定量项目分析性能验证
最新定量项目的性能验证.
（R＝检测值的均值/预期值）
临床可报告范围
可接受标准
以80％≤R≤120％为可接受限 ➢ R＜80％或者R＞120％时，按厂商推荐的次高的稀释
倍数进行稀释，以80％≤R≤120％为可接受限，依次 类推。 结果计算 ➢ CRR上限值 ＝最大稀释倍数×对应标本的AMR上限 浓度 ➢ CRR的下限值 ＝AMR的下限值
定量项目的性能验证.
定量项目性能验证指标有哪些
正确度 精密度 线性范围（可报告范围） 参考范围 抗干扰 分析灵敏度/检测限
ISO15189的相关要求
CNAS-CL38 《在临床化学检验领域的应用说明 》 ➢ 5.3.7设备故障修复后，如果设备故障影响了分析性能，应对相关检测给予
验证；程序中试剂、设备等更换都需要性能验证 ➢ 5.5.2 检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可
取样测定所得结果之间的接近程度。 ➢ 准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 ➢ 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指
对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。 ➢ 生物参考区间：参考值分布的95%区间
正确度验证
➢ 有证参考物质（CRM) ➢ 卫生部临检中心正确度验证计划（人源样本用
可溯源参考方法测定的结果去验证常规方法结 果，其偏倚是否允许） ➢ 参考实验室、参考方法比对
正确度
常用能力验证或比对：
➢ 参加能力验证/室间质评 ➢ 与使用相同检测方法已获认可实验室比对
临床检验定量项目性能规范
临床检验定量项目性能规范引言临床检验是指通过对生物样本的分析和检测，以获得有关患者病情或健康状况的诊断、预后及治疗指导信息的过程。
其中，定量项目是临床检验中常见的一种类型，通过测定样本中特定化学指标的数量，可以提供更精确的数据，用于帮助医生准确判断患者的健康状况。
本文档旨在规范临床检验定量项目的性能要求，以确保检验结果的准确性和可靠性。
项目要求精度精度是指测定结果与真实值之间的接近程度。
对于临床检验定量项目而言，精度至关重要，因为不准确的测试结果可能导致错误的诊断和治疗决策。
因此，精度应在一定范围内控制，以确保测试结果的准确性。
精度的评估可以通过以下方式进行：1.检测外部质控样品：定期使用由国家或区域质控中心提供的外部质控样品进行测试，并将结果与预设的参考值进行比对。
2.内部质控样品测试：在每个工作日开始时和结束时，使用内部质控样品进行测试，并记录测试结果。
通过监测内部质控样品的稳定性和一致性，评估仪器的精度。
线性范围线性范围是指仪器在一定浓度范围内能够线性测定样本浓度的能力。
对于临床检验定量项目来说，线性范围的确定对于测试结果的准确性和可靠性至关重要。
线性范围的评估可以通过以下方式进行：1.制备一系列具有不同浓度的标准品，涵盖定量项目的测量范围。
2.使用标准品进行一系列测量，记录测试结果和标准品的浓度。
3.构建标准曲线，通过回归分析确定仪器在不同浓度下的响应值和浓度值之间的线性关系。
4.根据标准曲线的斜率和相关系数确定仪器的线性范围。
精密度精密度是指重复测定同一样本多次所得到结果的接近程度。
精密度评估用于评估检验项目的可重复性和稳定性。
精密度的评估可以通过以下方式进行：1.选择一组稳定且具有代表性的样本，并重复测定多次。
2.计算测定结果的方差、标准差和变异系数，并评估其是否在可接受的范围内。
3.使用统计方法（例如方差分析）评估不同操作员、不同仪器和不同时间的测定结果之间的差异程度。
检出限和测定限检出限是指仪器能够可靠地检测到的最低浓度或数量的样本。
定量检验分析性能验证
如何实施性能验证？
准备工作 范围、材料、方案：应确定定量检测 的项目；所需的仪器、配套试剂、校 准品、质控品等材料；制定完整的性 能验证方案（尤其是各项性能参数的 判断标准的制定及其依据）。
how
试验要求：
仪器应进行校准或保养；要尽可能在 相同条件下进行各项试验；所有试验 均需在室内质控结果在控的情况下方 可进行。
测量重复性（批内精密度）
试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作 为允许总误差（TEa），批内精密度 <1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。 注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能 接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提 供的标本浓度
