2016年武汉大学885分子生物学考研真题(C卷)(回忆版)及详解【圣才出品】

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2016年临床医学检验技术(士)考试(相关专业知识)真题及详解【圣才出品】

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2016年临床医学检验技术(士)考试(相关专业知识)真题及详解一、以下每一道考题下面有ABCDE五个选项。

请从中选择最佳答案,并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。

1.氮质血症时,内生肌酐清除率较实际肾小球滤过率高10%~20%,这是因为()。

A.肾小管重吸收肌酐减少B.肾小管排泌少量肌酐C.肾小管合成少量肌酐D.肾小球滤过肌酐增加E.尿量减少【答案】B【解析】氮质血症是肾功能下降时,代谢废物或毒素不能及时排出,血液中尿素氮、肌酐等非蛋白氮含量显著增高、产生不良影响的情况。

肌酐主要从肾小球排出体外,还有小部分从肾小管分泌,而在肾小球滤过率下降的时候,由肾小管分泌所占比例代偿性增加,导致内生肌酐清除率较实际肾小球滤过率高。

2.唯一能减低血糖的激素是()。

A.胰岛素B.肾上腺素C.生长激素D.甲状腺素E.胰高血糖素【答案】A【解析】胰岛素是主要的降血糖激素;升高血糖的激素包括肾上腺素、胰高血糖素、皮质醇、生长激素等;此外,甲状腺素、生长抑素也能间接的影响糖的代谢,从而影响血糖水平。

3.关节腔积液呈绿色见于()。

A.结晶性关节炎B.痛风性关节炎C.丝虫性关节炎D.绿脓杆菌性关节炎E.结核杆菌性关节炎【答案】D【解析】常见关节腔积液的颜色变化及临床意义如下表所示:4.外源性凝血途径的启动因子为()。

A.第三因子B.第七因子C.第十一因子D.第十二因子E.第九因子【答案】A【解析】外源性凝血途径是由损伤组织暴露的因子Ⅲ与血液接触而启动。

当组织损伤血管破裂时,暴露的因子Ⅲ与血浆中的Ca2+、因子Ⅶ共同形成复合物进而激活因子Ⅹ。

因启动该过程的因子Ⅲ来自血管外的组织,故称为外源性凝血途径。

5.白血病诊断主要依据的检查项目是()。

A.白细胞计数B.血涂片检查C.血细胞培养D.骨髓涂片检查E.影像学检查【答案】D【解析】骨髓检查对于各型白血病、再障、巨幼细胞贫血等具有诊断价值。

6.尿液细菌培养,最常用的采集尿液的方法是()。

2015年武汉大学885分子生物学考研真题(B卷)及详解【圣才出品】

2015年武汉大学885分子生物学考研真题(B卷)及详解【圣才出品】

2015年武汉大学885分子生物学考研真题(B卷)及详解一、专业术语翻译与解释(共10小题,每小题4分,共40分)1.Exon答:Exon中文名称是外显子,是指断裂基因的一部分,包含在一个基因的转录物中,并在核内RNA剪接过程中保存下来成为细胞质中信使RNA的一部分。

外显子在编码蛋白基因中处于三个明显的区域:第一部位,不翻译成蛋白质部分,是RNA转录物起始部分的信号并含有引导mRNA到核糖体进行蛋白质合成的顺序;第二部位是含有翻译成蛋白质氨基酸顺序的信息部分;第三部位是转录为mRNA的一部分含有翻译终止和加多腺苷酸尾的信号。

2.Promoter答:Promoter中文名称是启动子,是指基因中控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度的一个组成部分。

启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动的。

启动子就像"开关",决定基因的活动。

3.Proteomics答:Proteomics中文名称是蛋白质组学,是指一种基因组所表达的全套蛋白质,即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。

蛋白质组学本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平,翻译后的修饰,蛋白与蛋白相互作用等,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生,细胞代谢等过程的整体而全面的认识。

4.Frame-shift mutation答:Frame-shift mutation中文名称是移码突变,是指由于插入或缺失非3的倍数个的核苷酸导致阅读框发生移动,随着转译成不正常的氨基酸的一种突变。

