DNA指纹图谱分析

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向日葵DNA指纹图谱构建及遗传多样性分析

ＶｒＳａ．ＴｈｅｓｕｎｌｆｏｗｅｒＳＳＲｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＤＮＡｉｆｎｇｅｒｐｉｎｒｔｉｎｇｐｒｏｖｉｄｅｄｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃｄａｔａｆｏｒｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎａｓｗｅｌｌａｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ＳＳＲ．８１ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡｂａｎｄｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｕｓｉｎｇ３４ｃｏｒｅＳＳＲｐｉｍｅｒｒｓｗｉｔｈａｖｅｒａｇｅｄ２．３８ｂａｎｄｓｐｅｒｐｉｍｅｒｒ．Ｇｅ — ｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｗａｓｃｏｍｐｕｔｅｄｕｓｉｎｇｔｈｅｓｏｆｔｗａｒｅＮＴｓｙｓ２．１０ｅ．ａｎｄａｄｅｎｄｒｏｇｒａｍｏｆｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗａｓｃｏｎ — ｓｔｒｕｃｔｅｄｕｓｉｎｇＵＰＧＭＡｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｈａｔｔｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ０．４３２０～０．９０１２ａｍｏｎｇ３０ｃｕｈｉｖａｒｓ．Ｔｗｏｃｌｕｓｔｅｒｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｉｆｅｄｗｉｔｈｔｈｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｃｏｅｉｃｆｉｅｎｔｏｆ０．６２．ｒｅｖｅｌｅａｄｔｈｅｇｅｎｅｉｔｃｒｅｌａｔｉｖｅｓａｍｏｎｇｃｕｈｉ —

桂花树苗的DNA指纹图谱构建与分析

桂花树苗的DNA指纹图谱构建与分析桂花（Osmanthus fragrans）是我国传统的重要观赏和经济植物之一。

它以其独特的香气和美丽的花朵而闻名，广泛种植于中国南方地区。

随着人们对桂花树苗质量的关注，研究桂花苗的遗传多样性和亲缘关系变得越来越重要。

DNA指纹图谱是研究植物亲缘关系和遗传多样性的有效工具之一。

本文将介绍桂花树苗的DNA指纹图谱构建和分析的方法。

1. 样品收集和DNA提取在进行DNA指纹图谱构建之前，我们首先需要收集桂花树苗的样品并提取其DNA。

可以选择健康的树苗叶片或芽为样品。

使用商用的DNA提取试剂盒，按照生产商的说明书提取DNA。

确保提取的DNA质量良好，以获得可靠的分析结果。

2. 样品DNA浓度和纯度的检测使用分光光度计或荧光定量仪测量DNA的浓度和纯度。

确保DNA的浓度在50-100 ng/μL之间，并且纯度（A260/A280比值）在1.8-2.0之间。

如果浓度或纯度不符合要求，可以进行适当的稀释或纯化处理。

3. PCR反应设置根据所选择的DNA标记和PCR扩增方法，设置PCR反应体系。

选择适当的引物和反应条件，并优化PCR反应的温度梯度以提高扩增效率和特异性。

确保每个样品都进行三个独立反应以消除偶然误差。

4. PCR扩增反应将设置好的PCR反应体系加入样品DNA，并进行PCR扩增反应。

在热循环仪中进行PCR反应，包括初始变性（94℃，3-5分钟），循环变性（94℃，30秒）、退火与延伸（退火温度和时间根据引物设计确定，一般为55-65℃，30秒-2分钟），最终延伸（72℃，5-10分钟），最后保持（4-10℃）。

5. PCR产物检测和分析将PCR扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行检测和分析。

在1.5%琼脂糖凝胶上进行电泳，运行电泳约30分钟，以检测PCR扩增产物的大小和数量。

使用DNA分子量标记物作为参考，根据PCR扩增产物的迁移距离和大小进行分析。

6. 数据处理和分析根据PCR产物的大小，构建PCR指纹图谱。

DNA指纹图谱分析实验

DNA指纹图谱分析实验一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。

二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA 用作基因探针，同人体核DNA的酶切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为"DNA指纹"，意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。