检验程序的性能特征宜包括：测量正 确度、测量准确度、测量精密度(含测 量重复性和测量中间精密度)、测量不 确定度、分析特异性（含干扰物）、 分析灵敏度、检出限和定量限、测量 区间、诊断特异性和诊断灵敏度
为什么要做性能验证？
性能验证是为了确保实验室开展的检 验项目，所应用的检测系统的分析性 能或检验项目的方法学(检验程序)能够 满足检测及临床要求，从而保证患者 标本检测结果准确可靠。
when 能对结果产生较大的影响时，可选择
其所开展的部分检验项目进行分析性 能验证。
初次验证后，对精密度、正确度及可 报告范围等性能参数至少每12个月进 行一次评估，可通过评估如CV、均值 等室内质控数据的变化趋势（批间精 密度）、室间质评项目的结果的可接 受性（正确度）、临床医护人员对结
when 果的反馈（可报告范围）、小样本的
实验室内精密度：
同一实验室内，使用同样的设备，由不同操 作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被 称为总精密度（不包括大的设备维护、仪器 校准和更换试剂批号）
定量检验的分析性能验证
• 实验室内精密度：
• 同一实验室内，使用同样的设备，由不同操作者在不同时间 内获得的精密度，以前曾被称为总精密度（不包括大的设备 维护、仪器校准和更换试剂批号）
• 文件依据 • CLSI （原NCCLS）颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的精密
what
如何实施性能验证？
• 准备工作 • 范围、材料、方案：应确定定量检测的项目；所需的仪器、
配套试剂、校准品、质控品等材料；制定完整的性能验证方 案（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据）。
how
• 试验要求： • 仪器应进行校准或保养；要尽可能在相同条件下进行各项试
验；所有试验均需在室内质控结果在控的情况下方可进行。
定量检验的分析性能验证
浙江省立同德医院 王伟
引言
• 依据卫生部《医疗机构临床实验室管理办法》第三十条款 • CNAS-CL02：2008《医学实验室质量和能力认可准则》
（IOS15189:2007）第5.5条款 • 实验室应对方法学进行评价，以检查其分析性能和对预期用
途的适用性。
• CNAS-CL02：《医学实验室质量和能力认可准则》 （IOS15189:2012,IDT）第5.5条款
精密度试验
• 在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼此相 符合的程度
• 包括： 重复性(repeatability) 中间精密度(intermediateprecision) 重现性(reproducibility) 实验室内精密度（within-labprecision)
• 中间精密度:
• 检验程序的性能特征宜包括：测量正确度、测量准确度、测 量精密度(含测量重复性和测量中间精密度)、测量不确定度、 分析特异性（含干扰物）、分析灵敏度、检出限和定量限、 测量区间、诊断特异性和诊断灵敏度
定量项目分析性能验证PPT课件
数据处理
• 数据有效性判断 随机误差、操作失误、标本问题等等； 产生的有问题数据若参与计算，会使结果判读有较大偏差； 根据统计学方法找出离群值，剔除； 剔除离群值后应找出问题原因并改正，缺少的标本数应补全。
• 数据计算 借助Excel工具，行标和EP文件中都给了完整的数据统计表格形式。
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结果判读——精密度
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验证实验
• 校准：按照日常操作校准频率进行校准 or 每个检测批次进行校准 • 质控：闭环质控，每日实验样本检测前做室内质控，实验样本检测
结束后也应做室内质控。当日质控需均在控当日实验数据才有效。 • 样本检测：尽可能接近日常样本检测。
《标准操作流程— 检测系统定量实验分析性能评价/验证》
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抽样误差——确认限
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结果判读——精密度
• 确认限的计算 需要消除由于抽样误差等造成的统计学差异
1. 自由度v的计算以及假拒绝率α的选择
自由度是有关样本数的数据；假拒绝率选择后得到的为（1-α/1）区间 ，α一般取5,得到的即为95%置信区间。