这种突变通常会导致多肽链上一系列的氨基酸发生变化,严重影响后续蛋白质或酶的结构和功能。

5.Wobble hypothesis答:Wobble hypothesis中文名称是摆动假说,是解释遗传密码简并性的假说,克里克于1966年提出。

具体内容是:对氨基酸专一的密码子的头两个碱基与相应转移RNA上反密码子的第2个和第3个碱基互补配对,而密码子的第3个碱基(3'端)与反密码子5'端碱基的配对专一性相对较差。

2010年武汉大学881微生物学考研真题(A卷)及详解【圣才出品】

2010年武汉大学881微生物学考研真题(A卷)及详解【圣才出品】

2010年武汉大学881微生物学考研真题(A卷)及详解一、名词解释(共10小题,每题4分,共40分)1.Aseptic technique答:Aseptic technique的中文名称是无菌技术,是指在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染,其自身也不污染操作环境的技术。

它是保证微生物学研究正常进行的关键。

2.Auxotroph答:Auxotroph的中文名称是营养缺陷型,是指某些菌株发生突变(自然突变或人工诱变)后,失去合成某种(或某些)对该菌株生长必不可少的物质(通常是生长因子如氨基酸、维生素)的能力,必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖的突变型菌株。

相应的野生型菌株称为原养型。

3.Diauxic growth答:Diauxic growth的中文名称是二次生长,是指微生物在同时含有速效碳源(或氮源)和迟效碳源(或氮源)的培养基中生长时,微生物首先会利用速效碳源(或氮源)生长直到该速效碳源(或氮源)耗尽,然后经过短暂的停滞后,再利用迟效碳源(或氮源)重新开始生长的这种生长或应答。

4.Virion答:Virion的中文名称是毒粒,又称病毒颗粒,是一团能够自主复制的遗传物质。

毒粒被蛋白质外壳所包围,有的还具有包膜,以保护遗传物质免遭环境破坏,并作为将遗传物质从一个宿主细胞传递给另一个宿主细胞的载体。

毒粒是病毒的细胞外颗粒形式,也是病毒的感染性形式。

5.Glycolysis答:Glycolysis的中文名称是糖酵解,是指在无氧条件下,葡萄糖在细胞质中被分解成为丙酮酸的过程。

在糖酵解过程中,每氧化1分子的葡萄糖净得2分子ATP以及两分子丙酮酸,2分子NAD+被还原为NADH。

糖酵解属于糖代谢的一种类型,可分为二个阶段,活化阶段和放能阶段。

反应包括三种关键酶(限速酶):己糖激酶、6-磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶。

6.Protoplast答:Protoplast的中文名称是原生质体,是指在人为条件下,用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后,所得到的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞。

武汉大学《分子生物学》复习题库及答案

武汉大学《分子生物学》复习题库及答案

武汉大学《分子生物学》复习题库及答案考试复习重点资料(最新版)资料见第二页封面第1页分子生物复习题及答案一、填空题1.病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DN。

2.IDS病毒的遗传物质是单链RN。

3.X射线分析证明一个完整的DN螺旋延伸长度为3.4nm。

4.氢键负责维持-T间(或G-C间)的亲和力5.天然存在的DN分子形式为右手B型螺旋。

二、选择题(单选或多选)1.证明DN是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。

这两个实验中主要的论点证据是(C)。

.从被感染的生物体内重新分离得到DN作为疾病的致病剂B.DN突变导致毒性丧失C.生物体汲取的外源DN(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能D.DN是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子E.真核心生物、原核生物、病毒的DN能相互混合并彼此替代2.1953年Wtson和Crick提出()。

.多核苷酸DN链通过氢键连接成一个双螺旋B.DN的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D.遗传物质通常是DN而非RNE.分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3.DN双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光汲取特性。

以下哪些是对DN的解链温度的正确描述?(C、D).哺乳动物DN约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的B.依赖于-T含量,因为-T含量越高则双链分开所需要的能量越少C.是双链DN中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值D.可通过碱基在260nm的特征汲取峰的改变来确定E.就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度4.DN的变性(、C、E)。