DNA指纹的图像在X光胶片中呈一系列条纹，很像商品上的条形码。

DNA指纹图谱，开创了检测DNA多态性（生物的不同个体或不同种群在DNA结构上存在着差异）的多种多样的手段，如RFLP（限制性内切酶酶切片段长度多态性）分析、串联重复序列分析、RAPD（随机扩增多态性DNA）分析等等。

各种分析方法均以DNA的多态性为基础，产生具有高度个体特异性的DNA指纹图谱，由于DNA指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性，且仍按简单的孟德尔方式遗传，成为目前最具吸引力的遗传标记。

DNA指纹具有下述特点：1．高度的特异性：研究表明，两个随机个体具有相同DNA图形的概率仅3×10－11；如果同时用两种探针进行比较，两个个体完全相同的概率小于5×10－19。

全世界人口约50亿，即5×109。

因此，除非是同卵双生子女，否则几乎不可能有两个人的DNA指纹的图形完全相同。

2．稳定的遗传性：DNA是人的遗传物质，其特征是由父母遗传的。

分析发现，DNA•指纹图谱中几乎每一条带纹都能在其双亲之一的图谱中找到，这种带纹符合经典的孟德尔遗传规律，即双方的特征平均传递50％给子代。

3．体细胞稳定性：即同一个人的不同组织如血液、•肌肉、毛发、精液等产生的DNA指纹图形完全一致。

睡莲种质资源遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建

睡莲种质资源遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建【摘要】本研究旨在对睡莲种质资源的遗传多样性进行分析，并构建其DNA指纹图谱，以探讨睡莲的遗传背景及遗传演化。

通过实验设计和数据分析，我们发现睡莲种质资源中存在丰富的遗传多样性，同时成功构建了睡莲的DNA指纹图谱，为睡莲的遗传育种和种质保护提供了重要参考。

结果讨论部分深入探讨了睡莲遗传多样性的意义和潜在应用价值。

本研究的结论强调了睡莲种质资源遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建的重要性，并展望了未来睡莲遗传育种研究的发展方向。

通过本研究，我们对睡莲资源的遗传特征有了更深入的了解，为睡莲资源的保护和利用提供了重要的科学依据。

【关键词】睡莲、种质资源、遗传多样性、DNA指纹图谱、分析、实验设计、数据、结果讨论、意义、展望1. 引言1.1 研究背景睡莲是一种具有观赏价值的水生植物，广泛分布在世界各地的池塘、湖泊和河流中。

睡莲具有多种品种和颜色，深受人们喜爱。

随着环境污染和人类活动的影响，睡莲的种质资源逐渐减少，种群遗传多样性也在下降。

研究睡莲种质资源的遗传多样性对于保护和利用睡莲资源具有重要意义。

通过分析睡莲的遗传多样性，可以了解不同品种的遗传背景和亲缘关系，为睡莲的保护、繁殖和育种提供科学依据。

构建睡莲的DNA指纹图谱可以帮助鉴别不同品种和个体之间的遗传差异，为睡莲资源的管理和利用提供技术支持。

1.2 研究目的睡莲种质资源遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建的研究目的是深入了解睡莲的遗传多样性水平，揭示其种质资源的遗传背景和遗传规律，为睡莲的遗传改良和保护提供科学依据。

具体目的包括：1.通过遗传多样性分析，探讨睡莲不同种质资源的遗传差异和遗传相似性，为其遗传资源的合理利用和保存提供依据；2.构建睡莲DNA指纹图谱，建立种质资源的遗传标记库，为品种鉴定、遗传背景分析和育种选择提供技术支持；3.通过实验设计和数据分析，探讨睡莲的遗传特点和遗传规律，为睡莲的品种改良和遗传保护提供理论基础。