2. C值的确定
由确定的自由度v和α查表得到。
3. 确认限计算
准备工作
以TSH做精密度实验为例做样本准备： 1. 说明书中声明，TSH的检测范围为0.005-100.0 uIU/mL，TSH的参考范围
为0.27-4.2 uIU/mL，2008年中国甲状腺疾病诊疗指南-甲状腺功能亢进症 诊疗指南中提出甲亢患者TSH一般小于1.0 uIU/mL。故，应挑选1.0 uIU/mL，以及接近参考范围上限4.2 uIU/mL的两水平标本。 2.普通干燥管收集，2-8℃可保存7天；-20℃可保存1个月，不可反复冻融。 3. 一次检测标本用量为50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多 预留一些，则每天至少需要300uL样本，总共需1.5mL。因标本量小，且装在 同一子弹头及日立杯中，在操作过程中应避免不必要的蒸发。（此处计算的是 最少用量，如果标本有富余应多分装一些子弹头）
定量检验的分析性能验证解读
定量检验的分析性能验证解读定量检验是一种用于评估分析方法性能的常见方法。
它可以通过比较分析结果与已知参考值或者其他分析方法的结果来评估分析方法的准确性、精确性、灵敏度和特异性等性能指标。
该方法可应用于各种领域，如医学诊断、环境监测和药物研究等。
在进行定量检验之前，首先要确定所需评估的指标。
常见的指标包括准确性、精确性、线性度、回归分析、检出限、可测限、准确度和灵敏度等。
准确性是指分析结果与真实值之间的关系，可以通过比较结果与标准物质的浓度来评估。
精确性是指同一样本的多次分析结果之间的一致性，可以通过重复分析多个样本来进行评估。
线性度是指分析方法在一定浓度范围内是否具有良好的线性关系。
回归分析可以用来评估分析结果与已知浓度之间的关系。
检出限是指分析方法能够检测到的最低浓度。
可测限是指分析方法能够可靠测定的最低浓度。
准确度是指分析结果与真实值之间的偏差，可以通过比较结果与已知浓度的平均偏差来评估。
灵敏度是指分析方法对样品中低浓度物质的检测能力。
在进行定量检验时，首先要选择合适的参考标准或者与之比较的分析方法。
参考标准可以是已知浓度的标准物质，也可以是其他公认准确、精确的分析方法。
然后，使用待测试的分析方法来分析一组样本，并将结果与参考标准或者其他分析方法的结果进行比较。
根据比较结果，可以评估分析方法的性能，并判断其是否符合要求。
在解读定量检验的结果时，需要综合考虑各种指标的评估结果。
如果分析结果与参考标准或者其他分析方法的结果非常接近，那么可以认为该分析方法具有较高的精确性和准确性。
如果分析结果在一定浓度范围内具有良好的线性关系，且与已知浓度之间有较高的相关性，那么可以认为该分析方法具有较好的线性度和回归分析能力。
如果分析方法能够可靠地检测到低浓度的物质，并具有较高的灵敏度，那么可以认为该分析方法具有较好的检出限和可测限。
如果分析结果与真实值之间的偏差较小，那么可以认为该分析方法具有较好的准确度。
总之，定量检验是一种评估分析方法性能的重要方法。
临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证
临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证在临床检验中，精密度与正确度是评价定量测定项目质量的重要指标。
精密度指的是在一定条件下，测定同一样本的重复性；而正确度则是测定结果与参考值之间的接近程度。
为了保证临床检验结果的准确性和可靠性，对于定量测定项目的精密度与正确度性能需要进行验证。
一、精密度验证精密度验证是评估定量测定结果的重复性和一致性，通常使用同一浓度的样本进行重复测定，以评价测定结果的离散程度。
精密度验证需要满足以下要求：1. 选择适当的样本：样本的选择应考虑到临床意义和测试目的。
通常选择近似于临床样本的类型和浓度，以便更准确地评估实际分析中的结果。
2. 确定测定条件：包括仪器、试剂、操作步骤等。
这些条件应与实际检验过程中的条件一致，以保证验证结果的可靠性。
3. 重复测定：至少重复测定3次，并记录每次测定结果。
重复测定的间隔时间应符合实际临床检验的情况，以考察长期测试的一致性。
4. 分析结果：计算测定值的平均值、标准差、变异系数等指标，评估重复测定的精密度。
指标的计算可以使用统计学方法进行。
二、正确度验证正确度验证是评估定量测定结果与参考值之间的一致性和准确性。
正确度验证需要满足以下要求：1. 参考物质的选择：参考物质是用于确定测定方法的准确性和可靠性的标准。
可以选择纯品、国际标准品或已验证的对照品作为参考物质。
2. 确定测定条件：与精密度验证相同，需要确保测定条件与实际检验过程一致，以保证验证结果的可靠性。