.包括双螺旋的解链B.可以由低温产生C.是可逆的D.是磷酸二酯键的断裂E.包括氢键的断裂5.在类似RN这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成(、D)。

.基于各个片段间的互补,形成反向平行双螺旋B.依赖于-U含量,因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少C.仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生D.同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对E.同意存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基6.DN分子中的超螺旋(、C、E)。

武汉大学微生物试题集-2016整理版

武汉大学微生物试题集-2016整理版
3.Auxotroph
4.Freeze drying
5.Lysogenic
二、简答题
1.绘图表示PCR技术的原理及步骤
2.请简述下列三种情况下生物之间的关系:真菌与藻类形成地衣;健康人肠道中的微生物;某些专性生活在昆虫细胞内的细菌。
3.试论油镜的工作原理。
4.革兰氏染色的原理和步骤
6.对细菌内毒素和细菌外毒素的免疫应答有何不同?根据以上分析你认为在遇到刚产生外伤的病人时应如何处理?
3、试述16S rRNA作为生物进化谱系“分支尺”的优越性。
2004
一、名词解释
菌落
性导
细菌生长曲线
二元培养物
芽孢
营养缺陷型
原生质体
内源性感染
非可培养微生物
基因工程
二、问答题
1、什么是转导?分几种类型?它们之间有何差别?
2、简述细菌细胞壁肽聚糖的化学组成及其结构特点。
3、目前已发现的肝炎病毒分几种类型?其不同类型的基因组有何特点?
4.描述细菌染色体DNA和质粒DNA提取的一般方法及原理?试分析并绘图表示相应的电泳检测结果?
5.试论病原菌的致病力?为什么说感染不是疾病的同义词?
2003
一、名词解释
系统发育树
纯培养物
纳米细菌
朊病毒
代时
条件致病菌
M13噬菌体
转座因子
发酵
感染
二、简答题
1、简述酵母人工染色体的组成及其各组分的作用。
2、简述构成细菌毒力的物质基础。
武大
一、名词解释
1.Archaea
2.L form of bacteria
3.Enrichment culture technology
4.Chemotaxis

2012年武汉大学885微生物学考研真题(A卷)及详解【圣才出品】

2012年武汉大学885微生物学考研真题(A卷)及详解【圣才出品】

2012年武汉大学885微生物学考研真题(A卷)及详解一、翻译及名词解释(共10小题,每小题4分,共40分)1.Colonization答:Colonization的中文名称是定植,是指人类的机体与正常菌群或其他各种微生物在长期进化过程中形成的一种共生关系。

定植的微生物必须依靠人体不断供给营养物质才能生长和繁殖,才能进而对人体产生影响(如导致感染)。

但是,人体也在进化过程中发展出一系列防御机制,在正常情况下足以抵御各种微生物的侵袭。

2.Bacteriophage typing答:Bacteriophage typing的中文名称是噬菌体分型。

噬菌体与宿主菌的关系具有高度特异性,即一种噬菌体只能裂解一种和它相应的细菌,因此可用于未知细菌的鉴定和分型。

3.Disinfection答:Disinfection的中文名称是消毒,是指利用温和的物理化学因素抑制病原体繁殖的一种手段。

消毒有物理方法,化学方法及生物方法,但生物方法利用生物因子去除病原体,作用缓慢,而且灭菌不彻底,一般不用于传染病的消毒,故消毒主要应用物理及化学方法。

4.Chemostat答:Chemostat的中文名称是恒化器,是指在整个培养过程中通过保持培养基中某种营养物质的浓度基本恒定的方式,使细菌的比生长速率恒定,生长“不断”进行。

培养基中的某种营养物质通常被作为细菌比生长速率的控制因子。

恒化器连续培养通常用于微生物学的研究,筛选不同的变种。

5.Immunity答:Immunity的中文名称是免疫,是指生物体能够辨认自我与非我,对非我做出反应以保持自身稳定的功能。

免疫是生物在长期进化过程中逐渐发展起来的防御感染和维护机体完整性的重要手段。

宿主免疫防御功能分为非特异性免疫和特异性免疫两大类,它们相辅相成,共同完成抵抗感染保护自身机体的作用,但有时也会造成对机体的病理性损伤。

6.Restriction-modification system答:Restriction-modification system的中文名称是限制修饰系统,是指限制性内切酶和它的“搭档”修饰酶一起组成的系统。