潮汕地区幽门螺杆菌DNA指纹图谱46例分析

ｍｅｏｄｂｔｒｔａｅｙｉｇｈｔｄａｔｈｓｍｔｐｎ．ｎｅｅｎ
【ｙｗｒｓＨｌｏａｔｙｒＡＤＫｅｏｄ】ｅｃｂｃｒｌｉｉｅｐｏ，ＲＰ【ｕｈｒｓａｄｅ】１ｅＳｏｇＡｉｔｏｉｆＳａｔｅｉｏｅｅＧａｇｏｇｐｖＡｔｏｄｒｓ１ｅｎｆｉｅＨｓｔｏｈｏＭｄａＣｌｇ，ｕｄｎｒ — ｓ１ｃｌｄａｐａｎｕｌｃｌｌｎｏ
效的基因分型方法。
提示不同基因型别的Ｈｐ与不同的疾病类别有关，ＡＤ是有ＲＰ
【关键词】幽门螺杆菌随机扩增多态性ＤＡ指纹法Ｎ【ｂｔｃ】ＯｊｔｅＡｐｉＡＤ（ａｄｍＡｐｆｄＰｌｏｈＮ）ｆｇｐｎｎｅｏｔＡｓａｔｒｂｅｉｐｌｎＲＰＲｎｏｍｌｅｏｍｒｉＤＡｉｅｒｔｇｍｔｄｏｃｖｙｇｉｉｙｐｃｎｒｉｉｈ
ｉｅｃｓｔｕｈｔｅｆａＡｄｆｒｎｅ，ｏｇｅｒｔｏＶｃ（＋）ｓｏｓｏｉｎｔａｔｉｅｅｃｓｍｏｇｈｍｏｄｓｎＴｅｒｓｌ — ｅｈｈａｈｗｇｉｃｆｒｎｅｎｅ，Ｃｎｕｉｈｕｔｉｎｓｆｎｄｉａｔｏｅｓｎ
ｄｔｃｃａｔｏｙｉａｉｎｓｓｒｍｓｎｅｅｔＶａＡｎｂｄｐｔｔｅｔｕｉｇｉｉｎｅｌｍｍｕｏｌｔｔｃｎｑｅｎｂｏｈｉｕ．ＲｅｕｔＲＡＤｆｇｒｒｔｇｃｎｄｔｃｅｇ — ｅｓｌＰｎｅｐｉｉａｅｅｔｈｅｉｎｎｔ

DNA指纹图谱在农作物品种鉴定中的应用

DNA(脱氧核糖核酸)是细胞染色体中的遗传基因,其分子各个片段就代表各个遗传信息。

由于DNA指纹图谱直接反映DNA水平上的差异,它成为当今最先进的遗传标记系统。

DNA指纹图谱技术主要有:限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polym or2 phism,简称RF LP)、随机扩增多态性(Random am plified polym orphic DNA,简称RAPD)、小卫星DNA (Mini2satellite DNA)、微卫星DNA (Microsatellite DNA)、内部简单重复序列(ISSR)、扩增片段长度多态性(Am plified fragment length polym or2 phism,简称AF LP)等等。

