内分泌常用实验

GnRH/TRH/CRH/GHRH联合兴奋试验原理：1、腺垂体激素接受下丘脑和靶激素的双重调节；2、外源性下丘脑促垂体激素兴奋腺垂体靶细胞，根据其反应程度判断腺垂体的储备功能；3、鉴别下丘脑-垂体病变引起的内分泌腺功能减退症；4、鉴别内分泌腺功能亢进的病因或判断其对药物的反应性；5、评估手术或放疗后的下丘脑-腺垂体功能。

方法：1、试验前抽血测定靶腺激素基础值；2、早上7-8时进行试验，相继静注GnRH 100ug、TRH 200ug、CRH 1.0ug/Kg、GHRH 1.0ug/Kg（均溶于5.0ml生理盐水），30秒内注射完；3、分别在-30、0、15、30、60、90和120min抽血测ACTH、皮质醇、TSH、LH、FSH及GH，必要时加测睾酮、T3、T4和IGF-1等。

临床意义：1、TRH兴奋试验：①正常人与30min出现峰值（10-30mu/L）；②Graves病、垂体性加减，TSH无明显升高或无反应；③下丘脑性甲减TSH峰值出现在60min后。

2、GnRH兴奋试验：①青春期前LH细胞的兴奋程度低，FSH增加0.5-2.0倍；②正常成人男性LH增加4.0-10.0倍，FSH增加0.5-2.0倍；③正常成年女性卵泡期LH增加3.0-4.0倍，排卵前期增加3.0-5.0倍，黄体期增加8.0-10.0倍，④正常成年女性FSH增加0.5-2.0倍；与月经周期无关；⑤兴奋反应大程度达不到以上倍数可诊断为垂体LH/FSH储备功能减退。

3、GnRH静滴兴奋试验：①GnRH250μg静滴8h; ②正常人滴注后30-45minLH上升（第一次上升反应），60-90min下降，2-4h内再次上升（第二次上升反应），维持约4h; ③垂体疾病引起的LH/FSH缺乏症无反应，LH/FSH部分缺陷症存在第一次上升反应，但第二次上升反应消失；④下丘脑病变无第一次上升反应，但第二次有反应（延迟反应）；⑤垂体惰性者必须进行GnRH延长兴奋试验。

4、GnRH延长兴奋试验：①每日肌注GnRH 100μg（共5天），或每天静滴GnRH 250μg（8h滴完，连续3-5天）；②出现LH分泌反应提示下丘脑病变；③单独进行垂体LH/FSH储备功能检查时以GnRH延长兴奋试验较可靠。

5、GnRH激动剂刺激试验：①隔夜空腹，次日8时皮下注射曲普瑞林（GnRH激动剂）0.1mg/㎡；②注射前和注射后4h分别测LH和FSH; ③体质性青春期延迟者刺激后4h的LH﹥8.0mU/ml,FSH显著升高；④低促性腺激素性性腺功能减退症刺激后4h的LH﹤8.0mU/ml.6、CRH兴奋试验：①静注CRH 1.0ug/Kg，正常人ACTH峰值（4.4-22pmol/L，20-100pg/ml）增加2.0-4.0倍；②ACTH峰值出现于静注CRH后的30min左右，皮质醇峰值发生于60min，可达550-690nmol/L（20-25ug/dl）或较基础值增加10ug/dl；③无ACTH和皮质醇兴奋反应或反应微弱，提示垂体ACTH储备功能不足（腺垂体功能减退症、大部分异位ACTH综合征、肾上腺肿瘤所致的Cushing 综合征）；④ACTH持续升高伴峰值消失提示下丘脑性腺垂体减退症；⑤Nelson 综合征对CRH刺激有增强的ACTH分泌反应；⑥垂体ACTH瘤出现过度反应或正常反应；⑦单独CRH兴奋试验的诊断价值有限，一般需结合垂体和肾上腺影像学检查。

7、GHRH延长兴奋试验：①每晚7-8时皮下注射GHRH 1.0ug/Kg，连续7天，于第8天晚深睡时抽血测GH；②正常人GH峰值＞7.0ug/L；③峰值＜5.0ug/L者在排除垂体惰性后可诊断为垂体GH缺乏症；④＞7.0ug/L为延迟反应（下丘脑病变）。