2016年武汉大学分子生物学885考研真题

2016年武汉大学分子生物学885考研真题

2016年分子生物学真题简答1 RNA editing是什么?作用机制是什么?2 简述大肠杆菌乳糖操纵子的作用机制?3 简述原核细胞转录终止机制?4 简述核酸霉保护踪迹法的实验原理?5 设计实验,研究特异性mRNA在细胞中的水平情况论述题1 DNA复制过程中怎样保证精确性和完整性2 设计实验,研究细胞内与蛋白质A结合的mRNA有哪些,实验方法和原理?3 蛋白质修饰,磷酸化,甲基化,乙酰化,糖基化,泛素化的作用位点和生物学意义?2015遗传名词解释1.deletion mapping2.aneuploid3.transcriptome4.founder effect5.endosymbiont theory这几个需要仔细注意,其他的都是考过的简答题1.为什么说rh抗原重要,如何防止新生儿溶血症2.区分核内遗传、核外遗传、母体影响3.xxx xxy个体在胚胎期为什么不会死亡、会发育成什么性别4杂种优势是什么,如何理解还有一题不记得了…应该也是考过计算和实验设计1.正常叶E 缺刻叶e。

一个正常但四号染色体三体的雌株和缺刻叶雄株杂jiao,第一问是如果E在四号染色体上,则F1中三体和缺刻叶父本回jiao,后代基因型表型比。

第二问不太记得,类似于F1后代自jiao,正常和缺刻表型比为3:1,请问该基因在四号染色体上吗?2.就是亲本aGe/AgE和age/age测jiao,后代基因型比例,一问是无干涉,一问是有干涉,数据不记得了,但是书后面很多习题类似,做会就ok了。

3.一个群体不考虑选择漂变等等外界因素I(A)基因频率0.5。

I(B)基因频率0.3 若为平衡群体,则该群体中ABO血型基因型频率如何(A 、B、AB、O)4.设计克隆控制水稻分蘖基因的实验。

具体细节不记得,主要是这句话。

2017年武汉大学885分子生物学考研真题(回忆版)及详解【圣才出品】

2017年武汉大学885分子生物学考研真题(回忆版)及详解【圣才出品】

2017年武汉大学885分子生物学考研真题(回忆版)及详解一、名词解释1.Base flipping答:Base flipping中文名称是碱基对打开,是指DNA双链或者RNA双链或者DNA 与RNA杂交双链在解旋酶等酶的作用下氢键断裂,碱基对打开暴露在外环境中的现象。

碱基对打开最早是在1994年在甲基转移酶催化DNA中胞嘧啶甲基化的过程中,通过X射线晶体衍射观察到的现象。

多发生在DNA复制、DNA修复以及RNA转录过程中。

2.RISC答:RISC全称为RNA-induced silencing complex,中文名称为RNA诱导沉默复合物,是指一定数量的外源性双链RNA(dsRNA)进入细胞后,被类似于核糖核酸酶Ⅲ的Dicer酶切割成的小干扰RNA与解旋酶和其他因子结合形成的蛋白质复合物。

RISC在RNA 干扰中起重要作用。

3.EMSA答:EMSA全称为electrophoretic mobility shift assay,中文名称为凝胶迁移实验,是指一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析,还可用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

基本原理是蛋白质与DNA结合后将大大增加相对分子质量,而凝胶电泳中DNA朝正电极移动的距离与其相对分子质量的对数成正比。

因此,没有结合蛋白的DNA片段跑得快,结合蛋白的DNA跑得慢。

4.Amber mutation答:Amber mutation的中文名称为琥珀突变,是指由于一对或几对碱基对的改变而使决定某一氨基酸的密码子变为终止密码子UAG的一种无义突变。

琥珀突变是三种终止密码子突变之一。

这种终止突变会造成肽链合成提前终止,通常也是致死突变。

5.aminoacyl-tRNA synthetase答:aminoacyl-tRNA synthetase中文名称是氨酰-tRNA合成酶,又称氨酰tRNA连接酶,氨基酸活化酶,是指一种合成氨酰tRNA的酶。

