作，共同开展TB-IGRA检测技术的基础 研究和应用研究，推动技术的不断创新和发展。
结核感染T细胞斑点试验
四．对小于4岁儿童，与结核菌素实验比较敏感性无优势，美国CDC更推荐结核菌素实
验。
T-SPOT-TB—应用
在结核性脑膜炎、结核性胸膜炎中的诊断意义
1.
敏感性优于ADA、TB-DNA，约在62-75%，特异性无统计学差异。
在结核病治疗中的评价意义
得（interferon gamma release assays）
IGRAs用于检测结核感染。IGRAs通过检
测代表结核分支杆菌的抗原刺激T淋巴细胞
反应后释放IFN-γ的量来判断是否存在结
核杆菌感染。
T-SPOT-TB—定义
以结核特异的混合抗原A和
混合抗原B（分别为ESAT6和CFP-10的部分多肽片
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汇报人姓名
1.
其数值高低与严重程度无关。
2.
效应T细胞随结核杆菌的清除而消失，其阴性及阳性结果可作为评估治疗效果的手段之一 。
T-SPOT-TB—应用
01
敏感性优于结核菌素试验，且不受卡介苗接种影响。
02
较少受到其他分支杆菌感染影响。
03
其阴性预测值高于阳性预测值，排除诊断意义更高。
在潜伏性结核杆菌 感 染者 的 筛选 中
染二科
核感染T细胞斑点试验
T-SPOT -TB）
击 / 此 / 处 / 添 / 加 / 副 / 标 / 题
演讲人姓名
由来----γ
干扰素释放
试验
（IGRAs）
在2001年前，美国仅批准结核菌素皮肤试
验（TST）用于结核分支杆菌的检测。在
结核感染T细胞斑点试验
T-SPOT-TB—应用
在活动性结核病中的诊断意义 1.敏感性86-94%，特异性89-99% 2.在肝移植术后、艾滋病、血液肿瘤等免疫抑制患
者中， T-SPOT-TB阳性率略低于免疫正常组，但仍具有 较高的敏感性，且优于结核菌素试验。
3.在肺外结核患者诊断中的，敏感性优于结核菌素 试验。
4.对小于4岁儿童，与结核菌素实验比较敏感性无优 势，美国CDC更推荐结核菌素实验。
结核感染T细胞斑点试验 （T-SPOT-IGRAs）
在2001年前，美国仅批准结核菌素 皮肤试验（TST）用于结核分支杆 菌的检测。在认识到IFN-γ在调节 对结核分支杆菌的细胞介导的免疫 反应中起重要作用，从而使得 （interferon gamma release assays） IGRAs用于检测结核感染。IGRAs通 过检测代表结核分支杆菌的抗原刺 激T淋巴细胞反应后释放IFN-γ的量 来判断是否存在结核杆菌感染。
T-SPOT-TB—示意
T-SPOT-TB—解释
非黄金标准 定性检测而不是定量检测 敏感性95.3%-98.8% 特异性94.1%-100% 萨斯分枝杆菌( My cobacter ium kans asii ) 、海
分枝杆菌(My cobacter ium mar inum ) 、斯氏分枝 杆菌( My cobacter ium sz ul gai ) 等少数分枝杆 菌中也存在完整RD1区，编码ESAT������ 6 和CFP������ 10, 可造成检测结果成假阳性。
T-SPOT-TB—应用
在结核性脑膜炎、结核性胸膜炎中的诊断意义 1.敏感性优于ADA、TB-DNA，约在62-75%，特异性无
统计学差异。 • 在结核病治疗中的评价意义
结核感染T细胞检测在结核病潜伏感染中临床应用
组别
结核潜伏感染情况 总例数 临床诊断结核 感染人数 感染率
结核感染情况 感染人数 感染率
监狱人员 214
6
130
60.75%
136 63.55%
医务人员 87
0
26
29.89%
26
29.89%
涂阳患者 26
26
其它肺病 9
0
总 数 336
32
0
0.00%
0
0.00%
156
46.73%
26 100.00%
酶联免疫吸附（TB-IGRA）
质量标准
每个样本均设有阳性及空白对照 每批检测用标准品制作标准曲线
结核感染T细胞检测
ELISPOT检测结核分枝杆菌感染
T-SPOT-TB在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值
组别
总例数
临床诊断结核
结核潜伏感染情况 感染人数 感染率
结核感染情况 感染人数 感染率
监狱人员 92
心包积液等）： 50ml离心管（无菌）加0.2ml肝素抗凝剂 与血标本同时送检。
结核感染T细胞检测
酶联免疫斑点试验（T-SPOT-TB）
血标本：
（ESA-6） （CFP-10）
结核感染T细胞检测
酶联免疫斑点试验（T-SPOT-TB）
阴性对照 A抗原
血液
B抗原
阳性对照
胸水
胸腔积液中IFN-γ水平显著高于外周血（＞4倍） 结核感染T细胞检测
0
0.00%
188 56.25%
结核感染T细胞检测
安全性与有效性
安全性：无风险，无并发症及不良反应。