一、DNA指纹图谱的方法11RF LP方法RF LP方法是G rodzicker等人于1974年发明的。

它是一种利用限制性酶切片段长度差异来检测生物个体之间差异的分子标记技术。

RF LP方法于上个世纪80年代开始应用于植物,在水稻、小麦、玉米、蕃茄和马铃薯等作物上的研究都已有报道。

但RF LP的多态信息含量是相对而言的,在一些作物上RF LP探针可进行品种间及种间的鉴别,而在小麦、马铃薯、大豆等作物上的多态性较低。

特别是小麦,它是严格的自花授粉作物,基因组较大,多态性很低(即使在相当分散的品种间也是如此)。

因而,RF LP方法在指纹图谱中的应用受到限制。

21RAPD方法RAPD方法是Willams等人于1990年发明的。

它是利用扩增DNA片段长度差异来检测生物个体的分子标记技术。

它可在对物种没有任何分子生物学研究的情况下,对其进行基因组指纹图谱的构建。

其相对于RF LP方法较简便,DNA用量也较少,且省去了使用放射性同位素,受到了许多学者的重视。

Welth1991年曾用RAPD分析玉米杂交种的品种纯度,He等人1992年曾用RAPD识别小麦品种,在花生、小麦、水稻等作物上也曾进行过深入研究。

DNA指纹图谱论文：DNA指纹图谱的自动识别与分析定位研究

DNA指纹图谱论文：DNA指纹图谱的自动识别与分析定位研究【中文摘要】DNA指纹图谱是通过实验使不同大小的DNA片断在凝胶底板上分离并显影而得到的图像。

DNA指纹图谱首先在法医、亲子鉴定及遇难人员身份确定等社会领域得到应用。

随后,当生物学家们将这种方法引入到生物学研究中时,其优越的表现使其成为目前分子生物学研究中一种普遍使用的手段,在种质资源保护、作物遗传育种等领域得到广泛的应用。

因此,寻求一种高效的DNA指纹图谱的鉴定方法可以更好的推动DNA指纹图谱在各个适用领域的应用。

本文在已有DNA指纹图谱分析系统基础上,对现有DNA指纹图谱分析系统进行了进一步改进,完善了DNA指纹图谱的数学模型及泳道中谱带的自动分析定位方法。

该数学模型表达了图谱中DNA限制性片段大小与其位移之间的函数关系。

基于数字图像处理的DNA指纹图谱分析定位的具体步骤包括:1)图像预处理。

主要是去除噪声和图像增强,具体手段包括直方图均衡化、图像锐化和中值滤波等。

本文采用的方法是采用直方图均衡化和去除小成分的结合方法,实验表明除小成分方法能很好的去除掉这种不关心的区域,而且很好地去除了噪声,并且虽然对图像边缘产生模糊效果,但极大的降低了泳道与泳道间的区域对泳道的影响,为后续精确的分割泳道奠定了基础。

2)泳道自动分割。

是将图谱中不同的泳道分割开来,形成一个个逻辑上相对独立的实体便于下一步分别进行分析。

根据DNA指纹图谱的特点,本文采用了利用两个泳道间灰度值之和最大的原理进行自动分割的模型,并发展出相应的方法。

实验证明,该方法分割效果较好,能够自动分割出DNA指纹图谱中所有泳道,即使泳道宽度略有不同,也可以准确的定位泳道的位置,并分割出来。

3)谱带自动定位。

这是DNA指纹图谱数字图像分析的最后一步,也是本文的核心部分,谱带的定位也是整个DNA指纹图谱分析过程最重要的部分,从一定程度上说,谱带定位的精确与否直接反映出DNA指纹图谱分析的结果正确与否。

DNA指纹图谱技术

DNA指纹图谱技术在土壤微生物多样性研究中的应用pace等于1986年首次利用rrna基因确定环境样品中的微生物，通过对5s rrna基因的序列分析来研究微生物的生态和进化。

该方法很快被用于微生物多样性研究领域。

由于5s rrna基因相对较小，携带信息相对较少，因而揭示微生物群落多样性的能力有限。

相比之下，随后开展的16s rrna基因序列分析为微生物多样性研究提供了更多信息，且效率更高。

目前16s rrna基因序列分析已广泛应用于微生物多样性的研究。

16s rrna基因序列分析是主要基于已建立的微生物16s rrna基因序列数据库，用以确定细菌的系统发育关系，并使序列探针用于识别未知菌成为可能。

当然序列探针的确定也可根据分子标记方法，如rapd方法进行。

利用16s rrna基因序列研究微生物多样性可采用不同的策略。

目前一般常用以下几种方法。

一、变性梯度凝胶电泳（dgge）和温度梯度凝胶电泳（tgge ）1993年muyzer等将dgge技术引入环境微生物学多样性的研究。

随后该技术被广泛用于比较不同生态系统中的微生物群落的多样性及监测特定微生物种群的动态变化，dgge和tgge的原理是根据含有不同序列的dna片段（16s rrna基因扩增产物）在具有变性剂梯度或温度梯度的凝胶上由于其解链行为的不同而导致迁移率的不同，部分解链的dna片段在凝胶中的迁移速率低于完全螺旋形式的dna分子，从而含有不同碱基序列的dna片段就得到有效分离。

结合pcr扩增标记基因或其转录物（rrna和mrna）的dgge方法能直接显示微生物群落中优势组成成分。

由于它可同时对多个样品进行分析，使之非常适合研究微生物群落的时空变化，而且可以通过对酶切条带进行序列分析，或通过与独特的探针杂交鉴定群落组成，可以方便地了解环境被干扰后的微生物群落变化或某种指示微生物的命运。

oliver等用dgge方法考察了农田微生物的变化情况，认为环境变化对农田微生物的多样性有很大影响。

DNA指纹图谱实验报告

生物学导论（工科平台）实验报告
实验名称：DNA指纹图谱
学生姓名：罗磊
学生学号：516021910409
指导教师：何丽明
实验时间：2016 年10 月14 日
1、插入小组DNA指纹图谱电泳结果照片，进行分析，找出罪犯（50分）。

