消化系统常见疾病实验室检查及其临床评估网络版讲解
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活检钳消毒,交叉污染 及时接种(<2h) Hp培养 营养丰富的培养基 微需氧环境 Hp生长较慢(>5d)
尿素呼吸试验( 1)
尿素呼吸试验(2)
14C-UBT及13C-UBT为非侵入性检查方法 顺从性好 ?14C-UBT有一定的放射性,累积剂量可损坏环境,而使其应用 受限 ?13C-UBT无放射性,适用儿童和孕妇,但检测仪器太昂贵。
消化性溃疡(不论活动或不活动,有无并发症) MALT淋巴瘤 萎缩性胃炎 胃癌切除术后 胃癌病人的一级亲属 对经检查HP阳性的FD患者,根除HP是一种合理选择
病人希望治疗(与病人的内科医生详细讨论后)
证据 等级
1a
1c 2a 3b 3b
推荐 等级
A
A B B B
5
A
Gut 2007;56:772–781
消化系统常见疾病实验室 检查及其临床评估
许建明 安徽医科大学第一附属医院消化科
消化系统常见疾病实验室检查
? 急性胰腺炎 (淀粉酶、脂肪酶 ) ? 原发性肝癌 (AFP)胰腺癌(CA19-9) 结肠癌(CEA) ? 幽门螺杆菌检测 ? 肝功能检查 ? 肝硬化腹水检查
一、幽门螺杆菌感染检测
Maastricht 2-2007 推荐的根除指征
Hp诊断方法
? ?侵入性方法 ?
快速尿素酶试验 组织学检查 细胞培养
? ?非侵入性方法 ? ?
血清学检测 尿素呼吸试验 粪便抗原检查 15N-尿素试验
Monteiro l,et al. Am J Gastroenterol,2002;96(2):353-358
临床工作中常用方法
?快速尿素酶试验 ?组织切片染色 ?细菌培养 ?尿素呼吸试验 ?血清抗体测定
二、肝功能检查的分析与监测
肝功能检测评估中应注意的问题
肝脏生化检测
非创伤 敏感
非特异 局限
肝功能检测
? 甄别无症状人群肝功能异 常 (大约1%-4%) 问题? ? 评估肝脏疾病类型及其病 变严重程度?
? 追踪肝病进展和判断治疗 反应?
无症状患者肝脏生化检测异常问题
Air Force Recruit Study
目前国际上推荐作为单项试验,能准确评估Hp感染,可列 为临床检测 “Golden standard”
尿源自文库呼吸试验(3)
?许多药物(如抗生素)影响Hp活力和(或)尿素酶活性,可影 响UBT的结果。如奥美拉唑可直接抑制酶活性和使活菌数量减 少,即使短时间应用也会使UBT结果出现假阴性 ?体位对UBT结果是有影响的. 一般认为坐位是合适 ?收集呼气标本的时间:给药后25min 最佳(侯丽英,2006) ?出血后胃内环境发生改变,可造成UBT值降低,甚至出现假 阴性
Hp粪便抗原测定
?检测结果具有很高的特异性和敏感性,分别为5.0~ 96.4%及90~98.2%,且可重复性好 ?多采用ELISA法。国内有试剂盒。 ?留取标本容易,操作简便、省时、无创,适合常规 检查,尤其适合幼儿、孕妇、年老体弱者 ?不过,粪便中微生物众多,与Hp类同的抗原,试剂盒 的采用的Hp抗体必须高度特异,否则假阳性。
?? European Study
?发现99/19877 (0.5%) 肝功能异常 151 例转氨酶持续轻-中度升高> 6
月患者进行肝脏活检发现: ?其中, 仅有1 2人(12%)明确ALT升
高原因
?慢性HCV – 15.3%
?? Dig Dis Sci 1993;38:2145– ?NASH (NAFLD) – 42%
快速尿素酶试验( 1)
原理:
试剂液 尿素
Hp 尿素酶
氨
试剂液 酚红
紫红色
简便、快速、准确和价廉。最为常用(首选)
快速尿素酶试验(2)
? 检测结果受检测试剂的pH值、取材部位、取材组织大小、取 材组织中菌量、反应时间、环境温度等因素影响。
?有活动性出血时,因出血造成胃内pH值的变化 ,可影响RUT 的敏感性和特异性。
? 近期应用抗生素、铋剂或质子泵抑制剂可暂时减少细菌的数 量、影响尿素酶活性均导致假阴性结果 ?研究表明标本中要有 104以上的细菌RUT 才能显示阳性,因 此 ,该方法不宜单独作为Hp根除治疗后的结果评价
组织切片染色( 1)
? Gram染色:Hp (Gram-),光镜分辨困难,少用 ? HE染色;Hp 淡红色,同时观察 Hp、组织学变化,
2150.