有效性： 特异性好，不受卡介苗（BCG）接种影响； 灵敏度高，几乎不受个体免疫功能低下影响； 国内临床数据：灵敏度95.3%；特异性94.1%； 阳性预测值95.4%；阴性预测值93.9% 减少医疗纠纷。
T淋巴细胞斑点试验在结核病诊断中的临床意义
T淋巴细胞斑点试验在结核病诊断中的临床意义目的：评价结核酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）在快速诊断结核病的临床意义。
方法：对我院确诊或疑诊结核患者进行T-SPOT.TB 检测，检测其诊断结核病的灵敏度及特异度。
结果：在结核性疾病T-SPOT TB检测灵敏度为90%（72/80），特异度为91.2%（62/68）。
肺结核组T-SPOT.TB检测灵敏度为92.8 %（52/ 56），结核性胸膜炎组，检测灵敏度为83%（20/24）。
结论：T-SPOT.TB 试验在临床诊断结核中，快速且敏感，对结核性疾病诊断有重要价值。
标签：酶联免疫斑点试验；结核病；灵敏度；特异度结核病是危及人类健康的重大公共卫生问题之一，我国流行病学调查发现在我国每年因结核病导致的死亡人数达到13万人[1]，且有逐年上升的趋势。
传统的结核菌素皮试（TST）及结核菌素纯蛋白衍生物作为结核感染诊断技术，其敏感性及特异性较差，导致很多的结核病人漏诊和误诊，延误了治疗。
发展能用于诊断结核的快速敏感的实验室技术成为当前医学界迫切之需。
酶联免疫斑点（enzyme linked immunospot assay，EL ISPOT）技术是一种新型的免疫酶技术，从单细胞水平检测分泌抗体细胞或分泌细胞因子细胞。
由EL ISPOT发展而来的结核感染T细胞斑点试验技术（T-SPOT.TB），使用结核分枝杆菌特异性抗原刺激外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PB-MC），通过细胞因子γ干扰素（IFN- γ）的分泌检测抗原特异性T淋巴细胞的应答反应，从而判断结核感染状态，具有较高的敏感性和特异性[2]。
Kim等[3]随诊72例疑似肺外结核患者的前瞻性研究显示，对于活动性肺外结核，T-SPOT.TB和PPD的敏感性分别为94%和47%，本文就T-SPOT.TB检测对结核性疾病的诊断价值进行初步探讨，为结核病的早期诊断及疗效判断提供一种快捷、灵敏的方法。
结核感染T细胞TBIGRA检测及意义
80.3%（118/147)
γ-干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义
88.64%（39/45）
结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值
90.7%（243/268）
两种结核分枝杆菌相关γ-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究
90.9%（290/319）
体外释放酶联免疫法检测结核杆菌γ-干扰素的实验研究
•Tuberculosis结核TB •Interferon（干扰素） •Gamma（ γ） •Release（释放） •Assay（测定）
•原理: 感染者体内被结核菌（TB）抗原致敏的效应T细胞; 在体外受到相同抗原的刺激（在APC辅助下）后，会分泌大 量IFN γ细胞因子; 通过IFN- γ的检测，判断结核感染情况。
IGRAs
APC
IFNg release assay
细胞 因子
ELISA
细胞 因子
ELISPOT
活化/细 胞因子
流式细胞术
体外刺激： RD1抗原T cell
IFNg
TNFa
CK
活化标志物
细胞因子
两种TBIGRA比较
高孟秋,刘菲,纪滨英等 两种γ干扰素释放分析在结核病临床诊断中的比较研 究.中华结核和呼吸杂志;2012，3510：762-765
原因
• HIV 感染和艾滋病破坏了机体的免疫
系统;加剧了结核的发病，
1/3HIV
病人死于结核
• 多菌耐药的结核菌感染率增加
• 贫困 移民等
• 细菌学涂片率低，2/3TB病人菌阴性
结核发病机理
结核分枝杆菌MTB
活动性结核： 发病状态 潜伏性结核感染LTBI：是宿主感染结核杆菌后尚未
结核分枝杆菌相关γ-干扰素(TB-IGRA)监测推荐书
结核分枝杆菌γ -干扰素（TB-IGRA）检测[TB 检测发展趋势]据世界卫生组织( WHO)统计，我国是全球22个结核病高负担国家之一，在结核病防治工作还面临着诸多新的问题与挑战，近年来，我国每年报告肺结核发病人数约130 万，且患者人数逐年增加，始终位居全国甲乙类传染病的前列。
国家已出台相关文件要求加强结核病防治工作，要求及早发现、治疗疾病，遏制结核病流行态势的出现。
而这无疑对结核的诊治水平提出了更高的要求。
但迄今为止，临床上用于结核分枝杆菌感染的诊断方法仍存在许多不足。