第二列为犯罪现场DNA样
品的电泳图，通过对比第三
组图片和第二组一样，因此
第三组DNA的主人为罪犯。

2、评价分析实验中的关键步骤（30分）。

a)制胶时拔出梳子应该垂直拔出。

b)DNA 样品应先离心。

电泳液应没过凝胶2mm。

c)点样时应注意不能戳破点样孔。

d)电解时不可将电极接反。

3、 DNA分子在电泳缓冲液中带正电荷还是负电荷？在电场中的运动方向如何(20分)？
负电荷，向正极移动。

家养鸟类DNA指纹图谱的建立和遗传学分析

家养鸟类DNA指纹图谱的建立和遗传学分析随着人们对自然科学的研究越来越深入，遗传学作为一门新兴的学科已经受到越来越多人的重视。

家养鸟类的DNA指纹图谱的建立和遗传学分析也成为了人们的研究重点。

一、DNA指纹图谱的建立DNA指纹是一种基于DNA序列的个体识别技术。

在建立DNA指纹图谱时，首先需要提取鸟类的DNA样本，可以采用血液、羽毛或口腔粘液等样品提取方式。

提取好的DNA样本需要进行PCR扩增以获得足够数量的DNA。

PCR扩增的产物会在凝胶电泳中形成DNA带，根据DNA带的大小和数量，可以建立DNA指纹图谱，并记录下每只鸟类的DNA指纹。

二、家养鸟类DNA指纹图谱的遗传学分析家养鸟类的DNA指纹图谱能够为遗传学分析提供重要的依据。

首先可以利用DNA指纹图谱判断家养鸟类的亲缘关系，如子代与亲本之间的亲缘关系、同一亲本子代之间的亲缘关系等。

此外，还可以分析鸟类的种群结构和群体历史。

通过比对不同个体之间的DNA指纹图谱，可以发现遗传多样性和基因频率等信息，从而研究鸟类的遗传演化、进化和分化等问题。

三、家养鸟类DNA指纹辨识技术的应用前景家养鸟类DNA指纹辨识技术的应用前景十分广泛。

首先，可以用于宠物鸟类的识别和管理，帮助养鸟人员快速精准地辨认不同的宠物鸟类。

其次，家养鸟类DNA指纹辨识技术还可以用于繁殖管理。

通过对配种鸟类的DNA指纹进行分析，可以评估配种的情况和效果，为繁殖管理提供科学依据。

四、家养鸟类DNA指纹图谱建立及分析中需要注意的问题在家养鸟类DNA指纹图谱的建立和遗传学分析过程中，需要注意以下几个问题。

首先是鸟类样本的选择问题。

要保证DNA样本的质量和数量，选择合适的样品非常重要。

其次是PCR扩增反应体系的优化问题，这是影响扩增效果和质量的重要因素。

还需要掌握准确的分析方法，如如何分辨不同长度的DNA带和如何验证DNA指纹图谱的可重复性等。

总之，家养鸟类DNA指纹图谱的建立和遗传学分析在研究鸟类遗传特征、品种鉴定、繁殖管理等方面都具有重要作用，并且应用前景广阔。

DNA指纹图谱技术知识讲解

二、以DNA指纹图谱技术为基础的微生物多样性研究方法
6、扩增rDNA限制性酶切片段分析（ARDRA）
ARDRA 是用特定引物进行 rDNA的扩增，再对扩增产物进行RFLP分析，这项技术可以为土壤细菌群落水平上提供可靠的基因型特征，这项技术常被用来了解各种样品的群落结构。
ARDRA方法最大的缺点是工作量大，目前，应用该方法进行微生物群落结构分析，还没有人设置重复。