武汉大学分子生物学2001—2015考研真题(1)

武汉大学分子生物学2001—2015考研真题(1)

武汉大学2015年分子生物学武汉大学2014年分子生物学一.名词解释1、complementDNA2、RNAsplicing3、Gel filtration chromatography4、gene5、snRNP6、OKAZIKIN sequence7、operon8、enhancesome一.简答题1.从分子角度谈谈为什么DNA比RNA更广泛地用作遗传信息的携带者2.试说明中介蛋白在转录调控中的作用原理3.以下是DNA的电泳条带,说明DNA有哪三种拓扑异构构型?设计实验验证该结果。

4.翻译过程需要哪些组分?各自的功能分别是什么三.论述题1.CTD是RNAPOL2的末端结构,说明其结构特点。

它在转录各过程的作用是什么?2.试从产生过程,作用机制和生物学功能几个方面比较miRNA和siRNA的异同点3蛋白质A可以上调蛋白质B的表达水平,说明蛋白A可能在哪些水平发挥作用并设计实验证明。

武汉大学2013年分子生物学一、名词解释(共10小题,每题4分,共40分)1.Ribozyme2.Missense Mutation3.Insulator4.RNA trans-splicing5.Nucleotide excision repair6.Transposon7.Dam methylase8.Spliceosome9.Core promotor10. SNP二、简答题(共5小题,每题10分,共50分)1.真核生物mRNA的5’帽子结构有何生物学功能?其缺失会造成什么后果?2.某一基因开放阅读框中的一个碱基突变会对该基因编码产物产生什么影响?3.请简述真核生物的mRNA和原核生物的mRNA有何不同。

4.请简述Ⅰ型内含子剪切的过程.5.请简述Western blot 的原理和步骤。

三、论述题(共3小题,每题20分,共60分)1.研究基因功能通常是降低或升高基因表达水平,请简要说出三种相关研究方法及原理。

2. mRNA和蛋白质的降解是一个有序的过程,其中microRNA和泛素起了非常重要的作用,请简述microRNA的概念、产生过程、作用机制,或者泛素的概念和蛋白质泛素化的过程。

分子生物武大考研试题

分子生物武大考研试题

笔试题(满分100分)1. PCR的条件是什么?设置的条件有什么依据?2. 去离子水与蒸馏水是否相同,若相同,为什么?不相同,又是为什么?3. 关于菌株保存有以下两个方案(1)不加甘油逐渐降温后,然后保存在-80℃中,(2)加甘油直接保存在-80℃中。

分别分析两种方案是否正确,若正确,为什么?不正确,又是为什么?(3)菌株保存中,甘油的作用是什么?依据是什么?4. 高压灭菌的温度为多少?灭菌是为什么要排尽灭菌锅内的冷空气?5. 克隆所用的载体有哪些必要的结构?6. 电泳分离DNA所用的缓冲液pH为多少?此时DNA带什么电荷,为什么?7. 电泳分离DNA、RNA、蛋白质分别用什么染色?8. 现有100uLDNA水溶液(装在eppendorf管中),请设计一个实验沉淀DNAWuda武大---考试方法说明及各章课外思考题一、课程的学习与考试作为生命科学领域的专业基础课,本课程强调学生对微生物学基本理论、基本概念、基本实验原理及微生物基本实验操作的掌握与运用,鼓励学生在教学过程中对教学的积极参与和平时学习的积累,不鼓励期末突击复习、考试的投机学习行为。

为此,特制定期末总成绩的评定标准。

一)理论课期末考试卷面成绩占总成绩的55%,其余45%为平时成绩。

平时成绩包括:1、课后思考题(0~4分),每章均会根据教学内容布置思考题,要求按时上交,教师每次将随机抽查20%~30%的作业本进行评分,在学期末考试结束后,作业本全部上交作为评定平时成绩的依据。

