细胞黏附测定

细胞黏附测定

一．实验材料：

1．Fibronectin、Laminin

2．0.2 % BSA（in PBS）

3．MTT

3．PBS

4．DMEM

二．实验步骤：

1．在酶标条内加入用PBS稀释的Fibronectin（10 μg/ml）或Laminin（10 μg/ml），4℃孵育过夜。

2．吸去Fibronectin或Laminin，PBS洗三遍后，用0.2 %的BSA室温封闭2小时，再用DMEM洗三遍。

3．胰酶消化细胞，计数，稀释成2.5×105/ml的细胞悬液，每孔加入100 μl 细胞稀释液，37℃培养30分钟（具体时间需根据不同的细胞而定）。另

设只加入100 μl DMEM孔，作为空白对照。

4．DMEM洗三遍，洗去未黏附的细胞，再加入200 μl DMEM。

5．MTT法检测酶标条中细胞的数量（具体方法请参考“MTT法测定细胞增殖”章节）。

6．黏附细胞百分数（％）＝（OD测定孔－OD对照孔）/ OD100×100％。