3、限制性片段长度多态性（RFLP）
根据不同生物个体或种群之间DNA 片段酶切位点有所差异的特点，利用限制性内切酶进行消化，产生长短、种类、数目不同的限制性片段，然后对这些特定DNA片段的限制性内切酶产物进行分析，根据特定的限制性酶谱图可对群落中的微生物加以区分。
二、以DNA指纹图谱技术为基础的微生物多样性研究方法
二、以DNA指纹图谱技术为基础的微生物多样性研究方法
变性梯度凝胶电泳（DGGE）和温度梯度凝胶电泳（TGGE）
原理在聚丙烯酰胺中加入甲酰胺，从正极
到负极梯度递加，或是形成温度梯度，电泳中的DNA到达它的变性甲酰胺浓度或温度时，双链部分解开，造成泳动速度发生变化，从而达到分离效果。
二、以DNA指纹图谱技术为基础的微生物多样性研究方法
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由于16S rDNA及18S rDNA的序列，每年都以很快的速度补充到GenBank中去，这使得能够比较方便地利用这一数据库进行微生物群体多样性的研究。
一、核糖体RNA基因的介绍
利用rDNA测量细菌进化和亲缘关系 • 首先， 16S rDNA 普遍存在于原核生物中，参
与生物蛋白质的合成过程，并在生物进化的漫长历程中保持不变，是生物演变的时间钟。 • 其次，在 16S rDNA 分子中，既含有高度保守区域，又有中度保守和高度变化的区域，适用于进化距离不同的各类细菌亲缘关系的研究。 • 第三， 16S rDNA 的相对分子量大小适中，约 1 540 个核苷酸，便于序列分析。

DNA指纹图谱课件

基因身份证为孤儿寻亲提供科技支持
用DNA指纹图谱作为证据对当事罪犯的指控，已在警方和法庭采用。
Rodman Dam 谋杀案, 1988
稳定的遗传性
*DNA指纹图谱同样严格遵守孟
德尔遗传定律。子代全部谱带中，必然有一部分来自父亲，一部分来自母亲。因此在亲子鉴定中被广泛的使用。
人的血液，毛发唾液等都可以用于亲子鉴定。一个人有23对染色体，同一对染色体同一位置上的一对基因称为等位基因，一个来自父亲，一个来自母亲。如果检测到某个DNA位点的等位基因，一个与母亲相同，另一个就应与父亲相同，否则就存在疑问了。
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
高度的个体特异性同卵双胞胎除外在家族系统中具有稳定的遗传性对于生物个体水平上体细胞的稳定性高度的个体特异性这种图纹几乎没有两个人完全相同它同人的指纹一样是每个人所特有的故称为dna指纹
DNA指纹图谱PPT讲
座
一、实验目的
1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程； 2. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定 DNA片段的长度。 3.掌握对DNA指纹数据进行基本统计分析方法。
1
DNA指纹图谱的制作过程
基因组(Genome)DNA经过：
2
1、限制性内切酶消化
2、电泳(Electrophoresis)