?Chronic hepatitis – 24%
.
需要探讨有关影响因?素AIH及/P其BC处– 理1.策5%略
?α-1-抗胰蛋白酶缺乏 – 0.7%
Scand J Gastroenterol
1999;34:85–91.
血清抗体测定
Hp感染数周后血中出现特异抗体 常检测IgG抗体 补体结合试验
抗体检测方法 凝集试验 被动血凝试验 酶联免疫吸附测定(ELISA) 最常用
血清抗体测定
? 阴性者血中也可存在交叉反应性抗体(如空肠弯曲菌感染) ? 且Hp根除后血中抗体可长时间维持在阳性水平 ? 故血清学阳性不能完全肯定患者有活动性感染,阴性也不能 排除初期的感染 ? 因此,血清学抗体的检测只能用于流行病学筛检而不能用于 临床诊断
理学和新手的诊断结果要好(Maconi et al) ?在低胃酸或胃癌时,胃内杂菌生长,误诊为Hp,免疫组化染色
?手术标本,固定不好,细菌溶解或形态不典型难以辨认 ?在取组织学标本时,用滤纸片粘取标本,敏感性 ,假阴性
细菌培养
从胃粘膜中培养出Hp 最直接和可靠方法 “Golden standard” 然而分离培养技术要求具有一定的微需氧培养条件和技术, 不作为常规的诊断方法 。该方法多用于科研,临床工作很少 采用。
分辨不易,敏感性较低 ? Warthin-Starry银染:Hp深棕或黑色、粘膜棕黄,
对比清楚,常用。步骤多费时 ? Giemasa染色:Hp淡黄,易分辨,操作易 ? 吖啶橙染色:Hp橙色荧光,方法简单,设备要求
组织切片染色(2)
?优点:方便、价廉,且可长期保存,可提供Hp和胃粘膜组织学
方面的资料,对既往的资料也可进行回顾性研究, ?影响因素:活检组织的取材范围、标本处理过程、适当的染色 ; ?观察者的经验和敬业精神对结果有影响.由熟练的病理学家复读 的组织学诊断有较高的敏感性(99%)和特异性 (100%),比常规病
尿素呼吸试验( 1)
尿素呼吸试验(2)
14C-UBT及13C-UBT为非侵入性检查方法 顺从性好 ?14C-UBT有一定的放射性,累积剂量可损坏环境,而使其应用 受限 ?13C-UBT无放射性,适用儿童和孕妇,但检测仪器太昂贵。
消化性溃疡(不论活动或不活动,有无并发症) MALT淋巴瘤 萎缩性胃炎 胃癌切除术后 胃癌病人的一级亲属 对经检查HP阳性的FD患者,根除HP是一种合理选择
病人希望治疗(与病人的内科医生详细讨论后)
证据 等级
1a
1c 2a 3b 3b
推荐 等级
A
A B B B
5
A
Gut 2007;56:772–781
消化系统常见疾病实验室 检查及其临床评估
许建明 安徽医科大学第一附属医院消化科
消化系统常见疾病实验室检查
? 急性胰腺炎 (淀粉酶、脂肪酶 ) ? 原发性肝癌 (AFP)胰腺癌(CA19-9) 结肠癌(CEA) ? 幽门螺杆菌检测 ? 肝功能检查 ? 肝硬化腹水检查
一、幽门螺杆菌感染检测
Maastricht 2-2007 推荐的根除指征
Hp诊断方法
? ?侵入性方法 ?
快速尿素酶试验 组织学检查 细胞培养
? ?非侵入性方法 ? ?
血清学检测 尿素呼吸试验 粪便抗原检查 15N-尿素试验
Monteiro l,et al. Am J Gastroenterol,2002;96(2):353-358
临床工作中常用方法
?快速尿素酶试验 ?组织切片染色 ?细菌培养 ?尿素呼吸试验 ?血清抗体测定
二、肝功能检查的分析与监测
肝功能检测评估中应注意的问题
肝脏生化检测
非创伤 敏感
非特异 局限
肝功能检测
? 甄别无症状人群肝功能异 常 (大约1%-4%) 问题? ? 评估肝脏疾病类型及其病 变严重程度?
? 追踪肝病进展和判断治疗 反应?