首先，结核菌素皮肤试验( TST)作为一种较常用的方法，但其特异性不够好，不利于在中国这类将卡介苗(BCG)作为常规接种疫苗的国家推广，同时，TST 对潜伏性结核分枝杆菌感染的敏感性一般，对于免疫抑制者的检测结果亦难以确定；其次，细菌学诊断无论是涂片镜检还是细菌培养，其检出率都不超过50%，灵敏度十分有限；核酸诊断虽然灵敏度大幅提高，但该方法具有成本高、操作复杂、对实验条件及技术人员要求高、肺外结核病人取样困难等特点，因而很难得到大面积推广。
近年来，一类用于诊断结核分枝杆菌感染的新方法进入了人们的视线——干扰素释放试验(Interferon Gamma Release Assay，IGRA)。
这类试验采用Elisa／Elispot(酶联免疫吸附／酶联免疫斑点)方法，定量检测检测全血／外周血单核细胞在结核菌特异性抗原刺激下释放γ -干扰素的水平，用于诊断潜伏性结核分枝杆菌感染以及结核病。
目前这类试验中，有两种较为成熟的方法，即QuantiFERON—TBGOLD 试验(QFT-G)和T-SPOT TB 试验。
其对应的方法和试剂盒先后被美国FDA 批准应用于临床，美国CDC 为其制定了使用指南。
然而，进口试剂的高成本，使得这些方法难以在国内得到广泛应用，而传统方法又存在诸多不足，因此，国内各大医疗机构及患者对一种性能稳定、质量可靠的优秀国产试剂的需求呼之欲出。
(优质医学)结核感染T细胞检测及意义
抗结核治疗效果辅助评估
等利用对50例结核患者的治疗进行追踪检测：
• 治疗开始后，结核患者中的敏感性和反应强度均有明 显的下降趋势
的临床应用
综上，： 高特异性，高灵敏性，体外，全血，定量检
测 应用方向： 肺结核辅助诊断 肺外结核辅助诊断 结核感染排查 潜伏性感染监控，抗结核治疗追踪
•原理: 感染者体内被结核菌（）抗原致敏的效应T 细胞，在体外受到相同抗原的刺激（在辅助下） 后，会分泌大量 γ(细胞因子)。通过 γ的检测，判 断结核感染情况。
12
目录
contents
1. 结核病的诊断现状 2. 介绍 3. 的临床应用 4. 检测方法及结果解释
方法介绍
原理: 机体内被结核菌抗原致敏的效 应T细胞，在体外受到相同抗原的 刺激（在辅助下）后，会分泌大量 γ(细胞因子)。通过 γ的检测，判断 结核感染情况。
• 检出率高（活动 分子诊断
结核和潜伏结核） • 区分BCG、NTM • 检测肺外结核
• 特异性差 • 误诊肺炎、肺癌 • 肺外结核难
• 假阳/假阴多； • （涂阴4535%） • 建议禁用
• 操作复杂 • 技术要求高 • 涂阴检出低34% • 肺外结核难
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•（结核） •（干扰素） •（ γ） •（释放） •（测定）
在所有人群中可以完全代替试验（美国，日本厚生省）
接受抗治疗前必须用进行结核杆菌感染的筛查，筛查不再使用（瑞士卫 生署和肺科协会）
两个国际组织、也发布了应用指南。
万泰试剂是“中华人民共和国出入境检验检疫行业标准—结核分枝杆菌 γ-干扰素体外检测方法”中唯一提到的结核检测试剂。
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注：感染后发病与否和机体易感性有关！
复燃
暴露 感染
1% 9%
疾病进展
Latency 潜伏
活动性结核病
2-5% 5-10% HIV>10%
治愈
未根治
一直存在活菌
90%
LTBI 自愈
需预防性服药
细菌全部被清除
不发展为结核病
不需要预防性服药
结核病的免疫主要是细胞免疫
Dheda K, et al.The immunology of tuberculoisis:From bench to beside.Respirogy,2010,15:433-450
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1. 结核病的诊断现状
2. TB-IGRA介绍 3. TB-IGRA的临床应用
4. TB-IGRA检测方法及结果解释
临床应用案例
肺结核辅助诊断：
某院呼吸科病人，男 临床症状：发热1周，咳嗽 检测结果：TB-IgG(-)，TB-IGRA（+）T-N的值是21.5pg/ml 结果分析：TB-IgG灵敏度低，易漏检。 临床诊断：肺结核 备注：2011年，WHO建议不再使用结核抗体检测结核感染
•原理: 感染者体内被结核菌（TB）抗原致敏的效应T细胞，
在体外受到相同抗原的刺激（在APC辅助下）后，会分泌大 量IFN- γ(细胞因子)。通过IFN- γ的检测，判断结核感染情况。
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1. 结核病的诊断现状
2. TB-IGRA介绍 3. TB-IGRA的临床应用
4. TB-IGRA检测方法及结果解释
潜伏性感染监控
一起小规模结核暴发流行的调查与控制
某中学高三年级小规模结核爆发
疫情发展阶段
初始病例 第一批疫情 第二批疫情 结核病例及分布 1例（7班） 疫情时间 6月初 8-9月 9月 疫情初处理 自行住院 全年级师生胸透， 胸透阴影预防性 服药 全年级师生PPD试 验