2、学习笔记(0~4分),要求并鼓励课堂记录或课后整理学习内容,所有学习笔记在期末考试结束后上交作为评定平时成绩的依据。

3、参与教学活动(0~17分),主要是鼓励学生在学习过程中的主动学习能力,在课堂、网站论坛或与教师平时就学习问题的探讨将作为此项成绩评定的依据。

为了配合这项工作,论坛中的同步教学论坛只有在经过认证后方可发言,是对同学参与教学活动项目评定的主要依据。

2001-2016年武汉大学885分子生物学考研真题及答案解析 汇编

2001-2016年武汉大学885分子生物学考研真题及答案解析 汇编

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2017版武汉大学考研资料《分子生物学》考研复习全书(备考经验、真题及答案解析、高分版笔记)配套教材:[1]《现代分子生物学》(第四版),朱玉贤李毅著,高等教育出版社,2012[2]《遗传学》(分子遗传学部分),王亚馥戴灼华,高等教育出版社,1999[3]《Instant Notes in Moecuar Biology》,Turner P C、Mcennan A D、Bates A D、White M R H,科学出版社。

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武汉大学历年分子生物学考研真题

武汉大学历年分子生物学考研真题

武汉大学分子生物学历年考研真题 (2001年-2013年)武汉大学2001 年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目名称:分子生物学科目代码: 477注意:所有答题内容必须写在答题纸上,凡写在试题和草稿纸上的一律无效。

一、解释概念 (20 分,每个4分)1. 卫星 DNA2. 复制体3. 逆转座子4. 反式激活因子5. 衰减子与衰减作用二:填空(30 分,每空 1 分,请将答案写在答卷上)1.从病毒到高等生物的研究表明,遗传物质是。

2.冈崎片段的发现证实了双链 DNA的复制,在复制过程中,一条新生链的合成是的,称为链;而另一条链的合成是的,称为链。

3.大肠菌中有三种DNA聚合酶,其中的polI的作用是 ,而pol III的作用是。

pol I和pol III都有的三种活性是、、。

4.由于真核细胞染色体DNA的复制要有一段RNA为引物,因此线状的DNA复制后必须存在着5’端缩短的问题。

已发现有一种端粒蛋白称为 ,它由构成,可以使单链DNA的5’延长。

5.对DNA 损伤有几种修复系统 ,其中只有修复系统可以造成DNA变异,与这一系统有关的一套基因平时受到一称为的抑制蛋白所抑制,它发挥抑制作用是结合在一段约20bp长的称为的DNA序列上,当DNA损伤时,另一种蛋白质称为。

把这种抑制蛋白水解后,修复系统的基因才会被激活。

6.真核细胞中有三种依赖于DNA的RNA聚合酶分别合成不同的RNA,RNA pol I 负责合成,RNA pol II 负责合成,RNA pol III负责合成。

7.大分子互相作用是分子生物学的重要内容,包括蛋白质之间、蛋白质与DNA或RNA之间的互相作用,蛋白质有四种重要的结构花式与大分子互相作用有关, 这些结构花式是 , , 。

8.NO 是气体小分子信号,它可由脱氨产生,它的作用方式是直接与酶作用使产生cGMP(环式GMP)。

9.真核mRNA的5’端通常有帽子结构,3’端有 polyA。

在polyA上游有一保守序列称为polyA 信号,其序列为。

(NEW)武汉大学《676生物化学基础》历年考研真题汇编(含部分答案)

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2005年武汉大学371生物化学考研
真题详解
2006年武汉大学368生物化学考研
真题。

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2016年武汉大学885分子生物学考研真题(C卷)(回忆版)及详解
一、名词解释题
1.Northern blot
答:Northern blot中文名称是Northern杂交,是指一种通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法,类似于DNA印迹法的操作程序。

通过northern blot的方法可以检测到细胞在生长发育特定阶段或者胁迫或病理环境下特定基因表达情况。

2.RNase H
答:RNase H,即Ribonuclease H,中文名称为核糖核酸酶H,是一种核糖核酸内切酶,可以特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA。