3. 测定参考物质：使用所选的参考物质进行测定，并记录测定值。
4. 分析结果：通过比较测定结果与参考值之间的接近程度，评估定量测定方法的正确度。
常用的评价指标包括相对偏差、共同认可误差等。
三、数据分析与结果判定在完成精密度与正确度验证后，需要进行数据分析和结果判定。
一般采用统计学方法对数据进行处理和分析，包括计算平均值、标准差、变异系数、相对偏差等指标。
通过与预设的指标或设定的可接受范围进行比较，判断验证结果是否符合要求。
定量检验的分析性能验证
定量检验的分析性能验证定量检验是一种广泛应用于大型或小型实验室的检验方法。
它涉及根据一系列预定的准则和规则，使用各种科学方法和技术对特定样本或物质进行分析。
这种分析方法的目的是确定样品的组成、浓度或性质，并生成可靠的结果，以支持决策制定和问题解决。
分析性能验证是确保定量检验方法可靠和准确的重要步骤。
这个过程通常涉及一系列的评估和实验，旨在验证方法是否满足所需的性能指标。
以下是进行分析性能验证时应考虑的关键方面：1.精密度：精密度是测量方法在重复性条件下得到一致结果的能力。
它可以通过重复测量相同样本多次，并计算结果的标准偏差来评估。
较低的标准偏差指示了更高的精密度。
2.精确度：精确度反映了测量结果的接近真实值的能力。
它通常通过与真实值进行比较来评估，这可以通过使用已知浓度的标准物质来实现。
误差百分比是评估精确度的常用指标。
较小的误差百分比指示了更高的精确度。
3.线性范围：线性范围指的是分析方法能够准确测量样本中不同浓度的物质。
这通常通过使用一组标准溶液，涵盖所检测物质可能存在的范围来评估。
线性范围越宽，分析方法的可靠性越高。
4.检出限和定量限：检出限是指分析方法能够可靠地检测到样品中的最低浓度。
这通常通过比较测量信号与背景噪声水平来评估。
定量限是指分析方法能够准确测量样品中的最低浓度。
这可以通过比较测量信号与噪声水平的比例来评估。
较低的检出限和定量限指示了更高的检测和测量能力。
5.选择性：选择性是指分析方法能够与其他组分区分开来，这些组分可能同时存在于样品中。
这通常通过添加类似结构的干扰物质并评估其对目标组分测量的影响来评估。
较高的选择性意味着分析方法不会被其他组分所干扰。
6.可重复性：可重复性是指在不同时间或由不同操作员执行相同样品的测量时，分析方法能够得到相似结果的能力。
这可以通过分析重复样品并计算结果的变异系数来评估。
较低的变异系数表明较高的可重复性。
7.稳定性：稳定性是指分析方法在不同条件下（如温度、湿度、时间等）是否产生一致的结果。
定量检验的分析性能验证
定量检验的分析性能验证在医学诊断、科学研究、工业生产等领域中，常用定量检验的方法对物质的成分和数量进行分析。
为确保检测结果的准确性和可靠性，必须进行分析性能验证。
本文将介绍定量检验的分析性能验证的概念、目的和方法。
概念与目的分析性能验证是对定量检验方法的准确性、精密度、灵敏度、特异性等性质进行评价的过程。
其目的是通过科学合理的方法，验证检验结果的可靠性，并提高定量检验方法的准确性和可重复性，保证检验结果的正确性。
方法精密度验证精密度验证是评价检验方法的可重复性和精密度的一个重要步骤。
其一般包括以下方法：1.同日内反复检测：在同一实验室中，使用相同的仪器设备、试剂、操作人员和环境条件，一天内对同一样品进行三次或以上的检测，记录检测结果，并计算平均值和标准差。
2.不同日间反复检测：在同一实验室中，使用相同的仪器设备、试剂、操作人员和环境条件，在不同的日期上对同一样品进行三次或以上的检测，记录检测结果，并计算平均值和标准差。
3.操作员间反复检测：在同一实验室中，选择两个或以上的操作员，在相同的操作流程和条件下，选取同一样品进行三次或以上的检测，记录检测结果，并计算平均值和标准差。
针对以上方法，可以采用统计学方法进行数据分析，如计算结果的均值、标准差、变异系数、误差限等等，用于评价检验方法的精密度。
准确性验证准确性验证是评价检验方法的测量误差和偏差的重要步骤。
以下是准确性验证的两种主要方法：1.对标准试品进行测定：使用已知浓度的标准试品，使用检验方法进行测定，与标准值进行比较，计算误差和偏差。
2.对不同样品进行测定：对不同样品进行测定，测定结果与真实值进行比较，计算误差和偏差。
灵敏度验证灵敏度验证是评价检验方法检测物质的最小浓度或最小可检测量的一个重要步骤。
常用方法有以下两种：1.构建标准曲线：使用目标物质的不同浓度的标准试品，使用检验方法进行测定，绘制标准曲线，根据曲线的斜率和截距计算最小检测限。
2.进行稀释：对于样品有浓度范围的情况，对样品进行适当稀释，保证测定结果在标准曲线的线性范围内。
免疫室定量项目方法性能验证标准操作程序
免疫室定量项目方法性能验证标准操作程序1 目的对免疫室检测项目进行性能验证，以保证所采用的相关试剂盒的分析性能能满足临床检测的要求和实验室检测结果的准确性。