PPD 试验：弱阳性多见，但不能鉴别MTB和NTM感染。 细菌学检查：常规痰涂片无法鉴别MTB和NTM。 培养特性：固体培养基上，NTM菌落常光滑，部分菌落有色素产
生，生长迅速，且在含PNB(对硝基苯甲酸)和含TCH (噻吩二羧
酸肼)选择性培养基上均可生长，而结核分枝杆菌只在TCH选择
性培养基上生长。
原 因
• HIV 感染和艾滋病破坏了机体的免疫 系统，加剧了结核的发病， 1/3HIV病人死于结核 • 多菌耐药的结核菌感染率增加 • 贫困、移民等 • 细菌学涂片率低，2/3TB病人菌阴性
结核发病机理
活动性结核： 发病状态 潜伏性结核感染（LTBI）：是宿主感染结核杆菌后
尚未发病的一种特殊状态
国内外相关研究
国内文章 结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用 TB-IGRA与TST检测菌培阳性肺结核患者比较 γ-干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义 结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值 两种结核分枝杆菌相关γ-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究 体外释放酶联免疫法检测结核杆菌γ-干扰素的实验研究 干扰素释放酶联免疫法（TB-IGRA）用于检测结核分枝杆菌的优越性 体外γ-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较 干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值 国外同类试剂 sensitivity 90.24%（74/82） 80.3%（118/147) 88.64%（39/45） 90.7%（243/268） 90.9%（290/319） 89.11%（90/101） 96.12%(99/103) 90.1%(308/342 88.6%(39/44) 优势
RD1区编码的ESAT-6和CFP-10两个特异性抗原
该抗原具 有较强的Thl细胞免疫原性，且在所有制备卡介 苗的菌株及环 境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原，不受卡介苗和非分支 杆菌影响
IFNg TNFa CK
国内外相关研究
TB-IGRA快速简便，是一种值得推广的检测方法：
张华，黄圣文，罗振元.结核分枝杆菌r-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用.中华医学院 感染学杂志 2009年第19卷第14期
电镜下的结核杆菌
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2010年新发880万例结核患者，59%在亚洲，26%在非洲
World Health Organization.Global tuberculosis control:epidemiology,strategy, financing:WHO report 2011(WHO/HTM/TB/2011.16).Geneva:WHO,2011
A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and TLatent TB检出高 SPOT.TB in Children Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Assay in Patients with Latent TB检出高 Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosis Estimating diagnostic accuracy of tests for latent tuberculosis infection 特异性93.6% without a gold standard among healthcare workers Clinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of Tuberculosis 灵敏度>90%,特异性>97%
发病人群前五位的国家
• India(2.0 million–2.5 million) (26%) • China (0.9 million–1.2 million) • South Africa (0.40 million–0.59 million) • Indonesia (0.37million–0.54 million) • Pakistan (0.33 million–0.48million).