注意事项：1、单一兴奋试验①用于确定单一靶腺功能减退的病变部位；②单一CRH兴奋试验应在下午4时后进行，试验前至少禁食4h；③分析结果应结合临床资料和影像学检查结果。

2、不良反应：面部发红，肠鸣音亢进，血压下降。

胰岛素低血糖试验原理：低血糖对下丘脑-垂体是一种非常强的应激因素。

正常人当血糖降至2.2mmol/L以下时，即显著兴奋GH、ACTH-皮质醇、TSH和儿茶酚胺的分泌。

本试验是利用一种标准量的胰岛素引起低血糖，以检测GH的储备功能，亦同时测定垂体-肾上腺轴、垂体-甲状腺轴的功能。

方法：1、空腹（隔夜禁食，不禁水），静脉注射普通胰岛素（0.1-0.15u/Kg）前30、0分钟，及注射后15、30、45、60、90、120分钟采血，查GH、血糖；2、45分钟之前，如血糖≤2.2mmol/L，或＜基础值的50%为诱发低血糖成功，继续试验；如血糖未达标，追加胰岛素，从新计时；3、有明显的低血糖应立即静脉注射50%葡萄糖20~40ml或口服葡萄糖水，取血仍可继续进行，不需中断实验；4、多数低血糖出现在30分钟左右，试验期间应密切观察病人的血压、脉搏和神志变化。

参考值：正常人GH峰值可＞10ug/ml；血浆皮质醇水平＞580noml/L；ACTH达峰值（134pg/ml±12 pg/ml）；临床意义：任何一次血GH≥10ug/ml，即可除外生长激素缺乏症，5ug/ml<GH<10ug/ml，生长激素贮备减低，GH<5ug/ml为生长激素缺乏；注意事项：缺血性心脏病、严重高血压、癫痫病、精神异常、垂体及肾上腺功能不全者禁止本试验。

左旋多巴兴奋试验原理：左旋多巴是多巴胺的前体物质，在体内转化为多巴胺或正肾上腺素，兴奋下丘脑-垂体，刺激生长激素释放激素的释放。

方法：1、清晨空腹口服左旋多巴0.5g（成人），儿童10mg/Kg体重（体重15Kg口服0.125g，15-30Kg口服0.25g，大于30Kg口服0.5g）；2.于服药前30min、0min及服药后30min、60min及120min各取血3ml测血GH。

参考值：儿童血清GH峰值一般＞7ug/L。

临床意义：3-7ug/L提示垂体GH储备功能不足，小于3ug/L垂体GH缺乏。

注意事项：多数患者服左旋多巴后有恶心、呕吐、头晕、口干、全身发软等反应，一般不严重，半小时后能自行消失。

重者呕吐出药物后，需重复试验。

葡萄糖抑制GH试验：原理：下丘脑GH神经元上有调节GH分泌的糖受体，葡萄糖负荷后，通过下丘脑糖受体抑制GHRH的分泌或兴奋生长抑素的分泌，使垂体GH的分泌减少。

GH瘤细胞分泌功能具有自主性，GH不受急性高血糖状态的抑制。

方法：1、空腹（试验前天晚餐后禁食，不禁水）；2、口服75克无水葡萄糖【1】或100克葡萄糖【2】。

2、分别于0、30、60、120和180分钟采血测定血糖和GH。

参考值：正常人，75克无水葡萄糖＜3 ug / L【1】；100克糖负荷后GH＜5ug / L 【2】；临床意义：多数GH瘤患者不受抑制，偶轻度受抑制，但仍大于基础值的50%，或GH反而升高。

禁水加压试验：原理：当长时间的禁饮后（一般6-16时不等），血浆渗透压上升，刺激神垂体分泌ADH。

补充外源性ADH后，根据尿量减少和尿渗透压上升程度，评估肾脏对ADH反应性。

方法：1、试轻症者于试验前当晚开始禁水，重症者于试验当日8时开始禁水；2、禁水前测量体重、血压、脉率、尿比重、尿渗透压及血浆渗透压；2、2小时排尿1次，分别上述指标（血浆渗透压除外）；4、排尿较多，体重下降3%-5%，或血压明显下降，或连续测两次尿比重相同，或连续2次尿渗透压差<30mOsm/L后，提示内源性AVP达峰，再抽取一次血浆渗透压；5、即刻皮下注射垂体后叶素5u，试验再继续2h，每小时收集尿液1次，分别测尿量、尿比重及尿渗透压。