2范围适应于免疫室开展的所有检测项目。
3 操作程序3.1 验证前准备3.1.1 仪器设备的准备：根据免疫室仪器设备的维护保养程序, 验证前，实验人员或请仪器厂家工程师对验证过程中需要用到的仪器设备进行全面的维护保养，以确保所涉及的仪器设备在最佳运行状态。
3.1.2 试剂的准备3.1.2.1 试剂盒的准备：验证前，确保足够用于验证的同批号试剂盒，如可能，可以再适当准备一些另一批号的试剂。
3.1.2.2 室内质控品的准备：按照《免疫室定量项目室内质控管理程序》规定的室内质控品购买和制备方法进行准备。
3.2 免疫室定量项目的验证方法3.2.1 拟验证参数的确定根据试剂盒说明书或行业内（如CLIA´88）要求制定拟验证的性能参数。
免疫室定量项目需要验证的参数包括：精密度（批内、批间精密度）、正确度、线性范围、临床可报告范围、生物参考区间、干扰、不同方法和仪器间的比对等。
要求检测过程中采取质量控制措施，尽可能保证检测系统处于一个稳定状态。
3.2.2 批内精密度实验3.2.2.1 标本来源：浓度分别处于正常和病理水平的混合的新鲜临床标本。
3.2.2.2 步骤：按照临床标本相同的检测方法，同批次内检测相同的20份混合的新鲜临床标本。
记录结果并计算均值、标准差和批内变异系数CV（%）：表1：批内精密度检测结果记录项目：3.2.3 批间精密度实验3.2.3.1 标本来源：浓度分别处于正常和病理水平的室内质控标本。
3.2.3.2 步骤：按照临床标本相同的检测方法，将室内质控标本连续检测20天。
记录结果，计算均值、标准差和批间精密度CV（%）：表2：批间精密度检测结果记录表项目：3.2.4 正确度验证实验免疫室对参加卫生部临检中心室间质评涵盖的项目进行正确度验证，以卫生部临床检验中心室间质评结果为依据，成绩在80%以上者即为验证通过。
定量检测中性能验证与方法学评价的试验方法
定量检测中性能验证与方法学评价的试验方法在科学研究领域，定量检测中性能验证与方法学评价是评估实验结果可靠性和研究方法的重要步骤。
本文将介绍一种常用的试验方法：“对照组设计”和“假设检验”，并讨论其在中性能验证与方法学评价中的应用和优势。
对照组设计是一种常用的试验方法，其基本原则是将参与试验的对象分为两组，即实验组和对照组。
实验组接受特定的干预措施，而对照组不接受任何干预，通过比较实验组和对照组的变量差异，可以得出干预措施是否有效的结论。
对照组设计主要包括随机对照试验和非随机对照试验两种形式。
随机对照试验是一种随机分组的设计方式，通过随机分配参与试验的对象到实验组和对照组，以控制可能的干扰因素。
非随机对照试验是一种非随机分组的设计方式，根据研究者的判断将参与试验的对象分配到实验组和对照组。
对照组设计在中性能验证与方法学评价中的应用可以从两个方面来考虑。
首先，对照组设计可以用于验证所提出的方法或技术的性能。
例如，在计算机科学中，研究者通常将一种新的算法或模型与现有的算法或模型进行比较，通过对照组设计来确定是否存在显著差异。
其次，对照组设计可以用于评价研究方法的可靠性和有效性。
研究者可以通过对照组设计来比较使用不同方法获得的实验结果，并确定哪种方法更为可靠和有效。
假设检验是一种用于检验统计推断的方法，其基本原则是通过对样本数据进行统计分析，推断总体参数的真实情况。
假设检验通常包括两个假设，即原假设和备择假设。
原假设通常是对研究者感兴趣的参数的其中一种陈述，而备择假设则是对原假设的一个补充或对立假设。
通过对样本数据进行统计分析，并计算得到一个检验统计量，可以判断原假设是否支持或拒绝。
假设检验在中性能验证与方法学评价中的应用可以从两个方面来考虑。
首先，假设检验可以用于验证研究结果的可靠性和有效性。
例如，在医学研究中，研究者通常使用假设检验来验证其中一种药物对疾病的治疗效果是否达到了预期。
其次，假设检验可以用于检验研究方法的可行性和效果。
定量项目分析性能验证
可报告范围
根据检验目的、预期用途等选择需要验证的性能特征
分析性能验证
生物参考区间
灵敏度/检出限
稀释倍数验证
分析特异性
（含干扰物）
• 实验室的参考区间可依据厂家说明书也可依据权威文献，
如存在地区、人群等差异，应自行验证
某些项目的诊断灵敏度对辅助临床诊断、监测病情、判断
预后有价值
• 对于需要稀释的样本，应对稀释样本进行验证，才可将可报告
验证实验数据计算获得批内不精密度 ，总不精密度1 ；
与厂家声明相比较 or 与实验室质量目标相比较？
➢ 性能验证的目的，是为了确定实验室现行方法能够满足临
床实验室对分析性能的要求。
➢ 在模拟日常操作的情况下，满足实验室质量目标即可。
结果判读——精密度
• CLIA’88 允许总误差或卫生部室间质量评价标准