RNase H不能水解单链或双链DNA 或RNA中的磷酸二酯键,但是可以特异性消化DNA-RNA杂合链中的RNA,常用于cDNA 第二链的合成
3.methyl trans-ferase
答:methyl trans-ferase中文名称是甲基转移酶,是指以S-腺苷蛋氨酸、甜菜碱和二甲基噻亭作为甲基的供体,把氨基、羟基、硫氢基甲基化。

结合在四氢叶酸上的活性C1单位被还原而生成甲基,通过5-甲基四氢叶酸转甲基酶与同型半胱氨酸被甲基化而生成蛋氨酸。

这种酶是以钴胺酰胺作为辅酶的。

4.frameshift mutation
答:frameshift mutation中文名称是移码突变,是指由于插入或缺失非3的倍数个的
核苷酸,从而导致蛋白质三联体密码子的阅读框发生移动,随着转译成不正常的氨基酸的突变。

这种突变通常会导致多肽链上一系列的氨基酸发生变化,严重影响后续蛋白质或酶的结构和功能。

5.Ubiquitination modification
答:Ubiquitination modification中文名称是去泛素化修饰,它是泛素化的逆过程,是指去除掉泛素(一类低分子量的蛋白质)分子,且在一系列特殊的酶作用下对靶蛋白进行的特异性修饰。

去泛素化修饰和去磷酸化,去乙酰化类似,都是去除蛋白质修饰的过程。

去泛素化功能的主要行使者是去泛素化酶。

二、简答题
1.RNA editing是什么?作用机制是什么?
答:(1)RNA editing的定义
RNA editing的中文名称为RNA的编辑,是指通过插入、删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息改变的一种mRNA前体加工的方式。

(2)介导RNA编辑的机制
①位点特异性脱氨基作用
载脂蛋白mRNA中的C→U,谷氨酸受体蛋白mRNA中的A→I,都属于脱氨基作用的结果。

分别由胞嘧啶和腺嘌呤脱氨酶所催化,发生在带有具催化作用的脱氨酶亚基的复合体中,有附加的RNA结合区能帮助识别所编辑的特异性靶位点。

②引导RNA指导的尿嘧啶插入或删除
指导RNA与被编辑区及其周围部分核酸序列有相当程度的互补性,并且存在一些未能
配对的腺嘌呤,形成缺口,为插入尿嘧啶提供模板,反应完成后,指导RNA从mRNA上解离下来,而mRNA则被用做翻译的模板。

2.简述大肠杆菌乳糖操纵子的作用机制。

答:(1)乳糖操纵子的基本结构
乳糖操纵子上依次排列着:
①启动子。

②操纵基因。

不编码任何蛋白质,是另一位点上调节基因I所编码的阻遏蛋白的结合部位,使操纵子受阻遏而处于关闭状态。

③结构基因。

lacZ、lacY、lacA,分别编码β-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷透性酶和β-半乳糖苷转乙酰基酶。

(2)乳糖操纵子的调控过程
①乳糖的负控诱导
a.乳糖不存在时,阻遏蛋白结合到操纵区,阻碍RNA聚合酶与lac启动子区的结合,下游结构基因无法转录。

b.乳糖存在时,乳糖与阻遏蛋白的变构位点结合,阻遏蛋白构象改变,失去活性而不与操纵区结合,下游基因能正常转录,产生相应的酶,使大肠杆菌能利用乳糖。

乳糖耗尽,诱导物异构乳糖减少,失去诱导物的阻遏蛋白会重新特异性结合lac操纵区,阻止基因转录。

②葡萄糖效应(降解物阻遏效应)
当葡萄糖与乳糖同时存在,大肠杆菌在耗尽外源葡萄糖之前不会诱发lac操纵子。

原因
是葡萄糖的降解产物能降低细胞内cAMP含量,使cAMP-CAP复合物的形成减少,影响其与启动区结合,导致下游结构基因的转录无法进行,使得乳糖无法被利用。

3.简述原核细胞转录终止机制。

答:转录的终止阶段是指当RNA链延伸到转录终止位点时,RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯键,RNA-DNA杂合物分离,转录泡瓦解,DNA恢复成双链状态,RNA聚合酶和RNA链都被从模板上释放出来的过程。

