动物生理学实验指导(生院)

动物生理学实验指导

张素华编

动物科技学院生理实验室

第一部分实验总论

第一节绪论

一、实验目标与要求

通过实验使学生初步掌握生理学实验的一些基本操作技能，学会检查人体功能活动的一些测试方法，验证和巩固某些基本理论知识，培养认真、负责、严谨求实的态度和团结协作的良好作风，增强对事物进行观察、比较、分析和综合的能力。为此要求：

1.实验前应仔细阅读实验指导，了解本次实验的目标、原理、步骤等，并复习有关理论知识。

2.实验时要按照实验指导及教师的指示进行操作和观察，客观、及时地记录实验现象或结果，并联系讲授内容进行思考。

3.实验后须及时整理实验记录，分析实验结果，按照规定格式书写实验报告，按时交负责教师评阅。

二、实验报告书写要求

因实验内容不同，可以填表、叙述等形式写出报告。书写要整洁，文字应简练、通顺。首先注明班级、组别、姓名、实验日期，写出实验题目、实验目标等项目，然后着重书写实验结果以及分析和讨论。并要求：

1.实验结果必须凭自己观察，随时记录，如实填写。有曲线记录的，经必要注明后，剪贴在实验报告上。

2.分析和结论实验结果的分析，是根据学过的理论知识对结果进行解释。如果出现非预期的结果时，应分析其可能的原因。实验结论，是从实验结果中归纳出概括性的判断，即本次实验所验证的理论概要。

三、生理实验室规则

1.须携带实验指导、记录本等文具准时进实验室，并穿戴实验衣帽。

2.遵守学习纪律，保持实验室安静；严肃、认真、安全地进行实验，不做与本实验无关的事情。

3.实验室的一切物品，未经教师许可，不得擅自取用或带出。

4.各组应用的实验器材、物品，在使用前应查点清楚，不得随意与别组调换；如遇机件不灵或损坏时，应报告教师，以便及时修理或更换。

5.节约水电及一切消耗性物品，爱护仪器和用具。损坏物品应赔偿。

6.保持实验室整洁。公共器材和药品用毕后立即归还原处，动物尸体和废弃物应放到指定地点。

7.实验完毕，应将实验器材、用品和实验台收拾干净，查点清楚，放还原处。各小组轮流搞好实验室的清洁卫生，关好窗户、水电，经教师检查无误后，方可离开。

四、常用生理盐溶液的配制

1．常用生理盐溶液

生理学实验中常用的生理盐溶液有数种，其成分和用途各异，如下表所示。

配制生理盐溶液的方法，是先将各成份分别配成一定浓度的基础溶液(见下表)，然后按表所载份量混合之。

应当注意的是，氯化钙溶液须在其它基础溶液混合并加蒸馏水稀释之后，方可一面搅拌一面逐滴加入，否则将生成钙盐沉淀．葡萄糖应在临用时加入，加入葡萄糖的溶液不能久置。

2．氨基甲酸乙酯常用于兔、猫、狗、蛙的全身麻醉药，使用方便，一次给药可维持4-5小时。剂量为1克／公斤体重．即20％的溶液5ml。

第二节动物生理学常用动物及基本操作技术一．实验动物

生理学实验主要以活的动物为对象，如鱼、蛙、家兔、小白鼠、大白鼠、羊、鸡等。实验动物的选择必须根据不同的实验目的。如心脏生理实验要求心脏标本存活期长，所需条件简单——可以选蛙类等。接近保定动物必须遵守操作规程，密切注意动物反应。保证人和动物的安全。

1.两栖类生物医学中常用蟾蜍和青蛙，分别属于两栖纲无尾目的蟾蜍科和蛙科。它们皮肤光滑、湿润、有腺体无鳞片。蛙类的心脏在离体情况下仍有节奏地搏动很久，常用来研究心脏的生理、药物对心脏的作用。腓肠肌和坐骨神经可用来观察外周神经的生理功能和骨骼肌的收缩。蛙的制动一般采用损毁脑及脊髓的办法。左手握蛙，用食指将蛙头下压成直角，右手指可触摸到柔软凹陷的枕骨大孔，用蛙针刺入向前搅动捣毁脑。