2.普通干燥管收集，2-8℃可保存7天；-20℃可保存1个月，不可反复冻融。
3. 一次检测标本用量为50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多
预留一些，则每天至少需要300uL样本，总共需1.5mL。因标本量小，且装在
同一子弹头及日立杯中，在操作过程中应避免不必要的蒸发。（此处计算的是
定度，则验证通过。
其中室间质评样品的不
确定度为
=
若参 ＞参考物质的不确
定度，则需计算验证区
间。
结果判读——线性范围
• 用两次均值画图，拟合线性回归线，计算相关系数 2 。
Hale Waihona Puke ➢ 若 2 ＞0.995，则可初步判读厂家声明的线性范围符合要求
➢ 若否，则应根据均值散点图确定，是采用扩大样本数量或重复检测次数
定量检测中性能验证与方法学评价的试验方法
定量检测中性能验证与方法学评价的试验方法定量检测的性能验证与方法学评价是指通过实验方法对其中一种技术、方法或设备的性能进行定量评价和验证的过程。
性能验证主要通过实验过程中的数据收集和分析，判断所评估的技术、方法或设备是否满足预期结果。
方法学评价主要是对实验方法的可行性、准确性、可重复性和可靠性进行评价。
本文将介绍定量检测的性能验证与方法学评价的一些常用试验方法。
一、数据收集与处理数据收集是性能验证与方法学评价的关键环节之一，它决定了实验结果的准确性和可靠性。
常用的数据收集方法包括直观观察、问卷调查、文献研究和数据采集等。
数据处理则是在原始数据的基础上进行分析和整理，常用的方法有统计分析、数据可视化和图表绘制等。
数据处理的目的是为了得到结论，从而对待评估的技术、方法或设备做出评价。
二、灵敏度与特异性试验灵敏度试验是用来评估检测方法对真正阳性样本的识别能力，特异性试验是用来评估检测方法对真正阴性样本的排除能力。
灵敏度与特异性是性能验证的重要指标之一，它们反映了检测方法的准确性和可靠性。
常用的灵敏度与特异性的试验方法有：1.真阳性和真阴性样本的测定：通过使用已知浓度的阳性和阴性样本，评估检测方法对真正阳性和真正阴性样本的识别能力和排除能力。
2.重复性试验：通过重复检测同一样本，评估检测方法的可重复性和一致性。
重复性试验可以分为同一实验室内的重复性试验和不同实验室间的重复性试验。
3.间断性试验：通过人为设置间断点，评估检测方法对样本的检测能力。
间断点可以设置在阳性与阴性之间，用以测试检测方法在临界样本处的灵敏度和特异性。
4.干扰试验：通过引入不同干扰因素，评估检测方法对干扰因素的抗干扰能力。
干扰因素可以是其他物质、环境因素或其他样本。
三、重复性与回溯试验重复性试验是通过重复检测同一样本，评估同一实验室内的试验方法的稳定性和可靠性。
重复性试验可以使用同一操作人员、设备和实验条件，或者使用不同的操作人员、设备和实验条件来进行。
定量项目的性能验证
应评估所选用方法和程序，在用于医学检验之前应证实其可给出满意结果 实验室负责人或指定人员应在开始即对程序评审并定期评审，每年一次 实验室对性能数据形成文件并保存 。
准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指 对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。
正确度性能评价（NCCLS EP15A2 ）
比对及偏差（ NCCLS EP9）
精密度评价（ NCCLS EP5A2 EP15A2 ）
批间不精密度： 批内不精密度：
线性范围（可报告范围）评价（ NCCLS EP6） 生物参考区间评价 （NCCLS C-28A)
正确度：一系列测量平均值与接受参照值之间一致程度。 精密度：精密度是指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次 取样测定所得结果之间的接近程度。
500 400 300 200 100 0 0 200 400 600 800
比较方法均值
批内精密度评价
实验方法：选择具有医学决定水平的高低值标本按 规定的操作方法，在较短的时间内及稳定的条件下 各做20次重复测定。计算其X、SD与CV。变异系 数即代表批内精密度。 实验材料：① 选用与检测仪器相配套的试剂、校准 品及其它辅助试剂。② 两个水平的质控品：质控水 平1、质控水平2。
定量项目分析性能验证
分析性能验证
需要验证哪些内容？
CNAS-CL38 医学实验室质量和能力认可准则在临床化学领域的应用：
CNAS-CL39 医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学领域的应用(仅针对定性项目):
分析性能验证
生化项目：
精密度 精密度 精密度