无症状患者肝脏生化检测异常问题
Air Force Recruit Study
目前国际上推荐作为单项试验,能准确评估Hp感染,可列 为临床检测 “Golden standard”
尿源自文库呼吸试验(3)
?许多药物(如抗生素)影响Hp活力和(或)尿素酶活性,可影 响UBT的结果。如奥美拉唑可直接抑制酶活性和使活菌数量减 少,即使短时间应用也会使UBT结果出现假阴性 ?体位对UBT结果是有影响的. 一般认为坐位是合适 ?收集呼气标本的时间:给药后25min 最佳(侯丽英,2006) ?出血后胃内环境发生改变,可造成UBT值降低,甚至出现假 阴性
Hp粪便抗原测定
?检测结果具有很高的特异性和敏感性,分别为5.0~ 96.4%及90~98.2%,且可重复性好 ?多采用ELISA法。国内有试剂盒。 ?留取标本容易,操作简便、省时、无创,适合常规 检查,尤其适合幼儿、孕妇、年老体弱者 ?不过,粪便中微生物众多,与Hp类同的抗原,试剂盒 的采用的Hp抗体必须高度特异,否则假阳性。
?? European Study
?发现99/19877 (0.5%) 肝功能异常 151 例转氨酶持续轻-中度升高> 6
月患者进行肝脏活检发现: ?其中, 仅有1 2人(12%)明确ALT升
高原因
?慢性HCV – 15.3%
?? Dig Dis Sci 1993;38:2145– ?NASH (NAFLD) – 42%
快速尿素酶试验( 1)
原理:
试剂液 尿素
Hp 尿素酶
氨
试剂液 酚红
紫红色
简便、快速、准确和价廉。最为常用(首选)
快速尿素酶试验(2)
? 检测结果受检测试剂的pH值、取材部位、取材组织大小、取 材组织中菌量、反应时间、环境温度等因素影响。
?有活动性出血时,因出血造成胃内pH值的变化 ,可影响RUT 的敏感性和特异性。
? 近期应用抗生素、铋剂或质子泵抑制剂可暂时减少细菌的数 量、影响尿素酶活性均导致假阴性结果 ?研究表明标本中要有 104以上的细菌RUT 才能显示阳性,因 此 ,该方法不宜单独作为Hp根除治疗后的结果评价
组织切片染色( 1)
? Gram染色:Hp (Gram-),光镜分辨困难,少用 ? HE染色;Hp 淡红色,同时观察 Hp、组织学变化,
2150.
?Chronic hepatitis – 24%
.
需要探讨有关影响因?素AIH及/P其BC处– 理1.策5%略
?α-1-抗胰蛋白酶缺乏 – 0.7%
Scand J Gastroenterol
1999;34:85–91.
血清抗体测定
Hp感染数周后血中出现特异抗体 常检测IgG抗体 补体结合试验
抗体检测方法 凝集试验 被动血凝试验 酶联免疫吸附测定(ELISA) 最常用
血清抗体测定
? 阴性者血中也可存在交叉反应性抗体(如空肠弯曲菌感染) ? 且Hp根除后血中抗体可长时间维持在阳性水平 ? 故血清学阳性不能完全肯定患者有活动性感染,阴性也不能 排除初期的感染 ? 因此,血清学抗体的检测只能用于流行病学筛检而不能用于 临床诊断
理学和新手的诊断结果要好(Maconi et al) ?在低胃酸或胃癌时,胃内杂菌生长,误诊为Hp,免疫组化染色
?手术标本,固定不好,细菌溶解或形态不典型难以辨认 ?在取组织学标本时,用滤纸片粘取标本,敏感性 ,假阴性
细菌培养
从胃粘膜中培养出Hp 最直接和可靠方法 “Golden standard” 然而分离培养技术要求具有一定的微需氧培养条件和技术, 不作为常规的诊断方法 。该方法多用于科研,临床工作很少 采用。
分辨不易,敏感性较低 ? Warthin-Starry银染:Hp深棕或黑色、粘膜棕黄,
对比清楚,常用。步骤多费时 ? Giemasa染色:Hp淡黄,易分辨,操作易 ? 吖啶橙染色:Hp橙色荧光,方法简单,设备要求
组织切片染色(2)
?优点:方便、价廉,且可长期保存,可提供Hp和胃粘膜组织学
方面的资料,对既往的资料也可进行回顾性研究, ?影响因素:活检组织的取材范围、标本处理过程、适当的染色 ; ?观察者的经验和敬业精神对结果有影响.由熟练的病理学家复读 的组织学诊断有较高的敏感性(99%)和特异性 (100%),比常规病