固氮菌菌剂的筛选和鉴定方法研究

固氮菌菌剂的筛选和鉴定方法研究固氮菌是一类能够将大气中的氮气转化为可利用形式的氮化合物的微生物。

固氮菌在农业生产中具有重要的作用，能够促进植物生长、提高产量、减少化肥使用量、改善土壤质量等。

而固氮菌菌剂作为一种生物肥料广泛应用于农业领域。

然而，在开发和应用固氮菌菌剂的过程中，如何筛选有效菌株、运用可靠的鉴定方法依然是一个挑战。

本文将对固氮菌菌剂的筛选和鉴定方法进行研究。

一、固氮菌菌株的筛选方法1. 土壤采样及分离固氮菌通常存在于土壤中，因此，首先要对不同生态环境中的土壤进行采样。

采样点的选择应该覆盖到农田、林地等不同土壤类型，并且要避免污染源的干扰，以保证采样质量。

采样时要注意避免高温、阳光直射等影响固氮菌活性的因素。

采样回来后，需要将土壤样品进行稀释并在适宜培养基上进行分离。

常用的培养基有湿润的富氧培养基、富营养的富氧培养基和缺氧培养基等。

分离后的单菌落需要进行纯化，并保存在液氮中以备后续研究使用。

2. 固氮活性的初步筛选固氮菌的固氮活性是其最重要的特征之一，因此，筛选过程中需要对菌株的固氮活性进行初步评估。

常用的初筛方法有亚硝酸盐还原试验、酰胺酶检测以及利用净化的空气中含有不同浓度的15N氮气等。

亚硝酸盐还原试验是一种常用的固氮活性评估方法，通过观察固氮菌在含有亚硝酸盐的培养基上的颜色变化来判断其活性。

酰胺酶检测法则是通过检测固氮菌产生的酰胺酶的活性来评估固氮菌的能力。

15N标记法则是通过在含15N氮气中培养固氮菌，然后测定培养基中15N的含量来判断固氮活性。

3. 生理生化特征的分析除了固氮活性外，固氮菌的其他生理生化特征也是筛选的重要指标。

例如，耐盐性、耐酸碱性、温度适应性等都可以通过一系列培养实验以及相应的生化特征检测方法进行评估。

这些特征能够帮助筛选出适应不同环境的固氮菌菌株。

二、固氮菌菌剂的鉴定方法1. DNA指纹图谱分析DNA指纹图谱分析是一种常用的固氮菌菌剂鉴定方法。

通过扩增固氮菌DNA 片段，并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，然后用DNA染色剂染色观察DNA迁移的条带，生成固氮菌的DNA指纹图谱。

DNA指纹图谱

Sarbah vs.the home office 加纳移民案例，1985
加纳移民案中人物关系：
Christiana：母亲 Joyce：Christiana在英国的亲生子女 Diana： Christiana在英国的亲生子女 David： Christiana在英国的亲生子女
Andrew：在加纳生活的男孩，被质疑是Christiana的亲生子女
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Ghana Immigration Case,1985
Rodman Dam 谋杀案, 1988
*DNA指纹图谱同样严格遵守孟
德尔遗传定律。子代全部谱带中，必然有一部分来自父亲，一部分来自母亲。因此在亲子鉴定中被广泛的使用。

人的血液，毛发唾液等都可以用于亲子鉴定。一个人有23对染色体，同一对染色体同一位置上的一对基因称为等位基因，一个来自父亲，一个来自母亲。如果检测到某个DNA位点的等位基因，一个与母亲相同，另一个就应与父亲相同，否则就存在疑问了。
Goldview
三、实验步骤
（一）DNA样品的提取和酶切（二）制胶(同学操作开始)
（每组4人共用一块胶）
（三）点样
（四）电泳（五）观察
手按住两边支点，打开电泳漕
用力
禁止
下压推杆至设定量程，将枪头伸到液面下
缓慢松开推杆，液体吸入枪头
下压推杆至底，挤出所有液体

院内传播耐甲氧西林葡萄球菌的DNA指纹图谱分析

ｓｓｅｔｉｔｆ１ｎｉｉｔｓｗａｅｅｍｉｅｙＫ— ｍｅｈｄｕｃｐｉｌｙｏ３ａｔｏｉｓｄｔｒｎｄｂＢｔｏ．ＴｈｃｇｎｓｄｔｃｅｔＲ．ＤＮＡｉｇｒｂｉｂｃｅｍｅＡｅｅｗａｅｅｔｄｗｉｈＰＣｆｅ— ｎｐｉｔｓｃｎｔｕｔｄｂｒｎｗａｏｓｒｃｅｙＥＲＩ－ＣＲ（ｎｅｏａｔｒｒｐｔｔｅｉｔｒｅｉｏｓｎｕ — ＣＲ）ＲｅｕｔＴｈｅｓｔｅｒｔＣＰｅｔｒｂｃｅｅｅｉｉｎｅｇｎｃｃｎｅｓｓＰｖ．ｓｌｓｅｓｎｉｖａｅｉｏｆＭＲＳｔａｅｍｙｉｎｅｃｐａｉｓ１０ｏｖｎｏｃｎａｄｔｉｏｌｎｎｗａ０ａｄｔｅｒｓｓａｔｒｔｆＭＲＳｔｔｅ３ａｔｂｏｉｓＶａＯ．ｎｈｅｉｔｎａｅｏｏｏｈｒ１ｎｉｉｔｃｃｓ１０
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DNA指纹的遗传分析

【实验结果】1 电泳结果图：图1：电泳结果图说明：a.条带1-6是marker的条带。

b.条带7-9是基因D1S80的条带。

2 marker的标准曲线的制作：marker1标准带的相关曲线图4：marker 1的标准曲线根据图4算出marker 2的相关数据：离度所以可以估算出条带1’~6’的标准分子量大概为2400、1700、1000、700、400、200。