IGRAs
APC
体外刺激： RD1抗原T cell
TNFa IFNg CK
活化标志物
细胞因子
两种TB-IGRA比较
高孟秋,刘菲,纪滨英等.两种γ-干扰素释放分析在结核病临床诊断中的比较研 究.中华结核和呼吸杂志，2012，35（10）：762-765
TB-IGRA 产品特性
高灵敏度，检出率85%以上 高特异性
Υ干扰素释放试验 （IGRAS）临床应用
南京医科大学第二附属医院 呼吸科 沈 红
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1. 结核病的诊断现状
2. TB-IGRA产品介绍 3. TB-IGRA的临床应用
4. TB-IGRA检测方法及结果解释
结核病现状
•结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(tubercle bacillus)引
TB-IGRA方法介绍
原理: 机体内被结核菌抗原致敏的效 应T细胞，在体外受到相同抗原的 刺激（在APC辅助下）后，会分泌 大量IFN- γ(细胞因子)。通过IFN- γ 的检测，判断结核感染情况。
IFN-g release assay
细胞 因子 ELISA 细胞 因子 ELISPOT 活化/细 胞因子 流式细胞术
临床诊断：结核性胸膜炎
临床应用案例
肺炎与肺结核的鉴别诊断：
某医院呼吸内科，男，59岁 临床症状：肺部有胸水，高烧发热，初步认定肺炎，抗生素治疗
1周不见效果，高度怀疑结核。
检测结果：痰涂片（-），结核抗体（-），TB-IGRA（-） 结果分析：传统结核检测检出率在20%-40%，灵敏度低。IGRA检
结核检测的方法比较
• • •
不能区分卡介 苗接种者 不能区分NTM 48-72小时复诊
接触史 临床症状 病原/病理
• • •
特异性差 误诊肺炎、肺癌 肺外结核难
TST（结核菌素皮试）
• •X射线•Fra bibliotek不能区分NTM 检出率低20% 肺外结核难
涂片 镜检
结核 诊断
抗体检测
假阳/假阴多； （涂阴45%/35%） • WHO建议禁用
•
• • •
耗时长4-8周 检出率低50% 涂阴检出低 22%-38%
IGRA方法
• •
•
肺外结核难
细菌培养
• •
取样操作简便 分子诊断 检出率高（活动 结核和潜伏结核） 区分BCG、NTM 检测肺外结核
• • •
操作复杂 技术要求高 涂阴检出低 34% 肺外结核难
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•
TB-IGRA
•Tuberculosis（结核TB） •Interferon（干扰素） •Gamma（ γ） •Release（释放） •Assay（测定）
38%
结核病现状及危害-传播范围广
逐年 增加
全球27个MDR-TB流行严重的国家之一，中国尤其严重
World Health Organization.Multidrug and extensively drug-resistant TB (M/XDR-TB): 2010 global report on surveillance and response. WHO/HTM/TB/2010.3.
临床应用案例
肺外结核辅助诊断：
某院感染科，女，75岁
临床症状：发热数日，胸痛，干咳
检测结果：X射线胸腔积液影像，积液涂片（-）、积液培养（-
）、TB-IGRA T-N 350pg/ml，积液单核细胞增多，血沉快