遗传学实验指导

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《遗传学》实验学习指导

《遗传学》是生命科学中的中心学科。同时也是一门实践性很强的学科。它是指导育种工作的理论基础,在传统育种、转基因育种、人体基因产物的产业化生产、各种传染性疾病病原菌的遗传分析研究及疫苗的生产、人类遗传病的基因治疗等人类面临的难题中发挥着巨大作用。对于现代从事生命科学的人,学习和掌握遗传学基本实验方法是十分必要和有益的。

一实验要求:

(一)实验前:预习实验内容,了解实验原理、实验目的,逐点分析实验操作过程,对每一个细节进行深刻的理解,不仅要知道实验该如何操作,而且要知道实验为什么要这样做,弄清实验操作过程中需要注意的细节,做到心中有数,以提高实验成功的可能性。

(二)实验操作过程中:一丝不苟,认真操作每一个环节,对实验现象和实验数据进行认真的观察记录。

(三)实验后:对实验结果和数据进行及时总结整理。结合所学的理论对实验结果进行分析,写出实验报告。对成功的实验可以提出改进的方法或建议。对于不成功的实验要分析失败的原因。

(四)强调动手能力的培养:在实验分组上,多数实验是以1人为组,单独操作。对学生实验成绩的评定上,包括实验操作。

二实验教材及学时

(一)实验教材:以《遗传学实验》刘祖洞江绍慧编为主,根据理论课所学内容,也采用了其它教材的个别实验。如:《遗传学手册》第三章“遗传学教学实验”的内容。(二)实验总学时:30

三实验内容及注意事项:

(一)实验内容:见下表:

(二)实验目的意义及注意事项

1 植物有丝分裂的观察

目的:观察染色体在有丝分裂中的动态变化过程,识别有丝分裂各个时期特点,加深对有丝分裂遗传学意义的理解。

掌握观察植物根尖有丝分裂的压片方法。

注意事项:

(1)根尖解离时间适合;

(2)取材部位一定要准确,只有分生区的细胞才有分裂相(部位准);

(3)取材料要少,有利于着色和细胞分散。

2 染色体的核型分析

目的:学习植物染色体核型分析的过程,掌握植物染色体组型分析的方法。

注意事项:

(1)核型分析的关键需要较多的染色体分散好、形态好的细胞,因此,要求根尖的预处理要好,保证有较多的中期分裂相;

(2)根尖的预处理应根据不同的药物,注意预处理药物的浓度、温度和时间;

(3)制片时,细胞尽可能分散,压片时用力均匀,勿搓动;

(4)测量数据尽可能接近染色体的实际长度;

3 减数分裂装片的制片与观察

目的:

(1)观察染色体在减数分裂中的行为和变化过程,识别减数分裂各个时期特点,

加深对减数分裂遗传学意义的理解;

(2)掌握观察植物减数分裂的制片技术。

注意事项:

(1)取材时期适合:取正处于减数分裂期的花蕾制片;

(2)正确识别花粉母细胞: 其特征是被一层非常明显的透明胼胝质包围;

(3)根据花粉母细胞中染色体的行为识别减数分裂各时期的特点。

4 人体X-染色质的制片与观察(口腔粘膜细胞)

目的:

(1)识别X染色质的形态及所在部位,加深对剂量补偿效应的理解;

(2)掌握观测X—染色质的制片方法

注意事项:

(1)制片时,一定刮取细胞膜、核膜完整的,细胞核未解体的口腔粘膜细胞;

(2)染色时,要用新配制的干净染色液;

(3)观察时,视野的光线不要太强,以利调焦;

(4)根据X-染色质的部位和形态正确识别X-染色质。

5 果蝇双因子实验

目的:(1)通过本实验,加深对孟德尔自由组合定律的理解。

(2)学习果蝇杂交实验技术

注意事项:

(1)保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇;

(2)杂交后倒掉亲本时,一定要倒干净,以免造成回交产生实验误差。同样在F

1

交后,倒掉F

1时一定要倒干净,以免造成F

1

和F

2

的混杂产生实验误差。

(3)培养期间切勿感染, F

2

的群体较大。

6 果蝇的伴性遗传

目的:通过果蝇伴性遗传实验,加深生物性状是由基因控制的、染色体是基因载体的认识。

注意事项:

(1)正确识别果蝇的性别;

(2)保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇;

7 果蝇唾腺染色体的观察

目的:

(1)观察唾腺染色体的结构特点,加深唾腺染色体在细胞遗传学研究具有重要意义的理解。

(2)学习观察唾腺染色体的制片方法

注意事项:

(1)要求培养的三龄幼虫要肥大:需在培养基中加入较多的糖和酵母汗;

(2)正确识别果蝇唾腺:根据唾腺存在的部位(身体前1/3处)、形态(囊状)、色差(半透明)等特点进行识别;

(3)压片时,切勿搓动盖玻片。

8 小鼠骨髓细胞的染色体制片与观察

目的:

(1)学习用骨髓细胞制备动物染色体标本片;

(2)观察小鼠染色体的形态结构和雌雄间的染色体差异

注意事项:

(1)实验所用小鼠最好是65-90天龄的幼鼠(约35-40g重);

(2)取骨髓时,尽可能收集多的骨髓;

(3)低渗时的温度的时间是实验成功的关键,在实温下,处理25分钟;

(4)第一次固定时,一定要充分打匀细胞,制成细胞悬液;

(5)滴片时,细胞悬液浓度不能太低。

9 染色体C-分带技术

目的:学习C-带分带技术和显带原理。

注意事项:

(1)染色体标本片的分裂相要多;

药品要新鲜,呈白色结晶状为佳;

(2)Ba(OH)

2

(3)准确控制酸、碱、盐处理的温度和时间;

(4) Geimsa原液的存放期至少在半月以上。

10 人群中P.T.C味盲基因频率及ABO血型基因频率的分析

目的:通过本实验,学习人体对P、T、C(苯硫脲)味觉表型的测试,根据测试结果学习和掌握对等位基因及ABO血型复等位基因频率的计算和分析。

注意事项:

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