2.家兔属哺乳动物兔型目。解剖学上，家兔颈部有降压神经独立分支，属于传入性神经，适合做急性心血管实验。

家兔较驯服，一般不会咬人。但有的品种（如长毛兔）或在哺乳、刚产仔和有咬癖时也会咬人，所以必须防备。家兔的脚爪锐利，若不小心或方法不当易被其抓伤，或造成兔子的创伤甚至导致流产等。正确的捉兔方法是，一只手在兔子头前挡住，当它匍匐在地时，顺势大把抓住双耳及颈部皮毛，承重在颈部皮毛上，迅速提起，另一只手托住臀部和下腹，抱在胸前。

二．常用麻醉剂

临床手术以及术前捕捉制动等，都会引起动物的疼痛、不适、恐惧等对身心的恶性刺激，还会在动物体内引起实质性的变化，从而影响实验结果的质量。因此实验常在手术前对动物进行毁脑或麻醉。麻醉措施也会在动物体内造成变化，但这些变化是能够预见和可以控制的，并且任何一项手术都能引起比麻醉时更大的不适。

鼠等效果也好。由于戊巴比妥钠对心肌、血管平滑肌和呼吸中枢有抑制作用，一般不用于心.血管和呼吸机能方面的研究。麻醉时需有尼克刹米备用。

乌拉坦(氨基甲酸乙酯) 可导致较持久的浅麻醉，对呼吸无明显影响，安全系数大。兔对其较敏感，狗、猫、鸟类（1.25g/kg）、蛙类（2g/kg）等均可用。兔狗猫用量每公斤体量0.75～1g，配成20%或25%溶液耳缘静脉注射。

三．手术器械与使用

手术器械是施行手术的必需工具，虽然手术器械的种类、样式很多，但其中有一些是各类手术所必须使用的基本器械，正确和熟练地掌握这些器械的使用方法，对于保证手术操作的顺利进行关系很大。

1.蛙类解剖器材

（1）剪刀：粗剪刀用于剪骨骼和皮肤等粗硬组织；手术剪用于剪肌肉、腱膜等一般软组织；眼科剪刀用于剪神经、血管、心包膜等细软组织。

（2）镊子：手术镊用于牵提皮肤夹捏肌肉等组织；眼科镊用于夹捏细软组织。

（3）探针：用于破坏脑和脊髓。

（4）玻钩：用于分离神经、血管。

（5）锌铜弓：用于对神经肌肉标本施加刺激，以检查其兴奋性。

（6）蛙心夹：用于夹住心尖，另一端借缚线连于杠杆，以描记心脏舒缩。

（7）蛙板和蛙钉：用蛙钉将蛙腿固定于一约20cm×15cm的木板上。制备神经肌肉标本，应在清洁的玻璃板上操作，为此可在板中央嵌一玻璃板。

2.哺乳类动物手术器材

（1）手术刀：用于切开皮肤和器官。

（2）剪刀：剪毛用粗剪刀；剪线及一般软组织用手术剪刀；剪破血管、输尿管以便插管时使用眼科剪刀。

（3）镊子：圆头镊子用于夹捏组织和牵提切口处的皮肤；眼科镊子用于夹捏细软组织。

（4）止血钳：用于提起皮肤切口、分离皮下组织和夹钳血管止血。蚊式止血钳适用于分离小血管及神经周围的结缔组织。

（5）动脉夹：用于阻断动脉血流。

（6）气管插管：急性动物实验时插入气管，以保证呼吸道通畅。

（7）动脉插管：急性动物实验时插入动脉，另一端接水银检压计或血压换能器。

（8）解剖台：固定动物，以便实验操作。有兔解剖台、狗解剖台。

（9）注射器：用于注射各种药物和溶液。

（10）搪瓷盆、杯等：用于放置手术器械、溶液、兔毛等。

四．生理手术的组织与实施

生理手术由密切相关的术前准备、手术实施和术后工作等三部分组成。

1.术前准备包括人员、器具和实验动物准备三个方面。

术者：是手术的执行者。应全面负责术前诊断，拟定手术计划和总结工作。

手术助手：是协助术者完成手术工作，所以应当了解手术进程及术中术者的意图，从扩创固定、