原核细胞转录终止机制分为不依赖于ρ因子的终止和依赖于ρ因子的终止。

(1)不依赖于ρ因子的终止
终止子,又称内在终止子,是指不依赖ρ因子终止反应的、模板DNA上存在的终止转录的特殊信号。

作用机制:
①终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,其转录产生的RNA容易形成发夹结构;在终止位点前面有一段由4~8个A组成的序列,转录产物的3'端为寡U。

②在新生RNA中出现发夹结构会导致RNA聚合酶的暂停,破坏RNA-DNA杂合链5'端的正常结构。

寡U的存在使杂合链的3'端部分出现不稳定的rU·dA区域,两者共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。

(2)依赖于ρ因子的终止
有些终止位点的DNA序列缺乏共性,而且不能形成强的发夹结构,因而不能诱导转录的自发终止。

大肠杆菌ρ因子能使RNA聚合酶在DNA模板上准确地终止转录。

RNA合成起始以后,ρ因子即附着在新生的RNA链5'端,利用ATP水解产生的能量,沿着5'→3'方向朝转录泡靠近;当RNA聚合酶移动到终止子而暂停时,ρ因子到达RNA的3'-OH 端,追上并取代暂停在终止位点上的RNA聚合酶,其RNA-DNA解螺旋活性使转录产物
RNA从模板DNA上释放,随后,转录复合物解体,完成转录过程。

4.简述核酸酶保护踪迹法的实验原理?
答:核酸酶保护踪迹法是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。

其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交,标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合,形成双链RNA;未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸,而待测目的基因与特异RNA 探针结合后形成双链RNA,免受RNA酶的消化,故该方法命名为RNA酶保护踪迹法。

(1)对于32P标记的探针,杂交双链进行变性聚丙酰胺凝胶电泳,用放射自显影或磷屏成像系统检测被保护的探针的信号。

(2)对于生物素标记的探针,杂交双链经过变性聚丙酰胺凝胶电泳后电转移至尼龙膜,采用链霉亲和素-辣根过氧化物酶和化学发光底物与膜上biotin标记的探针结合,X射线胶片或化学发光图像分析仪检测杂交信号。

5.设计实验,研究特异性mRNA在细胞中的水平情况。

答:(1)实验原理
为了研究特异性mRNA在细胞中的水平情况,先对细胞中总RNA进行提取,然后通过Northern印记分析确定mRNA水平情况。

(2)实验步骤
①细胞传代、冻存及复苏
a.传代培养:将细胞在37℃水汽饱和并含有5%CO2培养箱培养,细胞每隔3~4天传代培养一次。

b.冻存:细胞培养3~4天后,3000g离心5min,弃上清液,加入适量的新鲜培养基,用滴管反复吹打,将细胞液移至冻存管中,再加入DMSO使终浓度为10%。

置于-70℃过夜,次日放入液氮中保存。

c.复苏:从液氮中取出冻存细胞,置于37~42℃水浴中并剧烈震荡使细胞快速融化,将细胞悬液移入8~10ml培养基培养一天后换新鲜培养基,以后按常规进行细胞传代。

②细胞总RNA抽提
a.每106个细胞加0.2ml RNA Trizol变性液,用吸管反复吹吸使溶液均匀,RNA溶解。

b.每1ml样品中加0.2ml氯仿,用力振摇15s,置冰浴15min。

c.4℃、12000g离心10min,用75%乙醇洗两次,室温自然干燥,最后溶于DEPC 水中。

③制备探针
④Northern印记分析
a.每个样品取25~30μgRNA进行电泳。

b.电泳完毕,凝胶经EB染色后紫外灯下观察电泳结果。

c.将胶块倒置于水平玻板上,胶下有纸桥与20XSSC相连,胶上依次覆盖尼龙膜、Whatmann3MM滤纸、普通新华滤纸或吸水纸及500g重物。

室温下转移24~48h。

d.转移完毕,检查尼龙膜及胶上EB染料分布情况,判断转移效率,用滤纸吸去多余水分,室温晾干,80℃烘烤2h。

⑤杂交、洗膜及放射自显影
⑥统计分析
以细胞种类和辐照时间为协变量,对mRNA水平情况进行协方差分析。

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