临床意义：正常人禁水后，尿量明显减少，尿比重超过1.020，尿渗透压超过800mOsm/L，体重、血压、脉率不出现明显变化；注射加压素后尿渗透压一般不升高少数人升高但＜5%。

尿崩症患者，禁水后，反应迟钝，尿量无明显减少，尿比重、尿渗透压不升高，体重下降＞3%，严重者出现血压明显下降；注射加压素后，尿量明显减少，尿比重、尿渗透压明显升高。

根据比病情轻重可分为部分性尿崩症和完全性尿崩症，部分性尿崩患者，血浆渗透压最高值＜300mOsm/L，禁水后尿渗透压可超过血浆渗透压，注射加压素后尿渗透压可继续上升（9%-50%）。

完全性尿崩血浆渗透压＞300mOsm/L，尿渗透压＜血浆渗透压，注射加压素后1小时尿渗透压＞50%。

精神性多饮、多尿者与正常相似。

肾性尿崩症，在禁水后尿液不能浓缩，注射加压素后无反应。

注意事项：1、试验过程中应密切观察病人的精神状态、血压和体重，以免过度脱水发生危险，尤其在儿童，禁水3-5h内体重下降>3-5%时应终止试验。

2、垂体后叶素有一定的副作用，冠心病、高血压等老年病人应慎用或垂体后叶素酌情减量。

附注：1、在部分性尿崩症患者中，有部分人可显示一种特殊的现象，即尿渗透压水平呈现明显波动现象，禁饮后，尿渗透压逐步上升，甚至可超过血浆渗透压，而在继续禁水过程中，尿渗透压反而逐步降低，下降到血浆渗透压以下，而在注射加压素后，明显上升，有报道可上升超过50%。

这种现象说明患者ADH储备能力有限。

在开始禁饮的刺激下，还能释放一些ADH，但在继续禁饮时，分泌ADH 的能力即耗竭，由部分尿崩症转为完全性尿崩症。

2、精神性多饮患者由于长期多饮、多尿，肾脏对ADH的敏感性下降，禁水后尿渗透压不能升至正常，此时需结合临床做出判断，或嘱患者适量限水2-4周后重复此试验。

地塞米松抑制试验：原理：在正常情况下，垂体分泌ACTH受血液循环中皮质醇水平的调节。

地塞米松对垂体ACTH分泌抑制作用很强，而本身剂量很小，对血、尿皮质醇测定干扰小，观察血和尿皮质醇以及血浆ACTH的变化，可以反映垂体分泌ACTH的功能以及肾上腺皮质功能是否依赖于ACTH。

即可将Cushing病和Cushing综合征区别开来。

方法：1、第1日留24h尿测尿游离皮质醇（UFC），并于8：00采血测血浆ACTH和血浆皮质醇作为对照。

2、午夜1mg（或 2mg）法：第2日23：00-24：00口服地塞米松1mg（或 2mg）。

第3日8：00采血测定ACTH和皮质醇。

3、经典小剂量法：第2日开始口服地塞米松0.5mg，q6h，连服2日或0.75mg，q8h，连服2日。

第3日再次留24h尿测UFC，第4日8：00采血测小剂量地塞米松抑制后血浆ACTH和血清皮质醇。

4、经典大剂量法：第4日开始口服地塞米松2mg，q6h，连服2天。

第5日再次留24h尿，测UFC，第6日8：00采血测大剂量地塞米松抑制后血浆ACTH和血清皮质醇。

正常值和临床意义：1、午夜1mg（或 2mg）法：①正常人在服药后ACTH和皮质醇下降大于50%以上；②被抑制的血皮质醇降至140nmol/L以下，可排除Cushing,综合征；③上午8时血皮质醇＞275nmol/L，Cushing综合征诊断可成立，但需进一步明确病因；④血清皮质醇在140-275nmol/L时，应做标准的小剂量地塞米松抑制试验；⑤假阳性，在应用苯妥英钠、卡马西平诱导肝脏酶活性，加快DMX清除而导致假阳性结果；口服避孕药，雌激素可增加循环皮质醇蛋白结合浓度，易出现假阳性。