正确度 符合率 正确度
可报告范围 检出限 可报告范围
免疫定性项目：
结果判读——正确度（室间质评样本）
结果判读——线性范围
结果判读
• 参考区间 20名表观健康个体的检测值，不少于90%在参考区间以内 • 稀释倍数 稀释延伸出的检测区间也应满足检测范围内的线性相关 • 检出限 验证浓度的20次测定结果CV%≤20%
小结
准备工作 • 人员准备 • 根据项目 特性、临 床意义、 验证目的 等制定性 能验证方 案 • 样本准备 验证实验 • 选定方案 留取标本 后按实验 数据处理 • 借助 Excel工 具 结果判读 • 根据验证 目的确定 质量目标 • 从验证结 果判断实 验过程中 可能出现 的问题
• 数据有效性判断 随机误差、操作失误、标本问题等等； 产生的有问题数据若参与计算，会使结果判读有较大偏差； 根据统计学方法找出离群值，剔除； 剔除离群值后应找出问题原因并改正，缺少的标本数应补全。
• 数据计算 借助Excel工具，行标和EP文件中都给了完整的数据统计表格形式。
结果判读——精密度
与厂家声明相比较 or 与实验室质量目标相比较？
生物参考区间
灵敏度/检出限
稀释倍数验证 分析特异性
• 常见的干扰如黄疸、溶血、脂血等，例如验证黄疸对肝功能相 关指标检测的影响；或是针对某一情况（术后、服用某种药物 后等）对特定项目的影响。
定量检测项目的性能验证
实验室原因
图片来自：《全国临床生化正确度验证EQA/PT 》
（卫计委临检中心生化室主任 张传宝）
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一、定量检测性能验证的要求 二、定量检测性能验证的实施 三、个人体会及总结
14
性能验证
精密度 正确度 线性范围 可报告范围 生物参考区间
16
正确度验证
ISO 15189: 5.3.1.4
17
正确度确认
正确度确认 配套系统：溯源性文件和正确度验证计划
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溯源性
5.3.1.4 设备校准和计量学溯源 计量学溯源性应追溯至可获得的较高计量学级别的参考物质或 参考程序。 注：追溯至高级别参考物质或参考程序的校准溯源文件可以由 检验系统的制造商提供。只要使用未经过修改的制造商检验系统 和校准程序，该份文件即可接受。 参考： CNAS-CL06《测量结果的溯源性要求》 CNAS-GL18《量值溯源要求在医学测量领域的实施指南》
量值溯源的实现
物质 校准/赋值 方法
实施
国际单位定义 一级校准品
溯
二级校准品
源
工作校准品
产品校准品
常规样品
一级参考方法 二级参考方法
厂商选择检测方法
厂商常备检测方法 用户常规的检测方
法
厂
家
实
验标 室准化
量 值
实 验 室
传 递
不确定度
结果
配套系统具有较好的溯源性
• 完整的分析系统有明确的系统性能标准和方法特征， 为实验室规定了分析系统的使用范围、样本种类、配 套试剂与校准品，及明确的系统性能标准和方法特征。
线性范围（测量范围）
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分析特异性 （含干扰物）
• 常见的干扰如黄疸、溶血、脂血等，例如验证黄疸对肝功能相 关指标检测的影响；或是针对某一情况（术后、服用某种药物 后等）对特定项目的影响。
分析性能验证
结果判读
数据处理
✓ 判断依据
验证实验
✓ 数据有效性判断
准备工作
✓
模仿日常操作条件
✓
离群值剔除及数据 补充
✓ ✓
验证方案的选择 ✓ 仪器处于良好的运
确保每日闭环质控 在控
✓
借助excel或统计 学软件
行状态
✓ 人员要求
✓ 样本准备
准备工作
1. 确定验证方案 根据项目的临床价值、医学决定水平、常见影响因素等确定验
证方案，即要验证的内容。 2. 仪器处于良好运行状态，人员熟练掌握性能验证相关内容
可通过质控情况监测检测系统状态，或联系厂家确认；人员应 尽量为平常做实验的操作人员，能够熟练操作仪器、进行校准等。 3. 标本准备
验证实验
• 校准：按照日常操作校准频率进行校准 or 每个检测批次进行校准 • 质控：闭环质控，每日实验样本检测前做室内质控，实验样本检测
结束后也应做室内质控。当日质控需均在控当日实验数据才有效。 • 样本检测：尽可能接近日常样本检测。
《标准操作流程— 检测系统定量实验分析性能评价/验证》
数据处理
医学决定 水平及精 密度最佳
浓度
Hale Waihona Puke 覆盖线 性范围每浓度水平 15个 2个
10个
2个
最低用量 测试 测试
测试
测试
—
—
1个 测试
—
—
—
在厂家 声明检 出限以 下，配 置梯度
浓度
20个 测试
接近分 析测量 范围上
限
2个 测试