将这一组数据应用到实验结果中marker标准曲线的绘制上，显然会给实验结果带来很大的影响。

但又不可避免。

marker标准条带的相关数据图2 marker的标准曲线3成员A、C、D的D1S80的计算：根据marker的标准曲线知表2：4结果记录表：表3：结果记录表【实验分析及讨论】A从图1可知小组成员里只有A、C、D有正常的条带，而且全是纯合体，而B、E、F并没有出现正确的条带，分析可能原因：a在取样时取得太少了，致使提取的DNA浓度过低，在该实验的PCR条件下30个循环不能得到正确的DNA分子拷贝。

b取样不合适，可能在去口腔上皮时并没有在适合的位置取，导致取出来的并不是口腔上皮。

c在操作过程中一些错误的步骤导致没有提出正确的DNA分子。

B图1中最下面的有一排亮亮的条带。

据分析是PCR体系里引物的条带。

但是我们可以发现与B、E、F相比，A、C、D对应的条带最亮最宽，说明引物的含量较多，但是偏偏 A、C、D有正确的条带。

这似乎说不通，但是进一步的分析可以推测有以下两种原因：a在向Pcr小管里加入体系时，由于移液枪不准造成的加入体系不同，但这种概率较小。

b在向胶孔加入样品时由于加入量不同造成的结果。

这个显然比第一种出现的概率要大得多。

C原理中我们指出人类1号染色体上的VNTR D1S80，核心序列由16个核苷酸组成，拷贝数在14～41个之间，已知29种不同的等位基因。

但是我们的实验结果里D的拷贝数为13，却小于14，由于两者比较接近所以将D的拷贝数应该认为是14，而出现这种偏差的原因可能在于：a marker标准的分子量我们是用的周五晚上组的图估算出来的(如图3)，并不是说明书上标准的，所以marker的标准曲线与实际的可能有一定的差距，这样就会导致最后的结果也会有一定的差距。

指纹图谱

fingerprint;"指纹图谱" 英文对照1、指纹图谱是指经光谱或色谱测定得到的组分群体的特征图谱或图像,由于紫外光谱是电子光谱,吸收光谱的峰位取决于电子能级差,它反映的是分子的电子结构特征文献来源2、通常,指纹图谱是指蛋白质或DNA 的酶解图谱.在DNA 指纹图谱分析中,大分子DNA 经合适的限制性内切酶酶解,然后在凝胶介质中电泳,将酶解片段分离,所得分离图谱即为DNA 指纹图谱文献来源3、3 作物品种指纹图谱目前,指纹图谱是指能够反映生物个体间差异的电泳谱带.它具有类似于人的指纹所具有的个体特异性和稳定可靠性.贾继增(1996)指出,指纹图谱技术应主要满足两方面的要求:一是分辨率高,多态性好文献来源4、指纹图谱是指某种或某产2004年t2月·总第盆03期_走必,·563,、一诀拼瓤曝缎黝耀黝黝黝黝巍黯燃撇叭二一加-莽.葬沁莎撒{.术参数等,建立了徐长卿指纹图谱的分析方法,制定了徐长卿药材的质量标准草案文献来源5、指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱.其特点在于:通过指纹图谱的特征性,能有效鉴别样品的真伪或产地文献来源6、这种电泳图谱多态性丰富,具有高度的个体特异性和环境稳定性,就象人的指纹一样,因而被称为“指纹图谱”.指纹图谱是鉴别品种、品系(含杂交亲本、自交系)的有力工具,具有迅速(数小时至数天)准确等优点文献来源7、这些图谱能反映出原药材所含有的有效成分可有效地表征药材的质量是各种药材的固有特征并有重复性故称为指纹图谱.由于中药品种繁多有效成分与部位多种多样需要进行大量的研究工作因此最好有尽可能多的单位分工合作不断积累数据总结规律并应明确指纹图谱与有效部位的关系这样才能逐渐完善文献来源"指纹图谱" 在学术文献中的解释什么是指纹图谱撰写人：朱仲良指纹的概念大家都很清楚，是可以唯一标识一个人的特征。