覆盖检 测范围
2个 测试
注意：应按照厂家声明的样本类型、稳定期等进行样本的挑选以及保存。
分析性能验证
➢ 需要验证哪些内容？
CNAS-CL38 医学实验室质量和能力认可准则在临床化学领域的应用：
CNAS-CL39 医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学领域的应用(仅针对定性项目):
分析性能验证
生化项目：
精密度
免疫定性项目： 精密度
免疫定量项目： 精密度
正确度 可报告范围
符合率 正确度
结果判读——精密度
• 确认限的计算 需要消除由于抽样误差等造成的统计学差异
1. 自由度v的计算以及假拒绝率α的选择
自由度是有关样本数的数据；假拒绝率选择后得到的为（1-α/1）区间 ，α一般取5,得到的即为95%置信区间。
2. C值的确定
由确定的自由度v和α查表得到。
3. 确认限计算
其中，
结果判读——正确度（室间质评样本）
准备工作
以TSH做精密度实验为例做样本准备： 1. 说明书中声明，TSH的检测范围为0.005-100.0 uIU/mL，TSH的参考范围
为0.27-4.2 uIU/mL，2008年中国甲状腺疾病诊疗指南-甲状腺功能亢进症 诊疗指南中提出甲亢患者TSH一般小于1.0 uIU/mL。故，应挑选1.0 uIU/mL，以及接近参考范围上限4.2 uIU/mL的两水平标本。 2.普通干燥管收集，2-8℃可保存7天；-20℃可保存1个月，不可反复冻融。 3. 一次检测标本用量为50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多 预留一些，则每天至少需要300uL样本，总共需1.5mL。因标本量小，且装在 同一子弹头及日立杯中，在操作过程中应避免不必要的蒸发。（此处计算的是 最少用量，如果标本有富余应多分装一些子弹头）
什么时候需要进行验证？ 需要验证哪些内容？
分析性能验证
➢ 什么时候需要进行验证？
启用新的检测方法 • 新项目开展、同一检测项目新仪器上的使用、试剂换代等 已确认过的检测程序发生变更 • 影响到检测系统的维修过后（如更换测量池、加样针等）等
分析性能验证
➢ 需要验证哪些内容？
CNAS-CL02 医学实验室质量和能力认可准则：
• 数据有效性判断 随机误差、操作失误、标本问题等等； 产生的有问题数据若参与计算，会使结果判读有较大偏差； 根据统计学方法找出离群值，剔除； 剔除离群值后应找出问题原因并改正，缺少的标本数应补全。
• 数据计算 借助Excel工具，行标和EP文件中都给了完整的数据统计表格形式。
结果判读——精密度
与厂家声明相比较 or 与实验室质量目标相比较？
定量项目分析性能验证方案
概述 定量项目的分析性能验证 小结
分析性能验证
临床实验室所用的检验方法、仪器等应保证检验结果的准确可靠， 临床实验室应对所选购的商品定量试剂盒进行检查，以保证所选用的试 剂盒达到临床实验室要求的临床性能、分析性能、经济性能等各方面的 要求。
对未经修改而使用的已确认的检验程序进行独立验证。
验证实验
• 选定方案 留取标本 后按实验 方案进行
数据处理
• 借助 Excel工 具
准备工作
正确度 正确度 精密度 (比对 (定值物
方案) 质)
线性 范围
参考 区间
检出 限
稀释 分析特 倍数 异性
可选用的样 患者血 患者血 室间质评 患者血 健康个 患者血 患者血 患者血
本类型
清
清
物质
清 体血清 清
清
清
需要的浓度 水平
≥2
20
≥2
5~7
挑选浓度水 平依据
医学决 定水平
覆盖检 测区间
结果判读——线性范围
结果判读
• 参考区间 20名表观健康个体的检测值，不少于90%在参考区间以内
• 稀释倍数 稀释延伸出的检测区间也应满足检测范围内的线性相关
• 检出限 验证浓度的20次测定结果CV%≤20%
小结
准备工作
• 人员准备 • 根据项目
特性、临 床意义、 验证目的 等制定性 能验证方 案 • 样本准备
➢ 性能验证的目的，是为了确定实验室现行方法能够满足临 床实验室对分析性能的要求。
➢ 在模拟日常操作的情况下，满足实验室质量目标即可。
结果判读——精密度
• CLIA’88 允许总误差或卫生部室间质量评价标准
批内不精密度 Sr < 1/4 TEa 总不精密度 S1< 1/3 TEa
抽样误差——确认限
检出限 可报告范围
根据检验目的、预期用途等选择需要验证的性能特征
分析性能验证
生物参考区间
• 实验室的参考区间可依据厂家说明书也可依据权威文献， 如存在地区、人群等差异，应自行验证
灵敏度/检出限
某些项目的诊断灵敏度对辅助临床诊断、监测病情、判断 预后有价值
稀释倍数验证
• 对于需要稀释的样本，应对稀释样本进行验证，才可将可报告 范围扩大至稀释后的结果范围。